一种高效分离纯化Diosmin的方法

文档序号:9919296阅读:845来源:国知局
一种高效分离纯化Diosmin的方法
【技术领域】
[0001 ]本发明设及一种高效分离纯化Diosmin的方法。
【背景技术】
[0002] Diosmin(又名,香叶木巧)为黄酬巧类化合物,具有较强的生理功能,能够增强静 脉的张力,治疗静脉淋己功能不全等相关疾病;还能够减少微循环渺滞,改善淋己回流,减 轻水肿,具有治疗手术后水肿、糖尿病并发症、前列腺增生及肛肠常见疾病的功效;同时,香 叶木巧还具有多数黄酬类化合物的抗氧化活性,在实验中发现其对于福射引起的氧化损伤 有较强的修复作用;近年来在癌症预防及治疗方面备受关注。
[0003] 目前国际上应用的Diosmin为合成品,国内分离纯化工艺不成熟,进口Diosmin价 格昂贵,现研究发现蓬子菜中含有丰富的香叶木巧,蓬子菜原料资源丰富,在民间药用历史 悠久,具有清热桂湿、活血止痒的功效,近十余年来临床应用不同剂型治疗下肢静脉炎疗效 显著。

【发明内容】

[0004] 本发明目的是为了解决现有Diosmin分离纯度低,进口价格昂贵的问题,而提供一 种高效分离纯化D i O Sm i n的方法。
[0005 ]本发明的一种高效分离纯化D i O Sm i n的方法按W下步骤进行:
[0006] -、样品预处理:取干燥的蓬子菜,用浓度为70%的乙醇溶液回流提取2次,每次 1.化~2.化,第一次提取的料液比为1:10,第二次提取的料液比为1:8,将2次的提取液过 滤,减压浓缩回收乙醇溶液,得到浸膏;
[0007] 二、一次分离纯化:将步骤二得到的浸膏溶于水,得到一次上样液,所述的一次上 样液中浸膏的浓度为800mg/L~900mg/L,用一次上样液对AB-8大孔吸附树脂柱进行上样吸 附,吸附条件为:溫度为15~25 °C,流速为1.5BV/h~2.5BV/h,一次上样液的量为8BV~ 10BV,完成吸附;完成吸附后进行脱附,脱附条件为:W浓度为50%的乙醇溶液为脱附剂,流 速为0.8BVA~1.2BVA,脱附剂的量为4BV~她V,完成脱附,得到Diosmin-次纯化液;
[000引=、二次分离纯化处理:将步骤二得到的Diosmin-次纯化液加水稀释,得到二次 上样液,所述的二次上样液中步骤二得到的Diosmin-次纯化液的浓度为1150mg/L~ 1250mg/L,然后用二次上样液对聚酷胺柱进行上样吸附,吸附条件为:溫度为15~25°C,流 速为3.5BVA~4.5BVA,二次上样液的量为8BV~IOBV,完成吸附;完成吸附后进行脱附,脱 附条件为:W浓度为30 %的乙醇溶液为脱附剂,流速为0.8BVA~1.2BVA,脱附剂的量为 4BV~她V,完成脱附,得到Diosmin。
[0009] 本发明利用大孔树脂在蓬子菜中首次富集、分离、并纯化了含量较大、纯度较高的 Diosmin(香叶木巧),工艺路线成熟,成本低,溶剂毒副作用小,回收率高,适于工业化生产。 本发明有W下的优点:
[0010] 1、大孔吸附树脂具有良好的吸附性能,对于天然产物的分离纯化应用广泛且分离 效果良好,本发明中对Diosmin(香叶木巧)的分离纯度可达98%。
[0011] 2、蓬子菜原料资源丰富,在民间药用历史悠久,价格低廉。
[0012] 3、本发明方法简单可行、经济效益良好,有利于推广和应用。
[0013] 4、本发明的产品纯度高,有望解决Diosmin(香叶木巧)纯品靠进口,价格高昂等问 题。
【附图说明】
[0014] 图1为A:环境对照组(未福射)、B: 20mGy福射对照组和E: 2000mGy福射对照组中小 鼠肝脏中的化-ZnSOD在福射后转录水平效果对比图;
[001引图2为B: 20mGy福射对照组、C: 20mGy福射给药组(喂食实施例1产品)和D: 20mGy福 射阳性给药组中小鼠肝脏中的化-ZnSOD在福射后转录水平效果对比图;
[0016] 图3为E : 2000mGy福射对照组、F: 2000mGy福射给药组(喂食实施例1产品)和G: 2000mGy福射阳性给药组中小鼠肝脏中的化-ZnSOD在福射后转录水平效果对比图。
【具体实施方式】
【具体实施方式】 [0017] 一:本实施方式的一种高效分离纯化Diosmin的方法按W下步骤进 行:
[0018] 一、样品预处理:取干燥的蓬子菜,用浓度为70%的乙醇溶液回流提取2次,每次 1.化~2.化,第一次提取的料液比为1:10,第二次提取的料液比为1:8,将2次的提取液过 滤,减压浓缩回收乙醇溶液,得到浸膏;
[0019] 二、一次分离纯化:将步骤二得到的浸膏溶于水,得到一次上样液,所述的一次上 样液中浸膏的浓度为800mg/L~900mg/L,用一次上样液对AB-8大孔吸附树脂柱进行上样吸 附,吸附条件为:溫度为15~25 °C,流速为1.5BV/h~2.5BV/h,一次上样液的量为8BV~ 10BV,完成吸附;完成吸附后进行脱附,脱附条件为:W浓度为50%的乙醇溶液为脱附剂,流 速为0.8BVA~1.2BVA,脱附剂的量为4BV~她V,完成脱附,得到Diosmin-次纯化液;
[0020] =、二次分离纯化处理:将步骤二得到的Diosmin-次纯化液加水稀释,得到二次 上样液,所述的二次上样液中步骤二得到的Diosmin-次纯化液的浓度为1150mg/L~ 1250mg/L,然后用二次上样液对聚酷胺柱进行上样吸附,吸附条件为:溫度为15~25°C,流 速为3.5BVA~4.5BVA,二次上样液的量为8BV~IOBV,完成吸附;完成吸附后进行脱附,脱 附条件为:W浓度为30 %的乙醇溶液为脱附剂,流速为0.8BVA~1.2BVA,脱附剂的量为 4BV~她V,完成脱附,得到Diosmin。
[0021 ]【具体实施方式】二:本实施方式与【具体实施方式】一不同的是:步骤一中取干燥的蓬 子菜,用浓度为70%的乙醇溶液回流提取2次,每次化。其他步骤及参数与【具体实施方式】一 相同。
[0022]【具体实施方式】本实施方式与【具体实施方式】一或二不同的是:步骤二中所述的 AB-8大孔吸附树脂柱制备方法如下:①取AB-8大孔吸附树脂用浓度为95%的乙醇溶液浸泡 24h进行溶胀,然后将溶胀后的AB-8大孔吸附树脂置于圆底烧瓶内,用浓度为95%的乙醇溶 液回流洗脱地~化,然后进行湿法装柱;②装柱后用浓度为95%的乙醇溶液Wl. 5BVA~ 2.5BVA的流速通过树脂层至流出液加水不变白色混浊为止;③用水W2BVA的流速通过树 脂层洗尽乙醇溶液;④用浓度为5 %的HCl溶液W4BV~6BV体积和4BVA~6BVA流速淋洗, 然后用蒸馈水洗至流出液抑值为6~7;⑤用浓度为2%的化Cl溶液W4BV~6BV体积和4BVA ~6BVA流速淋洗,然后用蒸馈水洗至流出液pH值为7~8,得到AB-8大孔吸附树脂柱。其他 步骤及参数与【具体实施方式】一或二相同。
【具体实施方式】 [0023] 四:本实施方式与一至=之一不同的是:步骤二中所 述的一次上样液中浸膏的浓度为850mg/L。其他步骤及参数与一至S之一相 同。
【具体实施方式】 [0024] 五:本实施方式与一至四之一不同的是:步骤二中所 述的吸附条件为:溫度为20°C,流速为2BVA,一次上样液的量为9BV,完成吸附。其他步骤及 参数与一至四之一相同。
【具体实施方式】 [0025] 六:本实施方式与一至五之一不同的是:步骤二中所 述的脱附条件为:W浓度为50%的乙醇溶液为脱附剂,流速为IBVA,脱附剂的量为5BV,完 成脱附。其他步骤及参数与一至五之一相同。
【具体实施方式】 [0026] 屯:本实施方式与一至六之一不同的是:步骤=中所 述的聚酷胺柱制备方法如下:①取聚酷胺用浓度为95%的乙醇溶液浸泡2地进行溶胀,然后 将溶胀后的聚酷胺置于圆底烧瓶内,用浓度为95%的乙醇溶液回流洗脱4h~化,然后进行 湿法装柱;②装柱后用浓度为95%的乙醇溶液W3BV~4BV体积和3BVA~4BVA的流速通过 聚酷胺层至流出液蒸干后无残渣为止;③用浓度为5 %的化0扣容液W2BV~2.5BV体积和 2BVA~2.5BVA的流速通过聚酷胺层进行洗脱;④用蒸馈水WIBV体积和IBVA的流速通过 聚酷胺层进行洗脱;④用浓度为10 %的醋酸水溶液W2BV~2.5BV体积和2BVA~2.5BVA流 速淋洗,然后用蒸馈水洗至流出液pH值为中性;得到聚酷胺柱。其他步骤及参数与具体实施 方式一至六之一相同。
【具体实施方式】 [0027] 八:本实施方式与一至屯之一
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