Ezh2甲基转移酶抑制剂gsk126的合成方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种给突变性淋巴瘤的治疗提供良好前景的GSK126的合成新方法，属 于药物合成领域。
【背景技术】
[0002] 631(126:(3)-6-溴-1-(异丁基）-氮-((4,6-二甲基-2-氧-1，2-二氢吡啶-3基）甲 基)-3_甲基-6-(6-(对二氮己烷-2-基）哌啶-2-基)-1_氢-吲哚-4-甲酰胺，CAS号1346574-57_9，分子式〇311138仏〇2，分子量526.67。近几年的研究显不，人类的恶性肿瘤与。〇15^〇11^ group(PcG)蛋白的异常表达有着密切的关系，特别是polycomb repressive complex 1 (PRCl)蛋白复合物和PRC2蛋白复合物。而PRC2复合物的催化活性亚单位则是Zeste基因增 强子同源物2(enhancer of zeste homolog 2,简称EZIKhEZiK与果绳基因同源，是PcG基 因家族的核心成员，位于染色体7q35上，通过催化组蛋白H3第27位赖氨酸三甲基化 (H3K27m3)，从而达到抑制基因表达的效果。
[0003] 由于EZH2与肿瘤的恶性进程、侵袭性、转移能力关系密切，所以在淋巴瘤、乳腺癌、 胃癌、前列腺癌等多种恶性肿瘤中呈现高表达。随着对其在肿瘤中分子功能、上下游调控机 制和临床病理特点的深入了解，EZH2有望做为新靶点，为肿瘤治疗提供新的途径。
[0004] 为了证实抑制剂对于EZH2甲基转化酶活性的抑制效果，通过高通量筛查，发现了 含氮五元杂环PRC2蛋白有较好的效果，之后通过大量药物化学实验的优化衍生出了GSK126 化合物。GSK126就是含有杂环吲哚的具有高选择性、有效、竞争性S-腺苷蛋氨酸、小分子的 EZH2甲基转移酶的抑制剂，它对于EZH2药理机制的抑制或许给突变性淋巴瘤的治疗提供一 个很好的前景。
[0005] GSK126有效抑制了突变的EZH2弥漫性大B细胞淋巴瘤的增殖，并且在老鼠的异种 移植实验中显著抑制了突变的EZH2弥漫性大B细胞淋巴瘤的生长。因此，GSK126引起了药学 家和有机化学家的研究兴趣。
[0006] GSK126现有的合成方法(Nature, 2012,492:108-112)(如下式），主要是利用2-甲 基-3-硝基苯甲酸与1，3-二溴-5，5-二甲基海因以浓硫酸做溶剂，生成5-溴-2-甲基-3硝基 苯甲酸酯，然后与N，N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛作用后在铁粉和冰醋酸的作用下进行Heck 反应，得到6-溴-4-B引噪甲酸甲酯。后者再与2-溴丁烷通过亲核取代反应得至Ij IH-吲哚-4-羧 基，6-溴-1-(1-异丁基）甲酯，之后与三氯氧磷反应在吲哚的三位置上醛基，再经过还原得 到6-溴-1-(异丁基)_3_甲基-1-氢-吲哚-4-甲酸甲酯，得到的脂在氢氧化钠的甲醇四氢呋 喃的溶液中水解成6-溴-1-(异丁基)_3_甲基-1-氢-吲哚-4-甲酸，继而与3-氨甲基-4,6-二 甲基-2-羟基吡啶在偶联试剂1_( 3-二甲氨基丙基)_3_乙基碳二亚胺盐酸盐、1-羟基_7_偶 氮苯并三氮唑、N-吗啡啉的作用下得到消旋的偶联产物，通过手性柱拆分的方法得到S-型 的，最后与2-(哌嗪-1-基）吡啶-5-硼酸频那醇酯进行Suzuki偶联反应，得到目标产物 GSK126。现有的方法有两个缺陷：（1)得到关键的吲哚中间产物需要经过七步才能得到，反 应路线繁琐冗长；（2)需要通过手性拆分方法才能得到手性关键中间体，效率低，耗时长，成 本高。目前GSK126的市场价格是每克22，800元人民币左右。
【发明内容】
[0008] 本发明为了克服上述现有技术中的耗时长成本高的缺陷，提出了一种改进GSK126 的合成新方法。这个方法相对于已经投入生产的那种方法有两个优点：一、简化了步骤，从 而减少了原料的消耗，提高了总产率，从而取得更好的经济效益。二、采用了手性控制的方 法，已经投入生产的方法是使用手性柱的方法，但是成本高，耗时长，效率低，导致了该药物 的合成的成本较高。
[0009] 本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：
[0010] EZH2甲基转移酶抑制剂GSK126的合成方法，包括以下步骤：
[0011] (1 )2，5-二溴苯甲酸在浓硫酸中与浓硝酸反应，得到2，5-二溴-3-硝基苯甲酸；
[0012] (2) 2，5-二溴-3-硝基苯甲酸与酸在甲醇中加热反应，得到2，5-二溴-3-硝基苯甲 酉支甲醋；
[0013] (3)2,5_二溴-3-硝基苯甲酸甲酯与还原剂在酸和溶剂中反应，得到2,5_二溴-3-氨基苯甲酸甲酯；
[0014] (4)在碱存在下，2,5_二溴-3-氨基苯甲酸甲酯与烯丙基溴在碱和溶剂中反应，得 到2,5_二溴-3-(烯丙基胺)苯甲酸甲酯；
[0015] (5)在有机碱的存在下，2,5_二溴_3-(烯丙基胺)苯甲酸甲酯在催化剂、配体和相 转移催化剂的作用下在溶剂中反应，经过萃取、水洗、干燥和柱层析纯化后得到6-溴-3-甲 基-1-氢吲哚-4-甲酸甲酯；
[0016] (6)(1〇-异丁醇与对甲基苯磺酰氯反应，得到的产物在碱作用下与6-溴-3-甲基- 1-氢吲哚-4-甲酸甲酯在溶剂中反应，经过萃取、水洗、干燥和柱层析纯化后得到(5)-6-溴_ 1_(异丁基)_3_甲基-1-氢吲哚-4-甲酸甲酯；
[0017] (7)在碱的作用下，（S)-6_溴-1-(异丁基)_3_甲基-1-氢吲哚-4-甲酸甲酯在溶剂 中发生水解反应，得到(S)-6-溴-1-(异丁基)-3_甲基-1-氢吲哚-4-甲酸；
[0018] (8)(S)-6-溴-1-(异丁基)-3_甲基-1-氢吲哚-4-甲酸与3-氨甲基-4,6-二甲基-2-羟基吡啶在偶联试剂作用下在N，N-二甲基甲酰胺中偶联，得到（S)-6-溴-1-(异丁基)-氮_ ((4,6_二甲基-2-氧-1，2-二氢吡啶-3基）甲基)-3_甲基-1-氢-B引噪甲酰胺。
[0019] (9)(S)-6-溴-1-(异丁基)-氮-((4,6-二甲基-2-氧-l，2-二氢吡啶-3基）甲基)-3-甲基-1-氢-吲哚甲酰胺与2-(哌嗪-1-基）吡啶-5-硼酸频那醇酯在催化剂和溶剂作用下进 行Suzuki偶联反应，得到最终产物GSK126。其反应过程如下式：
[0021] 作为优选，步骤(1)中反应温度为60°c-130°c，优选80°c-l 10°C。
[0022]作为优选，步骤（2)中所述酸为浓硫酸、浓盐酸或浓硝酸，其中反应温度为30°C_ 120°C，优选 30°C_80°C。
[0023]作为优选，步骤(3)中所述还原剂为铁粉、锌粉或氯化亚锡，所述溶剂为甲醇、乙醇 或二氯甲烷，所述酸为盐酸或冰醋酸，其中所述2,5_二溴-3-硝基苯甲酸甲酯与还原剂的摩 尔比为1:2-10，优选1:4，其反应温度为20°C_120°C，优选50°C_80°C。
[0024] 作为优选，步骤(4)中所述溶剂为N，N_二甲基甲酰胺、二甲基亚砜或二氯甲烷，所 述碱为氢化钠、碳酸钾或氢氧化钾，所述2,5_二溴-3-氨基苯甲酸甲酯、烯丙基溴和碱的摩 尔比为1:1-4:2-10，优选1:2:4，其反应温度为25°C_100°C，优选50°C_90°C。
[0025] 作为优选，步骤(5)中所述有机碱为醋酸钠或醋酸钾，所述催化剂为氯化钯、醋酸 钯、双三苯基膦二氯化钯或双(三环己基膦)二氯化钯，所述相转移催化剂为四丁基溴化铵、 四丁基氯化铵或四丁基氟化铵，所述配体为亚磷酸三苯酯或1，3-双(三苯基膦)丙烷;所述 溶剂为N，N-二甲基甲酰胺或二甲基亚砜，所述2,5_二溴-3-(烯丙基胺）苯甲酸甲酯与催化 剂的摩尔比为1:0 · 01-0 · 5，优选1:0 · 02-0 · 1，其反应温度为60°C_130°C，优选80°C_110°C。
[0026] 作为优选，步骤(6)中所述碱为氢化钠、碳酸钾、氢氧化钾或氢氧化钠，所述溶剂为 N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、四氢呋喃或二氯甲烷，所述6-溴-3-甲基-1-氢吲哚-4-甲 酸甲酯与(R)-异丁醇的摩尔比为1:1-4;其反应温度为0°C_100°C，优选20°C_50°C。
[0027] 作为优选，步骤(7)中所述碱为氢氧化钠、氢氧化锂或氢氧化钾，所述溶剂为甲醇、 乙醇、二氯甲烷或四氢呋喃，所述(S)-6_溴-1-(异丁基)_3_甲基-1-氢吲哚-4-甲酸甲酯与 碱的摩尔比为1:1-5。
[0028]作为优选，步骤(8)中所述偶联试剂为1-(3_二甲氨基丙基)_3_乙基碳二亚胺或1， 3-二环己基碳二亚胺，其反应温度为20°C-100°C，优选60°C_80°C。
[0029] 作为优选，步骤(9)中所述溶剂为1，4_二环氧六环和水，所述催化剂为[1，1'_双 (二苯基膦)二茂铁]二氯化钯二氯甲烷络合