抗病毒药物及组合物的制作方法
【专利说明】
[0001] 本申请是2014年8月14日提交的中国专利申请号2014103999347的分案申请。
技术领域
[0002] 本发明设及一种抗病毒药物及其药物组合物，具体设及抗人类免疫缺乏病毒 化IV)的药物及其药物组合物，特别是设及一种可作为逆转录病毒蛋白酶抑制剂的药物，该 逆转录病毒蛋白酶抑制剂具有式I所示的化学结构。
【背景技术】
[0003] 人类免疫缺乏病毒化IV)是一种导致AIDS及其相关病变的病原性反转录病毒。由 于HIV的发现，对抗AIDS的抗病毒化学疗法的发展已成为积极研究重点。有关AIDS的分子目 标的研究参见Mitsua等人的文献(Science, 1990，pp. 1533-154) eHIV蛋白酶化IV PR)及天 口冬胺酷基蛋白酶首先被克拉玛化ramer)等人(Science 231,1580(1986))认为是AIDS疗 法的可能目标。从此W后，即广泛地确认HIV PR抑制剂在治疗AIDS时作为有效制剂的潜在 用途，有关HIV PR的医疗用途参见托马希里(Tomaselli)等人的文献(Chimica，0ggi，1991 年5月，PP.6-27)及J.P.胡弗化Uff)等人的文献(J.Med.Chem.34,2341-2327( 1991))。在传 统模拟天口冬胺酷基蛋白酶的过渡状态中，径基乙締、二径基乙締、径基乙胺和次麟酸电子 等排物(Bostere)似乎和HIV PR具有最大亲合力。许多HIV PR的抑制剂已在不同细胞系统 中，在毫微摩尔范围的浓度呈现抗病毒活性，且已说明在专利文献中。
[0004] HIV蛋白酶在病毒复制过程中的主要作用是将gag和gag-pol基因产物裂解成病毒 成熟所需要的结构蛋白（基质、壳、核壳)和酶类(蛋白酶、整合酶、逆转录酶），从而进一步完 善病毒结构。蛋白酶抑制剂(PI)就是阻止前体蛋白质裂解，导致无感染病毒颗粒的堆积。
[0005] 药效构象研究表明，运类化合物的作用机制是主要W氨健的方式分别与蛋白酶的 Asp 25，Cly 27和Asp 29残基相互作用，与蛋白酶活性基团中的氨基酸残基形成体相互作 用，从而达到抑制蛋白酶活性的目的，进而阻遏了艾滋病病毒的复制，达到抗病毒作用。蛋 白酶抑制剂可进入包括外周血在内的多种组织器官而发挥抗病毒作用，因而疗效深入而持 久。
[0006] 目前，已在临床广泛应用的HIV蛋白酶抑制剂有:沙奎那韦（saquinavir)、巧地那 韦（indinavir)、利托那韦(ritonavir)、奈非那韦(neIf inavir)、安普那韦(amprenavir)和 洛匹那韦Qopinavir)。2003年又有atazanavir和fosamprenavir两个新的蛋白酶抑制剂通 过了美国FDA的审批。由化istol-Myers Squit)b公司研发的atazanavir是一种每天只需服 用一次的全新的蛋白酶抑制剂。它对膜岛素和脂肪代谢影响非常小，病人没有腹泻等副作 用。能轻度增加胆红素水平，个别患者出现黄痘等，但病人很少因此而停止用药。
[0007] 运些蛋白酶抑制剂虽然能抑制HIV复制，但不能彻底消灭体内的病毒，也不能阻止 体内耐药毒株的出现和传播。蛋白酶抑制剂PI应用后不仅体内病毒的数量明显下降，同时 淋己细胞中T辅助细胞-CD4细胞则有所增加。然后长期使用运些蛋白酶抑制剂产生明显的 毒副作用和耐药性。脂代谢素乱是多种副作用中最突出且最复杂的，临床表现为面部和外 周脂肪消耗，腹、背、胸部脂肪积聚。病人出现高甘油=醋血症和高胆固醇血症、乳酸和血糖 升高、对膜岛素产生耐药性等。其次是耐药性，尤其是交叉耐药性是导致临床治疗失败的一 个主要原因。研究表明，发生PI耐药的机制比NR口和NNRTI更复杂，往往设及多点基因突变。 一般来说，蛋白酶底物结合区单一突变，可使病毒对药物的耐受性增加10倍。若蛋白酶Sl亚 区82位鄉氨酸或84位异亮氨酸被取代，则耐受性可增至30倍，如果82与84位残基同时突变， 可使药物治疗效果下降100倍。使高剂量PI会比使用低剂量PI延迟耐药性的产生，与核巧类 药物的联合应用也能减少耐药性的产生。还有耐药性的产生也由于高的病毒复制速率，逆 转录酶在逆转录过程中的出错和在蛋白酶抑制剂的选择性作用下的进化结果。另外PI其复 杂的服用方法、屯、血管疾病高风险使它不适应于依从性差、糖尿病、屯、血管疾病的患者。
[0008] 已知W下式I化合物是一种有效的逆转录病毒蛋白酶抑制剂
[0009]
[0010] 其分子式：C32H"N6Na209P，分子量730.66，其典型的英文名可W称为：t-Butyl3-isopropyl-3-[(2S,3S)-2-Phosphonooxy-3-(N-quin3ldoyl-L-3sp3r3ginyl)3min0-4-地eny化UtyIcarbazate Disodium,典型的中文名可称为：3-异丙基-3-[(2S,3S)-2-麟簇氧 基-3-(N-哇嘟酷基-k天口冬酷基)氨基-4-苯基下基阱基甲酸叔下醋二钢，或者典型的中 文名可称为:3-异丙基-3-[ (2S,3S)-2-麟簇氧基-3-(N-哇嘟酷基-L-天口冬酷基)氨基-4-苯基下基阱基甲酸叔下醋二钢。
[0011] 在式I化合物的结构式中，连接于苯基和异丙基之间的下基的2位和3位碳均为手 性碳。
[0012] 尽管制药工作者在药品质量控制中有较强的能力在药品生产企业对原料药实现 有效的控制;但是，当将原料药物制成制剂W后，进入流通领域，W及进入临床应用中时，非 生产企业人员(包括物流人员、医护人员、患者等)对制剂的内在的把控能力会大大减弱。
[0013] 因此，提供一种具有优良品质例如具有稳定药学特征的产品，特别是式I化合物的 原料药或者由其制成的制剂，仍然是本领域技术人员令人期待的。
【发明内容】
[0014] 本发明的目的在于提供一种具有优良品质例如具有稳定药学特征的产品，特别是 式I化合物的原料药或者由其制成的制剂。本发明人已经出人意料地发现，通过将式I化合 物的原料药中的杂质Ib控制在一定范围W下时，该原料药与常规的药用辅料特别是糖类组 合W制成药物制剂时，该种药物制剂具有优异的稳定性特别是杂质Ia的增长可W维持在非 常低的范围内。本发明基于此发现而得W完成。
[0015] 为此，本发明第一方面提供了一种药用原料药，其活性成分为W下式I化合物：
[0016]
[0017] 根据本发明第一方面任一实施方案的药用原料药，其中含有97% W上的式I化合 物，例如含有97.5% W上的式I化合物，例如含有98% W上的式I化合物。
[0018] 根据本发明第一方面任一实施方案的药用原料药，其中含有97%~103%的式I化 合物，例如含有97.5 %~102.5 %上的式I化合物，例如含有98 %~102 %的式I化合物。
[0019] 根据本发明第一方面任一实施方案的药用原料药，其中还含有(例如痕量的）作为
杂质存^ AA M 了斗T-/I'么;
[0020] 该式Ia化合物是式I化合物的未憐酸醋化的 一- 打 化合物，其分子式:〔32出2佩〇6，分子量606.72。而式I化合物的分子式:〔32此1佩化2〇9?，分子量 730.66。
[0021] 在本发明中，式Ia化合物亦可称为杂质Ia或者可称为Ia或者可称为Ia杂质或者其 它类似称谓。
[0022] 根据本发明第一方面任一实施方案的药用原料药，其中相对于式I化合物而言，式 Ia化合物的含量小于2%，例如小于1.75%，例如小于1.5%，例如小于1.25%，例如小于 1.0%，例如小于0.75%。
[0023] 根据本发明第一方面任一实施方案的药用原料药，其中相对于式I化合物而言，式 Ia化合物的含量为0.002~2%，例如为0.002~1.75%，例如为0.002~1.5%，例如为0.002 ~1.25%，例如为0.002~1.0%，例如为0.002~0.75%。
[0024] 在本发明中，短语"对于式I化合物而言，式Ia化合物的含量"是指对于所设及的物 料中，式Ia化合物相对于式I化合物的量。例如对于某一物料中若其中包含IOOmg式I化合 物，经测定其中还包含有〇.5mg的式Ia化合物，则对于式I化合物而言，式Ia化合物的量为 0.5%。对于其它杂质相对于式I化合物的量的类似表述亦有类似含义。上述"含量"亦可通 过本发明【HPLC-A】法测定得到。
[0025] 根据本发明第一方面任一实施方案的药用原料药，其照本发明【册LC-A】法测定， 其中式I a化合物峰面积与式I化合物峰面积的比小于2 %，例如小于1.7 5 %，例如小于 1.5%，例如小于1.25%，例如小于1.0%，例如小于0.75%。
[0026] 根据本发明第一方面任一实施方案的药用原料药，其照本发明【册LC-A】法测定， 其中式Ia化合物峰面积与式I化合物峰面积的比为0.002~2%，例如为0.002~1.75%，例 如为0.002~1.5%，例如为0.002~1.25%，例如为0.002~1.0%，例如为0.002~0.75%。
[0027] 根据本发明第一方面任一实施方案的药用原料药，其照本发明【册LC-A】法测定， 其中式I化合物峰面积与式Ia化合物峰面积的比大于50,例如大于57,例如大于67,例如大 于80,例如大于100,例如大于133。
[0028] 根据本发明第一方面任一实施方案的药用原料药，其照本发明【册LC-A】法测定， 其中式I化合物峰面积与式Ia化合物峰面积的比为50~50000,例如为57~50000,例如为67 ~50000，例如为80~50000，例如为100~50000，例如为133~50000。
[0029] 已经发现，式Ia化合物体内行为特征从药学角度讲远不及式I化合物甚至是不能 接受的，因此在本发明第一方面的药用原料药中（W及本发明第二方面的药物组合物中）将 式Ia化合物的量控制在一定量W下是有必要的。例如可W参考本领域一般对杂质的控制限 度要求(通常为<1 %，例如<0.75%)。
[0030] 根据本发明第一方面任一实施方案的药用原料药，其中还含有(例如痕量的）作为 杂质存巧的W下立化化合物.
[0031]
亥式Ib化合物是式Ia化合物的次憐酸醋。
[0032] 在本发明中，式Ib化合物亦可称为杂质Ib或者可称为Ib或者可称为Ib杂质或者其 它类似称谓。
[0033] 根据本发明第一方面任一实施方案的药用原料药，其中相对于式I化合物而言，式 Ib化合物的含量小于1 %，例如小于0.75 %，例如小于0.5 %，例如小于0.4 %，例如小于 0.3%，例如小于0.25%。
[0034] 根据本发明第一方面任一实施方案的药用原料药，其中相对于式I化合物而言，式 化化合物的含量为0.002~1 %，例如为0.002~0.75%，例如为0.002~0.5%，例如为0.002 ~0.4%，例如为0.002~0.3%，例如为0.002~0.25%。
[0035] 根据本发明第一方面任一实施方案的药用原料药，其照本发明【册LC-A】法测定， 其中式I b化合物峰面积与式I化合物峰面积的比小于1 %，例如小于0.7 5 %，例如小于 0.5%，例如小于0.4%，例如小于0.3%，例如小于0.25%。
[0036] 根据本发明第一方面任一实施方案的药用原料药，其照本发明【册LC-A】法测定， 其中式Ib化合物峰面积与式I化合物峰面积的比为0.002~1 %，例如为0.002~0.75%，例 如为0.002~0.5%，例如为0.002~0.4%，例如为0.002~0.3%，例如为0.002~0.25%。
[0037] 根据本发明第一方面任一实施方案的药用原料药，其照本发明【册LC-A】法测定， 其中式I化合物峰面积与式化化合物峰面积的比大于100,例如大于133,例如大于200,例如 大于250,例如大于333,例如大于400。
[0038] 根据本发明第一方面任一实施方案的药用原料药，其照本发明【册LC-A】法测定， 其中式I化合物峰面积与式化化合物峰面积的比为100~50000,例如为133~50000,例如为 200~50000，例如为250~50000，例如为333~50000，例如为400~50000。
[0039] 已经发现，当含有一定量式化化合物的本发明第一方面药用原料药与作为某些常 规药用辅料特别是糖类混合时，其中杂质式Ia化合物会随着物料的胆藏时间延长而出现与 式化化合物含量有关的增长趋势。即，当药用原料药与此类药用辅料混合时，该药用原料药 中的式Ib化合物高达一定量W上时，式Ib化合物量越高则式Ia化合物增长越大;而将该药 用原料药中的式Ib化合物控制在一定量W下时，在该药用原料药与上述药用辅料混合时其 中式Ia化合物的增长不明显。运是完全出人意料的，并且具有显著的制药意义，因为作为一 种药用原料药，特别是在将其制成口服给药的药用制剂时，糖类例如乳糖、甘露醇、山梨醇、 薦糖等对于制备此类口服给药制剂是极具价值的；而当该药用原料药中的式化化合物的量 控制在一定量W下时，其所制成的口服制剂随着胆藏时间的延长，作为杂质的式Ia化合物 不会明显地增长，运对于给临床提供一种安全性良好的制剂是极为有益的。但是当该药用 原料药中的式Ib化合物的量较高是地，该药用原料药无法与上述辅料一起制备口服制剂， 运将大大限制该药用原料药在制备制剂时辅料的选择范围，因为运类辅料是制剂学上廉价 且好用的辅料。
[0040]根据本发明，其中所述【册LC-A】法是一种高效液相色谱法，其可用于同时测定各 种物料(包括本发明的药用原料药W及由该药用原料药制成的药物组合物）中的式I化合 物、式Ia化合物、式Ib化合物=者的含量。
[0041 ]根据本发明，设及的【HPLC-A】法具体如下：
[0042] (i)色谱条件：
[0043] 照中国药典2010年版二部附录V D所载高效液相色谱法进行，
[0044] 色谱柱：固定相为十八烷基硅烷键合硅胶的色谱柱[该色谱柱是典型的Cis色谱柱， 其可W容易地从商业途径购得，例如Diamonsil Cis柱、Phenomenex Gemini Cis柱等，在本 发明下文的具体试验中，如未另外说明，使用的是Diamonsil Cis色谱柱，其规格可W为250 X4.6mm，如m]，
[0045] 流速：l.〇ml/min，
[0046] 流动相A:0.01mol/L憐酸二氨钟溶