一种海藻的酶解处理方法
【技术领域】
[0001] 本发明提供一种海藻的酶解方法，具体设及一种海藻的复合酶处理方法，属于生 物降解技术领域。
【背景技术】
[0002] 海藻提取有效成分的方法，有化学、物理和生物的方法;提取的有效成分含有调节 植物生长的物质，包括多种矿物质、氨基酸和维生素等天然生物活性物质，有利于促进植物 的各种生理机能。
[0003] 海藻中特有的海藻多糖、海藻酸钢，具有很好的生物活性，可刺激植物体内非特异 性活性因子的产生和内源激素的平衡，进而促进植物的生长，提高产量，改善农产品的品 质。
[0004] 现有的海藻提取有效成分的方法中，W生物法为佳，很多本领域人员多年从事海 藻的酶解研究，一些刊物中也发表了多篇关于海藻酶解方法的论文等，但仍然存在一些不 足。
[000引现有技术具有W下缺陷：（1)海藻酸钢的提取率低；（2)海藻糖胶的提取率低；（3) 多糖总得率较低；（4)酶解时间长，操作繁琐，成较高。
【发明内容】
[0006] 本发明为解决现有技术存在的不足，提供一种海藻的酶解处理方法，W实现W下 发明目的： 1、 提高海藻酸钢的提取率，使海藻酸钢的提取率为38.0~50.9%; 2、 提高海藻糖胶的提取率，使海藻糖胶的提取率为7.5~11.8%; 3、 提高多糖总得率； 4、 缩短海藻酶解反应时间； 5、 简化操作，降低成本。
[0007] 为解决上述技术问题，采用W下技术方案： 一种海藻的酶解处理方法，包括材料准备、预处理、酶处理、离屯、步骤。
[0008] W下是对上述技术方案的进一步改进： 所述的酶处理步骤:采用的酶为复合酶，所述的复合酶包括蛋白酶、纤维素酶和果胶 酶，质量比为3:1:2。
[0009] 所述的蛋白酶为木瓜蛋白酶、渡萝蛋白酶、簇肤酶、木瓜凝乳蛋白酶中的任意一 种。
[0010] 所述的纤维素酶为葡聚糖外切酶、葡聚糖内切酶、β-葡萄糖巧酶、纤维二糖酶中的 任意一种。
[0011] 所述的果胶酶为原果胶酶、裂解酶、多聚半乳糖醒酸酶中的任意一种。
[0012] 所述的酶处理步骤:反应抑为4~6.5，反应溫度为40~50°C。
[0013] 所述的酶处理步骤:加酶量为海藻匀浆质量的ο. 6~ο. 7%，反应时间为58~62h。
[0014] 所述的离屯、步骤:离屯、速率为2200r/min，离屯、时间为20min。
[0015] 采用的海藻包括马尾藻、羊栖菜和鹿角菜，质量比例为5:2:2。
[0016] 所述的预处理步骤:烘干溫度为90~98°C，烘干时间为40~45min，研磨细度为200 目。
[0017] 与现有技术相比，本发明的有益效果是： 1、 采用本发明的海藻酶解处理方法，海藻酸钢的提取率为38.0~50.9%; 2、 采用本发明的海藻酶解处理方法，海藻糖胶的提取率为7.5~11.8%，且海藻糖胶粘 度高； 3、 采用本发明的海藻酶解处理方法，多糖总得率高； 4、 采用本发明的海藻酶解处理方法，明显缩短海藻酶解反应时间； 5、 本发明的海藻酶解处理方法，操作简单，成本比常规方法低30%。
【具体实施方式】
[0018] 实施例1 一种海藻的酶解处理方法 步骤1、材料准备 采用的海藻包括马尾藻、羊栖菜和鹿角菜，质量比例为5:2:2; 所述马尾藻:水分含量为15~16%;所述羊栖菜:水分含量为12~14%;所述鹿角菜:水分 含量为13~14%。
[0019] 步骤2、预处理 将马尾藻、羊栖菜、鹿角菜用淡水洗净，分别90~98°C条件下烘干40~45min，烘干后研 磨为200目的细粉，混合后得到混合的海藻粉； 向海藻粉中加入3倍质量的去离子水，揽拌均匀，得到海藻浆液。
[0020] 步骤3、酶处理 将海藻浆液加入反应蓋中，调节反应pH，调节反应溫度，加入复合酶，加酶量占海藻匀 浆质量的0.7%;反应60h，反应完成后，升溫至95°C，保溫2min; 所述的复合酶包括蛋白酶、纤维素酶和果胶酶，质量比为3:1:2。
[0021 ] 步骤4、离屯、 将反应蓋中混合物引至离屯、机，22(K)r/min离屯、20min，收集上清液，分析其中海藻酸钢 和海藻糖胶的提取率。
[0022] 实施例2反应抑的单因素分析实验
酶处理步骤中，采用实施例2-7的反应pH，调节反应溫度为46°C，加入的复合酶中，蛋白 酶均选用木瓜蛋白酶，纤维素酶均选用β-葡萄糖巧酶，果胶酶均选用原果胶酶;按照实施例 1的方法酶解海藻。
[0023] 实施例8反应溫度单因素分析实验
酶处理步骤中，采用实施例8-11的反应溫度，调节反应抑为5.5，加入的复合酶中，蛋白 酶均选用木瓜蛋白酶，纤维素酶均选用β-葡萄糖巧酶，果胶酶均选用原果胶酶;按照实施例 1的方法酶解海藻。
[0024] 实施例12蛋白酶种类单因素分析实验
酶处理步骤中，复合酶中的蛋白酶采用实施例12-15的蛋白酶种类，调节反应pH为5.5， 调节反应溫度为43°C，加入的复合酶中，纤维素酶均选用β-葡萄糖巧酶，果胶酶均选用原果 胶酶;按照实施例1的方法酶解海藻。
[0025] 实施例16纤维素酶种类单因素分析实验
酶处理步骤中，复合酶中的纤维素酶采用实施例12-15的纤维素酶种类，调节反应抑为 5.5,调节反应溫度为43°C，加入的复合酶中，蛋白酶均选用渡萝蛋白酶，果胶酶均选用原果 胶酶;按照实施例1的方法酶解海藻。
[0026] 实施例20果胶酶种类单因素分析实验
酶处理步骤中，复合酶中的果胶酶采用实施例12-15的果胶酶种类，调节反应pH为5.5， 调节反应溫度为43°C，加入的复合酶中，蛋白酶均选用渡萝蛋白酶，纤维素酶均选用葡聚糖 内切酶;按照实施例1的方法酶解海藻。
[0027] 结果检测： 对实施例2-11海藻的酶解处理方法得到的上清液进行分析，海藻酸钢和海藻糖胶的提 取率见表1; 表1
对实施例12-22海藻的酶解处理方法得到的上清液进行分析，海藻酸钢和海藻糖胶的 提取率见表2; 表2
(1) 由表1可见，酶处理步骤中反应pH的单因素分析实验： 设及实施例2-7，结果显示，实施例4、5为优选实施例； (2) 由表1可见，酶处理步骤中反应溫度的单因素分析实验： 设及实施例8-11，结果显示，实施例9为优选实施例； (3) 由表2可见，酶处理步骤中蛋白酶种类的单因素分析实验： 设及实施例12-15,结果显示，实施例13为优选实施例； (4) 由表2可见，酶处理步骤中纤维素酶种类的单因素分析实验： 设及实施例16-19，结果显示，实施例17为优选实施例； 巧）由表2可见，酶处理步骤中果胶酶种类的单因素分析实验： 设及实施例20-22，结果显示，实施例21为优选实施例。
[0028] 由表1和表2可见，采用实施例2-22海藻的酶解处理方法，海藻酸钢的提取率为 38.0~50.6%，海藻糖胶的提取率为7.5~11.7%。
[0029] 实施例23 -种海藻的酶解处理方法 步骤1、材料准备 采用的海藻包括马尾藻、羊栖菜和鹿角菜，质量比例为5:2:2; 所述马尾藻:水分含量为15%;所述羊栖菜：水分含量为12%;所述鹿角菜:水分含量为 13〇/〇。
[0030] 步骤2、预处理 将马尾藻、羊栖菜、鹿角菜用淡水洗净，分别95~96°C条件下烘干41~42min，烘干后研 磨为200目的细粉，混合后得到混合的海藻粉； 向海藻粉中加入3倍质量的去离子水，揽拌均匀，得到海藻浆液。
[0031 ] 步骤3、酶处理 将海藻浆液加入反应蓋中，调节反应pH为5.5，调节反应溫度为43 °C，加入复合酶，加酶 量占海藻匀浆质量的0.7%;反应60h，反应完成后，升溫至95°C，保溫2min; 所述的复合酶包括蛋白酶、纤维素酶和果胶酶，质量比为3:1:2; 所述蛋白酶为渡萝蛋白酶，所述纤维素酶为葡聚糖内切酶，所述果胶酶为裂解酶。
[0032] 步骤4、离屯、 将反应蓋中混合物引至离屯、机，220化/min离屯、20min，收集上清液。
[0033] 结果检测： 对实施例23制备的的提取液进行检测，具体指标见表3; 表3
由表3可见，海藻酸钢和海藻糖胶的提取率高，海藻糖胶粘度高，多糖总得率高。
[0034] 最后应说明的是：W上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明， 尽管参照前述实施例对本发明进行了详细说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可W 对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡 在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保 护范围之内。W上所述为本发明最佳实施方式的举例，其中未详细述及的部分均为本领域 普通技术人员的公知常识;本发明的保护范围W权利要求的内容为准，任何基于本发明的 技术启示而进行的等效变换，也在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1. 一种海藻的酶解处理方法，其特征在于:包括材料准备、预处理、酶处理、离心步骤。2. 根据权利要求1所述的一种海藻的酶解处理方法，其特征在于:所述的酶处理步骤： 采用的酶为复合酶，所述的复合酶包括蛋白酶、纤维素酶和果胶酶，质量比为3:1:2。3. 根据权利要求2所述的一种海藻的酶解处理方法，其特征在于:所述的蛋白酶为木瓜 蛋白酶、菠萝蛋白酶、羧肽酶、木瓜凝乳蛋白酶中的任意一种。4. 根据权利要求2所述的一种海藻的酶解处理方法，其特征在于:所述的纤维素酶为葡 聚糖外切酶、葡聚糖内切酶、葡萄糖苷酶、纤维二糖酶中的任意一种。5. 根据权利要求2所述的一种海藻的酶解处理方法，其特征在于:所述的果胶酶为原果 胶酶、裂解酶、多聚半乳糖醛酸酶中的任意一种。6. 根据权利要求1所述的一种海藻的酶解处理方法，其特征在于:所述的酶处理步骤： 反应pH为4~6.5，反应温度为40~50 °C。7. 根据权利要求1所述的一种海藻的酶解处理方法，其特征在于:所述的酶处理步骤： 加酶量为海藻匀浆质量的〇. 6~0.7%，反应时间为58~62h。8. 根据权利要求1所述的一种海藻的酶解处理方法，其特征在于:所述的离心步骤:离 心速率为2200r/min，离心时间为20min。9. 根据权利要求1所述的一种海藻的酶解处理方法，其特征在于：所述的材料准备步 骤:采用的海藻包括马尾藻、羊栖菜和鹿角菜，质量比例为5:2:2。10. 根据权利要求1所述的一种海藻的酶解处理方法，其特征在于:所述的预处理步骤： 烘干温度为90~98 °C，烘干时间为40~45min，研磨细度为200目。
【专利摘要】本发明提供一种海藻的酶解处理方法，包括材料准备、预处理、酶处理、离心步骤。所述的酶处理步骤：采用的酶为复合酶，所述的复合酶包括蛋白酶、纤维素酶和果胶酶，质量比为3:1:2。所述的蛋白酶为木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、羧肽酶、木瓜凝乳蛋白酶中的任意一种。所述的纤维素酶为葡聚糖外切酶、葡聚糖内切酶、β-葡萄糖苷酶、纤维二糖酶中的任意一种。所述的果胶酶为原果胶酶、裂解酶、多聚半乳糖醛酸酶中的任意一种。采用本发明的海藻酶解处理方法，海藻酸钠的提取率为38.0～50.9%；海藻糖胶的提取率为7.5～11.8%。
【IPC分类】C12P19/04, C12P19/14, C12P19/12, C12P19/20
【公开号】CN105586377
【申请号】CN201610061793
【发明人】王伟华, 陈凤霞
【申请人】山东和田旺生物科技有限公司
【公开日】2016年5月18日
【申请日】2016年1月29日