生物流体中细菌的检测的制作方法
【专利说明】生物流体中细菌的检测
[00011 本申请是申请日为2012年4月20日、申请号为201210118926.1、发明名称为"生物 流体中细菌的检测"的发明专利申请的分案申请。
[0002] 发明背景
[0003] 通常将血液加工例如分离成成分，得到各种有价值的产品，例如输血产品。可以在 加工过程中汇集血液成分或产品，例如血沉棕黄层和血小板，例如，可以在作为输血产品给 予前汇集4-6个单位的血小板浓缩物。另外，可以在给予前贮存在封闭系统中（例如不使成 分暴露于外部环境)加工的血液成分。例如，可以将红细胞贮存几周，并且可以将血小板贮 存几天(例如根据目前的美国实践5天）。
[0004] 贮存的和/或未贮存的成分可能包括不期望的材料例如细菌。细菌可以在血液采 集(包括采血样)和/或贮存过程中污染血液或血液成分。细菌污染的一个来源可以是血液 捐献者皮肤，其可能包含一种或多种种类的细菌。由于在静脉穿刺前擦拭捐献者皮肤(例如 用酒精)可能不足以确保无菌，所以细菌可以进入采血容器并且细菌可以在贮存血液或血 液成分的同时再生。另外，静脉采血针头在该静脉采血针头插入捐献者时可能切下一圆片 皮肤，使得包含细菌的皮片与血液一起进入采血容器。
[0005] 污染的其他来源包括捐献者血液、环境(包括空气和环境中的设备）和静脉采血 者。污染可以在捐献血液单位和/或得到血样的同时发生。
[0006] 由于将一些血样成分(例如血小板)典型地贮存在环境温度，所以污染问题可能被 放大，因为许多种类的细菌在环境温度更快速地再生。
[0007] 污染的血液产品、尤其是细菌污染的血液产品对接触或接受这些产品的那些人形 成了潜在的健康风险。例如，给予存在细菌污染的输血产品可以对接受者产生不良反应，并 且在美国，给予具有高水平细菌污染的血小板每年牵连许多严重的疾病或死亡病例。
[0008] 用于检测细菌的一些现存的技术是耗费劳动且耗时的并且可能需要昂贵的设备。 一些技术可能使得采样受限、得到不精确的结果和/或难以检测一些种类的细菌。另外，这 些技术可能将污染从环境中导入样品。
[0009] 本发明提供了用于对至少一些现有技术缺陷的改善。本发明的这些和其他优点从 如下举出的描述中显而易见。
[0010] 发明概述
[0011] 在一个实施方案中，提供了用于检测生物流体例如血液和血液产品中细菌的方 法，该方法包括使可能包含细菌的生物流体接触减少血细胞呼吸的清洁剂和细菌生长促进 剂;和在一定时间期限内，测定和/或检测容器中的葡萄糖水平，所述容器包含所述的生物 流体、清洁剂和细菌生长促进剂。
[0012] 本发明的另一个实施方案提供了检测生物流体例如血液和血液产品中的细菌的 系统，该系统包含读取和/或测定装置，和包含适合于装载生物流体的容器的生物流体采样 装置，该容器包含入口并且包含用于减少血细胞呼吸的清洁剂和细菌生长促进剂。
[0013] 由于血细胞呼吸(使用葡萄糖作为其代谢的底物)在清洁剂的存在下减少，且由于 细菌在其代谢周期过程中利用葡萄糖（需氧菌在糖酵解过程中利用葡萄糖、厌氧菌在发酵 过程中利用葡萄糖），所以如果生物流体中存在细菌，则细菌生长将在生长促进剂的存在下 得到促进，且葡萄糖的水平将随时间减少。因此，葡萄糖的水平改变用作细菌检测的替代标 记。
【附图说明】
[0014] 图1显示根据本发明的细菌检测系统的实施方案，包含生物流体采样装置，其包含 适合于装载生物流体的容器，该容器包含葡萄糖采样入口并且包含用于减少血细胞呼吸的 清洁剂和细菌生长促进剂和葡萄糖读取和/或葡萄糖测定装置。
[0015] 图2显示根据本发明的细菌检测系统的另一个实施方案，包含葡萄糖读取和/或葡 萄糖测定装置和生物流体加工系统，其包含多个生物流体容器和如图1中所示的生物采样 装置。
[0016] 图3显示根据本发明的细菌检测系统的另一个实施方案，包含葡萄糖读取和/或葡 萄糖测定装置和生物流体加工系统，其包含多个生物流体容器、排气口、白细胞耗尽滤器和 如图1中所示的生物采样装置。
[0017]发明详述
[0018]有利的是，本发明不仅能够检测需氧菌，而且能够检测专门的厌氧菌并且能够检 测对于其代谢不使用氧的兼性厌氧菌。
[0019] 在一个实施方案中，提供了用于检测生物流体中的细菌的方法，该方法包括：（a) 将生物流体(该生物流体可能包含细菌)置于容器中，该容器包括（i)用于减少血细胞呼吸 的清洁剂;和（ii)细菌生长促进剂;和(b)在一定时间期限内，测定和/或检测容器内生物流 体中的葡萄糖水平，其中在该时间期限内葡萄糖水平的下降表示存在细菌。
[0020] 该方法的实施方案包括测定和/或检测容器内的第一葡萄糖水平，并且在测定和/ 或检测容器内第一葡萄糖水平的约4一约15小时内，测定和/或检测容器内的第二葡萄糖水 平;或包括在一定时间期限内，连续测定和/或检测容器内PC中的葡萄糖水平。
[0021 ]在一个实施方案中，在最初从受试者得到生物流体的约24小时或更短时间内将加 工的生物流体置于容器中。
[0022] 或者或另外，该方法的实施方案包括从受试者采集生物流体，并且在采集生物流 体的约24小时或更短时间内，使部分生物流体进入容器，其中使该部分生物流体保持与清 洁剂和细菌生长促进剂接触，并且在适合的时间期限后，在一定时间期限内，测定和/或检 测容器中的葡萄糖水平。示例地，可以采集1单位的血液并且加工以便将血液分离成一种或 多种成分，包括，例如，PC。在采血的约24小时内，可以使部分分离的PC进入容器，其中使该 部分PC保持与清洁剂和细菌生长促进剂接触，并且在适合的时间期限后，在一定时间期限 内，测定和/或检测容器中的葡萄糖水平。
[0023] 该方法的实施方案可以包括将清洁剂和细菌生长促进剂置于容器中，然后将生物 流体置于容器中，例如，该方法可以包括将生物流体置于采样装置容器中，该容器包含葡萄 糖采样入口并且包含用于减少血细胞呼吸的清洁剂和细菌生长促进剂。
[0024] 在优选的实施方案中，生物流体包含含有血小板的流体、例如富含血小板的血浆 或血小板浓缩物;包含红细胞的流体例如白细胞或浓集红细胞;包含脐带血、干细胞的流体 或细胞培养物。在一些实施方案中，生物流体包含白细胞耗尽的流体。
[0025] 在另一个实施方案中，提供了用于检测生物流体中细菌的系统，包括：（a)生物流 体采样装置，其包含适合于包含生物流体的容器，该容器包含入口（优选葡萄糖采样入口）， 该容器包含(i)有效量的用于减少血细胞呼吸的清洁剂;和（ii)有效量的细菌生长促进剂， 该系统还包含：（b)葡萄糖读取装置和/或葡萄糖测定装置，该装置还包含葡萄糖采样装置 (例如试剂垫和/或测试条），其中读取和/或测定装置适合于在一定时间期限内测定和/或 检测生物流体内的第一葡萄糖水平和生物流体内的第二葡萄糖水平，其中该时间期限内葡 萄糖水平的下降表示存在细菌。
[0026] 典型地，适合于包含生物流体的生物流体采样装置容器是软包装容器。
[0027] 在细菌检测系统的一个优选的实施方案中，该系统包含生物流体加工系统，该系 统包含多个容器，例如用于接收和/或采集生物流体的第一个容器(例如"源容器"）和至少 第二个用于接收部分生物流体的容器(例如作为生物流体采样装置的组成部分，其也是所 述系统的组成部分），其中第二个容器包含清洁剂和细菌生长促进剂;和葡萄糖读取和/或 测定装置，其检测该时间期限内生物流体中的葡萄糖水平。生物流体加工系统典型地包括 多个用于提供容器之间流体沟通的导管并且可以包括另外的部件，例如一个或多个另外的 容器(例如用于另外的溶液和/或用于包含加工的生物流体成分)和/或过滤装置(例如白细 胞耗尽过滤装置)和/或一个或多个排气口例如气体入口和/或气体出口。典型地，该生物流 体加工系统还包括一个或多个流量控制装置，例如夹子、转移路径截止器、止回阀和/或可 旋转阀。
[0028] 该细菌检测系统和/或生物流体加工系统的实施方案优选包括可拆卸的（或可连 接和可拆卸的）生物流体采样装置