一种细菌纤维素复合改性膜的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及生物医药材料及其制备技术领域，特别涉及一种细菌纤维素复合改性 膜的制备方法。
【背景技术】
[0002] 细菌纤维素是一种新型生物材料，具有良好的生物亲和性、生物相容性、生物可降 解性、生物适应性和无过敏反应，以及高的持水性和结晶度、良好的纳米纤维网络、高的张 力和强度，尤其是良好的机械韧性等优良性能，其在医学材料上的应用研究日益受到人们 的关注。
[0003] 在细菌纤维素的实际使用过程中为了进一步提高细菌纤维素的性能，往往与其他 材料复合得到细菌纤维素复合材料。本发明采用原位发酵法，使细菌纤维素与海藻酸和交 联羟丙基淀粉原位发酵复合，发酵产生凝胶状膜，对制得的凝胶状海藻酸/细菌纤维素/交 联羟丙基淀粉复合膜热干燥，然后置于20 °C冰箱中冰冻24h后，用真空冷冻干燥机干燥24h， 得到海藻酸/细菌纤维素/交联羟丙基淀粉复合改性膜。
【发明内容】
[0004] 本发明涉及提供一种细菌纤维素复合改性膜的制备方法，该方法简单易行，安全 无毒，可广泛应用于生物医药领域。
[0005] 为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：
[0006] -种细菌纤维素复合改性膜的制备方法，包括下列步骤：
[0007] (1)选取木醋杆菌接到固体培养基上，放入30°C恒温培养箱中，培养3~5d后培养 基上长出新菌体即为活化菌，再把活化菌接到种子液培养基溶液中，28°C~30°C、120r/min 振荡培养12h，得种子液；
[0008] (2)取发酵液培养基，调节溶液pH值为5.8~6.2，在121°C下高压蒸汽灭菌20min~ 30min，冷却至30°C，即得发酵液;所述发酵液培养基由下列成分配成的水溶液(W/V):葡萄 糖1.0~3.0%，蔗糖2.0~3.0%，玉米浆1.5~2.5%，硫酸铵0.2~0.5%，磷酸二氢钾0.1~ 0.4%，硫酸镁0.01~0.05%，海藻酸0.5~1 ·0%，交联羟丙基淀粉0.5~1 ;
[0009] (3)按体积比为6.0~8.0%接种量把种子液接入发酵液中，然后放入30°C的恒温 培养箱中培养7~8d，发酵液表面产生凝胶状膜；
[0010] (4)取出凝胶状膜后用去离子水冲洗干净，然后用1~2 % NaOH溶液在80 °C~90 °C 下浸泡1~2h，再用去离子水冲洗至水pH值为6.5~7.5,得凝胶状细菌纤维素复合改性膜。
[0011] 其中，优选地，步骤（1)中所述的固体培养基为(w/v):葡萄糖3.0~5.0%，蛋白胨 0 · 5~1 · 0 %，琼脂1 · 0~2 · 5 %，磷酸氢二钠0 · 15~0 · 30 %，柠檬酸0 · 1~0 · 2 %，硫酸镁0 · 02 ~0.03%〇
[0012] 其中，优选地，步骤（1)所述的种子液培养基为(w/v):葡萄糖2.0~3.0%，玉米浆 0.5~1.0%，硫酸铵0.5~1.0%，磷酸二氢钾0.1~0.5%，硫酸镁0.02~0.05%。
[0013] 本发明的有益效果：
[0014] 1)采用原位发酵法，将细菌纤维素与海藻酸和交联羟丙基淀粉复合，制得的细菌 纤维素复合改性膜作为医用敷料，具有较高的力学强度;可以延长敷料的使用时间，提高敷 料的阻菌性能。
[0015] 2)本发明工艺简单，操作方便，环保、生产成本低可实现由其制备出的敷料产品可 大规模实际应用。
[0016] 3)改性后的细菌纤维素复合膜抗拉强度及吸湿强度明显升高，扩大产品的利用范 围。
【具体实施方式】
[0017] 下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例 仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技 术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范 围。
[0018] -种细菌纤维素复合改性膜的制备方法，包括下列步骤：
[0019] (1)选取木醋杆菌接到固体培养基上，放入30°C恒温培养箱中，培养3~5d后培养 基上长出新菌体即为活化菌，再把活化菌接到种子液培养基溶液中，28°C~30°C、120r/min 振荡培养12h，得种子液；
[0020] (2)取发酵液培养基，调节溶液pH值为5.8~6.2，在121°C下高压蒸汽灭菌20min~ 30min，冷却至30°C，即得发酵液;所述发酵液培养基由下列成分配成的水溶液(W/V):葡萄 糖1.0~3.0%，蔗糖2.0~3.0%，玉米浆1.5~2.5%，硫酸铵0.2~0.5%，磷酸二氢钾0.1~ 0.4%，硫酸镁0.01~0.05%，海藻酸0.5~1 ·0%，交联羟丙基淀粉0.5~1 ;
[0021] (3)按体积比为6.0~8.0%接种量把种子液接入发酵液中，然后放入30°C的恒温 培养箱中培养7~8d，发酵液表面产生凝胶状膜；
[0022] (4)取出凝胶状膜后用去离子水冲洗干净，然后用1~2 % NaOH溶液在80 °C~90 °C 下浸泡1~2h，再用去离子水冲洗至水pH值为6.5~7.5,得凝胶状细菌纤维素复合改性膜。 [0023] 实施例1
[0024] (1)称取葡萄糖3.0g，蛋白胨0.5g，琼脂1.0g，磷酸氢二钠0.15g，柠檬酸0.1和硫酸 镁0.02g配制成100ml水溶液，调节pH值为5.8，在121°C下高压蒸汽灭菌20min-30min，趁热 把灭好菌的培养液倒入已灭菌的培养皿中，培养液冷却凝固后即得固体平板培养基，把冰 箱中保藏的菌种木醋杆菌(Acetobacterxy 1 inum NUST4 · 2)接到固体平板培养基上，放入30 °C恒温培养箱中，培养3d后平板培养基上长出新菌体即为活化菌。
[0025] 称取葡萄糖2.0g，玉米浆0.5g，硫酸铵0.5g，磷酸二氢钾0 . lg和硫酸镁0.02g配制 成100ml水溶液，调节pH值为5.8-6.2,在121°C下高压蒸汽灭菌20min，冷却至30°C，再把活 化好的菌种接到种子液培养基溶液中，28 °C、120r/min振荡培养12h，得种子液。
[0026] (2)称取葡萄糖l.Og，鹿糖2.0g，玉米浆1.5g，硫酸铵0.2g，磷酸二氢钾O.lg，硫酸 镁0. 〇lg，海藻酸0.5g和交联羟丙基淀粉0.5g配制成100ml水溶液，调节pH值为5.8，在121°C 下高压蒸汽灭菌20min，冷却至30°C，得发酵液。
[0027] (3)量取6ml种子液加入到发酵液中，然后放入30°C的恒温培养箱中培养7d，发酵 液表面产生凝胶状膜。
[0028] (4)取出凝胶状膜后用去离子水冲洗干净，然后用1 % NaOH溶液在80 °C下浸泡lh， 再用去离子水冲洗至水pH值为