使用溴结构域和额外终端(bet)蛋白抑制剂的用于癌症的组合疗法
【专利摘要】本发明提供使用溴结构域和额外终端BET蛋白抑制剂与某些化学治疗药物的组合治疗癌症的方法。
【专利说明】使用溴结构域和额外终端(BET)蛋白抑制剂的用于癌症的组 合疗法
[0001 ] 相关申请
[0002] 本申请根据35U.S.C.§119(e)要求2013年11月8日提交的美国临时申请第61/901， 908号的益处，所述美国临时申请的内容以全文引用的方式并入本文中。
[0003] 政府支持
[0004] 本发明在政府支持下在由国家卫生研究院(National Institutes of Health)授 予的拨款号CA122794、CA140594、CA137181、CA137008、CA147940、CA137008-01、 1U01CA141576下和在由Lung SPORE授予的拨款号P50CA090578下作出。政府拥有本发明中 的某些权利。
【背景技术】
[0005] 癌症作为一个群组占每年所有死亡原因的约13%，其中最常见的是:肺癌（140万 例死亡）、胃癌(740,000例死亡）、肝癌(700,000例死亡）、结肠直肠癌(610,000例死亡)和乳 癌（460，000例死亡）。三种最常见的儿童癌症是白血病（34%)、脑肿瘤（23%)和淋巴瘤 (12%)。儿童癌症的比率在美国在1975年到2002年之间每年增加0.6%，并且在欧洲在1978 年与1997年之间每年增加1.1 %。这使得侵袭性癌症成为发达国家的主导死亡原因并且成 为发展中国家的第二大死亡原因。
[0006] 已经开发了众多抗癌药物，包括激酶抑制剂和抗细胞凋亡剂。然而，其对患者的毒 性依然是主要问题。举例来说，激酶抑制剂（例如达沙替尼（dasatinib)和埃罗替尼 (erlotinib))用于治疗癌症，但其不良作用仍然是一个严重问题。达沙替尼增加了罕见但 严重病状的风险，其中在肺动脉中存在异常高的血压(肺高血压，PAH)，而在服用埃罗替尼 的患者中已经观察到严重的胃肠道、皮肤和眼部病症。此外，激酶抑制剂的临床功效受耐药 性的发展所限制。因此，需要鉴别可减轻当前抗癌药物的限制的新颖并且有效的治疗策略。
【发明内容】
[0007] 本发明至少部分地基于以下出乎意料的发现：溴结构域和额外终端(BET)蛋白抑 制剂与某些化学治疗药物的组合对治疗具有瘤形成的个体特别有效。因此，本发明提供改 进的治疗瘤形成的方法。根据本发明的一些方面，所述方法包含：以有效治疗所述瘤形成的 量向有需要的个体投与JQ1和/或其类似物与选自由以下组成的群组的激酶抑制剂的组合： MK2206、达沙替尼、AZD6244、克卓替尼（crizotinib)、CYT387、拉帕替尼（Lapatinib)、夫拉 平度(f lavopiridol)、y_27632、埃罗替尼、阿法替尼(Afatinib)、阿西替尼(Axitinib)、伯 舒替尼（Bosutinib)、西妥昔单抗（cetuximab)、福他替尼（Fostamatinib)、吉非替尼 (Gefitinib)、伊马替尼（Imatinib)、拉帕替尼、乐伐替尼（Lenvatinib)、木利替尼 (Mubritinib)、尼罗替尼(Nilotinib)、帕尼单抗(Panitumumab)、帕唑帕尼（Pazopanib)、卢 佐替尼（Ruxolitinib)、索拉非尼（Sorafenib)、舒尼替尼（Sunitinib)、曲妥珠单抗 (Trastuzumab)、凡德他尼(Vandetanib)和维罗非尼(Vemurafenib)。
[0008] 在一些实施例中，所述激酶抑制剂选自由以下组成的群组：克卓替尼、CYT387、拉 帕替尼和夫拉平度。在一些实施例中，JQ1和/或其类似物与所述激酶抑制剂分开、依序或同 时投与。
[0009] 根据本发明的一些方面，提供治疗瘤形成的方法，其包含：以有效治疗所述瘤形成 的量向有需要的个体投与JQ1和/或其类似物与抗细胞凋亡剂的组合。在一些实施例中，所 述抗细胞凋亡剂选自由以下组成的群组:ABT263、ABT199、ABT737和奥巴克拉(obatoclax)。 在一些实施例中，JQ1和/或其类似物与所述抗细胞凋亡剂分开、依序或同时投与。
[0010] 根据本发明的一些方面，提供治疗瘤形成的方法，其包含：以有效治疗所述瘤形成 的量向有需要的个体投与JQ1和/或其类似物与选自由以下组成的群组的抗瘤形成剂的组 合：长春新碱（vincristine)、依托泊苷（etoposide)、17-AAG、阿德希尔（adrucil )、万河 (velcade)、SAHA、多希（doxil)、吉西他滨（gemci tabine)、AZD2281、DBZ、异环磷酰胺 (ifosfamide)、雷利米得(revlimid)、强的松(prednisone)、利妥昔单抗(rituximab)、贝伐 单抗(Bevacizumab)、哌加他尼(Pegaptanib)和雷珠单抗(Ranibizumab)。在一些实施例中， 所述抗瘤形成剂是万珂或吉西他滨。在一些实施例中，JQ1和/或其类似物与所述抗瘤形成 剂分开、依序或同时投与。
[0011] 根据本发明的一些方面，提供治疗瘤形成的方法，其包含：向有需要的个体投与有 效量的JQ1和/或其类似物与坦罗莫司（temsirolimus)或BEZ235的组合，其中坦罗莫司或 BEZ235以其单独不具有抗瘤形成效应的剂量投与。在一些实施例中，JQ1和/或其类似物与 坦罗莫司或BEZ235分开、依序或同时投与。
[0012] 除非另外指示，否则以下实施例同样适用于本文阐述的本发明的各种方面。
[0013] 在一些实施例中，所述个体是哺乳动物。在一些实施例中，所述个体是人类患者。 在一些实施例中，所述个体具有选自由以下组成的群组的瘤形成:肺癌;淋巴瘤，包括弥漫 性大B细胞淋巴瘤和伯基特氏淋巴瘤(Burkitt ' s lymphoma);前列腺癌;基底细胞癌;胆道 癌;膀胱癌;骨癌;脑癌;CNS癌;乳癌;子宫颈癌;绒膜癌;结肠癌;直肠癌;结缔组织癌；消化 系统癌;子宫内膜癌;食道癌;眼癌;头颈癌；胃癌;上皮内赘瘤;肾癌;喉癌；白血病;肝癌;肺 癌;血液赘瘤形成；黑素瘤;骨髓瘤;成神经细胞瘤；口腔癌；卵巢癌;胰脏癌;成视网膜细胞 瘤;横纹肌肉瘤;直肠癌;肾癌;呼吸系统癌；肉瘤;皮肤癌；胃癌;睾丸癌；甲状腺癌;子宫癌； 和泌尿系统癌。在一些实施例中，所述瘤形成是肺癌。在一些实施例中，所述瘤形成是弥漫 性大B细胞淋巴瘤。在一些实施例中，所述瘤形成是伯基特氏淋巴瘤。
[0014] 在一些实施例中，进一步用另一抗瘤形成疗法治疗所述个体。在一些实施例中，所 述另一抗瘤形成疗法是手术、辐射疗法、化学疗法、基因疗法、DNA疗法、病毒疗法、RNA疗法、 辅助疗法、免疫疗法或其组合。在一些实施例中，JQ1和/或其类似物是JQ1。
[0015] 根据本发明的一些方面，提供医药组合物。这些组合物包含有效量的JQ1或其类似 物；和选自由以下组成的群组的激酶抑制剂：MK2206、达沙替尼、AZD6244、克卓替尼、 CYT387、拉帕替尼、夫拉平度、y-27632、埃罗替尼、阿法替尼、阿西替尼、伯舒替尼、西妥昔单 抗、福他替尼、吉非替尼、伊马替尼、拉帕替尼、乐伐替尼、木利替尼、尼罗替尼、帕尼单抗、帕 唑帕尼、卢佐替尼、索拉非尼、舒尼替尼、曲妥珠单抗、凡德他尼和维罗非尼。
[0016]根据本发明的一些方面，提供一种试剂盒，其包含含有以下的包装:含有JQ1或其 类似物的容器；和含有选自由以下组成的群组的激酶抑制剂的容器:M K 2 2 0 6、达沙替尼、 AZD6244、克卓替尼、CYT387、拉帕替尼、夫拉平度、y-27632、埃罗替尼、阿法替尼、阿西替尼、 伯舒替尼、西妥昔单抗、福他替尼、吉非替尼、伊马替尼、拉帕替尼、乐伐替尼、木利替尼、尼 罗替尼、帕尼单抗、帕唑帕尼、卢佐替尼、索拉非尼、舒尼替尼、曲妥珠单抗、凡德他尼和维罗 非尼。
[0017] 本发明的具体实施例的细节阐述于本文中。本发明的其它特征、目标和优势从具 体实施方式、图式、实例和权利要求书将显而易见。
【附图说明】
[0018] 图1描绘展示激酶抑制剂与JQ1之间的协同性的等效线图。低于连接X和Y轴的1到1 线的点是'协同的'，接近线的点是'累加的'，并且高于其的点是拮抗的。
[0019] 图2描绘表示抗细胞凋亡剂与JQ1之间的协同性的等效线图。
[0020] 图3描绘表示抗瘤形成剂与JQ1之间的协同性的等效线图。
[0021]图4描绘表示坦罗莫司或BEZ235与JQ1之间的累加效应的等效线图。
[0022]图5展示单一药剂的剂量反应曲线。
【具体实施方式】
[0023]本发明至少部分地基于以下出人意料的发现：溴结构域和额外终端(BET)蛋白抑 制剂与某些化学治疗药物的组合对治疗具有瘤形成的个体特别有效。如下文描述的实例中 所展示，已经发现，BET溴结构域抑制剂噻吩并-三唑并-1，4-二氮呼(JQ1)与某些化学治疗 剂(例如特定激酶抑制剂和抗细胞凋亡剂）当组合投与时的治疗功效展现协同性。因此，JQ1 和/或其类似物与某些激酶抑制剂、抗细胞凋亡剂和其它特定抗瘤形成剂的组合在治疗瘤 形成方面比个别治疗剂的累加效应更有效。
[0024] 本文所述的治疗剂的组合的协同效应允许使用较低剂量的一或多种治疗剂和/或 频率较低地向具有瘤形成的个体投与药剂。能够利用较低剂量的一或多种治疗剂和/或频 率较低地投与治疗剂降低了与向个体投与药剂相关的毒性而不降低疗法在治疗瘤形成方 面的功效。另外，协同效应导致药剂在预防、管理或治疗瘤形成方面的功效提高。最终，本文 所述的治疗剂的组合的协同效应有助于避免或减少与单独使用任一治疗剂相关的不良或 不希望的副作用。
[0025] 本发明提供使用JQ1和/或其类似物与某些激酶抑制剂、抗细胞凋亡剂和其它特定 抗瘤形成剂的协同组合治疗瘤形成的方法。如本文所用，瘤形成意指人类或动物的其中存 在异常增殖的细胞和/或组织的疾病状态。赘瘤可以是良性的、潜在恶性的（癌前期)或恶性 的(癌症）。
[0026] 可以用本文所述的组合治疗的癌症的实例包括(但不限于)实体肿瘤和血液癌症。 实体肿瘤由以下器官的肿瘤例示：乳房、膀胱、骨、脑、中枢和周边神经系统、结肠、结缔组 织、内分泌腺(例如，甲状腺和肾上腺皮质）、食道、子宫内膜、生殖细胞、头颈、肾、肝、肺、喉 和下咽、间皮瘤、肌肉、卵巢、胰脏、阴茎、前列腺、直肠、肾、小肠、软组织、睾丸、胃、皮肤、输 尿管、阴道和外阴。还包括由成视网膜细胞瘤和韦尔姆斯氏瘤(Wilms'tumor)例示的遗传性 癌症。另外，包括所述器官中的原发肿瘤以及远端器官中的相应继发肿瘤（"肿瘤转移"）。
[0027] 血液癌症由白血病和淋巴瘤的侵袭性和惰性形式，也就是以下各病例示：弥漫性 大B细胞淋巴瘤、非霍奇金氏病(non-Hodgkin's disease)、慢性和急性骨髓性白血病(CML/ AML)、急性成淋巴细胞性白血病（ALL)、慢性淋巴细胞性白血病（CLL)、霍奇金氏病 (Hodgkin's disease)、伯基特氏淋巴瘤、多发性骨髓瘤和T细胞淋巴瘤。还包括骨髓发育不 良综合症、浆细胞瘤形成、副肿瘤综合症、未知原发位点的癌症以及AIDS相关恶性肿瘤。
[0028] 可以用本文所述的组合治疗的良性赘瘤的实例包括(但不限于）良性软组织肿瘤、 骨肿瘤、脑和脊髓肿瘤、眼睑和眼眶肿瘤、肉芽肿瘤、脂肪瘤、脑膜瘤、多发性内分泌瘤形成、 鼻息肉、垂体肿瘤、泌乳素瘤、假脑瘤、脂溢性角化病、胃息肉、甲状腺结节、胰脏囊性赘瘤、 血管瘤、声带结节、息肉和囊肿、卡斯特莱曼病(Castleman disease)、慢性藏毛病、皮肤纤 维瘤、毛发囊肿、化脓性肉芽肿瘤以及幼年型息肉综合症。
[0029] BET(溴结构域和额外终端)蛋白是构成47种含溴结构域的蛋白质的较大家族的子 集的四种紧密相关的含溴结构域的蛋白质(BRD2、BRD3、BRD4和BRDT)。溴结构域是使含溴结 构域的蛋白质靶向组蛋白并且因此影响染色质结构和功能的乙酰基-赖氨酸结合口袋。BET 蛋白溴结构域与染色质的结合调苄基因表达，并且所述结合的小分子抑制对基因表达产生 选择性效应。BET溴结构域的小分子抑制导致选择性杀死宽范围的血液恶性肿瘤和实体肿 瘤内的肿瘤细胞。本领域中已知的BET溴结构域抑制剂的非限制性实例包括已经描述于US 2013/0184264中的JQ1和其类似物，所述专利的公开内容以引用的方式并入本文中。因此， 在一些实施例中，本发明的方法、医药组合物和试剂盒包含US 2013/0184264中描述并且以 引用的方式并入本文中的BET溴结构域抑制剂。本发明进一步涵盖此类化合物的医药学上 可接受的盐。在一些实施例中，本发明的方法、医药组合物和试剂盒包含JQ1或其医药学上 可接受的盐。
[0030] 如本文所用，"激酶"是指催化Y -磷酸酯从ATP转移到蛋白质和肽中的Ser/Thr或 Tyr的侧链上的羟基并且密切参与对各种重要细胞功能的控制的一大类酶，所述细胞功能 可能最值得注意的是:信号转导、分化和增殖。据估算在人体中存在约2,000种不同蛋白激 酶，并且尽管其中的每一者使特定蛋白质/肽底物磷酸化，但其都结合高度保守口袋中的相 同第二底物ATP。约50%的已知致癌基因产物是蛋白质酪氨酸激酶PTK并且其激酶活性已经 展示可引起细胞转化。
[0031] 在一些实施例中，JQ1和/或其类似物以有效治疗瘤形成的量与选自由以下组成的 群组的激酶抑制剂组合投与:MK2206、达沙替尼、AZD6244(司美替尼（Selumetinib))、克卓 替尼、CYT387、拉帕替尼、夫拉平度、y-27632、埃罗替尼、阿法替尼、阿西替尼、伯舒替尼、西 妥昔单抗、福他替尼、吉非替尼、伊马替尼、拉帕替尼、乐伐替尼、木利替尼、尼罗替尼、帕尼 单抗、帕唑帕尼、卢佐替尼、索拉非尼、舒尼替尼、曲妥珠单抗、凡德他尼和维罗非尼。在一些 实施例中，激酶抑制剂选自由以下组成的群组:MK2206、达沙替尼、AZD6244(司美替尼）、克 卓替尼、CYT387、拉帕替尼和夫拉平度。
[0032] 如下文描述的实例中所示，多种激酶抑制剂，包括MK2206、达沙替尼、AZD6244(司 美替尼)和克卓替尼当与JQ1组合投与时得到协同反应。在不希望受理论束缚的情况下，激 酶活化彼此和然后在核中终止的类似路径，其中信号通过转录因子而作用。因为JQ1靶向 BRD4,其是多种转录因子的关键衔接子，所以鉴于本文所述的数据，当本文所述的激酶抑制 剂与JQ1组合投与时预期有协同反应。
[0033]在一些实施例中，JQ1和/或其类似物与抗细胞凋亡剂组合投与。如本文所用，抗细 胞凋亡剂是抑制细胞凋亡的药剂。此类药剂可以是小有机或无机分子。其还可以是自然界 中的核酸或肽。抗细胞凋亡剂的非限制性实例包括48了263^81'199^8了737^8了737和奥巴 克拉。
[0034]在不希望受理论束缚的情况下，假设在JQ1强烈触发G1停滞时，抗细胞凋亡抑制剂 推进细胞进入完全细胞死亡。因此，当抗细胞凋亡剂与JQ1组合投与时预期有协同反应。
[0035]在一些实施例中，JQ1和/或其类似物以有效治疗瘤形成的量与选自由以下组成的 群组的抗瘤形成剂组合投与：长春新碱、依托泊苷、17-AAG、阿德希尔、万珂、SAHA、多希、吉 西他滨、AZD2281 (奥拉帕尼（01&?&413))、082、异环磷酰胺、雷利米得（来那度胺 (lenalidomide))、强的松、利妥昔单抗、贝伐单抗、哌加他尼和雷珠单抗。在一些实施例中， 抗瘤形成剂选自由以下组成的群组:长春新碱、依托泊苷、17-AAG、阿德希尔、万珂和吉西他 滨。
[0036]在不希望受理论束缚的情况下，假设因为靶向DNA复制的化合物展示与JQ1的协同 反应(例如，拓扑异构酶抑制剂，例如依托泊苷），所以靶向DNA复制的其它化合物（例如多 希、AZD2281和异环磷酰胺）当与JQ1组合投与时也预期可展现协同反应。
[0037]在一些实施例中，JQ1和/或其类似物与坦罗莫司或BEZ235组合投与，其中坦罗莫 司或BEZ235以其单独不具有抗瘤形成效应的剂量投与。如下文描述的实例中所展示，坦罗 莫司和BEZ235在其单独不具有效应的剂量下增加JQ1的效应。坦罗莫司的推荐剂量是每周 一次经30-60分钟IV输注25mg。因此，在一些实施例中，坦罗莫司以每周20mg、15mg、10mg或 5mg的剂量与JQ1-起投与，在一些实施例中，每周一次经30-60分钟IV输注。在一些实施例 中，BEZ235 以每天一次经口 50mg、100mg、150mg、200mg、250mg、300mg、350mg、400mg、450mg、 500mg、650mg、700mg、750mg 或 800mg 的剂量与 JQ1 -起投与。
[0038] 如本文所用，术语"组合"是指使用多于一种治疗剂。使用术语"组合"不限制向具 有瘤形成的个体投与治疗剂的次序。第一治疗剂(例如JQ1或其类似物)可以在向具有瘤形 成的个体投与本文所述的第二治疗剂(例如激酶抑制剂、抗细胞凋亡剂或抗瘤形成剂)之前 (例如，在之前5分钟、15分钟、30分钟、45分钟、1小时、2小时、4小时、6小时、12小时、24小时、 48小时、72小时、96小时、1周、2周、3周、4周、5周、6周、8周或12周）；与投与所述第二治疗剂 同时;或在投与所述第二治疗剂之后(例如，在之后5分钟、15分钟、30分钟、45分钟、1小时、2 小时、4小时、6小时、12小时、24小时、48小时、72小时、96小时、1周、2周、3周、4周、5周、6周、8 周或12周)投与。因此，JQ1和/或其类似物可以与本文所述的第二治疗剂(例如激酶抑制剂、 抗细胞凋亡剂或抗瘤形成剂)分开、依序或同时投与。
[0039] 预期被投药的"个体"包括(但不限于)人类;商业相关哺乳动物，例如牛、猪、马、绵 羊、山羊、猫和/或狗;和禽类，例如，商业相关禽类，例如鸡、鸭、鹅和/或火鸡。需要治疗的个 体是鉴别为具有瘤形成的个体，即，已经由医生(例如，使用本领域中熟知的方法)诊断为具 有瘤形成的个体。在一些实施例中，需要治疗的个体是疑似具有或罹患瘤形成的个体，例如 呈现一或多种指示瘤形成的症状的个体。术语"需要治疗的个体"进一步包括曾经具有瘤形 成但其症状已经改善的人。瘤形成的一或多种症状或临床特征取决于肿瘤的类型和位置。 举例来说，肺肿瘤可能会导致咳嗽、呼吸短促或胸部疼痛。结肠肿瘤可能会导致体重减轻、 腹泻、便秘、缺铁性贫血和大便带血。以下症状在大多数肿瘤的情况下出现:发冷、疲乏、发 热、食欲不振、不适、盗汗和体重减轻。
[0040]如本文所用，术语"投与（administer/administering/administration)" 是指植 入、吸收、摄取、注入或吸入一或多种治疗剂。
[0041 ] 如本文所用，术语"治疗（treatment/treat/treat ing)"是指逆转、缓解、延迟瘤形 成的发作或抑制瘤形成的进展。在一些实施例中，治疗可以在一或多种征象或症状已经出 现或已经被观察到之后投与。在其它实施例中，治疗可以在不存在瘤形成的征象或症状的 情况下投与。举例来说，治疗可以在症状发作之前向易感个体(例如，根据症状病史和/或根 据遗传学或其它易感性因素)投与。还可以在症状已经消退之后继续进行治疗，例如以延迟 或预防复发。
[0042] "有效量"是指足以引发所要生物反应，即，治疗瘤形成的量。如本领域的普通技术 人员将了解，本文所述的化合物的有效量可以取决于例如以下的因素而变化:所要生物端 点、化合物的药物动力学、正治疗的病状、投药模式以及个体的年龄和健康。有效量包括(但 不限于)减缓、减少、抑制、改善或逆转一或多种与瘤形成相关的症状所需的量。举例来说， 在治疗瘤形成中，此类术语可以指肿瘤大小的减小。
[0043] 化合物的有效量可以在一或多个剂量投与中从约0.001mg/kg到约1000mg/kg变 化，持续一或几天（取决于投药模式）。在某些实施例中，有效量从约〇.〇〇lmg/kg到约 1000mg/kg、从约 0 .Olmg/kg 到约 750mg/kg、从约 0 ? lmg/kg 到约 500mg/kg、从约 1 .Omg/kg 到约 250mg/kg、和从约 10 ? 0mg/kg到约 150mg/kg 变化。
[0044] 在一些实施例中，进一步用一或多种额外抗瘤形成疗法治疗个体。举例来说，个体 可以经历手术、福射疗法、化学疗法、基因疗法、DNA疗法、病毒疗法、RNA疗法、辅助疗法、免 疫疗法或其组合。
[0045] 本文提供的化合物可以通过任何途径投与，所述途径包括经肠(例如，经口）、非经 肠、静脉内、肌肉内、动脉内、髓内、鞘内、皮下、室内、经皮、皮内、经直肠、阴道内、腹膜内、局 部(如通过散剂、软膏、乳膏和/或滴剂）、经粘膜、经鼻、经颊、舌下;通过气管内滴注、支气管 滴注和/或吸入;和/或以口腔喷雾、鼻腔喷雾和/或气雾剂形式。特别预期的途径是经口投 药、静脉内投药(例如，全身性静脉内注射）、借助血液和/或淋巴供应区域性投药、和/或直 接投药到受影响位点。一般来说，最适当的投药途径将取决于多种因素，包括药剂的性质 (例如，其在胃肠道环境中的稳定性）和/或个体的情况（例如，个体是否能够耐受经口投 药)。
[0046] 实现有效量所需的化合物的确切量将随各个体而变化，取决于例如个体的物种、 年龄和一般情况、副作用或病症的严重程度、特定化合物的身份、投药模式等。所要剂量的 递送可以是一天三次、一天两次、一天一次、每隔一天、每隔两天、每周、每两周、每三周或每 四周。在某些实施例中，所要剂量可以使用多次投药递送(例如两次、三次、四次、五次、六 次、七次、八次、九次、十次、十一次、十二次、十三次、十四次或超过十四次投药）。
[0047] 在某些实施例中，用于向70kg成年人一天一或多次投药的化合物的有效量可以包 含每个单位剂型约0 ? OOOlrng到约3000mg、约0 .OOOlmg到约2000mg、约0 ? OOOlmg到约lOOOrng、 约0 ? OOlmg到约 lOOOrng、约0 ? Olmg到约 lOOOrng、约0 ? lmg到约 lOOOrng、约 lmg到约 lOOOrng、约 lmg到约100mg、约1 Omg到约1 OOOrng、或约100mg到约1 OOOrng化合物。
[0048] 在某些实施例中，本文提供的化合物可以按足以一天一或多次递送每天约 0.00 lmg/kg到约 100mg/kg、约0 .Olmg/kg 到约50mg/kg、优选约0 ? lmg/kg 到约40mg/kg、优选 约0? 5mg/kg到约 30mg/kg、约0.01mg/kg到约 10mg/kg、约0? lmg/kg到约 10mg/kg、并且更优选 约lmg/kg到约25mg/kg个体体重的剂量水平投与，以获得所要治疗效果。
[0049] 应了解，如本文所述的剂量范围提供向成人投与所提供医药组合物的指南。向例 如儿童或青少年投与的量可以由开业医生或本领域技术人员确定并且可以低于向成人投 与的量或与向成人投与的量相同。
[0050] 本文所述的医药组合物可以通过药理学领域中已知的任何方法制备。一般来说， 此类制备方法包括以下步骤:使活性成分(例如JQ1或其类似物)与载剂或赋形剂和/或一或 多种其它辅助成分结合，和然后必要和/或需要时，使产物成形和/或包装成所要单或多剂 量单位。医药组合物可以按散装形式、按单一单位剂量形式和/或按多个单一单位剂量形式 制备、包装和/或销售。如本文中所用，"单位剂量"是包含预定量的活性成分的医药组合物 的个别量。活性成分的量通常等于将向个体投与的活性成分的剂量和/或这个剂量的适宜 部分，例如这个剂量的二分之一或三分之一。
[0051] 本发明的医药制剂可以包括医药学上可接受的载剂或稀释到医药学上可接受的 载剂中。如本文所用，术语"医药学上可接受的载剂"意指一或多种相容填充剂、稀释剂或其 它此类物质，其适用于向人类或其它哺乳动物(例如狗、猫或马)投药。术语"载剂"表示天然 或合成的有机或无机成分，活性成分与所述载剂组合以促进应用。载剂能够与本发明的制 剂和与彼此共混，其方式为使得不存在将会实质上削弱所要医药功效或稳定性的相互作 用。适用于经口、皮下、静脉内、肌肉内等调配物的载剂可以见于雷明顿氏医药科学 (Remington's Pharmaceutical Sciences)，马克出版公司（Mack Publishing Company), 伊斯顿(Easton),宾夕法尼亚州(Pa)中。
[0052]通过以下实例进一步说明本发明，所述实例决不应理解为进一步限制。在整个本 申请中引用的所有参考文献(包括文献参考、授予的专利、公开的专利申请以及共同待决专 利申请)的全部内容特此以引用的方式明确地并入。
[0053] 实例 [0054]材料和方法
[0055] 针对含有p53/kRas突变的H2122人类肺癌系和m855小鼠GEM系剖析化合物。还针对 弥漫性大 B 细胞淋巴瘤细胞系0(：1-1^1、0(：1-1^3、0(：1-1^4、0(：1-1^7、3-0见4、31]-0见6、31]-017、耶11、1(422、1]2932和1'〇16(1〇以及针对伯基特氏淋巴瘤细胞系1^」1和0 &46剖析化合物。 [0056] 使用伯腾(Biotek)EL406,将含有20-60,000个细胞/毫升的50此细胞培养基分布 到白色384孔Nunc板(赛默(Thermo))中。悬浮细胞然后立即接受化合物，同时给予粘附细胞 系一小时以再附着到板的表面，随后进行化合物添加。将待测试的化合物溶解于DMS0中，并 且列阵于384孔化合物储存板(葛莱娜(Greiner))上。每个化合物板接受5点剂量反应中的 一种化合物，所述剂量反应大致集中于既定化合物对于既定细胞系的IC50上。
[0057] 在Janus MDT工作站（珀金埃尔默（Perkin Elmer))上使用100nl 384或96孔针转 移歧管将化合物阵列分布到分析板。通过直接钉'正向'化合物和将'反向'化合物板向后 钉，除了其自身的一式四份5点剂量反应中的每种化合物之外，实现一组一式8份的所有5X 5化合物浓度。
[0058]在添加化合物之后，将细胞板在370C培育箱中培育72小时。使用ATPlite(珀金埃 尔默)根据制造商方案评估细胞存活率。在CalcuSyn中利用由周-塔拉利(Chou-Talalay)呈 现的中值效应原理分析数据，并且使用GraphPad Prism软件进行可视化。所评估的关键参 数是组合指数和剂量减少指数。
[0059] ATPlite 分析
[0060] 使用伯腾EL406,将含有20-60,000个细胞/毫升的50此细胞培养基分布到白色384 孔Nunc板(赛默）中。紧接在接种之后，在Janus MDT工作站(珀金埃尔默)上使用100nl384孔 针转移歧管将溶解于DMS0中的化合物分布到板。将储备液以10点一式四份于DMS0储备液中 的剂量反应列阵于384孔葛莱娜化合物板中。在添加化合物之后，将细胞板在370C培育箱中 培育72小时。使用ATPlite(珀金埃尔默)评估细胞存活率，并且使用GraphPad Prism软件分 析数据。
[0061]结果：
[0062]图1描绘展示激酶抑制剂与JQ1之间的协同性的等效线图。低于连接X和Y轴的1到1 线的点是'协同的'，接近线的点是'累加的'，并且高于其的点是拮抗的。
[0063]图2描绘表示抗细胞凋亡剂与JQ1之间的协同性的等效线图。
[0064]图3描绘表示抗瘤形成剂与JQ1之间的协同性的等效线图。
[0065]图4描绘表示坦罗莫司或BEZ235与JQ1之间的累加效应的等效线图。
[0066]图5展示单一药剂的剂量反应曲线。
[0067] 表1:药物组合的平均CI值
[0070] 等效物和范围
[0071] 在权利要求书中，除非相反地指示或另外从上下文显而易见，否则例如"一（a/ an)"和"所述"的冠词可以意指一或大于一。除非相反地指示或另外从上下文显而易见，否 则如果一个、一个以上或所有的群组成员存在、使用于既定产品或方法中或另外与其有关， 那么在群组的一或多个成员之间包括"或"的权利要求书或说明书被视为满足。本发明包括 群组中恰好一个成员存在、使用于既定产品或方法中或另外与其有关的实施例。本发明包 括一个以上或所有的群组成员存在、使用于既定产品或方法中或另外与其有关的实施例。
[0072] 此外，本发明涵盖其中来自一或多条所列权利要求的一或多个限制、要素、条款和 描述性用语被引入到另一条权利要求中的所有变化、组合和排列。举例来说，附属于另一权 利要求的任何权利要求可以经修改以包括在附属于同一基本权利要求的任何其它权利要 求中可见的一或多个限制。在要素以清单形式（例如以马库什群组(Markush group)形式） 呈现时，所述要素的每一子组也被公开，并且可以从所述群组去除任何要素。应理解，一般 来说，在本发明或本发明的方面被称为包含具体要素和/或特征时，本发明的或本发明的方 面的某些实施例由此类要素和/或特征组成或主要由此类要素和/或特征组成。出于简单的 目的，那些实施例尚未专门地以这些词语阐述在本文中。还应注意，术语"包含"和"含有"打 算为开放的并且允许包括额外要素或步骤。在给出范围时，包括端点。此外，除非另外指明 或另外从上下文和本领域的普通技术人员的理解显而易见，否则表示为范围的值可以在本 发明的不同实施例中采用所述范围内的任何特定值或子范围，除非上下文另外明确规定， 否则达到所述范围下限的单位的十分之一。
[0073] 本申请提及各种颁予的专利、公开的专利申请、杂志文章和其它出版物，其都以引 用的方式并入本文中。如果任何并入的参考文献与本说明书之间存在冲突，那么应以本说 明书为准。另外，属于现有技术内的本发明的任何具体实施例可以从权利要求中的任何一 或多者明确排除。因为此类实施例被认为是本领域的普通技术人员已知的，所以其可以被 排除，即使所述排除在本文中并未明确阐述。本发明的任何具体实施例可以出于任何原因 从任何权利要求排除，无论与现有技术的存在相关与否。
[0074] 本领域的技术人员顶多使用常规实验即可识别或能够确定本文所述的特定实施 例的许多等效物。本文所述的本发明的实施例的范围并不打算限于上述描述，而是实际上 如所附权利要求书中所阐述。本领域的普通技术人员将了解，可以在不脱离如随附权利要 求书中定义的本发明的精神或范围的情况下对本说明书作出各种改变和修改。
【主权项】
1. 一种治疗瘤形成的方法，其包含： 以有效治疗所述瘤形成的量向有需要的个体投与JQ1和/或其类似物与选自由以下组 成的群组的激酶抑制剂的组合：MK2206、达沙替尼（(1&8&^1^13)、4206244、克卓替尼 (crizotinib)、CYT387、拉帕替尼（Lapatinib)、夫拉平度（f lavopiridol)、y_27632、埃罗替 尼（erlotinib)、阿法替尼(Afatinib)、阿西替尼(Axitinib)、伯舒替尼(Bosutinib)、西妥 昔单抗（061：111；[111313)、福他替尼（？08七311131：；[11；[13)、吉非替尼（66；1^1：；[11；[13)、伊马替尼 (111^1：；[11；[13)、拉帕替尼、乐伐替尼（1^11￥31：；[11；[13)、木利替尼（111131'；[1：；[11；[13)、尼罗替尼 (Nilotinib)、帕尼单抗(Panitumumab)、帕唑帕尼(Pazopanib)、卢佐替尼(Ruxolitinib)、 索拉非尼（Sorafenib)、舒尼替尼（Sunitinib)、曲妥珠单抗（Trastuzumab)、凡德他尼 (\^11(16七&11；[13)和维罗非尼（￥61]111瓜€611；[13) 02. 根据权利要求1所述的方法，其中所述激酶抑制剂选自由以下组成的群组：克卓替 尼、CYT387、拉帕替尼和夫拉平度。3. 根据权利要求1到2中任一权利要求所述的方法，其中JQ1和/或其类似物与所述激酶 抑制剂分开、依序或同时投与。4. 一种治疗瘤形成的方法，其包含： 以有效治疗所述瘤形成的量向有需要的个体投与JQ1和/或其类似物与抗细胞凋亡剂 的组合。5. 根据权利要求4所述的方法，其中所述抗细胞凋亡剂选自由以下组成的群组： ABT263、ABT199、ABT737 和奥巴克拉（obatoclax)。6. 根据权利要求4到5中任一权利要求所述的方法，其中JQ1和/或其类似物与所述抗细 胞凋亡剂分开、依序或同时投与。7. -种治疗瘤形成的方法，其包含： 以有效治疗所述瘤形成的量向有需要的个体投与JQ1和/或其类似物与选自由以下组 成的群组的抗瘤形成剂的组合:长春新碱(vincristine)、依托泊苷(etoposide)、17-AAG、 阿德希尔（adrucil)、万河（velcade)、SAHA、多希（doxi 1)、吉西他滨（gemcitabine)、 AZD2281、DBZ、异环磷酰胺（ifosfamide)、雷利米得(revlimid)、强的松(prednisone)、利妥 昔单抗（rituximab)、贝伐单抗（Bevacizumab)、哌加他尼（Pegaptanib)和雷珠单抗 (Ranibizumab)〇8. 根据权利要求7所述的方法，其中所述抗瘤形成剂是万珂或吉西他滨。9. 根据权利要求7到8中任一权利要求所述的方法，其中JQ1和/或其类似物与所述抗瘤 形成剂分开、依序或同时投与。10. -种治疗瘤形成的方法，其包含： 向有需要的个体投与有效量的JQ1和/或其类似物与坦罗莫司（temsirolimus)或 BEZ235的组合，其中坦罗莫司或BEZ235以其单独不具有抗瘤形成效应的剂量投与。11. 根据权利要求10所述的方法，其中JQ1和/或其类似物与坦罗莫司或BEZ235分开、依 序或同时投与。12. 根据前述权利要求中任一权利要求所述的方法，其中所述个体是哺乳动物。13. 根据权利要求12所述的方法，其中所述个体是人类患者。14. 根据前述权利要求中任一权利要求所述的方法，其中所述个体具有选自由以下组 成的群组的瘤形成:肺癌;淋巴瘤，包括弥漫性大B细胞淋巴瘤和伯基特氏淋巴瘤(Burkitt' s lymphoma);前列腺癌;基底细胞癌;胆道癌;膀胱癌;骨癌;脑癌;CNS癌;乳癌;子宫颈癌； 绒膜癌；结肠癌；直肠癌；结缔组织癌；消化系统癌;子宫内膜癌;食道癌；眼癌；头颈癌；胃 癌;上皮内赘瘤；肾癌；喉癌；白血病;肝癌;肺癌;血液赘瘤形成；黑素瘤;骨髓瘤;成神经细 胞瘤；口腔癌;卵巢癌;胰脏癌;成视网膜细胞瘤;横纹肌肉瘤;直肠癌;肾癌;呼吸系统癌；肉 瘤;皮肤癌；胃癌;睾丸癌；甲状腺癌;子宫癌;和泌尿系统癌。15. 根据权利要求14所述的方法，其中所述瘤形成是肺癌。16. 根据权利要求14所述的方法，其中所述瘤形成是弥漫性大B细胞淋巴瘤。17. 根据权利要求14所述的方法，其中所述瘤形成是伯基特氏淋巴瘤。18. 根据前述权利要求中任一权利要求所述的方法，其进一步包含用另一抗瘤形成疗 法治疗所述个体。19. 根据权利要求18所述的方法，其中所述另一抗瘤形成疗法是手术、辐射疗法、化学 疗法、基因疗法、DNA疗法、病毒疗法、RNA疗法、辅助疗法、免疫疗法或其组合。20. 根据前述权利要求中任一权利要求所述的方法，其中所述JQ1和/或其类似物是 JQl〇21. -种医药组合物，其包含有效量的 (a) JQl或其类似物;和 (b) 选自由以下组成的群组的激酶抑制剂：MK2206、达沙替尼、AZD6244、克卓替尼、 CYT387、拉帕替尼、夫拉平度、y-27632、埃罗替尼、阿法替尼、阿西替尼、伯舒替尼、西妥昔单 抗、福他替尼、吉非替尼、伊马替尼、拉帕替尼、乐伐替尼、木利替尼、尼罗替尼、帕尼单抗、帕 唑帕尼、卢佐替尼、索拉非尼、舒尼替尼、曲妥珠单抗、凡德他尼和维罗非尼。22. -种试剂盒，其包含含有以下的包装： (a) 含有JQ1或其类似物的容器;和 (b) 含有选自由以下组成的群组的激酶抑制剂的容器:MK2206、达沙替尼、AZD6 244、克 卓替尼、CYT387、拉帕替尼、夫拉平度、y-27632、埃罗替尼、阿法替尼、阿西替尼、伯舒替尼、 西妥昔单抗、福他替尼、吉非替尼、伊马替尼、拉帕替尼、乐伐替尼、木利替尼、尼罗替尼、帕 尼单抗、帕唑帕尼、卢佐替尼、索拉非尼、舒尼替尼、曲妥珠单抗、凡德他尼和维罗非尼。
【文档编号】C07D487/14GK105849110SQ201480066883
【公开日】2016年8月10日
【申请日】2014年11月7日
【发明人】J·E·布拉德内尔, M·R·麦基翁, M·A·希普, B·沙皮, K·K·王, 陈昭
【申请人】达纳-法伯癌症研究所有限公司