一种用于鉴定或辅助鉴定仓储书虱的方法及其专用成套试剂的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种用于鉴定或辅助鉴定仓储书虱的方法及 其专用成套试剂。
【背景技术】
[0002] 书虱（booklice)又名纸虱（paperlice)、米虱，隶属于嗤虫目（Psocoptera)、书虱 科(Liposcelididae)、书虱属(Liposcelis)。书虱属是嗤虫目中最具经济意义的一个属，全 世界广泛分布，是世界储粮等仓储物保护中的常见害虫。该类害虫具有活动能力强、取食范 围广、生长周期短、抗性强和防控难度大等特点，危害仓储物品并威胁人类健康，大量发生 时可造成严重的经济损失。
[0003] 截至目前，世界已知书虱126种，我国已报道25种。仓储书虱是指与仓储物保护有 关并且可随贸易进行远距离传播的书虱。全世界常见的仓储书虱有10余种，例如暗褐书虱 (Liposcelis brunnea)、嗜虫书虱（L · entomophi la)、无色书虱（L. decolor)、皮氏书虱 (1^.卩6&1'111&11；〇、红书虱（1^.1'1^&)、虚伪书虱(1^.111611(1&1)、嗜卷书虱（1^.13081^5^11(^11；[1&)、口齿 书虱(L. corrodens)、小眼书虱(L.paeta)、三色书虱(L. tricolor)。除嗤书虱外，上述其他9 种仓储书虱在我国均有发生。加强仓储书虱的鉴定技术研究具有重要意义，但由于这些仓 储书虱属于同一属，个体又十分微小，且鉴定专家数量十分有限，因此在仓储保护部门及检 验检疫部门中，依据形态学特征等传统手段进行鉴定，一般耗时较长且操作复杂，不能满足 实际要求。因此，亟需一种能直观、快速、准确、高通量地进行仓储书虱物种鉴定和区分的检 测方法。
[0004] 生物芯片因具有高通量、高度并行性、高灵敏度等优点而得到了广泛的研究和应 用。基因芯片的基本原理是DNA的碱基配对和互补原理，将核酸片段作为识别分子，按预先 设置的排列固定于特定的固相支持载体的表面形成微点阵，利用反向固相杂交技术，将标 记的样品分子与微点阵上的核酸探针杂交，以实现多到数万个分子之间的杂交反应，通过 特殊的检测系统来高通量、大规模地分析检测样品中多个基因的表达状况或者特定基因分 子的存在。
【发明内容】
[0005] 本发明所要解决的技术问题是如何鉴定或辅助鉴定仓储书虱。
[0006] 为解决上述问题，本发明首先提供了一种用于鉴定或辅助鉴定仓储书虱的方法及 其专用成套试剂。
[0007] 本发明所提供的用于鉴定或辅助鉴定仓储书虱的成套试剂，可包括由探针Lbr、探 针Len、探针Lde、探针Lpe、探针Lru、探针Lme、探针Lbo、探针Leo、探针Lpa和探针Ltr组成的 成套探针，各探针均为单链DNA分子。
[0008] 所述探针Lbr可为如下al)或a2)或a3)或a4)所示的DNA分子：
[0009] al)具有序列表的序列1自5'末端起第16至39位所示的核苷酸的DNA分子；
[0010] a2)由连接臂和特异序列组成的DNA分子;所述特异序列的核苷酸序列如序列表的 序列1自5 '末端起第16至39位所示；
[0011] a3)核苷酸序列如序列表的序列1自5'末端起第16至39位所示的DNA分子；
[0012] a4)核苷酸序列如序列表的序列1所示的DNA分子。
[0013] 所述探针Len可为如下bl)或b2)或b3)或b4)所示的DNA分子：
[0014] bl)具有序列表的序列2自5'末端起第16至40位所示的核苷酸的DNA分子；
[0015] b2)由连接臂和特异序列组成的DNA分子;所述特异序列的核苷酸序列如序列表的 序列2自5 '末端起第16至40位所示；
[0016] b3)核苷酸序列如序列表的序列2自5'末端起第16至40位所示的DNA分子；
[0017] b4)核苷酸序列如序列表的序列2所示的DNA分子。
[0018] 所述探针Lde可为如下cl)或c2)或c3)或c4)所示的DNA分子：
[0019] cl)具有序列表的序列3自5'末端起第16至38位所示的核苷酸的DNA分子；
[0020] c2)由连接臂和特异序列组成的DNA分子;所述特异序列的核苷酸序列如序列表的 序列3自5 '末端起第16至38位所示；
[0021] C3)核苷酸序列如序列表的序列3自5'末端起第16至38位所示的DNA分子；
[0022] c4)核苷酸序列如序列表的序列3所示的DNA分子。
[0023] 所述探针Lpe可为如下dl)或d2)或d3)或d4)所示的DNA分子：
[0024] dl)具有序列表的序列4自5'末端起第16至39位所示的核苷酸的DNA分子；
[0025] d2)由连接臂和特异序列组成的DNA分子;所述特异序列的核苷酸序列如序列表的 序列4自5 '末端起第16至39位所示；
[0026] d3)核苷酸序列如序列表的序列4自5'末端起第16至39位所示的DNA分子；
[0027] d4)核苷酸序列如序列表的序列4所示的DNA分子。
[0028] 所述探针Lru可为如下el)或e2)或e3)或e4)所示的DNA分子：
[0029] el)具有序列表的序列5自5'末端起第16至41位所示的核苷酸的DNA分子；
[0030] e2)由连接臂和特异序列组成的DNA分子;所述特异序列的核苷酸序列如序列表的 序列5自5 '末端起第16至41位所示；
[0031] e3)核苷酸序列如序列表的序列5自5'末端起第16至41位所示的DNA分子；
[0032] e4)核苷酸序列如序列表的序列5所示的DNA分子。
[0033] 所述探针Lme可为如下Π )或f2)或f3)或f4)所示的DNA分子：
[0034] Π )具有序列表的序列6自5'末端起第16至37位所示的核苷酸的DNA分子；
[0035] f2)由连接臂和特异序列组成的DNA分子;所述特异序列的核苷酸序列如序列表的 序列6自5 '末端起第16至37位所示；
[0036] f3)核苷酸序列如序列表的序列6自5'末端起第16至37位所示的DNA分子；
[0037] f4)核苷酸序列如序列表的序列6所示的DNA分子。
[0038]所述探针Lbo可为如下gl)或g2)或g3)或g4)所示的DNA分子：
[0039] gl)具有序列表的序列7自5'末端起第16至40位所示的核苷酸的DNA分子；
[0040] g2)由连接臂和特异序列组成的DNA分子;所述特异序列的核苷酸序列如序列表的 序列7自5 '末端起第16至40位所示；
[0041] g3)核苷酸序列如序列表的序列7自5'末端起第16至40位所示的DNA分子；
[0042] g4)核苷酸序列如序列表的序列7所示的DNA分子。
[0043] 所述探针Leo可为如下hi)或h2)或h3)或h4)所示的DNA分子：
[0044] hi)具有序列表的序列8自5'末端起第16至37位所示的核苷酸的DNA分子；
[0045] h2)由连接臂和特异序列组成的DNA分子;所述特异序列的核苷酸序列如序列表的 序列8自5 '末端起第16至37位所示；
[0046] h3)核苷酸序列如序列表的序列8自5'末端起第16至37位所示的DNA分子；
[0047] h4)核苷酸序列如序列表的序列8所示的DNA分子。
[0048] 所述探针Lpa可为如下il)或i2)或i3)或i4)所示的DNA分子：
[0049] il)具有序列表的序列9自5'末端起第16至40位所示的核苷酸的DNA分子；
[0050] i2)由连接臂和特异序列组成的DNA分子;所述特异序列的核苷酸序列如序列表的 序列9自5 '末端起第16至40位所示；
[0051 ] i3)核苷酸序列如序列表的序列9自5'末端起第16至40位所示的DNA分子；
[0052] i4)核苷酸序列如序列表的序列9所示的DNA分子。
[0053]所述探针Ltr可为如下jl)或j2)或j3)或j4)所示的DNA分子：
[0054] jl)具有序列表的序列10自5'末端起第16至40位所示的核苷酸的DNA分子；
[0055] j2)由连接臂和特异序列组成的DNA分子;所述特异序列的核苷酸序列如序列表的 序列10自5 '末端起第16至40位所示；
[0056] j3)核苷酸序列如序列表的序列10自5'末端起第16至40位所示的DNA分子；
[0057] j4)核苷酸序列如序列表的序列10所示的DNA分子。
[0058] 所述探针Lbr、所述探针Len、所述探针Lde、所述探针Lpe、所述探针Lru、所述探针 Lme、所述探针Lbo、所述探针Leo、所述探针Lpa或所述探针Ltr中，可自5'末端起第1位核苷 酸上进行氨基基团的标记。
[0059] 所述a2)和/或所述b2)和/或所述c2)和/或所述d2)和/或所述e2)和/或所述f2) 和/或所述g2)和/或所述h2)和/或所述i2)和/或所述j2)中，所述连接臂可由若干个T组成。
[0060] 所述a2)和/或所述b2)和/或所述c2)和/或所述d2)和/或所述e2)和/或所述f2) 和/或所述g2)和/或所述h2)和/或所述i 2)和/或所述j 2)中，所述连接臂具体可由15个T组 成。
[0061] 所述成套试剂还可包括质控探针;所述质控探针可为定位点探针和/或阳性探针 和/或阴性探针。
[0062] 所述定位点探针