一种去苦味儿茶素的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明属于儿茶素的制备领域，具体涉及一种去苦味儿茶素的制备方法。
【背景技术】
[0002]儿茶素是茶叶中最重要的生理活性物质，约占多酚类80%，属黄烷醇类，其基本结构是α-苯基苯并吡喃，分为酯型和非酯型两类，结构上的主要区别在于氢基取代的数量和位置不同。儿茶素主要由表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、表没食子儿茶素(EGC)、表儿茶素没食子酸酯(ECG)和表儿茶素(EC)等单体组成。儿茶素具有明显的抗衰老、防癌抗突变、降脂减肥、降低血糖、血脂和胆固醇、预防心血管疾病等药理功能，已广泛应用于食品加工、医药保健和日用化工等领域。卫生部已批准了茶多酚为我国食品添加剂。国内外研究成果表明，儿茶素可防心血管疾病，预防癌症，抗氧化作用，具有明显的抗衰老功能，有望开发成为一种天然的护肤品。从1990开始，由于有关茶多酚/儿茶素的保健与药理功能研究的突破，不仅扩大了绿茶在国际市场上的份额，而且极大地推进了我国茶叶深加工产业的快速发展，为茶叶功能成分的研究与开发奠定了良好的产业与市场基础，目前，我国已经形成年产5000多吨茶多酚/儿茶素的产业规模。儿茶素粗品传统的提取分离工艺主要包括离子沉淀法、有机溶剂萃取法和吸附柱色谱法。由于茶叶的功能成分复杂，各功能成分的化学结构相似，从茶叶中制取无苦味的儿茶素具有相当难度。
【发明内容】
[0003]本发明提供一种去苦味儿茶素的制备方法，该方法简便，只使用食用添加酶制剂，制备周期短，成本低，符合绿色和安全的要求，去苦味儿茶素的提取率及产品纯度高，适宜规模化生产。
[0004]本发明提供的技术方案是:一种去苦味儿茶素的制备方法，包括如下步骤:
(1)加入纯水溶解绿茶儿茶素提取物，配置成浓度为5%W/v的溶液，加入氢氧化钠调节pH值为4.0-5.0，制得茶汤料液，备用；
(2)按照0.025%w/v的比例，在茶汤料液中添加果胶酶，在35°C_37°C下静止酶解，间歇搅拌，得酶解液；
(3)加入氢氧化钠调节调节酶解液pH值为5，离心过滤；
(4)将步骤(3)中过滤后的上清液通过微孔陶瓷膜过滤器，滤去极微小杂质，并用反向渗透浓缩器进行浓缩，收集浓缩液，将所述洗脱液浓缩至16-18波美度，得浓缩液；
(5)将所述浓缩液在180°C下通过离心喷雾干燥塔进行离心干燥，得脱去苦味的儿茶素。
[0005]本发明步骤(2)中，加入果胶酶，静置酶解16-24小时，间歇60分钟搅拌10分钟。
[0006]本发明步骤(4)中所述反向渗透浓缩器所采用的反渗透膜材料为醋酸纤维素、芳香族聚酰胺、聚醚砜或聚偏氟乙烯其中之一。
[0007]本发明具有以下有益效果:本发明以小叶绿茶儿茶素提取物为原料，经过果胶酶酶解，微孔超滤及反向渗透浓缩，从绿茶提取物中分离去苦味儿茶素，优化了产品分离纯化工艺流程，单体提取率及产品纯度高。产品可防心血管疾病，预防癌症，抗氧化作用，具有明显的抗衰老功能，有望开发成为一种天然的护肤品。也是许多功能食品开发的重要原料，可单独或者与维生素类、天然植物成分复配应用于保健食品、化妆品等领域。本发明方法简便，制备周期短，成本低，符合环保和安全的要求，适宜规模化生产。
【具体实施方式】
[0008]以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。本发明中，果胶酶购自诺维信(中国)生物技术有限公司。
[0009]本发明中，绿茶儿茶素提取物最好是(小叶种茶树上米摘的)小叶绿茶儿茶素提取物。
[0010]实施例1
一种去苦味儿茶素的制备方法，包括如下步骤:
1、取小叶绿茶儿茶素提取物100克，配成2000ml儿茶素溶液，加入氢氧化钠调节pH值为4.0-5.0，向所述溶液中添加0.5克果胶酶，在35-37°C温度下酶解16小时，间歇60分钟搅拌10分钟，(加入氢氧化钠)将酶解液调节pH值至5，在1200 r/min条件下离心过滤；
2、将步骤I中过滤后的上清液缓慢通过微孔陶瓷膜过滤器，出去部分肉眼不可见杂质，再通过(截留分子量为2500的反渗透膜)反向渗透浓缩器浓缩至16-18波美度，得浓缩液；
3、将所述浓缩液在180°C温度下离心喷雾干燥，得到87.25g砖红色固体。
[0011]将步骤3得到的砖红色固体与儿茶素标准品(购自美国Sigma-Aldrich公司，Ci5HwO6,M.W.290.27，编号:E4018，纯度2 98%(HPLC))对照鉴定并经高效液相色谱法分析检测(鉴定、检测结果为:所述砖红色固体，分子量为290，(-)ES1-MS m/z:289 [Μ—H]-，熔点240 0C，分子式为:C15HwO6，(ECG+EGCG+GCG)含量< 1.5%表明所述砖红色固体为无苦味(去苦味)儿茶素，而且纯度2 98%。
[0012]实施例2
一种去苦味儿茶素的制备方法，包括如下步骤:
1、取小叶绿茶儿茶素提取物100克，配成2000ml儿茶素溶液，加入氢氧化钠调节pH值为4.0-5.0，向所述溶液中添加0.5克果胶酶，在35-37°C温度下酶解20小时，间歇60分钟搅拌10分钟，(加入氢氧化钠)将酶解液调节pH值至5，在1200 r/min条件下离心过滤；
2、将步骤I中过滤后的上清液缓慢通过微孔陶瓷膜过滤器，出去部分肉眼不可见杂质，再通过(截留分子量为2500的反渗透膜)反向渗透浓缩器浓缩至16-18波美度，得浓缩液；
3、将所述浓缩液在180°C温度下离心喷雾干燥，得到87.25g砖红色固体。
[0013]将步骤3得到的砖红色固体与儿茶素标准品(购自美国Sigma-Aldrich公司，Ci5HwO6,M.W.290.27，编号:E4018，纯度2 98%(HPLC))对照鉴定并经高效液相色谱法分析检测(鉴定、检测结果为:所述砖红色固体，分子量为290，(-)ES1-MS m/z:289 [Μ—H]-，熔点240 0C，分子式为:C15HwO6，(ECG+EGCG+GCG)含量< 1.5%表明所述砖红色固体为无苦味(去苦味)儿茶素，而且纯度2 98%。
[0014]实施例3
一种去苦味儿茶素的制备方法，包括如下步骤: 1、取小叶绿茶儿茶素提取物100克，配成2000ml儿茶素溶液，加入氢氧化钠调节pH值为4.0-5.0，向所述溶液中添加0.5克果胶酶，在35-37°C温度下酶解24小时，间歇60分钟搅拌10分钟，(加入氢氧化钠)将酶解液调节pH值至5，在1200 r/min条件下离心过滤；
2、将步骤I中过滤后的上清液缓慢通过微孔陶瓷膜过滤器，出去部分肉眼不可见杂质，再通过(截留分子量为2500的反渗透膜)反向渗透浓缩器浓缩至16-18波美度，得浓缩液；
3、将所述浓缩液在180°C温度下离心喷雾干燥，得到87.25g砖红色固体。
[0015]将步骤3得到的砖红色固体与儿茶素标准品(购自美国Sigma-Aldrich公司，Ci5HwO6,M.W.290.27，编号:E4018，纯度2 98%(HPLC))对照鉴定并经高效液相色谱法分析检测(鉴定、检测结果为:所述砖红色固体，分子量为290，(-)ES1-MS m/z:289 [Μ—H]-，熔点240 0C，分子式为:C15HwO6，(ECG+EGCG+GCG)含量< 1.5%表明所述砖红色固体为无苦味(去苦味)儿茶素，而且纯度2 98%。
【主权项】
1.一种去苦味儿茶素的制备方法，其特征在于，包括如下步骤: (1)加入纯水溶解绿茶儿茶素提取物，配置成浓度为5%W/v的溶液，加入氢氧化钠调节pH值为4.0-5.0，制得茶汤料液，备用； (2)按照0.025%w/v的比例，在茶汤料液中添加果胶酶，在35°C-37 °C下静止酶解，间歇搅拌，得酶解液； (3)加入氢氧化钠调节调节酶解液pH值为5，离心过滤； (4)将步骤(3)中过滤后的上清液通过微孔陶瓷膜过滤器，滤去极微小杂质，并用反向渗透浓缩器进行浓缩，收集浓缩液，将所述洗脱液浓缩至16-18波美度，得浓缩液； (5)将所述浓缩液在180°C下通过离心喷雾干燥塔进行离心干燥，得脱去苦味的儿茶素。2.根据权利要求1所述一种去苦味儿茶素的制备方法，其特征在于:步骤(2)中加入果胶酶，静置酶解16-24小时，间歇60分钟搅拌10分钟。3.根据权利要求1所述一种去苦味儿茶素的制备方法，其特征在于:步骤(4)中所述反向渗透浓缩器所采用的反渗透膜材料为醋酸纤维素、芳香族聚酰胺、聚醚砜或聚偏氟乙烯其中之一。
【专利摘要】本发明提出了一种去苦味儿茶素的制备方法，包含如下步骤：（1）向含有绿茶儿茶素提取物的溶液中添加果胶酶，35-37℃温度下静止酶解，间歇搅拌，离心过滤，得酶解液；（2）将酶解液通入微孔陶瓷膜过滤器，并用反向渗透浓缩器浓缩，收集浓缩液，将浓缩液浓缩至16-18波美度，得浓缩液；将浓缩液通过离心喷雾干燥塔进行离心干燥，得去苦味儿茶素。本发明使用果胶酶对绿茶儿茶素进行酶解，具较好的转化效果，是一种转化率高，产品纯度高的制备方法，而且制备周期短，成本低，适宜规模化生产。
【IPC分类】A23L5/10, C07D311/62, C12P17/06, A23L33/105
【公开号】CN105585548
【申请号】CN201511001383
【发明人】叶艳, 龙菲菲, 罗祥, 马松, 吴世华
【申请人】湖北中鑫生物科技有限公司
【公开日】2016年5月18日
【申请日】2015年12月29日