治疗涎腺腺样囊性癌的三萜化合物及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物技术领域，具体涉及从灯台树的干燥叶中分离得到的一种具有治 疗涎腺腺样囊性癌作用的三萜类化合物及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 灯台树Alstonia scholaris(L. )R.Br.为夹竹桃科鸡骨常山属乔木。其性味甘、 淡、平，具有清热解毒、消肿止痛、平喘止咳、截疟、发汗、健胃等作用。灯台树根、茎、皮、叶均 可入药，以皮和叶为主。该植物主要分布在我国的广西南部、西部和云南南部，在尼泊尔、印 度、斯里兰卡、緬甸、泰国、越南、柬埔寨、马来西亚、印度尼西亚、菲律宾和澳大利亚热带地 区也有分布。灯台树具有悠久的民间用药历史，我国民间用灯台树皮治疗头痛、伤风、痧气、 肺炎、百日咳、慢性支气管炎，外用可治外伤止血、接骨、消肿、疮疖及配制杀虫剂等。
[0003] 国内外学者对灯台树的化学成分进行了一系列研究，已经发现的化学成分主要包 括生物碱类、黄酮类和三萜类，其次还有挥发油、留体类、维生素等成分。目前，灯台树的生 物碱、黄酮和三萜类成分研究较为深入，其中以灯台树叶的研究较多，已经从中分离得到了 50多个生物碱成分，主要为单萜吲哚生物碱。
[0004] 近年来，随着对其化学成分和药理活性等方面研究的逐步展开，发现其活性成分 丰富，在抗肿瘤、抗炎、抗菌、抗糖尿病和调血脂等方面显示出潜在的药用价值。研究表明， 灯台树中含有的三萜类成分羽扇豆醇对不同组织来源的细胞均具有增殖抑制活性，如黑色 素瘤451LU细胞、WM35细胞和B162F2细胞，人胰腺癌细胞株AsPC-I，人表皮癌A431细胞，肝癌 3丽07721细胞，前列腺癌细胞^^ &?、011?221?丫1和?(：-3。羽扇豆醇可选择性地抑制无胸腺裸 鼠451LU和CWR22R γ 1细胞的增殖，通过调节细胞增殖标记物、细胞凋亡标记物和细胞周期 调控分子在肿瘤异种移植中的表达而发挥作用。灯台树除了具有以上药理作用外，还具有 退热、缩宫、降压、抗疟疾等作用。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种从灯台树的干燥叶中分离得到的一种具有治疗涎腺腺 样囊性癌作用的三萜类化合物及其制备方法。
[0006] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：
[0007] 具有下述结构式的化合物(I)，
[0009]所述的化合物（I)的制备方法，包含以下操作步骤：（a)将灯台树的干燥叶粉碎，用 75~85 %乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和 的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步骤(a)中乙 酸乙酯萃取物用大孔树脂除杂，先用10%乙醇洗脱8个柱体积，再用75%乙醇洗脱10个柱体 积，收集75%乙醇洗脱液，减压浓缩得75%乙醇洗脱物浸膏；（c)步骤(b)中75%乙醇洗脱浸 膏用正相硅胶分离，依次用体积比为75:1、45 :1、20:1、12:1和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗 脱得到5个组分；（d)步骤(c)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为20:1、12:1和 5:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的反 相硅胶分离，用体积百分浓度为75 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集10~12个柱体积洗脱液， 洗脱液减压浓缩得到纯的化合物(I)。
[0010]进一步地，所述大孔树脂为AB-8型大孔吸附树脂。
[0011] 进一步地，所述用乙醇热回流提取采用的乙醇浓度为80%。
[0012] -种药物组合物，其中含有治疗有效量的所述的化合物（I)和药学上可接受的载 体。
[0013] 所述的化合物(I)在制备治疗涎腺腺样囊性癌的药物中的应用。
[0014] 所述的药物组合物在制备治疗涎腺腺样囊性癌的药物中的应用。
[0015] 本发明化合物用作药物时，可以直接使用，或者以药物组合物的形式使用。
[0016] 该药物组合物含有治疗有效量的本发明化合物（I)，其余为药物学上可接受的、对 人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。
[0017] 所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料 以及药物制品辅剂。将本发明的药物组合物以单位体重服用量的形式使用。本发明药物可 通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控 释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等;用于注射时，可制成灭菌的 水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。
【附图说明】
[0018]图1为化合物(I)结构式；
[0019 ]图2为化合物（I)理论ECD值与实验ECD值比较。
【具体实施方式】
[0020]下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0021 ]实施例1:化合物(I)分离制备及结构确证
[0022] 试剂来源：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷为分析纯，购自上海凌峰化 学试剂有限公司，甲醇，分析纯，购自江苏汉邦化学试剂有限公司。
[0023]制备方法：（a)将灯台树的干燥叶（IOkg)粉碎，用80 %乙醇热回流提取（25L X 3 次），合并提取液，浓缩至无醇味(3L)，依次用石油醚(3LX3次）、乙酸乙酯(3LX3次)和水饱 和的正丁醇(3LX3次)萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物(431g)和正丁醇萃取 物；（b)步骤(a)中乙酸乙酯萃取物用AB-8型大孔树脂除杂，先用10%乙醇洗脱8个柱体积， 再用75%乙醇洗脱10个柱体积，收集75%乙醇洗脱液，减压浓缩得75%乙醇洗脱物浸膏 (157g); (c)步骤(b)中75%乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为75:1(8个柱体 积）、45:1 (8个柱体积）、20:1 (8个柱体积）、12 :1 (8个柱体积）和1:1 (5个柱体积）的二氯甲 烷-甲醇梯度洗脱得到5个组分；（d)步骤(c)中组分4(49g)用正相硅胶进一步分离，依次用 体积比为20:1(8个柱体积）、12:1(10个柱体积)和5:1(8个柱体积)的二氯甲烷-甲醇梯度洗 脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2(25g)用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百 分浓度为75 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集10-12个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯 的化合物（I)(35mg)。
[0024] 结构确证：白色无定形粉末，HR-ESMS显示[M+Na]+为m/z 623 · 3226，结合核磁特 征可得分子式为C34H48O9，不饱和度为11。核磁共振氢谱数据3h(ppm，DMS0_d6，500MHz): H-I (4.74，d，J = 7.5)，H-2(2.92，dd，J=15.5,7.5)，H-2(3.34，d，J=15.5)，H-5(2.38，dd，J = 12.5，1.5)，H-6(1.99，m)，H-6(1.86，m)，H-7(5.04，br，s)，H-9(2.49，dd，J=11.5，1.5)，H-ll(1.37，m)，H-ll(1.49，m)，H-12(1.65，m)，H-12(1.36，m)，H-15(5.18，d，J=2.5)，H-16 (1.89，m)，H-16(2.09，m)，H-17(1.28，m)，H-18(1.01，s)，H-19(1.17，s)，H-20(2.14，m)，H-21(3.71，dd，J=11.0,5.0)，H-21(3.47，t，J=11.0)，H-22(2.58，m)，H-22(2.26，m)，H-26 (1.23，s)，H-27(1.13，s)，H-28(1.18，s)，H-29(1.46，s)，H-30(1.12，s)3-0Ac(1.99，s)，7-OAc (I · 92，s);核磁共振碳谱数据δ。(ppm，DMSO-Cl6，125MHz): 72 · 3 (CH，I-C)，35 · 6 (CH2，2-C)， 173.1(C，3-C)，87.4(C，4-C)，45.2(CH，5-C)，27.0(CH2,6-C)，75.9(CH，7-C)，42.7(C，8-C)， 36.8(CH，9-C)，45.1(C，10-C)，17.5(CH2，11-C)，35.2(CH2，12-C)，47.4(C，13-C)，160.3(C， 14-C)，119.7(CH，15-C)，34.6(CH2，16-C)，58.1(CH，17-C)，19.5(CH 3，18-C)，15.3(CH3，19-C)，30.8(CH，20-C)，66.0(CH2,21-C)，35.9(CH 2,22-C)，201.1(C，23-C)，120.7(C，24-C)， 56·7(C，25-C)