一种组蛋白甲基化酶ezh2抑制剂中间体的合成方法
【技术领域】
[0001 ] 本发明设及一种组蛋白甲基化酶EZH2(enhancer of zeste homolog 2)抑制剂的 中间体的合成方法，属于有机合成领域。
【背景技术】
[0002] 组蛋白甲基化酶EZH2是化G蛋白复合体的主要成份，是H3K27甲基化催化酶，它与 组蛋白甲基化修饰有关，通过与其他化G蛋白形成polycomb抑制复合物(PRC)而发挥转录抑 制作用，在胚胎发育、细胞分化和肿瘤发生中具有重要作用。EZ肥具有DNA甲基转移酶、组蛋 白去乙酷化酶的调控作用，参与祀基因的转录抑制并促进细胞的增殖，且其参与的基因沉 默机制与DNA甲基转移酶参与的基因沉默机制及组蛋白的乙酷化修饰存在交互作用。在肿 瘤细胞中EZH2为一个专口高度沉默包括抑癌基因在内的一系列祀基因的转录抑制因子。 EZ肥可激活干细胞特异基因及调控很多抑癌基因如pl6、p27和服CA18。
[0003] EZH2在多种肿瘤组织中高表达，如前列腺癌、乳腺癌、膀脫癌、大肠癌、肝细胞癌、 淋己瘤等，并发现EZH2表达增高与肿瘤的进展及预后相关。运就提示其可能成为一种新的 肿瘤标志物，同时成为基因治疗的新祀点。其中，代表性的化合物CPI169的R型异构体具有 较好的生物活性，能抑制PRC2的催化活性，ICstKlnM,还能降低H3K27me3细胞水平，ECso为 70nM。
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[0005] 化合物1(结构如下式所示）与3-(氨基甲基)-4-甲氧基-6-甲基化晚酬盐 酸盐通过常规缩合方法可制备EZH2抑制剂CPI169、CPI360及其类似化合物。
[0006]
[0007]其中，Z为NH、NBoc、0、S、S〇2。对于化合物I的合成方法的报道较少， W02014124418A1，W02015010078A2，W02015023915A1W及organic letters ,2014(16)， 4114-4117中公开的方法(如下式所示），均WI-6为起始原料制备化合物I，其中化合物I-3 的制备需使用格氏试剂，反应体系要求苛刻，且产品手性选择性不高，需要通过进一步的拆 分纯化W得到单一构型的化合物1-2,但纯化收率低，W(R)-叔下基4-(1-氨基乙基)赃晚- I-簇酸叔下醋的纯化为例，通过与扁桃酸成盐再游离的方法进行单一手性化合物的富集， 但纯化收率仅44%;由化合物1-2制备化合物I-I时，需要使用价格昂贵、不易得的钉或钮金 属催化剂，使得化合物I的合成成本大大提高，且反应条件苛刻，需惰性气体条件下IlOC揽 拌12小时，反应结束后需要通过硅胶柱层析色谱分离方法对化合物I进行分离纯化，不利于 工艺放大。
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[0009] 因此需要开发一种化合物I的新的合成方法，本专利给出的方法路线短、操作简 单，收率高，ee值高、安全性好，环境友好，成本低，有利于工艺化生产。
【发明内容】
[0010] 本发明的目的是提供一种下面通式(I)所述化合物的合成方法。
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123456 其中，Z 为NH、NBoc、0、S、S〇2。 2 本发明所述化合物I的合成方法可W用W下流程表示： 3
4 其中，Z的定义如前。 5 更具体的，本发明的制备方法包含如下过程： 6 1)步骤1:在有机溶剂中，化合物1通过还原得到化合物2;
[001 引
[0019] 所述还原剂可选自（R)-2-甲基-CBS-恶挫棚烧，（S)-2-甲基-CBS-恶挫棚烧，（R)-MeCBS-棚烧二甲硫酸，（S)-MeCBS-棚烧二甲硫酸，二氯双(4-甲基异丙基苯基)钉-(±)-2， 2 ' -二(二-对甲苯基麟)-1，1' -联糞，二氯化钉-1，1' -联糞-2，2 ' -双二苯麟，棚氨化钢、棚氨 化裡、四氨裡侣、钮/碳，氨氧化钮/碳，销/碳，氧化销，销/=氧化二侣，二乙基苯胺棚烧，棚 烧二甲硫酸中的一种或多种，优选(R) -MeCBS-棚烧二甲硫酸、（S) -MeCBS-棚烧二甲硫酸。所 述还原剂与化合物1的摩尔比为0.1~2:1。所述反应使用的溶剂为甲醇、乙醇、四氨巧喃，甲 苯中的一种或多种，优选四氨巧喃;所述的反应时间W检测反应完成为止;所述的反应溫度 为-10 ~35°C。
[0020] 2)步骤2:化合物2与甲基横酷氯在碱性条件下，得到化合物3;
[0021]
[0022] 所述反应可W为本领域此类反应的常规方法和条件，所述的碱可选自=乙胺，N, N-二异丙基乙胺，化晚，4-二甲氨基化晚二异丙胺，碳酸钢，碳酸钟，碳酸氨钢，碳酸氨钟，氨 氧化钢，氨氧化钟，钢氨中的一种或多种，优选=乙胺。所述的反应时间W检测反应完成为 止。
[0023] 3)步骤3:化合物3和化合物4通过亲核取代制备化合物5;
[0024]
123 所述的亲核取代方法和条件可W为本领域此类反应的常规方法和条件，所述的碱 可选自钢氨，二(=甲基娃基)氨基裡，碳酸钟，碳酸钢，碳酸飽中的一种或多种，所述的溶剂 为N，N-二甲基甲酯胺，N，N-二甲基苯胺的一种或两种。所述反应溫度为80~130°C，优选100 ~120°C。所述的反应时间W检测反应完成为止。 2
[00%] 所述化合物4可W由市场得到，或者参考Organic Letters,2013,15(2) ,362-365 中所示方法制得。 3 4)步骤4:化合物5水解制备化合物I;
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[0029] 所述的亲核取代方法和条件可W为本领域此类反应的常规方法和条件。
[0030] 本发明方法的优点主要在于：
[0031] 1.公开了一类制备组蛋白甲基化酶EZH2抑制剂关键中间体I的合成方法，其中，Z 为NH、NBoc、0、S、S〇2;
[0032] 2.中间体I由化合物1通过还原、横酷化、取代、水解反应方便的得到，该反应操作 简单，后处理方便，中间不需要纯化，并且四步反应收率高达73% ;
[0033] 3.通过手性还原化合物1得到高e. e.值的化合物2(e . e .值>92 % )，W达到对关键 中间体I的手性控制；
[0034] 4.该方法反应操作简单、环境友好，反应原料简单易得，适合工业生产；
[0035] 本方法是一条全新的可工业化的合成路线。同时，该路线对开发新的组蛋白甲基 化酶抑制剂具有很好的方法学意义。 具体实施例
[0036] 下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，运些实施例仅用于说明本发明 而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条 件进行。
[0037] 实施例中所用的原料或试剂除特别说明之外，均市售可得。
[0038] 实施例中所述的室溫均指20-35°C。除非特别指出，所述的试剂不经纯化直接使 用。所有溶剂均购自商业化供应商，例如奥德里奇(Al化ich)，并且不经处理就可使用。反应 通过化C分析和/或通过LC-MS分析，通过起始材料的消耗来判断反应的终止。分析用的薄层 层析（TLC)是在预涂覆硅胶60 F254 0.25毫米板的玻璃板（EMD化学品公司（EMD 化emicals))上进行的，用UV光(254皿)和/或硅胶上的舰显象，和/或与化C染色物如醇制憐 钢酸、水合巧=酬溶液、高儘酸钟溶液或硫酸高姉溶液一起加热。
[0039] IH-NMR谱是在万瑞安-默丘利-VX400(Varian Mercu巧-VX400)仪上，在400MHz操 作下记录的。
[0040] 本发明中使用的缩写具有本领域常规含义，如:DCM表示二氯甲烧，DMF表示N，N-二 甲基甲酯胺。
[0041] 连施例1化合物7的制备
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[0043] 将化合物6(652g，2.87mo 1)溶于甲醇（1.5L)，冰浴下分批加入棚氨化钢（108.6g， 2.87mol)并保持反应体系溫度0-5°C，升至室溫揽拌0.5小时。将反应体系浓缩后，加入水 (3L)和甲基叔下基酸(3L)分层，水相用甲基叔下基酸（I.化X3)，合并有机相，盐水洗涂，硫 酸钢干燥，过滤浓缩得到无色油状化合物7(655g)，无需进一步纯化，直接用于下一步反应。
[0044] Ih NMR(400MHz，CDC13): S4.30-4.00 (m，2H)，3.65-3.50(m，1H)，2.75-2.5