一种低温溶剂提取制备高纯大豆磷脂酰胆碱的方法
【技术领域】
[0001]本发明属于溶剂提取技术范围，特别涉及一种由富含磷脂酰胆碱的大豆磷脂原料 制备高纯大豆磷脂酰胆碱的方法。 技术背景
[0002] 磷脂是含磷的脂质，是生物膜的基本成分。磷脂的醇部分或者是甘油，或者是鞘氨 醇，故可分成甘油磷脂(phosphoglyceride)和鞘磷脂（sphingolipid)两类。体内含量较多 的甘油磷脂是磷脂酰胆碱(PC，卵磷脂）、磷脂酰乙醇胺(PE，脑磷脂）、磷脂酰丝氨酸(PS)、磷 脂酰甘油、二磷脂酰甘油（心磷酯)及磷脂酰肌醇(PI)等，每一磷脂可因组成的脂肪酸不同 而有若干种。卵磷脂即磷脂酰胆碱(PC)是磷脂中最为重要的成分之一，主要用于保健食品、 医药、化妆品等行业。高纯度卵磷脂作为高档乳化剂可用于静脉注射脂肪乳剂、抗癌药物鸦 胆子油乳剂、脂质体制剂、微乳制剂等。
[0003] 目前提取大豆磷脂酰胆碱的方法主要有:有机溶剂法分离技术，无机盐复合沉淀 技术，膜分离技术，色层分离技术和超临界萃取技术等。
[0004] CN101033236,介绍了 一种树脂层析法分离提纯卵磷脂，产品中PC含量为94%。 CN1634939,介绍了一种超临界C〇2提取制备大豆磷脂的方法，产品中PC含量可达90%以上。 CN102010440A，介绍了一种吸附法制备高纯大豆磷脂酰胆碱的方法，产品中PC含量大于 909LUS4714571介绍了正己烷-乙腈、乙腈-氟碳混合溶剂提取蛋黄卵磷脂的方法，产品中PC 含量可达95%，但其所用的氟碳溶剂价格昂贵，不利于工业化生产。CN1506368，介绍了一种 双液相混合溶剂对大豆磷脂进行多级逆流萃取，产品中PC含量大于80%。
[0005] 柱层析法处理量相对较小，工艺放大困难。超临界萃取技术，设备昂贵，操作条件 苛刻，不适合大规模推广。膜分离法，膜的渗透量和膜的寿命仍制约着膜工艺的工业化。无 机盐复合沉淀技术，工艺中使用的无机盐会造成环境污染。
【发明内容】
[0006] 针对上述现有技术存在现有溶剂提取法难以制备高纯大豆磷脂酰胆碱的问题，本 发明的目的是为了提供一种低温溶剂提取法从富含磷脂酰胆碱的大豆磷脂原料中提取高 纯大豆磷脂酰胆碱的方法。
[0007] 为解决上述问题，本发明所采用的技术方案如下： 一种低温溶剂提取制备高纯大豆磷脂酰胆碱的方法，其特征在于:采用混合溶剂和低 温冷冻结晶方法，具体包括以下步骤： ⑴在20~50°C，将大豆磷脂原料溶于乙腈-低碳醇混合溶剂； ⑵缓慢降温至-10~_25°C进行结晶，结晶时间为2~18h; (3)用常规方法过滤除去杂质； ⑷滤液经真空脱除溶剂，得到含大豆磷脂酰胆碱97%以上的产品。
[0008] 所述大豆磷脂原料为大豆磷脂酰胆碱含量优选大于45%，更优选大于55%，最优选 大于60%的大豆磷脂。
[0009]所述乙腈-低碳醇混合溶剂是乙腈与低碳醇按体积比1:2~8:1的混合物。
[0010]所述的大豆磷脂原料与混合溶剂的比例为1:4~30(质量-体积比），优选的比例为 1:6~20 (质量-体积比），最优选的比例为1:8~10 (质量-体积比）。
[0011 ]所述低碳醇为d、C2、C3、C4醇或它们的混合物。
[0012] 所述结晶温度为-10~-20°C，优选-15~_18°C。
[0013] 所述结晶时间为7~16h，优选的时间为12~14h。
[0014] 所述的过滤可采用离心、减压过滤、压滤中的任意一种，所述溶剂脱除方法为常用 的真空脱除法。
[0015] 实施本发明的由富含磷脂酰胆碱的大豆磷脂原料制备高纯大豆磷脂酰胆碱的方 法，可以得到大豆磷脂酰胆碱含量高于97%的磷脂产品。另外，本溶剂提取工艺简单，溶剂 来源广泛、价格便宜、用量少，易于实现工业化生产。
【具体实施方式】
[0016] 为了更好地说明本发明，我们列举了下列实施例，但本发明并不仅限于下述实施 例。
[0017] 实施例1:用含磷脂酰胆碱62%的大豆磷脂100g，溶于240ml甲醇，加入720ml乙腈， 搅拌均匀，降温至-18°C，保温16h，过滤除去杂质，再真空浓缩去除溶剂，得到产品40.5g。高 效液相色谱分析结果表明，产品大豆磷脂酰胆碱含量为97.2%，收率为64%。
[0018] 实施例2:用含磷脂酰胆碱56%的大豆磷脂100g，加热至50°C溶于乙腈-甲醇混合溶 液950ml(乙腈与甲醇体积比为3:1)，降温至-18°C，保温12h，过滤除去杂质，再真空浓缩去 除溶剂，得到产品39.8g。高效液相色谱分析结果表明，产品大豆磷脂酰胆碱含量为97.5%， 收率为61%。
[0019] 实施例3:用含磷脂酰胆碱58%的大豆磷脂100g，溶于250ml乙醇，加入500ml乙腈， 搅拌均匀，降温至-16°C，保温18h，过滤除去杂质，再真空浓缩去除溶剂，得到产品38.4g。高 效液相色谱分析结果表明，产品大豆磷脂酰胆碱含量为97.1%，收率为60%。
[0020] 实施例4:用含磷脂酰胆碱62%的大豆磷脂100g，溶于300ml异丙醇，加入540ml乙 腈，搅拌均匀，降温至_15°C，保温10h，过滤除去杂质，再真空浓缩去除溶剂，得到产品 39.1 g。高效液相色谱分析结果表明，产品大豆磷脂酰胆碱含量为98.2%，收率为62%。
[0021 ] 实施例5:用含磷脂酰胆碱62%的大豆磷脂100g，溶于330ml正丁醇，加入500ml乙 腈，搅拌均匀，降温至-10°C，保温8h，过滤除去杂质，再真空浓缩去除溶剂，得到产品39.6g。 高效液相色谱分析结果表明，产品大豆磷脂酰胆碱含量为98.0%，收率为63%。
[0022] 上述实施例所用的大豆磷脂酰胆碱含量的分析方法采用高效液相色谱法:用硅胶 为填充剂（色谱柱250mmX4. 6mm，5ym);以甲醇-水-冰醋酸-三乙胺(85 :15 :0.45 :0 .0 5 )为流动相A，以正己烷-异丙醇-流动相A ( 2 0:48 :3 2 )为流动相B ;柱温为4 0 °C ; 按下表1进行梯度洗脱;检测器为蒸发光散射检测器。
[0023] 表1梯度洗脱程序
检测结果统计如表2所示。
[0024]表2实施例检测结果表
【主权项】
1. 一种低温溶剂提取制备高纯大豆磷脂酰胆碱的方法，其特征在于:采用混合溶剂和 低温冷冻结晶方法，具体包括以下步骤： (1) 在20~50°C，将大豆磷脂原料溶于乙腈-低碳醇混合溶剂； (2) 缓慢降温至-10~_25°C进行结晶，结晶时间为2~18h; (3) 用常规方法过滤除去杂质； (4) 滤液经真空脱除溶剂，得到含大豆磷脂酰胆碱97%以上的产品。2. 根据权利要求1所述的低温溶剂提取制备高纯大豆磷脂酰胆碱的方法，其特征在于： 所述大豆磷脂原料为大豆磷脂酰胆碱含量大于45%的大豆磷脂，优选大于55%，更优选大于 60% 的。3. 根据权利要求1所述的低温溶剂提取制备高纯大豆磷脂酰胆碱的方法，其特征在于： 所述乙腈-低碳醇混合溶剂是乙腈与低碳醇按体积比1:2~8:1的混合物。4. 根据权利要求1所述的低温溶剂提取制备高纯大豆磷脂酰胆碱的方法，其特征在于： 所述的大豆磷脂原料与混合溶剂的质量-体积比为1:4~30,优选1:6~20,更优选1:8~10。5. 根据权利要求1所述的低温溶剂提取制备高纯大豆磷脂酰胆碱的方法，其特征在于： 所述低碳醇为&、&、(： 3、(：4醇或它们的混合物。6. 根据权利要求1所述的低温溶剂提取制备高纯大豆磷脂酰胆碱的方法，其特征在于： 所述结晶温度为_1〇~ _20°C，优选-15~_18°C。7. 根据权利要求1所述的低温溶剂提取制备高纯大豆磷脂酰胆碱的方法，其特征在于： 所述结晶时间为7~16h，优选的时间为12~14h。8. 根据权利要求1所述的低温溶剂提取制备高纯大豆磷脂酰胆碱的方法，其特征在于： 所述的过滤可采用离心、减压过滤、压滤中的任意一种。
【专利摘要】本发明公开了一种低温溶剂提取制备高纯大豆磷脂酰胆碱的方法，其特征在于：采用混合溶剂和低温冷冻结晶方法，具体包括以下步骤：在20～50℃，将大豆磷脂原料溶于乙腈-低碳醇混合溶剂；缓慢降温至-10～-25℃进行结晶，结晶时间为2～18h；用常规方法过滤除去杂质；滤液经真空脱除溶剂，得到含大豆磷脂酰胆碱97%以上的产品。本发明提取工艺简单，溶剂来源广泛、价格便宜、用量少，易于实现工业化生产。
【IPC分类】C07F9/10
【公开号】CN105481892
【申请号】CN201510820403
【发明人】李乃畅, 朱兵, 王保成, 吴仰波, 高正松, 吴仁荣
【申请人】南京威尔化工有限公司
【公开日】2016年4月13日
【申请日】2015年11月24日