作为詹纳斯激酶的抑制剂的n-氰基甲基酰胺的制作方法
【技术领域】
[0001 ]本发明设及通式（1)的化合物其为詹纳斯激酶(Janus kinase JAK)的抑制剂，詹 纳斯激酶(JAK)是设及炎性病症、自身免疫性疾病、增殖性疾病、变态反应症、移植排斥、设 及软骨转换的损伤的疾病、先天性软骨崎形和/或与IL6或干扰素类的分泌过多相关的疾病 的一类酪氨酸激酶。特别地，本发明的化合物抑制JAKl和/或JAK2和/或JAK3亚家族。本发明 还提供了本发明化合物的制备方法、包含本发明化合物的药物组合物、它们的互变异构体 W及它们的可药用盐。
【背景技术】
[0002] 蛋白质激酶(PKs)调节多种生物过程，包括细胞生长、存活、分化、器官形成、器官 发生、血管新生、组织修复和再生。蛋白质激酶在人类疾病的宿主中还有专口的作用，疾病 例如移植排斥、类风湿性关节炎、银屑病(psoriasis)、肌萎缩性侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis)和多发性硬化(multiple sclerosis)W及实体和血液恶性疾病如白 血病和淋己瘤。细胞因子影响细胞分化、增殖和活化，并且可W同时调节促炎和抗炎响应使 得宿主对病原体适当地反应。细胞因子刺激的免疫和炎性反应促进疾病的发病:病变如严 重的重症联合免疫缺陷（SCID)产生于免疫系统的抑制，同时过分活跃或者不合适的免疫/ 炎性响应促进自身免疫性疾病(例如，哮喘、全身性红斑性狼疮、甲状腺炎、屯、肌炎）W及疾 病如硬皮病和骨关节炎的病变(〇i"tmann,R.A.,T.化 eng,et al. (SOOO)Arthritis Res 2 (1):16-32)。
[0003] 很大范围的细胞因子的信号传导包括蛋白质酪氨酸激酶的詹纳斯激酶家族 (JAKsKW及信号转导与转录激活因子(STATs)。詹纳斯激酶(JAK)为经由JAK-STAT途径将 细胞因子介导的信号进行转导的细胞内非受体酪氨酸激酶家族，范围为120-140kDa JAK家 族在细胞因子依赖性调节设及免疫响应的增殖和细胞功能中扮演重要角色。目前，已知有 四种哺乳动物JAK家族成员：JAK UJAK 2、JAK 3和TYK 2 JAK UJAK 2和TYK 2被普遍表 达，而JAK 3表达于髓样和淋己样细胞谱系中。
[0004] 化ndeghinste等人(WO 2005/124342)发现JAKl为运样一种祀标，对其进行抑制也 许与包括OA的多种疾病有治疗相关性。敲除小鼠中的JAKl基因证实了 JAKl在疾病发展期间 扮演必要而非多余的角色。
[000引 JAK2为细胞质蛋白质-酪氨酸激酶，其在信号转导分子中催化S憐酸腺巧的丫憐 酸根基团至特定酪氨酸残基的径基基团的转移。JAK2在配体诱导的受体和酶的自体憐酸化 之后介导细胞因子受体下游的信号传导。JAK2的主要下游效应基因为已知为信号传导与转 录活化因子(STAT)蛋白质的一类转录因子。研究已经发现活化JAK2突变(JAK2V617F)与骨 髓增生性疾病(myeloproliferative disorders)之间的关联。骨髓增生性疾病是骨髓恶性 肿瘤的一类亚组，是W形态学上成熟的粒细胞、红细胞(erythroid)、巨核细胞或单核细胞 谱系的细胞的扩张为特征的同源干细胞疾病。骨髓增殖性疾病(MPD)包括真性红细胞增多 症(PV)、特发性血小板增多症化T)、伴有骨髓纤维变性的髓样化生(MMM)、慢性髓细胞性白 血病(CML)、慢性骨髓单核细胞性白血病(CMML)、嗜酸细胞增多综合征化ES)、青少年粒-单 核细胞型白血病(JMMU和系统性肥大细胞病(SMCD)。已经认为，在信号传导机制中的异常， 包括在组成上活化蛋白质赖氨酸激酶，引发了MPD。化k2-/-小鼠胚胎由于不存在发育完全 的红细胞生成而是贫血的，且在交配后约12.5天死亡。
[0006] JAK3缔合下列白介素的常见细胞外受体丫链：化-2、化-4、化-7、化-9和化-15。 JAK3缺失在晒齿动物和人类中均与缺乏免疫（immune compromised) (SCID)的表型有关。 SCID表型的JAK3(-/-)哺乳动物和淋己样细胞特异性表达的JAK3为免疫抑制物的祀标的两 个有利的属性。数据表明JAK3的抑制剂会阻碍T-细胞活化并且防止移植手术后的移植物的 排斥，或者向患有自体免疫疾病的患者提供治疗益处。JAK3的一个重要特征在于其特异性 缔合常见的细胞因子受体丫链，后者为化-2、化-4、比-7、化-9和化-15的受体的共同组成。 与其他更广泛地表达于许多哺乳动物组织中的JAK家族成员不同JAK3表达看上去似乎主 要受限于造血细胞的内质膜。JAK3通过小鼠和人基因而确认为免疫抑制祀标(O'Shea J.et al. (2004)) JAK3抑制剂成功地进入临床研发阶段，最初用于器官移植排斥，但是后来也用 于其他免疫炎性指征如风湿性关节炎(RA)、银屑病和克罗恩病(化Ohn ' S disease)。
[0007] 在JAK激酶水平阻断信号传导对于研发治疗人类癌症和关节炎是有前景的。也认 为抑制JAK激酶在患有皮肤免疫病症例如银屑病和皮肤敏化的患者中具有治疗作用。很多 病症被认为受益于调节JAK通路的治疗，根据运些病症，显然的是调节JAK通路的新的化合 物W及使用运些化合物的方法应当向大范围的患者提供实质的治疗益处。
[000引 Portola的专利申请(WO 2010/129802,WO 2009/145856,WO 2009/136995等)记载 了作为脾酪氨酸激酶(SYK)或JAK抑制剂的喀晚类化合物。
[0010] Rigel已经递交了诸多专利申请(WO 2011/017178，W0 2010/085684，W0 2010/ 078369，W0 2010/075558和WO 2010/039518等），要求保护用作JAK途径的调节剂或JAK激 酶、特别是JAK-2、JAK-3或运两者的抑制剂的喀晚类化合物。
[001引 Avila Therapeutics报道了作为蛋白质激酶抑制剂的喀晚类化合物（wo 2010123870，W0 2009/158571，W0 2009/051822和WO 2008/151183)。
[0014]切topia Research ?八丄1(1报道了作为蛋白质激酶(包括JAK)抑制剂的苯基氨基 喀晚类化合物(WO 2008109943,WO 2009029998)。
[0016]切topia在他们的专利申请WO 2008109943中报道了两个化合物。所报道的化合物 2在体外对JAK 2和JAK-3的抑制分别小于IiiM和小于20iiM。
[0018] 然而，运些化合物都没有市场化，并且要注意运些化合物存在巨大的未满足的能 力，因此需要开发W治疗有效方式调节JAK酶的化合物。本申请在下文中记载了运样的新的 分子。
【发明内容】
[0019] 本发明描述了一组作为JAK抑制剂的新的化合物，其可用于治疗自身免疫性疾病、 增殖性疾病、变态反应症、移植排斥、设及软骨转换的损伤的疾病、先天性软骨崎形和/或与 IL6或干扰素类的分泌过多相关的疾病。新的化合物由W下通式(1)定义：
[0021] 本发明的化合物可用于通过调节詹纳斯激酶(JAK)治疗人体或哺乳动物体。本发 明的化合物因此适合用于治疗其他自体免疫相关的疾病。
【具体实施方式】
[0022] 本发明的主要目的在于提供新的通式（1)化合物、在它们的合成中设及的中间体、 它们的可药用盐W及包含它们或它们的混合物作为药剂的药物组合物。
[0024] 在一个实施方案中提供了新的通式（1)化合物、在它们的合成中设及的中间体、它 们的可药用盐W及包含它们或它们的混合物作为药剂的药物组合物的制备方法。
[0025] 在另一实施方案中提供了药物组合物，所述药物组合物包含通式（1)化合物、它们 的可药用盐W及包含可药用载体、溶剂、稀释剂、赋形剂和其他通常用于制造药物组合物中 的媒介。
[0026] 在另一实施方案中提供了本发明的新的化合物在由于JAK失调发展出的疾病状况 中的用途，通过向哺乳动物给予治疗有效量且无毒性量的式（1)化合物或它们的可药用组 合物。
[0027] 发明详述
[0028] 本发明的新的化合物通过W下通式(I)定义：
[0030] 其中
[0031 ] X，当存在时，独立地选自N或CH;
[0032] Z，当存在时，独立地选自N或CH;
[0033] 'n'选自 0、1。
[0034] A独立地选自氨、面素、打-4烷基、CF3、CN、CON (Ri) 2、0打-4烷基 [003引环B选自W下环体系：
[0037] 所述环B可W，当适用时，任选地取代有独立选自W下的一个或多个取代基:H、0H、 CN、畑2、面素、氧代、OCF3、CF3、C广Cs烷基、OC广Cs烷基、（CH2) i-6〇C广Cs烷基、0-(CH2) o-4〇C广Cs 烷基、C (0) NHC广Cs烷基、NHC (0) CrCs烷基、S (0) 〇-2&-C6烷基、（C出）1-6N (化）2、（ C此）1-6NHC (= O)ORi、（CH2)i-6NHC(=O)Ri、C(=O)ORi、C(=O)I?i、（CH2)i-4C(=O)NHI?i、（CH2)0-4〇(CH2)0-4Ari、 (C此）0-4NH (C此）〇-4Ar I、（ C此）〇-4Ar I、（ C此）0-4C (O) (C此）〇-4ArI、（ C此）0-4C ( = O) O (C此）〇-4Ar I、 (C出）0-4C (= O) N化（C出）〇-4Ar 1;
[0038] 术语ARi，当存在时，独立地选自芳环或杂环环，所述芳环或杂环环为未经取代的 或经一个、两个、S个或四个独立地选自W下的取代基所取代:0H、CN、N此、面素、0CF3、CF3、 C广Cs烷基、OC广Cs烷基、（CH2) i-6〇C广Cs烷基、0- (CH2) o-4〇C广Cs烷基、C (0) NHC广Cs烷基、NHC (0) CrCs烷基、S (0) 〇-2&-C6烷基、（C出）1-6N(化）2、（ C出）1-6NHC (= 0) 0化、（C出）1-6NHC( = 0) Ri、C(= 0)0Ri 或-C( =0)Ri、CH2(CH2)o-4C( =0)N皿 1;
[0039] Ri，当存在时，独立地选自氨、&-C4烷基、打-C4面代烷基、C3-C7环烷基基团；
[0040] 如果没有特别指明的话，合适的取代基在适用时包括但不限于单独或与其他自由 基组合的下列自由基:径基、氧代基团、面代基团、硫代基团、硝基、氨基、烷基、烷氧基、面代 烷基或面代烷氧基；
[0041 ]在进一步的实施方式中，上述的基团、自由基可W选自：
[0042] -"烷基"基团，无论是单独使用还是与其他自由基组合，表示含有一至六个碳的直 链或支链的自由基，选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正下基、仲下基、叔下基、戊基、叔戊 基、正戊基、正己基等；
[0043] -本文使用的术语"面代"或"面素"，无论是单独使用还是与其他自由基组合，如 "面代烷基"、"全面代烷基"，是指氣、氯、漠或舰。术语"面代烷基"表示经一个或多个面素取 代的如上定义的烷基自由基;如氣甲基、二氣甲基、=氣甲基、氣乙基、二氣乙基、=氣乙基， 单或多面素取代的甲基、乙基、丙基、下基、戊基或己基基团。术语"面代烷氧基"表示如上定 义的面代烷基直接连接至氧原子，例如氣甲氧基、氯甲氧基、氣乙氧基、氯乙氧基等。
[0044] -术语"芳基"是指芳香族单碳环和多碳环体系，其中在多个环体系中的各个碳环 环稠合或通过单个碳键彼此连接。合适的芳基包括苯基、糞基和联苯基。
[0045] -本文使用的术语"经取代的"表示所指定原子上的任一个或多个氨被选自所指定 基团的选项取代，条件是不超过所指定原子的正常价态并且该取代生成稳定的化合物。
[0046] 式(I)化合物可W含有一种或多种不对称中屯、并且因此可W作为外消旋体或外消 旋混合物、单个对映异构体、非对映异构体混合物和单个的非对映异构体存在。本发明是指 包括所有的式(I)化合物的运些异构体形式，无论是作为单个种类还是其混合物的形式。
[0047] 本文描述的一些化合物含有締属双键，并且如果没有另外指明，意指包括E和Z几 何异构体运两者。
[0048] 本文描述的一些化合物可W存在不同的氨的连接点，称为互变异构体。运样的实 例可W为酬和其締醇形式，已知为酬-締醇不变异构体。各个互变异构体及其混合物包括在 式(I)化合物中。
[0049] 缩写列表
[0050] DMF:二甲基甲酯胺 [0051 ] DCM:二氯甲烧
[0052] EDAC.肥l:N-(3-二甲基氨基丙基)-N'-乙基碳二亚胺盐酸盐，
[0053] 册BT: 1-径基苯并S挫
[0054] TFA:S 氣乙酸
[00巧]DCC:二环己基碳二亚胺
[0056] DIPEA:二异丙基乙胺
[0057] 化OAc:乙酸乙醋 [005引 h:小时
[0059] min:分钟
[0060] tRet:保留时间
[0061] 肥1:氨氯酸
[0062] RT:室溫[25-30 °C]
[0063] 81酷口：（±)-2,2'-双(二苯基麟基)-1，1'-联糞
[0064] DPPF: [ 1，1' -双仁苯基麟基)二茂铁]二氯化钮与DCM的复合物 [006引 Pd2(化a)3:S(二亚苄基丙酬)二钮
[0066 ] (PPh3 ) 2PdCl 2 :双(S苯基麟)二氯化钮（II) 巧067] 设备描述
[006引 质谱在LC-MS 2010-A Shimadzu上记录。
[0069] UPLC纯度通过使用Waters Sequipy设备确定。
[0070] UPLC柱：B邸打8(2. IXlOOmm) 1.7y [0071 ]流动相:0.05 % TFA/水:ACN 梯度。
[0072] 流速：1 .Oml/min。
[0073] 波长:在 220nm 的 UV。
[0074] HPLC纯度通过使用Agi Ient-1100设备确定。
[007引 HPLC柱J'Sphere ODS 150*4.6mm，
[0076]流速 1.0ml/min，220min [00"77] NMR谱：Br址er Avanc 400mHz
[0078]本发明特别有用的化合物选自：
[0079] N-(氯基甲基)-4-(2-((4-(4-(2-氧代邮咯烧-1-基)赃晚-1-基巧基)氨基)喀晚- 4-基)苯甲酯胺；
[0080] N-(氯基甲基）-4-(2-( (4-(4-(1,1-二氧代异嚷挫烧-2-基）赃晚-1-基）苯基）氨 基)喀晚-4-基)苯甲酯胺；
[0081 ] N-(氯基甲基）-4-(2-( (4-(4-吗嘟代赃晚-1-基）苯基）氨基）喀晚-4-基）苯甲酯 胺；
[0082] 4-(2-( (4-(4-( IH-I，2,4-S挫-1-基）赃晚-1-基）苯基)氨基）喀晚-4-基)-N-(氯 基甲基)苯甲酯胺.
[0083] 4-(2-( (4-(4-(lH-化挫-1-基)赃晚-1-基)苯基)氨基)喀晚-4-基)-N-(氯基甲基） 苯甲酯胺；
[0084] 4-(2-((4-([1，3'-联化咯烧]-1'-基)苯基)氨基)喀晚-4-基)-N-(氯基甲基)苯甲 酷胺；
[008引 N-(氯基甲基)-4-(2-( (4-(4-( 1,1-二氧代四氨-2H-嚷喃-4-基)赃嗦-1-基)苯基） 氨基)喀晚-4-基)苯甲酯胺；
[0086] N-(氯基甲基)-4-(2-( (4-(4-(巧喃-2-基)赃晚-1-基）苯基)氨基）喀晚-4-基）苯 甲酯胺；
[0087] N-(氯基甲基)-4-(2-( (4-(4-(1，1-二氧代四氨嚷吩-3-基）赃嗦-1-基)苯基)氨 基)喀晚-4-基)苯甲酯胺；
[0088] N-(氯基甲基)-4-(2-( (4-(4-(2,5-二氧代化咯烧-1-基)赃晚-1-基)苯基)氨基） 喀晚-4-基)苯甲酯胺；
[0089] N-(氯基甲基)-4-(2-( (4-(4-(嚷吩-2-基)赃晚-1-基）苯基)氨基）喀晚-4-基）苯 甲酯胺；
[0090] N-(氯基甲基)-4-(2-( (4-(4-(2-氧代嗯挫烧-3-基)赃晚-1-基)苯基)氨基)喀晚-4-基)苯甲酯胺；
[0091] N-(氯基甲基）-4-(2-( (4-(4-(四氨巧喃-2-基）赃晚-1-基）苯基）氨基）喀晚-4-基)苯甲酯胺；
[0092] N-(氯基甲基)-4-(2-( (4-(4-巧-甲基巧喃-2-基)赃晚-1-基)苯基)氨基)喀晚-4-基)苯甲酯胺；
[0093] N-(氯基甲基)-4-(2-( (4-(4-(四氨-2H-化喃-4-基)赃嗦-1-基)苯基)氨基)喀晚-4-基)苯甲酯胺；
[0094] N-(氯基甲基)-4-(2-( (4-(4-(5-甲基四氨巧喃-2-基）赃晚-1-基）苯基)氨基）喀 晚-4-基)苯甲酯胺；
[0095] 4-(2-( (4-(4-(6-氧杂-3-氮杂双环[3.1.1]庚-3-基）赃晚-1-基）苯基)氨基）喀 晚-4-基)-N-(氯基甲基)苯甲酯胺；
[0096] N-(氯基甲基)-4-(2-( (4-(4-(2-氧代咪挫嘟-1-基)赃晚-1-基)苯基)氨基)喀晚-4-基)苯甲酯胺；
[0097] 4-(2-( (4-(4-(1,3,4-嗯二挫-2-基)赃晚-1-基)苯基)氨基)喀晚-4-基)-N-(氯基 甲基)苯甲酯胺；
[009引 4-(2-((4-(4-(2H-1，2,3-S 挫-2-基）赃晚-1-基）苯基)氨基）喀晚-4-基)-N-(氯 基甲基)苯甲酯胺.
[0099] 4-(2-( (4-(4-( IH-I，2,3-S挫-1-基）赃晚-1-基）苯基)氨基）喀晚-4-基)-N-(氯 基甲基)苯甲酯胺.
[0100] N-(氯基甲基)-4-(2-((4-(4-(5-氧代-1护1，2,4-^挫-4(5^-基）赃晚-1-基）苯 基)氨基)喀晚-4-基)苯甲酯胺；
[0101] N-(氯基甲基)-4-(2-( (4-(4-(5-氧代-4,5-二氨-1H-1，2，4-S 挫-1-基）赃晚-1-基)苯基)氨基)喀晚-4-基)苯甲酯胺；
[0102] 4-(2-( (4-(4-(1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基)赃晚-1-基）苯基)氨基）喀晚-4-基)-N-(氯基甲基)苯甲酯胺；
[0103] N-(氯基甲基)-4-(2-( (4-(4-(5-甲基-1,3,4-嗯二挫-2-基）赃晚-1-基)苯基)氨 基)喀晚-4-基)苯甲酯胺；
[0104] N-(氯基甲基)-4-(2-( (4-(4-(5-甲基-1,3,4-嚷二挫-2-基）赃晚-1-基)苯基)氨 基)喀晚-4-基)苯甲酯胺；
[0105] N-(氯基甲基)-4-(2-((4-(4-(四氨-2H-[1，4]二氧杂环己二締并[2,3-c]化咯-6 (3H)-基)赃晚-1-基)苯基)氨基)喀晚-4-基)苯甲酯胺；
[0106] N-(氯基甲基)-4-(2-( (4-(4-(2-氧代-I-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基）赃晚-1-基)苯基)氨基)喀晚-4-基)苯甲酯胺；
[0107] N-(氯基甲基）-4-(2-( (4-(4-(5-氧代-4,5-二氨-1,3,4-嗯二挫-2-基）赃晚-1-基)苯基)氨基)喀晚-4-基)苯甲酯胺；
[010引 N-(氯基甲基)-4-(2-( (4-(4-(4-环丙基-5-甲基-4H-1，2，4-S挫-3-基）赃晚-1-基)苯基)氨基)喀晚-4-基)苯甲酯胺；
[0109] N-(氯基甲基)-4-(2-( (4-(4-(5-甲氧基-1,3,4-嗯二挫-2-基）赃晚-1-基)苯基） 氨基)喀晚-4-基)苯甲酯胺；
[0110] 4-(2-((4-(4-(1,4-二氧杂孽-6-基)赃嗦-1-基)苯基)氨基)喀晚-4-基)-N-(氯基 甲基)苯甲酯胺；
[0111] N-(氯基甲基)-4-(2-( (4-(4-(4,5-二氨-IH-咪挫-2-基)赃嗦-1-基）苯基)氨基） 喀晚-4-基)苯甲酯胺；
[0112] N-(氯基甲基)-4-(2-( (4-(4-(4,5-二氨-IH-咪挫-2-基)赃晚-1-基）苯基)氨基） 喀晚-4-基)苯甲酯胺；
[0113] N-(氯基甲基）-4-(2-((4-(3-(四氨-2H-[1，4]二氧杂环己二締并[2,3-c]化咯-6 (3H)-基)化咯烧-1 -基)苯基)氨基)喀晚-4-基)苯甲酯胺；
[0114] N-(氯基甲基)-4-(2-( (4-(4-(5-甲基-1,3,4-嗯二挫-2-基）赃嗦-1-基)苯基)氨 基)喀晚-4-基)苯甲酯胺；
[0115] N-(氯基甲基)-4-(2-((4-(4-(3,4-二径基化咯烧-1-基）赃晚-1-基)苯基)氨基） 喀晚-4-基)苯甲酯胺；
[0116] 4-(2-((4-(4-(8-氧杂-3