葡萄糖衍生物阳离子脂质体纳米颗粒的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一系列葡萄糖衍生物阳离子脂质体纳米颗粒的制备方法。
【背景技术】
[0002] 近年来，基因治疗在治疗遗传疾病、多种传染病W及癌症方面起到越来越重要的 作用。目前基因治疗面临最大的挑战是找到一种安全高效的基因载体将外援基因导入到人 体细胞内。常用的基因载体有病毒载体和非病毒载体，病毒载体转导效率高、复杂的装配过 程由细胞完成、不同病毒载体具有不同表达特点，但是由于存在无法控制病毒复制的风险 并具内在免疫原性，而使其应用受到限制；相比于病毒载体而言非病毒载体具有毒性低、免 疫反应低，而且所携带的基因不整合至宿主细胞基因组等优点。而作为非病毒性载体之一 的阳离子脂质体在临床试验中具有较好的发展前景。阳离子脂质体本身带有正电荷，所W 可作为带负电荷药物的传递载体，特别适用于蛋白、多肤、DNA和RNA类药物，故在抗病毒、 抗癌症等方面的基因治疗研究中有独特应用。
[0003] W葡萄糖为原料，通过全己醜化、脱1-0-己醜基、Η氯己醜亚胺醋化、糖巧化、叠 氮化、脱全部己醜基、4, 6-0-异丙叉基保护、離化、脱叉基保护、还原氨化和季倭盐化反应， 合成不同疏水链长度和不同物理结构的一系列葡萄糖衍生物阳离子脂质：扣-Ci2-G1u-TMA、 i/i-Ci2-Glu-TMA、i/i-Ci2-Glu-TMA 和扣-Ci2-G1u-TMA ; W葡萄糖为原料，通过全己醜化、脱 1-0-己醜基、Η氯己醜亚胺醋化、糖巧化、叠氮化、脱全部己醜基、还原氨化、叔胺化、和季 倭盐化反应，合成不同疏水链长度、和不同物理结构的一系列葡萄糖衍生物阳离子脂质： Glu-DiCizMA、Glu-DiCwMA、Glu-DiCieMA和Glu-DiCisMA ;利用上述八种葡萄糖衍生物阳离子 脂质带正电荷的季倭盐头部可通过静电作用结合核酸药物，利用带长链的疏水端可与细胞 壁麟脂双分子层结合的特征，可望通过融合内吞作用实现核酸药物从胞外到胞内的转运。
[0004] 所制备的葡萄糖衍生物阳离子脂质体纳米颗粒具有结构稳定性好、粒度尺寸适 中、粒径分布窄、表面电荷适中、制备成本低廉等优点，能满足核酸药物转运载体应具备的 基本要求。
[0005] 所制备的葡萄糖衍生物阳离子脂质体纳米颗粒，亦可用于构建非核酸药物缓释给 药系统，或用于非核酸药物的转运载体。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的是提供一种合成成本低、操作容易的一系列葡萄糖衍生物阳离子脂 质体纳米颗粒的制备方法。
[0007] 本发明提供的送种丙二醇胺衍生物阳离子脂质体纳米颗粒的制备方法，包括如下 步骤： (1) W葡萄糖为原料，W高氯酸为催化剂，己酸酢为溶剂及反应物，经柱层析分离纯化 得到白色粉末状固体1，2, 3, 4, 6-五-0-己醜基-α，目-D-化喃葡萄糖； (2) W二氧六环和甲醇为混合溶剂，1，2, 3, 4, 6-五-0-己醜基-α，目-D-化喃葡萄糖 与氨气发生反应脱去1位己醜基，经柱层析分离纯化得到淡黄色浆状物2, 3, 4, 6-四-0-己 醜基-α，目-D-化喃葡萄糖； (3) W无水二氯甲焼为溶剂，无水碳酸钟提供弱碱性环境，2, 3, 4, 6-四-0-己醜 基-α，目-D-化喃葡萄糖与Η氯己腊发生施密特反应，经经柱层析分离纯化得到淡黄色浆 状物2, 3, 4, 6-四-0-己醜基-α -D-化喃葡萄糖Η氯己醜亚胺醋； (4) W无水二氯甲焼为溶剂，TMSOTf为催化剂，步骤（3)所得淡黄色浆状物 2, 3, 4, 6-四-0-己醜基-α -D-化喃葡萄糖Η氯己醜亚胺醋与3-氯-1-丙醇发生糖巧化反 应，经柱层析分离纯化得到白色晶体3'-氯丙基2, 3, 4, 6-四-0-己醜基-目-D-化喃葡萄 糖巧； 妨WyV，yV-二甲基甲醜胺为溶剂，3'-氯丙基2,3,4,6-四-0-己醜基-目-〇-口比 喃葡萄糖巧与叠氮化钢反应，经柱层析分离纯化得到白色固体3'-叠氮基丙基 2, 3, 4, 6-四-0-己醜基-目-D-化喃葡萄糖巧； (6) W甲醇为溶剂，3'-叠氮基丙基2, 3, 4,6-四-0-己醜基-目-D-化喃葡萄糖巧与 氨气反应脱去全部己醜基，经柱层析分离纯化得到淡黄色浆状物3'-叠氮基丙基目-D-化 喃葡萄糖巧； (7) W步骤（6)得到的3'-叠氮基丙基目-D-化喃葡萄糖巧为原料，2, 2-二甲氧基 丙焼为溶剂及反应物，W浓硫酸为催化剂，室温反应，经柱层析分离纯化得到淡黄色浆状物 3'-叠氮基丙基4, 6-0-异丙叉基-目-D-化喃葡萄糖巧； (8) 二甲基甲醜胺为溶剂，W氨化钢为催化剂，3'-叠氮基丙基4,6-0-异 丙叉基-目-D-化喃葡萄糖巧与烷基漠反应，经柱层析分离纯化得到3'-叠氮基丙基 2, 3-二-0-二烷基-4, 6-0-异丙叉基-目-D-化喃葡萄糖巧； (9) W甲醇为溶剂，3'-叠氮基丙基2, 3-二-0-正烷基-4, 6-0-异丙叉基-目-D-化 喃葡萄糖巧与己醜氯反应脱去异丙叉基，经柱层析分离纯化得到3'-叠氮基丙基 2, 3-二-0-正烷基-目-D-化喃葡萄糖巧； (10) W甲醇为溶剂，铅碳为催化剂，3'-叠氮基丙基2,3-二-0-正烷基-目-D-口比 喃葡萄糖巧与甲醒和氨气反应得到叔胺，经柱层析分离纯化得到3' -W，W-二甲胺基丙基 2, 3-二-0-正烷基-目-D-化喃葡萄巧； (11) 步骤（10)得到的3' -yV，yV-二甲胺基丙基2, 3-二-0-正烷基-β -D-化喃葡萄 巧与贿甲焼进行季倭盐化反应，经柱层析分离纯化得白色固体； (。）W步骤（6)得到的3'-叠氮基丙基目-D-化喃葡萄糖巧为原料，W四氨巧喃和 水为溶剂，用Η苯基麟还原叠氮得到伯胺，经柱层析分离纯化得淡黄色浆状物3'-氨基丙基 目-D-化喃葡萄糖巧； (13) 步骤（12)所得产物3'-氨基丙基目-D-化喃葡萄糖巧，W甲醇、己醇为溶剂，无 水碳酸钟提供碱性环境，在加热的条件下与漠代焼姪反应，经柱层析分离纯化得无色浆状 物3' -〇V，W-二正烷基）丙基目-D-化喃葡萄糖巧； (14) 步骤（13)得到的3'-〇ν，Λ^-二正烷基）丙基目-D-化喃葡萄糖巧与贿甲焼进行 季倭盐化反应，经柱层析分离纯化得白色固体； (15) 步骤（11)和步骤（14)得到的白色固体经超声波振荡水分散后得到相应的葡萄 糖衍生物阳离子脂质体纳米颗粒。
[0008] W葡萄糖为原料，W高氯酸为催化剂，己酸酢为溶剂及醜化试剂，浓缩，结晶得白 色粉末状固体1，2,3,4,6-五-0-己醜基-(1，目-〇-化喃葡萄糖。反应温度；1〇°〇~2〇乂；反 应时间；1〇 h;反应投料比为；葡萄糖(mol):己酸酢（mol):高氯酸(mol) = 1 : 7.5 : 0. 06;结晶使用溶剂为；石油離：己酸己醋=10 : 1(体积比）。所得1，2, 3, 4,6-五-0-己 醜基-α,目-D-化喃葡萄糖，W环氧六环和甲醇为混合溶剂（环氧六环：甲醇=5 : 2， 体积比），常温下通入氨气反应，经柱层析分离纯化得淡黄色浆状物2, 3, 4, 6-四-0-己醜 基-α,目-D-化喃葡萄糖。反应时间；20 min~40 min ;柱层析分离洗脱剂为：石油離：己 酸己醋=2 : 1 (体积比）。所得2, 3, 4, 6-四-0-己醜基-α，目-D-化喃葡萄糖，W无水 二氯甲焼为溶剂，无水碳酸钟提供弱碱性环境，常温下与Η氯己腊反应，经柱层析分离纯化 得淡黄色浆状物2, 3, 4, 6-四-0-己醜基-α -D-化喃葡萄糖Η氯己醜亚胺醋。反应时间： 24 h;反应投料比为；2, 3, 4,6-四-0-己醜基-α,目-D-化喃葡萄糖（mol) : Η氯己腊 (mol):无水碳酸钟（mol) = 1 : 2. 5 : 1 ;柱层析分离洗脱剂为：石油離：己酸己醋= 3 : 1 (体积比）。所得2, 3, 4, 6-四-0-己醜基-α -D-化喃葡萄糖Η氯己醜亚胺醋，W无 水二氯甲焼为溶剂，4Α分子筛为除水剂，W TMSOTf为催化剂在氮气的保护下与3-氯-1-丙 醇反应，经柱层析分离纯化得白色晶体3'-氯丙基2, 3, 4, 6-四-0-己醜基-目-D-化喃 葡萄糖巧。反应温度；-20 °C -室温；反应时间；2 h ;反应投料比为；2, 3, 4, 6-四-0-己 醜基-a-D-化喃葡萄糖Η氯己醜亚胺醋（mol) : 3-氯丙醇（mol) : TMSOTf(mol) = 1 :2.4 : 0.01;柱层析分离洗脱剂为：石油離：己酸己醋=3 : 1(体积比）。所得产物 3'-氯丙基2, 3, 4, 6-四-0-己醜基-目-D-化喃葡萄糖巧，二甲基甲醜胺为溶剂， 在加热条件下与叠氮化钢反应，经柱层析分离纯化得3'-叠氮基丙基2, 3, 4, 6-四-0-己 醜基-目-D-化喃葡萄糖巧。反应温度；75°C，反应时间；24 h ;反应投料比为；3' -氯丙基 2, 3, 4,6-四-0-己醜基-目-D-[]比喃葡萄糖巧（mol):叠氮化钢（mol) = 1 : 6;柱层析分 离洗脱剂为；石油離：己酸己醋=3 : 1(体积比）。3'-叠氮基丙基2, 3, 4,6-四-0-己 醜基-目-D-化喃葡萄糖巧，W甲醇为溶剂，通入氨气至饱和条件下反应，经柱层析分离纯 化得3'-叠氮基丙基目-D-化喃葡萄糖巧。反应时间；24 h ;柱层析分离洗脱剂为；己酸己 醋：甲醇=2 : 1(体积比）。所得产物3'-叠氮基丙基目-D-化喃葡萄糖巧，W 2, 2-二 甲氧基丙焼为溶剂及反应物，W浓硫酸为催化剂，室温反应，经柱层析分离纯化得3'-叠氮 基丙基4, 6-0-异丙叉基-目-D-化喃葡萄糖巧。反应时间；4 h，柱层析分离洗脱剂为：石油 離：己酸己醋=2 : 1(体积比）。所得产物3'-叠氮基丙基4, 6-0-异丙叉基-目-D-口比 喃葡萄糖，W 二甲基甲醜胺为溶剂，氨化钢为催化剂，常温下与月桂基漠反应，经柱层 析分贸纯化得3'-叠氮基丙基2, 3-二-0-正十二烷基-4, 6-0-异丙叉基-目-D-化喃葡 萄糖巧。反应时间；10 h;反应投料比；3'-叠氮基丙基4, 6-0-异丙叉基-β-D-化喃葡 萄糖巧（mol):氨化钢（mol):月桂基漠（mol) = 1 : 6 : 4;柱层析分离洗脱剂为：石 油離：己酸己醋=16 : 1(体积比）。所得产物3'-叠氮基丙基2,3-二-0-正十二焼 基-4, 6-0-异丙叉基-目-D-化喃葡萄糖巧，W甲醇为溶剂，与己醜氯反应脱除异丙叉基， 经柱层析分离纯化得3'-叠氮基丙基2, 3-二-0-正十二烷基-目-D-化喃葡萄糖巧。反 应温度；(TC至室温；反应时间；1 h;反应投料比；3'-叠氮基丙基2,3-二-0-正十二焼 基-4, 6-0-异丙叉基-目-D-化喃葡萄糖巧（mol):己醜氯（mol) = 1 : 8;柱层析分离洗 脱剂为：石油離：己酸己醋=2 : 1(体积比）。所得产物3'-叠氮基丙基2,3-二-0-正 十二烷基-目-D-化喃葡萄糖巧，W甲醇为溶剂，铅碳为催化剂，与甲醒和氨气反应，经柱层 析分离纯化得3' -yV，yV-二甲胺基丙基2, 3-二-0-正十二烷基-目-D-化喃葡萄巧。反应 时间；24 h;反应投料比；3'-叠氮基丙基2,3-二-0-正十二烷基-目-D-化喃葡萄糖巧 (mol):甲醒（mol) = 1 : 8,3'-叠氮基丙基2,3-二-0-正十二烷基-目-D-化喃葡萄 糖巧（g):铅碳（g) = 1 : 0.3;柱层析分离洗脱剂为：己酸己醋：甲醇=5 : 1(体积 比）。所得产物3' -yV，yV-二甲胺基丙基2, 3-二-0-正十二烷基-目-D-化喃葡萄巧，W四 氨巧喃为溶剂，常温下与贿甲焼反应，分离纯化得白色固体3' Η甲基贿化倭基） 丙基2,3-二-0-正十二烷基-目-D-化喃葡萄巧。反应时间；3 h;反应投料比；3'-A；yV-二 甲胺基丙基2,3-二-0-正十二烷基-目-D-化喃葡萄巧（mol):贿甲焼（mol) = 1 : 4; 纯化；反应混合液经冰浴冷却析晶。所得白色固体经超声波振荡水分散后得到阳离子脂质 体3'-〇ν，Λ；Λ^- S甲基贿化倭基）丙基2, 3-二-0-正十二烷基-β -D-化喃葡萄巧（简写 为扣-Ci2-G1u-TMA)纳米颗粒。
[0009] 二甲基甲醜胺为溶剂，氨化钢为催化剂，常温下3'-叠氮基丙基4, 6-0-异 丙叉基-目-D-化喃葡萄糖与肉豆護基漠反应，经柱层析分离纯化得3'-叠氮基丙基 2, 3-二-0-正十四烷基-4, 6-0-异丙叉基-目-D-化喃葡萄糖巧。反应时间；10 h;反应投 料比；3'-叠氮基丙基4, 6-0-异丙叉基-目-D-化喃葡萄糖巧（mol):氨化钢（mol):肉 豆護基漠 （moU = 1 : 6 : 4;柱层析分离洗脱剂为击油離：己酸己醋=16 : 1(体积 比）。所得产物3'-叠氮基丙基2,3-二-0-正十四烷基-4, 6-0-异丙叉基-目-D-化喃 葡萄糖巧，W甲醇为溶剂，与己醜氯反应脱除异丙叉基，经柱层析分离纯化得3'-叠氮基丙 基2, 3-二-0-正十四烷基-目-D-化喃葡萄糖巧。反应温度；0°C至室温；反应时间；1 h ; 反应投料比；3' -叠氮基丙基2,3-二-0-正十四烷基-4, 6-0-异丙叉基-目-D-化喃葡 萄糖巧（mol):己醜氯（mol) = 1 : 8 ;柱层析分离洗脱剂为：石油離：己酸己醋=2 : 1 (体积比）。所得产物3'-叠氮基丙基2, 3-二-0-正十四烷基-目-D-化喃葡萄糖巧，W 甲醇为溶剂，铅碳为催化剂，与甲醒和氨气反应，经柱层析分离纯化得3' -Λ;Λ^-二甲胺基丙 基2,3-二-0-正十四烷基-目-D-化喃葡萄巧。反应时间；24 h ;反应投料比；3'-叠氮基 丙基2,3-二-0-正十四烷基-目-〇-化喃葡萄糖巧〇11〇^:甲醒（111〇^=1:8,3'-叠 氮基丙基2,3-二-0-正十四烷基-目-D-化喃葡萄糖巧（g):铅碳（g) = 1 : 0.3;柱层 析分离洗脱剂为：己酸己醋：甲醇=5 : 1(体积比）。所得产物3'-Λ;Λ^-二甲胺基丙基 2, 3-二-0-正十四烷基-目-D-化喃葡萄巧，W四氨巧喃为溶剂，常温下与贿甲焼反应，分 离纯化得白色固体3'-〇ν，Λ；Λ^- Η甲基贿化倭基）丙基2, 3-二-0-正十四烷基-目-D-化 喃葡萄巧。反应时间；3 h;反应投料比；3'-yV，yV-二甲胺基丙基2,3-二-0-正十四焼 基-目-D-化喃葡萄巧（mol):贿甲焼（mol) = 1 : 4;纯化；反应混合液经冰浴冷却析晶。 所得白色固体经超声波振荡水分散后得到阳离子脂质体3' -〇ν，Λ；Λ" Η甲基贿化倭基）丙 基2, 3-二-0-正十四烷基-β -D-化喃葡萄巧（简写为扣-Ci4-G1u-TMA)纳米颗粒。
[0010] 二甲基甲醜胺为溶剂，氨化钢为催化剂，常温下3'-叠氮基丙基4, 6-0-异 丙叉基-目-D-化喃葡萄糖与錄蜡基漠反应，经柱层析分离纯化得3'-叠氮基丙基 2, 3-二-0-正十六烷基-4, 6-0-异丙叉基-目-D-化喃葡萄糖巧。反应时间；10 h;反应 投料比；3'-叠氮基丙基4, 6-0-异丙叉基-目-D-化喃葡萄糖巧（mol):氨化钢（mol): 錄蜡基漠 （moU = 1 : 6 : 4;柱层析分离洗脱剂为击油離：己酸己醋=16 : 1(体积 比）。所得广物3'-叠氮基丙基2, 3-二-0-正十六烷基-4, 6-0-异丙叉基-β -D-化喃 葡萄糖巧，W甲醇为溶剂，与己醜氯反应脱除异丙叉基，经柱层析分离纯化得3'-叠氮基丙 基2,3-二-0-正十六烷基-目-D-化喃葡萄糖巧。反应温度；0°C至室温；反应时间；1 h; 反应投料比；3'-叠氮基丙基2,3-二-0-正十六烷基-4, 6-0-异丙叉基-目-D-化喃葡 萄糖巧（mol):己醜氯（mol) = 1 : 8 ;柱层析分离洗脱剂为：石油離：己酸己醋=2 : 1 (体积比）。所得产物3'-叠氮基丙基2, 3-二-0-正十六烷基-β -D-化喃葡萄糖巧，W 甲醇为溶剂，铅碳为催化剂，与甲醒和氨气反应，经柱层析分离纯化得3' -Λ;Λ^-二甲胺基丙 基2, 3-二-0-正十六烷基-目-D-化喃葡萄巧。反应时间；24 h ;反应投料比；3'-叠氮基 丙基2,3-二-0-正十六烷基-目-D-化喃葡萄糖巧（mol):甲醒（mol) = 1 : 8, 3'-叠 氮基丙基2,3-二-0-正十六烷基-β-D-化喃葡萄糖巧（g):铅碳（g) = 1 : 0.3;柱层 析分离洗脱剂为：己酸己醋：甲醇=5 : 1(体积比）。所得产物3'-Λ;Λ^-二甲胺基丙基 2, 3-二-0-正十六烷基-目-D-化喃葡萄巧，W四氨巧喃为溶剂，常温下与贿甲焼反应，分 离纯化得白色固体3'-〇ν，Λ；Λ^-Η甲基贿化倭基）丙基2,3-二-0-正十六烷基-目-D-化 喃葡萄巧。反应时间；3 h;反应投料比；3'-yV，yV-二甲胺基丙基2,3-二-0-正十六焼 基-目-D-化喃葡萄巧（mol):贿甲焼（mol) = 1 : 4;纯化；反应混合液经冰浴冷却析晶。 所得白色固体经超声波振荡水分散后得到阳离子脂质体3' -〇ν，Λ；Λ^-Η甲基贿化倭基）丙 基2, 3-二-0-正十六烷基-β -D-化喃葡萄巧（简写为扣-Cie-Glu-TMA)纳米颗粒。
[0011] 二甲基甲醜胺为溶剂，氨化钢为催化剂，常温下3'-叠氮基丙基4, 6-0-异 丙叉基-β-D-化喃葡萄糖与硬脂基漠反应，经柱层析分离纯化得3'-叠氮基丙基 2, 3-二-0-正十八烷基-4, 6-0-异丙叉基-目-D-化喃葡萄糖巧。反应时间；10 h;反应 投料比；3'-叠氮基丙基4, 6-0-异丙叉基-目-D-化喃葡萄糖巧（mol):氨化钢（mol): 硬脂基漠（mol) = 1 : 6 : 4;柱层析分离洗脱剂为：石油離：己酸己醋=16 : 1(体积 比）。所得广物3'-叠氮基丙基2, 3-二-0-正十八烷基-4, 6-0-异丙叉基-β -D-化喃 葡萄糖巧，W甲醇为溶剂，与己醜氯反应脱除异丙叉基，经柱层析分离纯化得3'-叠氮基丙 基2, 3-二-0-正十八烷基-目-D-化喃葡萄糖巧。反应温度；0°C至室温；反应时间；1 h ; 反应投料比；3'-叠氮基丙基2,3-二-0-正十八烷基-4, 6-0-异丙叉基-目-D-化喃葡 萄糖巧（mol):己醜氯（mol) = 1 : 8 ;柱层析分离洗脱剂为：石油離：己酸己醋=2 : 1 (体积比）。所得产物3'-叠氮基丙基2, 3-二-0-正十八烷基-β -D-化喃葡萄糖巧，W 甲醇为溶剂，铅碳为催化剂，与甲醒和氨气反应，经柱层析分离纯化得3' -Λ;Λ^-二甲胺基丙 基2,3-二-0-正十八烷基-β-D-化喃葡萄巧。反应时间；24 h;反应投料比；3'-叠氮基 丙基2,3-二-0-正十八烷基-目-D-化喃葡萄糖巧（mol):甲醒（mol) = 1 : 8, 3'-叠 氮基丙基2,3-二-0-正十八烷基-β-D-化喃葡萄糖巧（g):铅碳（g) = 1 : 0.3;柱层 析分离洗脱剂为：己酸己醋：甲醇=5 : 1(体积比）。所得产物3'-Λ;Λ^-二甲胺基丙基 2, 3-二-0-正十八烷基-目-D-化喃葡萄巧，W四氨巧喃为溶剂，常温下与贿甲焼反应，分 离纯化得白色固体3'-〇ν，Λ；Λ^-Η甲基贿化倭基）丙基2,3-二-0-正十八烷基-目-D-口比 喃葡萄巧。反应时间；3 h;反应投料比；3'-yV，yV-二甲胺基丙基2,3-二-0-正十八焼 基-目-D-化喃葡萄巧（mol):贿甲焼（mol) = 1 : 4;纯化；反应混合液经冰浴冷却析晶。 所得白色固体经超声波振荡水分散后得到阳离子脂质体3' -〇ν，Λ；Λ^-Η甲基贿化倭基）丙 基2, 3-二-0-正十八烷基-β -D-化喃葡萄巧（简写为扣-Cis-Glu-TMA)纳米颗粒。
[0012] W四氨巧喃和水为溶剂，用Η苯基麟还原3'-叠氮基丙基目-D-化喃葡萄糖巧的 叠氮基为氨基，分离纯化得到3'-氨基丙基目-D-化喃葡萄糖巧。反应温度；75°C;反应 时间；3 h ;反应投料比；3' -叠氮基丙基目-D-化喃葡萄糖巧（mol) : Η苯基麟（mol)= 1 : 2;纯化；加水除去杂质。所得产物3'-氨基丙基目-D-化喃葡萄糖巧，W甲醇和己醇 为混合溶剂，无水碳酸钟为缚酸剂，在加热的条件下与月桂基漠反应，经柱层析分离纯化得 3'-〇V，W-二正十二烷基）丙基目-D-化喃葡萄糖巧。反应温度；75°C;反应时间；48h;反 应投料比；3'-氨基丙基目-D-化喃葡萄糖巧：月桂基漠（mol):无水碳酸钟=1 : 4 :2,柱层析分离洗脱剂为：己酸己醋：甲醇=4 : 1(体积比）。所得产物3'-〇ν，Λ^-二 正十二烷基）丙基目-D-化喃葡萄糖巧，W四氨巧喃为溶剂，常温下与贿甲焼反应，丙丽 结晶得到白色固体3' -0V-甲基-Λ;Λ^-二正十二烷基贿化倭基）丙基目-D-化喃葡萄糖 巧。反应时间；3 h，反应投料比；3'-〇ν，Λ^-二正十二烷基）丙基目-D-化喃葡萄糖巧： 贿甲焼（mol) = 1 : 4;纯化；丙丽结晶。所得白色固体经超声波振荡水分散后得到阳离子 脂质体3' -0V-甲基-W，W-二正十二烷基贿化倭基）丙基目-D-化喃葡萄糖巧（简写为 Glu-DiCizMA)纳米颗粒。
[0013] W甲醇和己醇为混合溶剂，无水碳酸钟为缚酸剂，在加热的条件下，3'-氨基丙基 目-D-化喃葡萄糖巧与肉豆護基漠反应，经柱层析分离纯化得3' -〇V，W-二正十四烷基） 丙基目-D-化喃葡萄糖巧。反应温度；75°C;反应时间；48 h;反应投料比；3'-氨基丙基 目-D-化喃葡萄糖巧：肉豆護基漠(mol):无水碳酸钟=1 : 4 : 2,柱层析分离洗脱剂 为：己酸己醋：甲醇=4 : 1(