一种名为表儿茶素反式咖啡酸酯的儿茶素类衍生物及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001]本发明属于化学技术领域，具体涉及一种名为表儿茶素反式咖啡酸酯的儿茶素类 衍生物及其制备方法和应用。
【背景技术】
[0002] 茶，属山茶科，其叶部加工后的产品如绿茶、红茶等中均含有具有良好生物活性的 儿茶素类化合物，例如从绿茶中分离出的表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、从红茶中分 离出的茶黄素类成分，都具有良好的抗氧化、抗衰老等活性。而且，茶产品中还含有具有降 月旨、抗菌、消炎、抗癌的儿茶素类衍生物成分，这些均是农业和医药等领域的研究热点。
[0003] 紫娟茶(Zi juan tea)属于大叶茶变种(C. var .assamica)，是云南省农业科学院茶 叶研究所采用单株选种法经多代培育而成的新品种。该茶是以茶树的叶为原料，经过杀青、 揉捻、干燥后制得。紫娟茶主要产于我国云南省，具有紫茎、紫叶、紫芽的特征。这种茶除了 作为茶饮料使用外，还可用于降压、抗氧化、抗衰老等用途。
[0004] 关于紫娟茶生物活性的化学基础的报道比较少，如果能成功的从紫娟茶中研究开 发出具有生物活性的儿茶素类衍生物成分，将会对农业和医药等领域作出重要贡献。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的之一是提供一种从紫娟茶中分离制备得到的名为表儿茶素反式咖 啡酸酯的儿茶素类衍生物，此名为表儿茶素反式咖啡酸酯的儿茶素类衍生物具有如下所示 结构：
[0007] 本发明的目的之二是提供一种上述名为表儿茶素反式咖啡酸酯的儿茶素类衍生 物的制备方法，其包括以下步骤：
[0008] 1)、原料粉碎
[0009] 取紫娟茶，并将紫娟茶粉碎；
[0010] 2)、浸提
[0011]用甲醇提取粉碎后的紫娟茶，提取液经过减压浓缩制得膏状提取物；
[0012] 3)分离纯化
[0013]将甲醇提取后的膏状提取物分离纯化得到表儿茶素反式咖啡酸酯。
[0014] 作为优选，所述步骤2)浸提中，粉碎后的紫娟茶先用石油醚浸提，再用乙酸乙酯浸 提、最后再将经乙酸乙酯浸提的紫娟茶用甲醇提取。
[0015] 作为优选，所述步骤3)中所述的分离纯化是将所述甲醇提取制得的膏状提取物溶 解后依次经MCI柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析、聚酰胺柱层析，最后经HPLC制备分离 纯化得到表儿茶素反式咖啡酸酯。
[0016] 作为优选，所述步骤2)浸提中，有机溶剂提取采用浸泡方式提取，即将粉碎后的紫 娟茶浸泡在有机溶剂中72小时;或者将粉碎后的紫娟茶用有机溶剂超声波振荡提取。
[0017] 作为优选，步骤3)中所述的分离纯化的具体步骤为：将甲醇提取物溶解后使用 Me0H-H20体积比0:100到100:0作为梯度洗脱，收集其中Me0H-H20体积比70:30到80:20的洗 脱组分;然后将所得的洗脱组分经Sephadex LH-20凝胶柱层析，以Me0H-H20体积比50:50到 100:0作为梯度洗脱，收集其中Me0H-H 20体积比70:30的洗脱组分;所得洗脱组分再经MCI柱 层析，以Me0H-H20体积比30:70到100:0作为梯度洗脱，收集其中Me0H-H 20体积比70:30到80: 20的洗脱组分;然后经聚酰胺柱层析，以二氯甲烷-甲醇体积比1:1洗脱，收集相应洗脱组 分，最后经HPLC制备纯化，得到表儿茶素反式咖啡酸酯。
[0018] 本发明的目的之三是将如上所述的名为表儿茶素反式咖啡酸酯的儿茶素类衍生 物应用于抗血管炎症药物方面的制备。
[0019] 具体地说是将如上所述的表儿茶素反式咖啡酸酯的儿茶素类衍生物和药学上所 通用的辅料制成一种抗血管炎症药物。该药物剂型包括口服型、外用型和注射型等。所述口 服型包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸剂等;所述外用型包括栓剂、徐剂、洗剂、膏剂、透皮贴 剂等;所述注射型包括注射液、混旋液、冻干粉等。具体制备方法参照制药领域的常规方法 制备。
[0020] 本发明的有益效果如下：
[0021] 1)通过试验证实，本发明所述名为表儿茶素反式咖啡酸酯的儿茶素类衍生物在由 血管紧张素 II诱导的大鼠主动脉血管平滑肌细胞炎症模型中有一定抗炎作用，可以应用于 制备抗血管炎症药物方面。因此本发明提供的具有医学活性的儿茶素类衍生物，对农业和 医药领域具有重要的意义;为有效开发利用紫娟茶提供了更为广阔的前景。
[0022] 3)、本发明制备方法简单，成本较低。
【附图说明】
[0023] 图1为表儿茶素反式咖啡酸酯(epicatechin 3-〇-caffeate)的化学结构式。
[0024] 图2为表儿茶素反式咖啡酸酯（epicatechin 3-〇-caffeate)对血管紧张素 II (Angll)诱导的大鼠主动脉血管平滑肌细胞(Rat VSMC)炎症的抑制试验示意图。
【具体实施方式】
[0025] 下述实施例中的实验方法，如无特别说明，均为常规方法。
[0026] 下述实施例中的百分含量，如无特别说明，均为质量百分含量。
[0027] 下面结合具体实施例来对本发明做进一步详细说明。
[0028] -、表儿茶素反式咖啡酸酯（epicatechin 3-〇-caffeate)的制备
[0029] (1)取4.5公斤紫娟茶，并将紫鹃茶粉碎；
[0030] (2)首先将4.5公斤粉碎后的紫娟茶先用15升石油醚常温浸提72小时，然后在70Hz 下超声浸提2小时;得石油醚提取液;按上述步骤浸提三次，合并提取液并将提取液浓缩至 膏状，得石油醚提取浸膏18克；
[0031] 然后将经石油醚浸提后的紫娟茶再用15升乙酸乙酯常温浸提72小时，然后在70Hz 下超声浸提2小时;得乙酸乙酯提取液，按上述步骤浸提三次;合并提取液并将提取液浓缩 至膏状，得乙酸乙酯提取浸膏50克；
[0032]最后将经过乙酸乙酯提取后的紫娟茶再用15升甲醇常温浸提72小时，得甲醇提取 液，然后在70Hz下超声浸提2小时；按上述步骤合并提取液并将提取液浓缩至膏状，得甲醇 提取浸膏800克。
[0033] (3)取500克甲醇提取浸膏用500mL热水溶解，再通过MCI柱层析，使用Me0H-H20体 积比0:100到100 :0梯度洗脱，收集其中Me0H-H20体积比70: 30到80: 20的洗脱组分;将得到 的洗脱组分再经过Sephadex LH-20凝胶柱层析，使用Me0H-H20体积比50:50到100:0梯度洗 脱，收集其中Me0H-H 20体积比70 : 30的洗脱组分；将得到的洗脱组分经过MCI柱层析，使用 Me0H-H20体积比30:70到100:0梯度洗脱，收集其中Me0H-H20体积比70:30到80:20的洗脱组 分;将得到的洗脱组分经过聚酰胺柱层析，以二氯甲烷-甲醇体积比1:1洗脱，每20毫升一馏 分，将收集到的馏分点板合并、蒸干后再经HPLC制备纯化，可得到表儿茶素反式咖啡酸酯。 可得到表儿茶素反式咖啡酸酯(epicatechin 3-〇-caffeate，2.2毫克）。
[0034] 本发明表儿茶素反式咖啡酸酯(epicatechin 3-〇-caffeate)的特性如下：
[0035] 1)、可溶于甲醇和DMS0,白色固体，
[0036] 2)^UVA ffflnm(loge) ：204(2.9), 286(2.2), 32