一种迷迭香中提取熊果酸的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及植物熊果酸的提取技术领域，具体是一种迷迭香中提取熊果酸的制备方法。
【背景技术】
[0002]迷迭香(Rosmarinus officinalis L.)也叫油安草，系唇形科鼠尾草属植物，常绿小灌木，原产欧洲、北非及地中海沿岸，近年来在我国云南、广西、海南、湖南、四川、贵州、福建等省区均有种植。迷迭香精油主要含有α-蒎烯、三环萜、对伞花烃、柠檬烯、I，8_桉叶油素、龙脑、樟脑、松油醇、松油醇、松油烯-4-醇等成分。迷迭香提取物中主要含有鼠尾草酚、迷迭香二醛、表迷迭香酚、表迷迭香酚甲醚、鼠尾草酸、鼠尾草酸甲酯、迷迭香酚、熊果酸、齐墩果酸等萜类物质，芹菜素、橙皮素、高车前苷、芫花素等黄酮类物质，香草酸、咖啡酸、迷迭香酸、阿魏酸等酚酸类物质。
[0003]熊果酸具有保肝、抗肝炎、抗肿瘤、增强免疫功能、抗炎抑菌、抗HIV、降血脂等作用。近年来发现它具有抗致癌、抗促癌、诱导F9畸胎瘤细胞分化和抗血管生成作用，熊果酸具有明显的抗氧化功能，因而被广泛地用作医药和化妆品原料。熊果酸对四氯化碳引起的大、小鼠急性肝损伤具有明显的保护和治疗作用；能使动物血清SGPT及肝甘油三酯的含量显著下降，血清甘油三酯、β
-脂蛋白、α1、α2球蛋白及肝糖原含量明显增加，肝细胞变性、坏死症状明显减轻;有明显的驱脂作用和抗纤维化等作用;能抑制肿瘤生长、抗始发突变、抗促癌、抗氧化、诱导癌细胞分化和抗血管生成;对Ρ388和L1210白血病细胞、Α549人肺癌细胞有显著的细胞毒作用，ED50均小于4mg/mol;对KB肿瘤细胞、人结肠癌细胞HCT-8、乳腺癌细胞MCF-7显示边缘细胞毒作用;能抑制肿瘤生长和抗肿瘤增殖;熊果酸可以对抗致癌物苯并芘、黄曲霉毒素BI诱发的基因突变。本申请提供一种从迷迭香中提取药用价值极高的熊果酸的制备方法，以提高其纯度和提取率。
【发明内容】
[0004]本发明的目的在于提供一种迷迭香中提取熊果酸的制备方法，以解决上述【背景技术】中提出的问题。
[0005]为实现上述目的，本发明提供如下技术方案:
一种迷迭香中提取熊果酸的制备方法，包括以下步骤:
1)原料预处理:取迷迭香干叶，洗净晾干后用植物粉碎机粉碎过100目筛得迷迭香粉末；
2)醇提:将迷迭香粉末放在萃取釜中，加入3-6倍重量于迷迭香粉末的85-90%乙醇进行热回流提取I次，加入重量是迷迭香粉末5%的有机酸溶剂，
搅拌均匀；
3)超声波提取:将步骤2)所得继续在55-60°C的水浴状态下，进行超声提取2次，每次提取30-60min;
4)过滤浓缩干燥:通过分离器将步骤三中含有残渣的火龙果皮溶液进行过滤、离心，弃去滤渣，得到上清液，向上清液中加入重量是迷迭香粉末1%的超氧化物歧化酶，再进行浓缩冷冻干燥，真空度保持在为20-22Pa，持续0.5_lh，得干燥物；
5)脱色:将步骤4)所得干燥物中加入2-3倍重量的所述干燥物的95%乙醇进行溶解，加入重量是干燥物重量的0.5的％中性氧化铝，搅拌均匀，在80 °C水浴中进行脱色30min，过滤，滤液进行HPLC分析，对滤液旋转蒸干回收乙醇，得到迷迭香熊果酸。
[0006]作为本发明的优选方案，步骤2)中所述有机酸溶剂为草酸和酒石酸的混合物，它们质量比为1:1.5。
[0007]作为本发明的优选方案，所述步骤3)中的超声提取条件为超声频率25kHz，超声功率为 1000-1200W。
[0008]本发明的有益效果是:在提取过程，加入草酸和酒石酸的有机酸溶剂提高提取过程是迷迭香中活性成分的稳定性，具有无污染，成本低、无毒害的优点;采用超声提取，安全可靠，促进有效成分的提取，操作简单、提取温度低、提取时间短、提取率高，目标成分纯度较高以及节约能耗，提高资源的利用率，提取适应性广，并且提取过程简单易行。本发明具有工艺简单、回收率高、氧化损耗小、节时、节能、提取率高等优点，同时避免了有毒溶剂的使用，具有良好的工业推广价值。利用本发明的方法，提取熊果酸，一次提取率就能达到90%以上，纯度达到98%以上。
【具体实施方式】
[0009]以下通过实施例对本发明做进一步阐述:
实施例1
一种迷迭香中提取熊果酸的制备方法，包括以下步骤:
1)原料预处理:取迷迭香干叶，洗净晾干后用植物粉碎机粉碎过100目筛得迷迭香粉末；
2)醇提:将迷迭香粉末放在萃取釜中，加入5倍重量于迷迭香粉末的90%乙醇进行热回流提取I次，加入重量是迷迭香粉末5%的有机酸溶剂，
搅拌均匀;所述有机酸溶剂为草酸和酒石酸的混合物，它们质量比为1: 1.5;
3)超声波提取:将步骤2)所得继续在55°C的水浴状态下，进行超声提取2次，每次提取45min;其中超声提取条件为超声频率25kHz，超声功率为I OOOff ；
4)过滤浓缩干燥:通过分离器将步骤三中含有残渣的火龙果皮溶液进行过滤、离心，弃去滤渣，得到上清液，向上清液中加入重量是迷迭香粉末1%的超氧化物歧化酶，再进行浓缩冷冻干燥，真空度保持在为20Pa，持续0.5h，得干燥物；
5)脱色:将步骤4)所得干燥物中加入2倍重量的所述干燥物的95%乙醇进行溶解，加入重量是干燥物重量的0.5的％中性氧化铝，搅拌均匀，在80°C水浴中进行脱色30min，过滤，滤液进行HPLC分析，对滤液旋转蒸干回收乙醇，得到迷迭香熊果酸。
[0010]实施例2
一种迷迭香中提取熊果酸的制备方法，包括以下步骤:
I)原料预处理:取迷迭香干叶，洗净晾干后用植物粉碎机粉碎过100目筛得迷迭香粉末；
2)醇提:将迷迭香粉末放在萃取釜中，加入3倍重量于迷迭香粉末的85%乙醇进行热回流提取I次，加入重量是迷迭香粉末5%的有机酸溶剂，
搅拌均匀;所述有机酸溶剂为草酸和酒石酸的混合物，它们质量比为1: 1.5;
3)超声波提取:将步骤2)所得继续在55°C的水浴状态下，进行超声提取2次，每次提取30min;其中超声提取条件为超声频率25kHz，超声功率为1000-1200W;
4)过滤浓缩干燥:通过分离器将步骤三中含有残渣的火龙果皮溶液进行过滤、离心，弃去滤渣，得到上清液，向上清液中加入重量是迷迭香粉末1%的超氧化物歧化酶，再进行浓缩冷冻干燥，真空度保持在为20Pa，持续0.5h，得干燥物；
5)脱色:将步骤4)所得干燥物中加入3倍重量的所述干燥物的95%乙醇进行溶解，加入重量是干燥物重量的0.5的％中性氧化铝，搅拌均匀，在80°C水浴中进行脱色30min，过滤，滤液进行HPLC分析，对滤液旋转蒸干回收乙醇，得到迷迭香熊果酸。
[0011]实施例3
一种迷迭香中提取熊果酸的制备方法，包括以下步骤:
1)原料预处理:取迷迭香干叶，洗净晾干后用植物粉碎机粉碎过100目筛得迷迭香粉末；
2)醇提:将迷迭香粉末放在萃取釜中，加入6倍重量于迷迭香粉末的90%乙醇进行热回流提取I次，加入重量是迷迭香粉末5%的有机酸溶剂，
搅拌均匀;所述有机酸溶剂为草酸和酒石酸的混合物，它们质量比为1: 1.5;
3)超声波提取:将步骤2)所得继续在60V的水浴状态下，进行超声提取2次，每次提取30-60min;其中超声提取条件为超声频率25kHz，超声功率为1000-1200W;
4)过滤浓缩干燥:通过分离器将步骤三中含有残渣的火龙果皮溶液进行过滤、离心，弃去滤渣，得到上清液，向上清液中加入重量是迷迭香粉末1%的超氧化物歧化酶，再进行浓缩冷冻干燥，真空度保持在为22Pa，持续Ih，得干燥物；
5)脱色:将步骤4)所得干燥物中加入2倍重量的所述干燥物的95%乙醇进行溶解，加入重量是干燥物重量的0.5的％中性氧化铝，搅拌均匀，在80°C水浴中进行脱色30min，过滤，滤液进行HPLC分析，对滤液旋转蒸干回收乙醇，得到迷迭香熊果酸。
[0012]上述说明是针对本发明较佳可行实施例的详细说明，但实施例并非用以限定本发明的专利申请范围，凡本发明所提示的技术精神下所完成的同等变化或修饰变更，均应属于本发明所涵盖专利范围。
【主权项】
1.一种迷迭香中提取熊果酸的制备方法，其特征在于包括以下步骤: 1)原料预处理:取迷迭香干叶，洗净晾干后用植物粉碎机粉碎过100目筛得迷迭香粉末； 2)醇提:将迷迭香粉末放在萃取釜中，加入3-6倍重量于迷迭香粉末的85-90%乙醇进行热回流提取I次，加入重量是迷迭香粉末5%的有机酸溶剂， 搅拌均匀； 3)超声波提取:将步骤2)所得继续在55-60°C的水浴状态下，进行超声提取2次，每次提取30-60min; 4)过滤浓缩干燥:通过分离器将步骤三中含有残渣的火龙果皮溶液进行过滤、离心，弃去滤渣，得到上清液，向上清液中加入重量是迷迭香粉末1%的超氧化物歧化酶，再进行浓缩冷冻干燥，真空度保持在为20-22Pa，持续0.5_lh，得干燥物； 5)脱色:将步骤4)所得干燥物中加入2-3倍重量的所述干燥物的95%乙醇进行溶解，加入重量是干燥物重量的0.5的％中性氧化铝，搅拌均匀，在80 °C水浴中进行脱色30min，过滤，滤液进行HPLC分析，对滤液旋转蒸干回收乙醇，得到迷迭香熊果酸。2.根据权利要求1所述的一种迷迭香中提取熊果酸的制备方法，其特征在于:步骤2)中所述有机酸溶剂为草酸和酒石酸的混合物，它们质量比为1: 1.5。3.根据权利要求1所述的一种迷迭香中提取熊果酸的制备方法，其特征在于:所述步骤3)中的超声提取条件为超声频率25kHz，超声功率为1000-1200W。
【专利摘要】本发明公开了一种迷迭香中提取熊果酸的制备方法，属于植物熊果酸提取技术领域。该制备方法包括以下步骤：原料预处理、醇提、超声波提取、过滤浓缩干燥、脱色共五个步骤，得到迷迭香熊果酸。本发明制备方法具有利用率高，提取率高，所得火龙果熊果酸的纯度高。
【IPC分类】C07J63/00
【公开号】CN105601699
【申请号】CN201511011981
【发明人】胡丽
【申请人】胡丽
【公开日】2016年5月25日
【申请日】2015年12月30日