一种海地瓜胶原蛋白的提取方法
【技术领域】
[0001]本发明公开了一种海地瓜胶原蛋白的提取方法，属于生物医药领域。
【背景技术】
[0002]海地瓜属于棘皮动物门海参纲芋参目。海地瓜与刺参营养成分相似，具有丰富的蛋白、多糖、矿物质元素及微量元素，目前研究主要集中在对其营养成分分析和加工利用方面，海参多肽以刺参、梅花参、日本海参等传统参为原料，通过酶解工艺制成的具有多种功效的肽类；海参多肽具有良好的稳定性、水溶性，具有抗氧化性、抗疲劳、降血压等诸多生理功能。
[0003]但是海地瓜加热后质地坚硬，并且生活在浅海软泥中，体表积累大量铅、铬、汞等有害重金属，使得海地瓜资源尚未被充分开发和利用。
【发明内容】
[0004]本发明主要解决的技术问题:针对目前海地瓜具有丰富营养价值，但是由于其体表积累大量有害重金属，使得海地瓜资源不能被充分利用的问题，本发明首先通过提取香根草根及芥菜根中的有效成分，再使用其对经初步改性后的高炉渣进行进一步生物改性增加其对重金属的吸附能力，然后将其与泥沙混合养殖海地瓜，去除其体表的有害重金属，最后进行提取海地瓜胶原蛋白，使海地瓜可以被充分利用和开发。
[0005]为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是:
(1)取600?800g新鲜的香根草根及400?500g新鲜的芥菜根，混合均匀，使用侧刀将其切割成1?3cm颗粒，将所得的颗粒放入碾磨机中进行碾磨，形成糊状物，然后使用无水乙醇浸泡糊状物，浸泡30?40min，随后将将其放入装有1L超临界萃取装置的萃取罐中，提取压力设定为12?15MPa，分离压力设定为3?5MPa，提取温度设定为28?38°C，进行提取1?2h后出料，得出料液，备用；
(2)取800?900g高炉渣放入粉碎机中进行粉碎，过筛得80?100目颗粒，将所得的颗粒物放入容器中，向其中加入质量分数为60%的盐酸溶液浸泡颗粒物，搅拌30?50min后过滤，得过滤物，进行风干；
(3)按固液比1:3，将上述风干后的过滤物与出料液在容器中混合均匀，再加入60?90g甜菜素，然后将容器置于微波环境下进行加热，温度设定为55?60°C，微波频率为500?800MHz，以转速120?150r/min，搅拌2?3h后，静止8?10h，随后过滤，收集过滤物；
(4)取10?15只海地瓜放入培养池内，将上述所得的过滤物与泥沙按质量比1:3进行混合，然后将其放入培养池内培养海地瓜，培养20?35天后，将海地瓜取出，使用水将海地瓜表面清洗干净，随后使用内脏处理机，将其内脏处理掉，再使用水将去除内脏后的海地瓜清洗干净；
(5)将上述洗净后的海地瓜放入组织捣碎机中进行打浆，将所得的浆状物放入烘箱中进行烘干，温度设定为60?80°C，然后将其取出放入粉碎机中进行粉碎，过筛得60?80目海地瓜粉末；
(6)将上述所得的海地瓜粉末放入容器内，向其中加入质量分数为10?15%的氯化钠溶液，淹没粉末5?8cm，搅拌1?3h后，使用质量分数为60%的氢氧化钠溶液调节pH为
7.5?8.0，然后向其中加入海地瓜粉末质量5?10%的复合风味蛋白酶，对容器进行加热，温度设定为35?40°C，搅拌3?5h后，将容器移至紫外灯下进行灭酶，随后将酶解液放入离心机中进行离心分离，收集上清液；
(7)对上述所得的上清液进行降温至10?15°C，向其中加入无水乙醇，直至溶液中乙醇含量为65?70%，静置10?15min，然后使用陶瓷膜对其进行过滤，将所得的过滤液放入喷雾干燥机中进行喷雾干燥，收集干燥物，即可得到海地瓜胶原蛋白。
[0006]本发明的有益效果是:
(1)本发明通过改性颗粒对海地瓜的养殖，使其体表有害重金属的去除率达到93?96% ；
(2)通过本发明所海地瓜胶原蛋白的提取率达到45?57%;
(3)本发明在制备过程中绿色环保，无环境污染，且制备成本低，易于操作。
【具体实施方式】
[0007]取600?800g新鲜的香根草根及400?500g新鲜的芥菜根，混合均匀，使用侧刀将其切割成1?3cm颗粒，将所得的颗粒放入碾磨机中进行碾磨，形成糊状物，然后使用无水乙醇浸泡糊状物，浸泡30?40min，随后将将其放入装有1L超临界萃取装置的萃取罐中，提取压力设定为12?15MPa，分离压力设定为3?5MPa，提取温度设定为28?38°C，进行提取1?2h后出料，得出料液，备用；取800?900g高炉渣放入粉碎机中进行粉碎，过筛得80?100目颗粒，将所得的颗粒物放入容器中，向其中加入质量分数为60%的盐酸溶液浸泡颗粒物，搅拌30?50min后过滤，得过滤物，进行风干；按固液比1: 3，将上述风干后的过滤物与出料液在容器中混合均匀，再加入60?90g甜菜素，然后将容器置于微波环境下进行加热，温度设定为55?60°C，微波频率为500?800MHz，以转速120?150r/min，搅拌2?3h后，静止8?10h，随后过滤，收集过滤物；取10?15只海地瓜放入培养池内，将上述所得的过滤物与泥沙按质量比1:3进行混合，然后将其放入培养池内培养海地瓜，培养20?35天后，将海地瓜取出，使用水将海地瓜表面清洗干净，随后使用内脏处理机，将其内脏处理掉，再使用水将去除内脏后的海地瓜清洗干净；将上述洗净后的海地瓜放入组织捣碎机中进行打浆，将所得的浆状物放入烘箱中进行烘干，温度设定为60?80°C，然后将其取出放入粉碎机中进行粉碎，过筛得60?80目海地瓜粉末；将上述所得的海地瓜粉末放入容器内，向其中加入质量分数为10?15%的氯化钠溶液，淹没粉末5?8cm，搅拌1?3h后，使用质量分数为60%的氢氧化钠溶液调节pH为7.5?8.0，然后向其中加入海地瓜粉末质量5?10%的复合风味蛋白酶，对容器进行加热，温度设定为35?40°C，搅拌3?5h后，将容器移至紫外灯下进行灭酶，随后将酶解液放入离心机中进行离心分离，收集上清液；对上述所得的上清液进行降温至10?15°C，向其中加入无水乙醇，直至溶液中乙醇含量为65?70%，静置10?15min，然后使用陶瓷膜对其进行过滤，将所得的过滤液放入喷雾干燥机中进行喷雾干燥，收集干燥物，即可得到海地瓜胶原蛋白。
[0008]实例1
取600g新鲜的香根草根及400g新鲜的芥菜根，混合均匀，使用侧刀将其切割成1cm颗粒，将所得的颗粒放入碾磨机中进行碾磨，形成糊状物，然后使用无水乙醇浸泡糊状物，浸泡30min，随后将将其放入装有1L超临界萃取装置的萃取罐中，提取压力设定为12MPa，分离压力设定为3MPa，提取温度设定为28°C，进行提取lh后出料，得出料液，备用；取800g高炉渣放入粉碎机中进行粉碎，过筛得80目颗粒，将所得的颗粒物放入容器中，向其中加入质量分数为60%的盐酸溶液浸泡颗粒物，搅拌30min后过滤，得过滤物，进行风干；按固液比1: 3，将上述风干后的过滤物与出料液在容器中混合均匀，再加入60g甜菜素，然后将容器置于微波环境下进行加热，温度设定为55°C，微波频率为500MHz，以转速120r/min，搅拌2h后，静止8h，随后过滤，收集过滤物；取10只海地瓜放入培养池内，将上述所得的过滤物与泥沙按质量比1:3进行混合，然后将其放入培养池内培养海地瓜，培养20天后，将海地瓜取出，使用水将海地瓜表面清洗干净，随后使用内脏处理机，将其内脏处理掉，再使用水将去除内脏后的海地瓜清洗干净；将上述洗净后的海地瓜放入组织捣碎机中进行打浆，将所得的浆状物放入烘箱中进行烘干，温度设定为60°C，然后将其取出放入粉碎机中进行粉碎，过筛得60目海地瓜粉末；将上述所得的海地瓜粉末放入容器内，向其中加入质量分数为10%的氯化钠溶液，淹没粉末5cm，搅拌lh后，使用质量分数为60%的氢氧化钠溶液调节pH为7.5，然后向其中加入海地瓜粉末质量5 %的复合风味蛋白酶，对容器进行加热，温度设定为35°C，搅拌3h后，将容器移至紫外灯下进行灭酶，随后将酶解液放入离心机中进行离心分离，收集上清液；对上述所得的上清液