一种柠檬苦素类化合物、制备方法和治疗卵巢癌的用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物技术领域，具体涉及从干燥的陈皮中分离得到的一种具有治疗卵 巢癌作用的柠檬苦素类化合物及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 陈皮是芸香科植物橘(Citrus reticulata Blaneo)及其栽培变种的干燥成熟果 皮。采摘成熟果实，剥取果皮，晒干或低温干燥。味苦、辛，性温，具有理气健脾、燥湿化痰作 用，用于脘腹胀满，食少吐泻，咳嗽痰多。药材分为"陈皮"和"广陈皮"。一般来说，陈皮果皮 常剥成数瓣，基部相连或呈不规则碎片。外表面橙黄色或红棕色，有细皱纹及凹下的点状油 室；内表面黄白色，粗糙呈海绵状，附黄白色或黄棕色筋络状维管束，质稍硬而脆，气香，味 辛而微苦。而广陈皮果皮则多剖成3至4瓣，基部相连，形状整齐有序，厚度约1毫米。点状油 室较大，对光照视透明清晰，质较柔软。但是不管是陈皮还是广陈皮都以片大、色鲜、油润、 质软、香气浓、味甜苦辛者为佳。主产于广东、福建、四川、江苏、浙江、江西、湖南等地。
[0003] 陈皮主要含有挥发油、黄酮类、有机胺类及微量元素等成分。陈皮含挥发油约占 2%~4%，主要成分为梓檬苦素和梓檬醛。
[0004] 现代药理学表明陈皮在心血管、胃肠道、呼吸道、内分泌、抗癌、抗衰老、养颜美容、 营养补虚方面具有很好作用，这为陈皮深度开发提供广阔前景。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种从干燥的陈皮中分离得到的一种具有治疗卵巢癌作用 的柠檬苦素类化合物及其制备方法。
[0006] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：
[0007] 具有下述结构式的化合物(I)，
[0009] 所述的化合物（I)的制备方法，包含以下操作步骤：（a)将干燥的陈皮粉碎，用75~ 85%乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正 丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步骤(a)中乙酸乙 酯萃取物用大孔树脂除杂，先用10%乙醇洗脱8个柱体积，再用75%乙醇洗脱10个柱体积， 收集75%乙醇洗脱液，减压浓缩得75%乙醇洗脱物浸膏；（c)步骤(b)中75%乙醇洗脱浸膏 用正相硅胶分离，依次用体积比为80 :1、45:1、25:1、10:1和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱 得到5个组分；（d)步骤(c)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为15:1、10:1和5: 1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的反相 硅胶分离，用体积百分浓度为75 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集8~12个柱体积洗脱液，洗 脱液减压浓缩得到纯的化合物(I)。
[0010] 进一步地，所述大孔树脂为D101大孔吸附树脂。
[0011] 进一步地，所述用乙醇热回流提取采用的乙醇浓度为80%。
[0012] -种药物组合物，其中含有治疗有效量的所述的化合物（I)和药学上可接受的载 体。
[0013] 所述的化合物(I)在制备治疗卵巢癌药物中的应用。
[0014] 所述的药物组合物在制备治疗卵巢癌药物中的应用。
[0015] 本发明化合物用作药物时，可以直接使用，或者以药物组合物的形式使用。
[0016] 该药物组合物含有治疗有效量的本发明化合物（I)，其余为药物学上可接受的、对 人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。
[0017] 所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料 以及药物制品辅剂。将本发明的药物组合物以单位体重服用量的形式使用。本发明药物可 通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控 释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等;用于注射时，可制成灭菌的 水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。
【附图说明】
[0018]图1为化合物(I)结构式；
[0019 ]图2为化合物（I)理论ECD值与实验ECD值比较。
【具体实施方式】
[0020]下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0021 ]实施例1:化合物(I)分离制备及结构确证
[0022] 试剂来源：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷为分析纯，购自上海凌峰化 学试剂有限公司，甲醇，分析纯，购自江苏汉邦化学试剂有限公司。
[0023]制备方法：（a)将干燥的陈皮（10kg)粉碎，用80 %乙醇热回流提取（25L X 3次），合 并提取液，浓缩至无醇味(3L)，依次用石油醚(3LX3次）、乙酸乙酯(3LX3次)和水饱和的正 丁醇(3LX3次)萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物(431g)和正丁醇萃取物；（b) 步骤(a)中乙酸乙酯萃取物用D101大孔树脂除杂，先用10%乙醇洗脱8个柱体积，再用75% 乙醇洗脱10个柱体积，收集75%乙醇洗脱液，减压浓缩得75%乙醇洗脱物浸膏（172g);(c) 步骤(b)中75%乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为80:1(8个柱体积）、45:1(8 个柱体积）、25:1(8个柱体积）、10:1(10个柱体积)和1:1(5个柱体积)的二氯甲烷-甲醇梯度 洗脱得到5个组分；（d)步骤(c)中组分4(65g)用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为15:1 (8个柱体积）、10:1(10个柱体积)和5:1(8个柱体积）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组 分；（e)步骤（d)中组分2(37g)用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为 75 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集8-12个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物 (I)(45mg)〇
[0024] 结构确证：白色无定形粉末;HR-ESMS显示[M+Na]+为m/z 637.3020,结合核磁特 征可得分子式为C34H46O1Q，不饱和度为12。核磁共振氢谱数据δΗ(ρρηι，DMS0_d6，500MHz):H-1 (7.33，d，J=10.6)，H-2(6.03，d，J=10.6)，H-5(2.78，dd，J = 8.0,2.1)，H-6(2.20，dd，J = 16·9,2·1)，H-6(2.31，dd，J=16.9,8.0)，H-9(2.85，d，J = 7.2)，H-ll(5.45，dd，J=10.8， 7.2)，H-12(5.57，d，J=10.8)，H-15(3.74，m)，H-16(1.71，dd，J=13.6，10.4)，H-16(2.09， dd，J = 13.6,7.3)，H-17(2.95，dd，J=10.4,7.3)，H-18(0.91，s)，H-19(0.92，s)，H-21 (6.98，s)，H-22(6.05，s)，H-23(7.15，s)，H-28(0.93，s)，H-29(1.01，s)，H-30(5.09，s)，H-30(5.19，s)，7-0CH 3(3.54，s)，ll-0Ac(1.76，s)，H-2'（1.78，m)，H-3'（1.25，m)，H-3'（1.01， m)，H-4 '（ 0 · 72，m)，H-5 '（ 0 · 73，m);核磁共振碳谱数据δ。(ppm，DMS〇-d6，125MHz): 152 · 0 (CH， 卜C)，125.2(CH，2-C)，203.3(C，3-C)，45.8(C，4-C)，44.6(CH，5-C)，30.8(CH2,6-C)，173.6 (C，7-C)，136.2(C，8-C)，52.4(CH，9-C)，41.5(C，10-C)，70.7(CH，11-C)，74.0(CH，12-C)， 45.1(C，13-C)，92.6(C，14-C)，78.1(CH，15-C)，38.3(CH2，16-C)，37.2(CH，17-C)，13.5(CH 3， 18-C)，20.7(CH3，19-C)，121.8(C，20-C)，140.0(CH，2hC)，110.7(CH，22-C)，141.9(CH，23-C)，22.6(CH 3,28-C)，22.2(CH3,29-C)，120.2(CH2,30-C)，51.8(CH 3,7-0CH3)，169.3(C，11-0Ac)，20.2(CH3，n-0Ac)，175.1(C，r-C)，40.4(CH，2'-C)，25.1(CH2,3'-C)，11.6(CH 3,4'- C)，15.1 (CH3，5 '-c);碳原子标记参见图1。红外光谱表明该化合物含有羟基(3442cnf4和羰 基（1737CHT1)基团。该化合物在233nm处有紫外吸收带，说明含有α，β-不饱和酮羰基基团。 13C NMR谱和DEPT谱显示有34个碳信号，其中包括八个甲基(一个甲氧基