双歧杆菌乳酸亚种(Bifidobacterium animalis subsp. lactis)CECT8145的新菌株及其 ...的制作方法
【专利摘要】本发明提供了属于食品和药物工业的领域。具体而言，本发明涉及双歧杆菌乳酸亚种的新菌株(即，CECT8145)，其细胞成分、代谢物和分泌的分子。本发明描述了所述的菌株在用于治疗和/或预防超重和肥胖症、以及相关的疾病/紊乱的食品和/或药物配制物中的用途，其中所述的相关的疾病/紊乱例如为代谢综合征、高血压、高血糖症、炎症、2型糖尿病、心血管疾病、高胆固醇血症、激素紊乱、不孕症等。CECT814520120514
【专利说明】
双歧杆菌乳酸亚种（Bifidobacterium animal is subsp. lactis)CECT 8145的新菌株及其用于治疗和/或预防 超重和肥胖症从及相关疾病/素乱的用途
技术领域
[0001 ]本发明属于食品和药物工业。其具体设及物种双歧杆菌乳酸亚种 (Bifidobacterium animalis subsp. lactis)CECT 8145的新菌株、其上清液和/或培养物， W及提取物和/或由该菌株释放的生物活性化合物，其中所述的提取物和/或生物活性化合 物被加入至食品和/或药物配制物中，从而引起厌腻，降低食欲，减少体脂肪，降低屯、血管危 险，导致体重减轻，具有抗氧化剂和抗炎活性，因此在治疗和/或预防超重和/或肥胖症和/ 或有关疾病/素乱中具有用途。
【背景技术】
[0002] 肥胖症和超重是代谢和营养的素乱，并具有严重的健康后果，其中超重是肥胖症 的程度。尽管运种问题的临床和流行病学知识有所提高，但是肥胖症和超重的流行程度在 工业化和发展中国家显著增加。肥胖症在多种慢性疾病/素乱的发生率中是公认的高危险 因素，其中所述的多种慢性疾病/素乱例如为高血压、缺血性屯、脏病、脑卒中、2型糖尿病和 某种形式的癌症，在西方世界的发展中国家中，肥胖是发病率和死亡率的重要原因。
[0003] 在反抗超重和肥胖症的过程中，食品工业已经引入了新的组分W便帮助消费者保 持合适的体重。在研究和新产品研发的领域中，一种选择是加入某些组分，运些组分通过抑 制能量W脂肪形式累积(通过降低脂肪的吸收或形成，或者通过刺激脂肪的代谢动员W及 增加的脂解，或者通过改善脂质氧化率)而起作用。
[0004] 对预防或治疗超重和肥胖症起积极作用的另一种策略是通过引起厌腻来控制和/ 或降低食欲，从而激起食欲的代谢调节。
[0005] 类似地，一些研究表明肥胖症伴有慢性氧化应激的状态，已经提出慢性氧化应激 的状态是肥胖症与一些合并症（例如膜岛素抵抗和屯、血管疾病）之间的连接。（Molnar D， Decsi T,Koletzko B."Reduced antioxidant status in obese Children with multimetabolic synd;rome"Int J.Obes Relat Metab Disord 2004;28:1197-202)。因此， 近年来，对饮食补充剂(使用抗氧化剂从而改善和预防过重和肥胖症)的可能用途进行了研 究。
[0006] 此外，肠道微生物丛和益生菌通过调节免疫功能并保护个体免于感染和慢性炎性 状况而对健康具有积极的作用。研究表明肠道微生物丛是在调节体重和肥胖症有关的疾 病/素乱中可W起作用的因素。因此，提出通过饮食来操纵肠道微生物丛作为预防或改变肥 胖症危险、特别是有关的代谢疾病/素乱的潜在的新的工具。
[0007] 在运一方面，多数有利的作用归因于属于物种双歧杆菌乳酸亚种的菌株，其与治 疗和预防超重和肥胖症、W及有关的疾病/素乱有关。美国专利文件US2011027348描述了微 生物有机体双歧杆菌乳酸亚种(未明确规定的特定的菌株），其具有抗炎症、代谢综合征、月己 胖症和高血压的活性。
[000引此外，运方面的其他具体的实例为菌株双歧杆菌乳酸亚种B420和抓12。
[0009] 因此，在题为"Study of Danisco probiotics shows positive impact on metabolic syndrome(MetS)'',Food Engineering & Ingredients,2010,Vol.35, Issue 2, p.9，D证ont的文章中描述了菌株双歧杆菌乳酸亚种B420,及其抗代谢综合征、炎症、代谢内 毒素血症等的活性。
[0010] 类似地，美国专利文件US20120107291描述了菌株双歧杆菌乳酸亚种B420,其具有 抗糖尿病、代谢综合征、肥胖症、组织炎症等的活性。
[0011] 根据在所述的专利申请中的信息，菌株B420通过肠有关的淋己组织来积极地影响 免疫系统而起作用，并且展示出改善葡萄糖耐受、减少肠系膜脂肪组织、降低炎性指数等的 能力。然而，关于该菌株的可利用的信息并未提及关于其可能引起食欲降低或增加厌腻的 能力的任何情况，也未声称该菌株的抗氧化剂能力。
[0012] Holscher等人的题为"Bifidobacterium Iactis Bbl2 enhances intestinal 曰ntibody response in formul曰-fed inf曰nts:曰 r曰ndomized,double-blind,controlled hial"的非专利参考文件描述了菌株乳酸双歧杆菌(Bifidobacterium IactiS)化12及其 在加强免疫功能中的作用。
[0013] 美国专利文件US2008267933描述了菌株双歧杆菌乳酸亚种化12,其通过引起厌 腻、改善能量代谢，改善膜岛素敏感性和代谢综合征等来发挥抗肥胖症和体重控制活性。该 菌株的作用可W除了厌腻W外与能量、脂肪、膜岛素和葡萄糖代谢有关的某些基因（例如 Scdl ,Ac巧30,Adn,Ilirsp,Car3和Apoa-4)过表达的结果。然而，在关于该菌株的可利用的信 息中，未提及其可行的抗氧化剂能力的任何情况。
[0014] 技术问题
[0015] 考虑到上述情况，本发明的技术问题的目的设及提供新型微生物有机体，其可W 用作食品和药物配制物中的组分，从而提供抗超重和肥胖症、W及有关的疾病/素乱的治疗 和/或预防活性。
[0016] 上述问题的解决方法
[0017] 上述技术问题已经通过提供菌株双歧杆菌乳酸亚种W及包含该菌株的食品和药 物配制物而解决，其中根据the Budapest Treaty的条款，所述的菌株于14/05/12保藏于位 于Pare Cientific Universitat de Valencia,c/Catedratico AgustIn Escardino,9, 46980 Paterna-Valencia,Spain的the ColeccicSn Esp过话)虹 de Cultivos Tipo (Spanish Type Qilture Collection-CECT),登录号为CECT8145。
[001引本发明的有利作用
[0019] 与现有技术中属于相同物种的菌株不同，摄入本发明的菌株W及包含该菌株的食 品和药物配制物除了减少肌体脂肪W外，还可W引起厌腻，降低食欲，W及增加哺乳动物对 氧化应激的抗性。此外，本发明的菌株W及包含该菌株的饮食和药物配制物除了降低葡萄 糖和一些炎性标志物的浓度W外，还可W降低血液中总胆固醇和甘油=醋的水平。所有运 些都得到W下结论:本发明的菌株W及包含该菌株的食品和药物配制物的作用可W有效地 管理超重，换言之，治疗和/或预防肥胖症和有关的疾病/素乱，并且本方面的菌株优于现有 技术中相同物种的其他菌株。
[0020] 发明概述
[0021] 本发明设及物种双歧杆菌乳酸亚种的新菌株(根据the Budapest化eaty的条款， 其于 14/05/12保藏于位于化rc Cientific Universitat de Valencia,c/(^ite化自tico Agust化 Escardino,9,46980 化terna-'Valencia,Spain的the Colecci加 Espafiola de Qiltivos Tipo(Spanish Type Culture Collection-CECT)，登录号为CECT8145)，W及与 该菌株有关的生物活性化合物，该菌株的上清液和培养物，包含生物活性化合物、上清液 和/或培养物的提取物，W及运些物质的任意一种在食品和药物配制物中的配方。
[0022] 本发明的菌株及其衍生的产物(本发明的目的）是通过调节某些基因的差异性表 达而起作用的，其中所述的基因积极地影响了肌体脂肪的减少，运使得本发明的菌株特别 有效地用于治疗和/或预防超重和/或肥胖症W及有关的疾病/素乱，例如:代谢综合征、高 血压、高血糖症、炎症、2型糖尿病、屯、血管疾病、高胆固醇、激素素乱、不孕症等。
[0023] 在哺乳动物摄入本发明的菌株之后，他们经历了肌体脂肪和体重、总甘油=醋、总 胆固醇、葡萄糖水平和TNFa因子的减少，W及脂肪细胞因子的增加。此外，本发明的菌株导 致厌腻增加(可通过饥饿激素水平的减少来证明），W及氧化应激的抗性增加(可通过在使 用本发明的菌株治疗的哺乳动物中丙二醒浓度的减少来证明）。
[0024] 本发明的菌株的转录组学研究显示摄取所述的菌株会上调节与碳水化合物(包括 氧化憐酸化和ATP合成)代谢、谷脫甘肤代谢(氧化应激的水平降低）、辅助因子和维生素的 生物合成、脂质代谢、核巧酸代谢、糖基化和膜代谢有关的代谢途径和过程。
[0025] 此外，如本发明的菌株的代谢组学研究（其详细情况在本专利说明书的试验部分 提供)所证明，摄取该菌株会引起与抗氧化剂代谢W及碳水化合物和核巧酸代谢有关的一 系列代谢变化。就氧化应激的水平降低而言，谷脫甘肤代谢可W识别为本发明菌株的祀物， 并且戊糖憐酸途径和糖基化的上调节是显著的，而且在糖元、核巧酸、脂质和辅助因子的多 种变化也是明显的。
[0026] 附图简述
[0027] 图1:乳酸菌属的23种菌株在秀丽隐杆线虫(C. elegans)中用于肌体脂肪减少的筛 选。
[0028] 图2:双歧杆菌属的15种菌株在秀丽隐杆线虫中用于肌体脂肪减少的筛选。
[0029] 图3:在喂养菌株CECT8145(BIF-1)或给予对照饮食(线虫类生长培养基，下文称为 NG培养基)的秀丽隐杆线虫野生型N2中甘油S醋的定量。
[0030] 图4:在70°C下过夜灭活的菌株CECT8145(BIF-1)的培养物在秀丽隐杆线虫中对肌 体脂肪减少的作用。
[0031] 图5:在通过施加过氧化氨使秀丽隐杆线虫(野生型N2)经历氧化应激后而估计的 菌株CECT8145(BIF-1)的抗氧化剂活性。
[0032] 图6:相对于秀丽隐杆线虫(野生型N2)和突变体而言，肌体脂肪的减少。
[00削图7:在17周的试验过程中，在使用IO^C即/天（黑色长斜方形）的菌株CECT8145 (BIF-I)处理的肥胖Zucker大鼠中，体重的测定。本试验中包含肥胖的Zilcker大鼠（黑色圆 圈）对照组和消瘦的Zilcker大鼠（白色圆圈）组。
[0034] 图8:在使用IO^CFU/天（黑色长斜方形）的菌株CECT8145(BIF-1)处理的肥胖 Zucker大鼠中所观察的固体摄取量。本试验中包含肥胖的Zilcker大鼠（黑色圆圈）对照组和 消瘦的Zilcker大鼠（白色圆圈）组。
[0035] 图9:与对照Ziicker大鼠（黑柱)相比，在使用l〇WCFU/天的菌株CECT(BIF-I)(灰柱） 处理的肥胖Zucker大鼠中的总胆固醇。本试验中包含消瘦的Zilcker大鼠（白柱)对照组。
[0036] 图10:与对照Ziicker大鼠（黑柱）相比，在使用l〇WCFU/天的菌株CECT8145(BIF-1) (灰柱)处理的肥胖Zucker大鼠中的皿L胆固醇。本试验中包含消瘦的Zilcker大鼠（白柱)对 照组。
[0037] 图11:与对照Ziicker大鼠（黑柱）相比，在使用l〇WCFU/天的菌株CECT8145(BIF-1) (灰柱)处理的肥胖Zucker大鼠中所测定的总胆固醇:HDL胆固醇的比值(屯、血管疾病危险指 数）。本试验中包含消瘦的Ziicker大鼠（白柱)对照组。
[0038] 图12:与对照Ziicker大鼠（黑柱）相比，在使用IQIDcFU/天的菌株CECT8145(BIF-1) (灰柱)处理的肥胖Zucker大鼠中所测定的甘油S醋的浓度。本试验中包含消瘦的Zilcker大 鼠（白柱)对照组。
[0039] 图13:与对照Ziicker大鼠（黑柱）相比，在使用l〇WCFU/天的菌株CECT8145(BIF-1) (灰柱)处理的肥胖Zucker大鼠中所测定的葡萄糖的浓度。本试验中包含消瘦的Zilcker大鼠 (白柱)对照组。
[0040] 图14:与对照Ziicker大鼠（黑柱）相比，在使用l〇WCFU/天的菌株CECT8145(BIF-1) (灰柱)处理的肥胖Zucker大鼠中的TNFa(炎症标志物）的水平。本试验中包含消瘦的Zilcker 大鼠（白柱)对照组。
[0041 ] 图15:与对照Ziicker大鼠（黑柱）相比，在使用l〇WCFU/天的菌株CECT8145(BIF-1) (灰柱)处理的肥胖Zucker大鼠中的脂肪细胞因子的水平。本试验中包含消瘦的Zilcker大鼠 (白柱)对照组。
[0042] 图16:与对照Ziicker大鼠（黑柱）相比，在使用l〇WCFU/天的菌株CECT8145(BIF-1) (灰柱)处理的肥胖Zucker大鼠中所测定的丙二醒(氧化的标志物）的浓度。本试验中包含消 瘦的Ziicker大鼠（白柱)对照组。
[0043] 图17:与对照Ziicker大鼠（黑柱）相比，在使用l〇WCFU/天的菌株CECT8145(BIF-1) (灰柱)处理的肥胖Zucker大鼠中所测定的饥饿激素(食欲的标志物）的水平。本试验中包含 消瘦的Zilcker大鼠（白柱)对照组。
[0044] 图18:菌株BIF-I对酸性抑水平的抗性。
[0045] 图19:菌株BIF-I对胆汁盐的抗性。
[0046] 图20:与传统的市售酸乳酪相比，使用菌株BIF-I发酵的酸乳酪在秀丽隐杆线虫中 使得肌体脂肪降低更多（11.4% )。
[0047] 图21:使用菌株BIF-I发酵的豆奶在秀丽隐杆线虫中的减脂作用。
[0048] 图22:具有菌株BIF-I(活的W及灭活的细胞）的果汁在秀丽隐杆线虫中的减脂作 用。
[0049] 发明详述
[0050] 本发明的目的是微生物有机体，W及包含该微生物有机体的食品和药物配制物， 其具有治疗和预防哺乳动物的超重和肥胖症、W及相关疾病/素乱的有用的用途。
[0051] 所述的微生物有机体具体设及物种双歧杆菌乳酸亚种的新菌株（根据the Budapest Treaty的条款，其于 14/05/12保藏于位于化rc Cientific 加 iversitat de Valencia,c/CatedratiCO AgustIn Escardino,9,46980 Paterna-Valencia,Spain的the Colecci加.Esp姐〇1身 de Qiltivos Tipo(Spanish Type Qilture Collection-CECT)，登 录号为 CECT8145)。
[0052] 在本专利申请中，本发明的双歧杆菌乳酸亚种CECT8145的菌株还称为BIF-I。
[0053] 就本发明的目的而言，术语"相关的或有关的疾病/素乱"和"由超重和/或肥胖症 引起的疾病/素乱"包括:代谢综合征、高血压、高血糖症、炎症、2型糖尿病、屯、血管疾病、激 素素乱、不孕症等。
[0054] 就本发明的目的而言，术语由本发明的菌株衍生得到的生物活性产物定义为所述 的菌株的细胞成分，W及形成所述的菌株的一部分的化合物和分子，例如由所述的菌株分 泌的代谢物和分子，例如:赋予所需的预防或治疗活性的细胞内成分(例如DNA、肤、脂肪酸 等）、细胞壁成分(蛋白质、肤、脂肪酸等）。
[0055] 术语食品配制物定义为引入了本发明的菌株、由其衍生的生物活性产物、所述的 菌株的上清液和/或提取物和/或培养物的功能食品、益生菌、合生素（synbiotic)、饮食补 充剂和/或营养食品。
[0056] 就本发明的内容而言，药物配制物定义为W下运些:其引入了本发明的菌株、由其 衍生的生物活性产物、所述的菌株的上清液和/或提取物和/或培养物，并组合至少一种药 物可接受的赋形剂和/或载体。在本发明中使用的药物可接受的赋形剂和/或载体是现有技 术中本领域的专家已知的。
[0057] 本发明的发明人鉴定了新菌株，即，属于物种双歧杆菌乳酸亚种的CECT8145,与现 有技术所报告的相同物种的其他菌株相比，所述的新菌株具有新型的生物活性，从而使其 特别有效地用于治疗和/或预防超重和/或肥胖、W及由超重和/或肥胖症引起的和/或与超 重和/或肥胖症相关的疾病和/或素乱。
[005引在本发明的菌株与属于现有技术的相同物种的其他菌株(即，菌株B420和化12)之 间的比较基因组学研究显示，本发明的菌株具有在其他的巧中菌株(B420和化12)中是独特 的且不具有相应的同源物的基因和基因组区域。具体而言，所实施的基因组学研究测定与 菌株B420和抓12不同，本发明的菌株缺乏符合结合分子脂质的功能的基因。
[0059] 本发明的菌株的新型生物活性之一为其抗氧化剂活性，因此，其增加对氧化应激 的抗性的能力。
[0060] 氧化应激是由游离自由基的产生与抗氧化剂防御之间的失衡所导致的，其中所述 的抗氧化剂应激负责将有机体中所述的自由基解毒。在肥胖的患者中，氧化应激并非通过 单一的机制产生，而是通过多种因素的汇合而产生，运些因素最终可W概括为抗氧化剂减 少，W及氧化强化剂元素增加。多项研究报告肥胖症与主要的抗氧化剂酶的活性降低之间 的直接关系。
[0061] 由本发明的菌株的生物活性所诱导的对氧化应激的抗性通过在使用本发明的菌 株处理的哺乳动物中丙二醒浓度降低来证明（图16)。
[0062] 丙二醒为指示肌体中氧化速率的标志物:该标志物的水平与氧化速率的增加呈平 行增加，并且对氧化应激的保护降低;反之亦然。
[0063] 图5示出了摄入本发明的菌株会增加对氧化应激的保护，运可由秀丽隐杆线虫的 存活证明。
[0064] 本发明的菌株的另一种新型生物活性在于其被摄入后会增加厌腻、从而降低饥饿 激素水平的能力（图17)。
[0065] 饥饿激素是可W潜在地增加或刺激食欲并由此起到饥饿和体重的调节剂作用的 唯一已知的循环激素。饥饿激素为胃肠神经肤(生长激素促分泌素受体的内源配体），其最 近由主要在胃中产生的泌酸粘膜中分离得到。其在血液中的浓度取决于饮食、高血糖症、月己 胖症和瘦蛋白。饥饿激素在吃饭前1-2小时分泌，并且其浓度在吃饭后急剧降低。饥饿激素 作用于外侧下丘脑中，并且在理论上，会抑制促炎细胞因子的分泌并括抗瘦蛋白。在生理学 上，饥饿激素会增加胃酸的分泌，并具有其他的激素和屯、血管功能。
[0066] 本发明的菌株能够降低饥饿激素的水平，由此增加厌腻。
[0067] 此外，本发明的菌株可W导致总甘油S醋、胆固醇、葡萄糖、TWa因子的水平降低， W及脂肪细胞因子的水平升高(分别参见图12,9,13,14和15)。
[0068] 已经显示由摄入本发明的菌株所导致的肌体脂肪水平的降低显著高于相当于双 歧杆菌属其他菌株(特别是与属于相同物种的市售菌株双歧杆菌乳酸亚种化12相比）的水 平（图2)。
[0069] 在本文实施例1中所示的结果证明与对照喂养条件相比，摄入本发明的菌株将线 虫类秀丽隐杆线虫中的肌体脂肪减少至少40%。与现有技术的相同物种的其他菌株所产生 的肌体脂肪减少相比，特别是与菌株化12相比，本发明的菌株能够使肌体脂肪减少的水平 比菌株抓12高28.5%，运证明本发明的菌株BIF-I比相同物种的其他菌株更有效。
[0070] 类似地，当将本发明的菌株引入至食品产品（例如酸乳酪、发酵的大豆或果汁）中 时，其对肌体脂肪减少的作用比传统产品（酸乳酪、发酵的大豆或果汁)产生的作用高出超 过 11%(图 20、21 和 22)。
[0071] 如在作为实例而提供的试验部分中详细报告的那样，转录组学研究显示摄入本发 明的菌株会上调节与碳水化合物代谢(包括氧化憐酸化和ATP合成）、谷脫甘肤代谢(降低的 氧化应激水平）、辅助因子和维生素的生物合成、脂质代谢、核巧酸代谢、糖基化和膜代谢相 关的代谢途径和过程。
[0072] 此外，由代谢组学研究（其详细情况在本专利说明书的试验部分提供)证明，摄入 本发明的菌株会引起一系列与抗氧化剂代谢、W及碳水化合物和核巧酸代谢有关的代谢变 化。谷脫甘肤代谢被鉴定为本发明的菌株用于降低氧化应激水平的祀物，并且戊糖憐酸途 径和糖基化的上调节也是显著的，并且在糖元、核巧酸、脂质和辅助因子代谢中，各种变化 也是明显的。所述的代谢组学变化证明了与肌体脂肪减少W及对抗氧化应激的保护（由本 发明的菌株引起)相关的生物活性。
[0073] 运些结果已经通过使用线虫类秀丽隐杆线虫的突变体进行的研究来证明，如实施 例8中详细说明的那样，所述的研究鉴定了在摄入本发明的菌株BIF-I后差异性表达的多个 基因，并且说明了由所述的菌株所发挥的生物活性及其对抗超重和肥胖症的更有效的作 用。
[0074] 具体而言，我们鉴定了 W下差异性表达的基因：Acox-l，Acs-5，Daf-22，Fat-7, Daf-16, Sod-4, Trxr-S, Asg-2 和!"ph-l。
[00巧]基因 Acox-l，Acs-5和Daf-22编码过氧化物酶体中脂肪酸(6-氧化的酶；基因化t-7 和化f-16编码设及脂肪酸去饱和过程的酶;基因 Sod-4,化xr-2和Asg-2编码设及保持氧化 还原细胞平衡并除去ROS的酶;基因 Asg-2单独地编码设及氧化憐酸化过程的酶；W及基因 T地-I编码设及S丙烷(triprophan)代谢并由此设及5-?色胺合成的酶。
[0076] 本发明的菌株及其分泌的生物活性产物、W及所述的菌株的上清液、培养物和/或 提取物可W单独配制，或者与其他微生物有机体和/或功能组分结合配制，并将其引入至根 据本发明使用的食品或药物配制物中。
[0077] 当将本发明的菌株与其他微生物有机体结合引入至食品或药物配制物中时，所述 的微生物有机体应该优选属于乳酸杆菌属、链球菌属、双歧杆菌属、酵母菌属和/或克鲁维 酵母属，例如：鼠李糖乳酸杆菌化.rhamnosus)，德氏乳杆菌保加利亚亚种化.de化rueckii subsp.bulgaricus),高加索酸奶乳酸杆菌化.kefir),类高加索酸奶乳酸杆菌 化.parakefir)，短乳酸杆菌化.brevis)，干酪乳酸杆菌化.casei)，胚芽乳酸杆菌 化.plantarum),发酵乳酸杆菌化.fermentum),副干酪乳酸杆菌化.paracasei),嗜酸乳酸 杆菌化.acido地ilus),类植物酸杆菌(X.paraplantarum),罗伊氏乳酸杆菌(X.reuteri), 嗜热链球菌(St.thermophilus),长双岐杆菌(B. longum),短双岐杆菌(B.breve),双叉双歧 杆菌(B.bif idum),假链状双歧杆菌(B. catenulatum),链状双歧杆菌(B.adolescentis),假 链状双歧杆菌（8.93日11(1〇。日1日]1111日1：11111),酿酒酵母（5.。日'日￥131日日），布拉迪酵母 (S.boulardii),乳酸克鲁维酵母菌化.Iactis),或马克斯克鲁维酵母化.marxianus)。
[007引此外，本发明还设及配制物，其引入了由本发明的菌株衍生的生物活性化合物、该 菌株的上清液和/或培养物，W及由培养本发明的菌株而得到的提取物。
[0079] 本发明的配制物可W为食品或药物配制物，其中本发明的配制物引入了本发明的 菌株和/或由其分泌的生物活性产物和/或上清液和/或培养物和/或提取物。
[0080] 所述的食品或药物配制物可W为液体或固体，包括但不限于胶囊和/或药丸。
[0081] 本发明的食品和/或药物配制物引入了量为IO5C即至10?即/克或毫升配制物、优 选为IO7至IQiic即/g或C即/ml的本发明的菌株。
[0082] 当本发明的食品和/或药物配制物引入了由本发明的菌株衍生得到的生物活性化 合物(例如上清液、提取物、肤等)时，运些生物活性化合物W占总配制物的0.01至99重量％ 的比率、优选为0.01至40重量％的比率引入至所述的配制物中。引入了本发明的菌株W及 由其衍生的生物活性化合物、上清液、培养物提取物和/或培养物的营养配制物应该优选地 为W下一种:水果或蔬菜汁、冰激凌、婴儿食品、牛奶、酸乳酪、奶酪、发酵牛奶、奶粉、谷物、 烘烤产品、牛奶和/或谷物基产品、营养补充剂、软饮料和/或饮食补充剂。
[0083] 本发明所参考的每日食品产品（例如发酵牛奶、新鲜奶酪或酸乳酪或它们的等价 物）（干燥的或冻干的）为优选的合适的媒介物，其中引入了本发明的菌株和/或由其衍生的 生物活性化合物和/或上清液和/或提取物和/或培养物。
[0084] 如果需要，本发明的菌株和/或其衍生的生物活性化合物和/或菌株的上清液和/ 或提取物和/或培养物可W作为食品或药物包装在胶质或纤维素胶囊中，或者包装在凝胶 胶囊或药丸等其他形式中。
[0085] 本发明的菌株及包含该菌株的配制物被特别设计用于哺乳动物中，即，动物和人 类，用于治疗超重和肥胖症W及相关的疾病/素乱。
[0086] 因此，本发明的目的为W下运些：可培养的和/或不可培养的和/或非活性形式的 W及可任选地与其他微生物有机体组合的菌株双歧杆菌乳酸亚种的CECT8145,包含该菌株 的食品和药物配制物，W及治疗和/或预防哺乳动物的超重和/或肥胖症、W及有关的疾病/ 素乱的方法，例如代谢综合征、高血压、高血糖症、炎症、2型糖尿病、屯、血管疾病、高胆固醇 血症、激素素乱和不孕症，所述的方法表征为包括给予有效量的本发明的菌株双歧杆菌乳 酸亚种的CECT8145, W及包含根据本发明的菌株的食品和药物配制物。
[0087] 在本发明的内容中，本发明的目的还是降低体重，血液中的总胆固醇、甘油S醋和 葡萄糖的水平，TNFa因子、丙二醒和饥饿激素的水平，W及增加哺乳动物的脂肪细胞因子的 方法，该方法表征为包括给予有效量的本发明的菌株双歧杆菌乳酸亚种的CECT8145，W及 包含根据本发明的菌株的食品和药物配制物。
[0088] 在运一方面中，值得注意的是本发明考虑了可培养的和/或不可培养的和/或非活 性细胞形式的本发明的菌株双歧杆菌乳酸亚种的CECT8145的用途(图4)。
[0089] 由于可W至少部分通过结构成分(例如DNA、细胞壁成分等)发挥所需的作用，所W 根据本发明和本发明的形式部分，可W使用通过不同方法(冷冻、加热、福射等)灭活的本发 明的不可培养的和/或非活性细胞。运意味着本发明的菌株在不必是可培养的/活的条件下 保留其对抗代谢综合征和/或相关的疾病/素乱的性质的一部分。因此，如实施例4所示，本 发明的菌株的灭活培养物在动物模型秀丽隐杆线虫中会减少肌体脂肪，运表明所述的功能 作用不仅是由于菌株的代谢，还由于存在某些细胞壁化合物。
[0090] 下文提供W下附图和实施例W便说明本发明，并且绝不意图限定本发明。 实施例
[0091] 实施例1
[009。筛选在秀丽隐杆线虫中用于减少肌体脂肪的细菌
[0093] 对乳酸杆菌属的23株菌株和双歧杆菌属的15柱菌株进行筛选来分析它们在被线 虫类秀丽隐杆线虫摄入后对肌体脂肪减少的作用。在本研究中包含巧中市售的菌株LGG(鼠 李糖乳酸杆菌)和抓12(双歧杆菌乳酸亚种）。
[0094] 秀丽隐杆线虫累积微滴形式的脂肪，其可W通过使用尼罗红（巧光）染色而显现。 由所述的染料发射的巧光可W通过巧光剂来定量。因此，与在对照条件(NG培养基+大肠杆 菌化SCherichia COli))下喂养的幼虫相比，通过分析在使用不同菌株喂养的幼虫中的巧 光的降低来针对不同微生物有机体对线虫类中肌体脂肪的累积和/或减少的作用，评估运 些不同的微生物有机体。
[0095] 本试验由使用卵至幼嫩的成虫期(3天大）的时间内的不同的微生物有机体喂养秀 丽隐杆线虫组成。标准的饲料为散布有细菌大肠杆菌的NG培养基。
[0096] 通过向NG培养基的平板中直接加入尼罗红染料来染色脂肪微滴。在整个检验期 内，在不同的喂养条件下将线虫类在20°C下溫育。在喂养期后，取得各条件的样品，并定量 各情况下发射的巧光。取得对照喂养条件(NG培养基+大肠杆菌)作为定量和比较试验条件 下的巧光的参照。
[0097] 图1示出了使用乳酸杆菌属的菌株在秀丽隐杆线虫中用于肌体脂肪减少所获得的 结果(表示为在使用尼罗红染料染色的幼虫中定量的巧光减少的百分率）。最高的脂肪减少 的百分率相当于LAC-I染色(为32.4%，与对照喂养条件相比）。
[0098] 图2示出了双歧杆菌属菌株的筛选。用于肌体脂肪减少的最有效的菌株为BIF-I (为40.5 %，与对照喂养条件相比）。
[0099] 根据由所检验的38株菌株得到的结果，选择菌株双歧杆菌属BIF-I为最有效地抵 抗脂肪的减少。因此，我们更深程度地研究该菌株的功能和技术性质。
[0100] 实施例2
[0101] 分类学鉴定和基因组学测序
[0102] 2.1.鉴定
[0103] 通过测序核糖体DNA(rDNA)16S，在属和种的水平下明确地鉴定菌株BIF-1。通过使 用在线BLAST化ttp://blast .ncbi .nlm.nih.gov/Blast.cgi),将SIF-I菌株的序列与保存 在公共数据库中的完整基因序列比较，鉴定所述的序列，与属于物种双歧杆菌乳酸亚种的 公共序列得到最高的同源性(99 % )。
[0104] 2.2.基因组测序
[0105] 为了表征菌株BIF-I的基因组水平W及安全性和功能性，我们通过在Life Science-Roche 454平台上进行焦憐酸测序，实施菌株BIF-I的全基因组测序。获得总计 434,581原始序列。进一步的从头序列的组装在5个支架（scaffold)上组织序列，最大的序 列为1，923,368个核巧酸。估计菌株BIF-I的基因组大小为2.1Mb。在水平转移的风险下，未 检测到编码毒力因子的基因，也未检测到位于多个区域中的抗生素抗性基因。
[0106] 实施例3
[0107] 在BIF-I处理的秀丽隐杆线虫中甘油S醋减少的定量
[0108] 在秀丽隐杆线虫野生型肥中，分析菌株BIF-I摄入对甘油S醋减少的作用。
[0109] 由同步的幼嫩的成虫期秀丽隐杆线虫群体测定甘油S醋。在PBS缓冲剂中洗涂由 各条件得到的线虫类，并对溶解产物进行超声波处理。使用市售的试剂盒，基于巧光测定， 使用溶解的样品测定总甘油=醋。针对蛋白质的浓度，对所有样品进行归一化。
[0110] 图3示出在对照喂养条件(NG培养基)下或喂养菌株BIF-4下的线虫类进行甘油S 醋的定量。在喂养BIF-I的线虫类中，观察总甘油S醋的减少。
[01川实施例4
[01。] 在使用BIF-I的灭活培养物处理的秀丽隐杆线虫中肌体脂肪的减少
[0113] 在秀丽隐杆线虫中分析灭活BIF-I细胞的减脂功能作用。所述的细胞通过在70°C 下热处理18小时来灭活。
[0114] 所述的检验由使用卵至成虫期（3天）的活性的或灭活的BIF-I喂养秀丽隐杆线虫 组成。在对照条件下，使用NG培养基喂养线虫类，其中所述的NG培养基包含大肠杆菌。
[0115] 通过向NG培养基的平板中直接加入尼罗红染料来染色脂肪微滴。在检验期内，在 不同的喂养条件下将线虫类在20°C下溫育。在喂养期后，取得各条件的样品，并定量各情况 下发射的巧光。取得对照喂养条件(NG培养基+大肠杆菌)作为定量其他试验条件下的巧光 的参照。
[0116] 所述的结果（图4)显示在70°C下灭活的BIF-I细胞保持了它们在线虫类中的减脂 的作用，其与在活的BIF-培养基中观察到的巧光百分率相同。
[0117] 实施例5
[0"引菌株BIF-I在秀丽隐杆线虫中的抗氧化剂活性
[0119]我们分析了摄入菌株BIF-I是否增加在秀丽隐杆线虫(野生型N2)中对急性氧化应 激的抗性。
[0120] 根据Madorell等人(2011)所述的方法学实施所述的检验。使用秀丽隐杆线虫野 生型N2。试验包含对照(NG培养基+大肠杆菌菌株0P50)和BIF-I菌株。试验开始于年龄同步 的线虫类群体，其培养于不同喂养条件下的NG平板中。将该平板在2(TC下溫育7天。该时期 之后，使用出〇2(2mM)施加氧化应激，并且溫育5小时后测定线虫类的生活力。图5示出了在施 加过氧化氨应激后存活的线虫类中获得的结果。与在对照喂养条件下的群体相比，使用 BIF-I喂养7天的线虫类对氧化应激具有更高的抗性，
[0121] 并且更多地存活。
[0122] 实施例6
[01U] 在具有菌株双歧杆菌乳酸亚种BIF-I的秀丽隐杆线虫中的转录组学研究 [0124]我们研究了双歧杆菌乳酸亚种BIF-I的摄入对秀丽隐杆线虫转录组的作用。使用 技术"忍片（chips)"来研究在喂养BIF-I的线虫类中，与对照喂养条件下的线虫类相比，基 因表达、代谢途径和生物过程的变化。在统计学分析中使用显著性水平P含0.05。
[01巧]6.1.在BIF-I处理的线虫类中的差异性基因表达
[0126] 喂养菌株BIF-I的线虫类显示与在对照喂养条件下的线虫类不同的基因表达图 谱。因此，它们与对照线虫类相比，呈现296个过表达的基因和26个表达不足的基因（表1)。
[0127] 表1.在喂养BIF-I菌株的秀丽隐杆线虫中所观察到的差异性基因表达 [012 引
[0129] 在BIF处理的线虫类中过表达的296个基因的筛选表明不同的功能组(group)。上 述基因设及蛋白质水解、繁殖、胚胎发育、碳水化合物代谢、蚁皮周期、肌体形态形成、移动、 氧化还原过程、蛋白质代谢、运输、谷脫甘肤代谢、芳香族氨基酸代谢、对T福射的应答、月旨 肪酸代谢和神经肤信号传递途径。
[0130] 在BIF-I处理的秀丽隐杆线虫中25个表达不足的基因主要设及生长的上调节。
[0131] 6.2.代谢途径
[0132] 关于代谢途径，测定出与对照线虫类相比，喂养BIF-I的线虫类展现出23个上调节 的W及20个下调节的代谢途径(表2)。
[0133] 表3和4列出了在使用BIF-I双歧杆菌菌株处理后上调节或下调节的代谢途径。
[0134] 表2.在喂养菌株BIF-I的秀丽隐杆线虫中差异性表达的代谢途径的数量
[0136]表3.与对照相比，在BIF-I处理后的秀丽隐杆线虫中上调节的代谢途径的列表。 ID:根据KEGG数据库的识别代号。
[0141」6.3.生物巧程
[0142] 在喂养菌株BIF-I的线虫类中，与对照相比，总计26个生物过程是过表达的，而76 个过程是表达不足的(表5)。
[0143] 表5.与对照相比，在喂养菌株BIF-I的秀丽隐杆线虫中差异性表达的生物过程的 数量。
LUIW」 巧0耶/巧細列m J化Bit-i化巧的巧化失T化巧迈的耶巧迈个化的化枉。
[0146] 表6.在BIF处理的秀丽隐杆线虫中过表达的26个生物过程的列表。GO:基因本体 (数据库）。
[0147]
[0148] 表7.与对照相比，在BIF-I处理的秀丽隐杆线虫中表达不足的76个生物过程的列 表。GO:基因本体(数据库）。
[01491
[0151]
[0152] 总体而言，转录组学研究的结果显示，在喂养菌株BIF-I的线虫类中，与碳水化合 物代谢(氧化憐酸化、ATP合成等）、谷脫甘肤代谢(降低的氧化应激的水平）、辅助因子和维 生素的生物合成、脂质代谢、核巧酸代谢、糖基化和膜代谢相关的代谢途径和过程受到上调 -H- T。
[0153] 实施例7
[0154] 在菌株BIF-I上的秀丽隐杆线虫中的代谢组学研究
[0155] 我们分析了与对照线虫类(喂养NG培养基+大肠杆菌0P50)的图谱相比，在摄入菌 株BIF-I后秀丽隐杆线虫的代谢图谱的变化。
[0156] 所述的试验设及使用卵至幼嫩的成虫期(3天大）的菌株BIF-I喂养秀丽隐杆线虫。 对照喂养条件为使用细菌大肠杆菌喂养的NG培养基。
[0157] 此后，线虫类经历了代谢组学分析，采用了分析技术、LC-MS/MS化SI + K-ESI)和 GC-MS、W及随后的数据的生物信息处理。
[0158] 结果显示出具有统计学意义的变化，如W下所列：
[0159] -谷脫甘肤(G甜)代谢和氧化应激:在本研究中，与对照相比，丫 -谷氨酷基-亮氨酸 和丫-谷氨酷基-蛋氨酸的水平高于喂养BIF-I的线虫类，运与丫-谷氨酷基-转移酶(GGT)活 性的可能的升高，W及由此响应于BIF-I的谷脫甘肤（GSH)的再循环一致。此外，视晶酸 (0曲thalmate)(-种用于G甜合成的代谢物)在喂养BIF-I的组中显著降低，运与G甜生物合 成减少一致。运可能是由于对较低水平的氧化应激所产生的谷脫甘肤的需要较低。运得到 W下观察的支持:GSSG(氧化的GSH)和半脫氨酸-谷脫甘肤二硫化物(它们为喂养BIF-I菌株 的组中的氧化应激的标志物)的水平较低。
[0160] -碳水化合物的代谢:喂养BIF-I的一组在与碳水化合物代谢有关的许多代谢物中 展现出变化。麦芽四糖和麦芽五糖的水平展现出较高的水平，而与对照相比，海藻糖-6-憐 酸和葡萄糖的水平在喂养BIF-I的组较低。其他受影响的途径为糖元代谢和戊糖憐酸途径。 因此，6-憐酸葡萄糖酸在BIF-I组中显示明显的升高。运一事实W及高水平的核糖和低水平 的核糖-5-憐酸与BIF-I存在下戊糖憐酸途径的可能的上调节一致。
[0161] -核巧酸代谢:核巧酸代谢的变化是在戊糖憐酸途径的活性中所观察到的变化的 结果。喂养BIF-I的线虫类显示较高水平的N-氨基甲酯-天冬氨酸盐和乳清酸盐（它们为喀 晚合成的巧中中间体）。在嚷岭代谢中观察到类似的变化。因此，BIF-I处理的线虫类显示较 低水平的尿囊素（嚷岭降解的产物）。此外，使用BIF-I处理的组具有较高水平的嚷岭核巧 (腺巧和鸟巧)碱基(腺嚷岭和次黄嚷岭)和核巧酸[腺巧5'-一憐酸(AMP)和鸟巧5'-一憐酸 (GMP)]。运些结果W及所观察到的前体氨基酸(谷氨酸盐和谷氨酷胺）的增加，W及戊糖憐 酸途径的可能的上调节支持嚷岭生物合成的可能的增加，并伴有嚷岭降解的降低。
[0162] -膜和胆固醇的代谢:在喂养BIF-I的线虫类中，我们观察到胆碱和乙酷胆碱的水 平增多，运不仅设及糖基化过程，还设及膜代谢。此外，7-二氨胆固醇(胆固醇生物合成的中 间体)的水平在喂养BIF-I的线虫类中增加，运与运种益生菌对胆固醇生物合成的调控的作 用一致。膜中胆固醇含量的变化可W影响受体环境、离子通道和其他膜蛋白质，并由此改变 它们的功能。此外，胆固醇代谢会影响脂质和激素相关的过程。
[0163] -其他的观察:在秀丽隐杆线虫中，BIF-I会增加憐酸泛酷琉基乙胺、3'-脱憐酸-辅 酶-a和辅酶A(CoA)的水平。此外，BIF-I导致黄素单核巧酸(FMN)和黄素腺嚷岭二核巧酸 (FAD)增加，运与FAD生物合成的上调节一致。CoA和FAD设及碳水化合物、脂质和氨基酸的代 谢。
[0164] 总体而言，向秀丽隐杆线虫喂养菌株BIF-I会产生一系列的与抗氧化剂代谢、碳水 化合物和核巧酸代谢有关的代谢变化。谷脫甘肤代谢显示为益生菌BIF-I降低氧化应激水 平的祀物。此外，BIF-I饮食导致戊糖憐酸和糖基化途径受到上调节。此外，在糖元、核巧酸、 脂质和辅助因子的代谢中观察到改变。
[0165] 运些结果与转录组学研究中所观察到的那些一致(实施例6)。
[0166] 实施例8
[0167] 差异性表达的基因的鉴定
[0168] 为了说明由实施例6中所述的转录组学结果得到的作用机制，我们着手试验来评 价在喂养菌株BIF-I的秀丽隐杆线虫中肌体脂肪的减少。在本试验中，我们使用秀丽隐杆线 虫野生型N2W及通过转录组学研究而突出的重要基因的不同的秀丽隐杆线虫突变体。当在 秀丽隐杆线虫野生型N2中观察到的功能作用完全或部分显现在基因的突变体中时，则该基 因是某些组分的作用机制所必需的。表8(附表)和图6中所示的结果识别出秀丽隐杆线虫中 突变的一些目标基因，其在摄入BIF-I后差异性地表达(转录组学研究）。运些结果说明摄入 本发明的菌株而影响的生物学活性。
[0170]
[0169] 表8:秀丽隐杆线虫中目标突变基因的列表。
[0171]
[0172] 图6定量地示出在秀丽隐杆线虫野生型N2和突变体菌株(具有表8中列出的基因的 差异性表达)中肌体脂肪减少的百分率。
[0173] 实施例9
[0174] 在鼠科模型中的临床前试验
[0175] 在喂养巧巾不同剂量的益生菌菌株BIF-I (1〇8,10哺1〇1化FU/天）的肥胖的Zucker 大鼠模型中着手试验，并且该试验包含2组消瘦的Zucker大鼠作为对照。该试验持续12周， 测定体重，并且记录在试验期间的固体和液体摄取量。此外，在试验结束时，测定生物化学 数据：总胆固醇、皿L胆固醇、甘油S醋、TN化因子（炎症标志物）、丙二醒(氧化应激的标志 物）、脂肪细胞因子和饥饿激素(厌腻的标志物）。
[0176] 结果示于图7至17中。
[0177] 总体而言，在鼠科模型中的临床前研究结果显示在喂养剂量为1〇1化FU/天的肥胖 的Zucker大鼠中，对体重减少的正作用（与对照组相比，对于处理组而言，体重增益减少 6.42%)。此外，喂养BIF-I的动物具有较低的固体摄取量。此外，生物化学参数的测定显示 在喂养BIF-I的大鼠中，总胆固醇降低，伴有皿L胆固醇升高，W及甘油S醋和葡萄糖水平稍 微下降。最终，BIF-I处理使得TWa因子、丙二醒和饥饿激素的水平降低，而脂肪细胞因子升 局。
[017引实施例10
[0179] 安全性研究
[0180] 根据FA0/W册的指导原则(FA0/W册，2002)执行菌株BIF-I的安全性。具体而言，评 价不需要的代谢物的生产:乳酸异构体的生产(表9)、胆汁盐去缀合(表10)和生物胺的生产 (表11 )、W及抗生素抗性图谱(表12)。
[0181]表9.菌株BIF-I产生的乳酸异构体 LUI07」 丄丄
[0190] 菌株BIF-I的益生菌性质
[0191] 菌株被认为是益生菌的主要需求之一在于其可W存活胃肠通过。因此，检验菌株 BIF-I对消化条件的抗性。由此，实施2个检验:一个检验为对低抑水平的抗性，而另一个检 验为对胆汁盐的抗性。在第一个检验中，将所述的菌株与pH水平降低的盐溶液（0.09% NaCl)接触放置15分钟，并计数活细胞的数量（图18)。在第二个检验中，将菌株BIF-I与量增 加的胆汁盐(牛胆汁)接触放置15分钟（图19)。运些检验的结果表明除了在pH4的溫育下(其 中检测到生活力稍微损失），存活率不具有显著的差异。
[0192]实施例12
[01W] 使用菌株BIF-I(双歧杆菌乳酸亚种CECT 8145)发酵的功能酸乳酪
[0194] 首先，在牛奶基质中分析BIF-I的发酵能力。为了进行该分析，使用不同剂量的细 菌（106，10哺IO 8C即/mU接种一定体积的市售脱脂乳，并在37°C下溫育2地。结果显示在1〇7 和IO8CFlVmL下接种的益生菌的积极发酵。
[0195] 随后，通过加入10化FU/mL BIF-IW及市售酸乳酪双歧杆菌发酵基在市售的脱脂 乳和奶粉上的混合物(0.6%)来制得功能酸乳酪。在本研究中，包含仅含有市售酸乳酪菌株 (德氏乳杆菌保加利亚亚种和嗜热链球菌）的对照发酵。在发酵结束时，通过双歧杆菌属的 选择性平板计数来检查菌株BIF-I的存在情况。
[0196] 最后，为了分析所得的酸乳酪对减少肌体脂肪的作用，在临床前模型秀丽隐杆线 虫中进行功能研究。结果显示在秀丽隐杆线虫中，使用菌株BIF-I发酵的酸乳酪比传统的市 售酸乳酪使得肌体脂肪减少更多（11.4 % )(图20)。
[0197] 此外，在使用菌株BIF-I发酵的豆奶喂养的秀丽隐杆线虫中测定到相同程度的肌 体脂肪减少情况(图21)。
[019引实施例13
[0199] 补充有菌株BIF-I(双歧杆菌乳酸亚种CECT 8145)的果汁
[0200] 将市售的橘子汁补充不同剂量（106, IO7和IO8CFlVmL)的BIF-I菌株(双歧杆菌乳酸 亚种CECT 8145)的活的和灭活的细胞。在后者(灭活的细胞）中，通过在12rC下高压蓋处理 30分钟将培养物灭活。就功能分析而言，将补充有菌株BIF-1(0D:30)的果汁加入至秀丽隐 杆线虫的培养基(NG培养基）的表面上。我们研究包含热灭活的细菌和活的细菌的果汁对秀 丽隐杆线虫的肌体脂肪减少的作用。
[0201] 结果（图22)显示喂养果汁（补充有IO7C即/mL菌株BIF-I的活细胞）的线虫类比对 照条件(NG培养基）经历了肌体脂肪减少10.3%。此外，在喂养果汁（具有IO 7CFlVmL菌株 BIF-I的灭活的细胞)的线虫类中所观察到的减少极其类似，显示脂肪比对照减少7.2%。
【主权项】
1. 一种属于物种双歧杆菌乳酸亚种的菌株，其于14/05/12登记于the Colecci0n Espafiolade Cultivos Tipo(Spanish Type Culture Collection-CECT)，登录号为 CECT8145。2. 根据权利要求1所述的可培养的和/或活性细胞形式的菌株。3. 根据权利要求1所述的不可培养的和/或非活性细胞形式的菌株。4. 包含根据权利要求1至3的任意一项所述的菌株的上清液和/或培养物和/或提取物 和/或生物活性化合物。5. 包含根据权利要求1至3的任意一项所述的菌株的配制物。6. 根据权利要求5所述的配制物，其中根据权利要求1所述的菌株以IO5CFU至IO12CFU/ 克或毫升配制物的量存在。7. 包含根据权利要求4所述的上清液和/或培养物和/或提取物和/或生物活性化合物 的配制物。8. 根据权利要求5至7的任意一项所述的配制物，其中所述的配制物为药物配制物。9. 根据权利要求8所述的配制物，其中该配制物进一步包含至少一种载体和/或药物可 接受的赋形剂。10. 根据权利要求5至7所述的配制物，其中所述的配制物为食品配制物。11. 根据权利要求10所述的配制物，其中所述的食品配制物选自水果或蔬菜汁、冰激 凌、婴儿食品、牛奶、酸乳酪、奶酪、发酵牛奶、奶粉、谷物、烘烤产品、牛奶基产品、谷物基产 品、营养补充剂、软饮料和/或饮食补充剂。12. 根据权利要求5至11的任意一项所述的配制物，其表征为包含至少一种选自以下的 其他微生物有机体：鼠李糖乳酸杆菌，德氏乳杆菌保加利亚亚种，高加索酸奶乳酸杆菌，类 高加索酸奶乳酸杆菌，短乳酸杆菌，干酪乳酸杆菌，胚芽乳酸杆菌，发酵乳酸杆菌，副干酪乳 酸杆菌，嗜酸乳酸杆菌，类植物酸杆菌，罗伊氏乳酸杆菌，嗜热链球菌，长双岐杆菌，短双岐 杆菌，双叉双歧杆菌，假链状双歧杆菌，链状双歧杆菌，假链状双歧杆菌，酿酒酵母，布拉迪 酵母，乳酸克鲁维酵母菌，或马克斯克鲁维酵母。13. 根据权利要求12所述的用于治疗和/或预防超重和/或肥胖症和/或相关的疾病/紊 乱的配制物。14. 根据权利要求12所述的使用的配制物，其中所述的相关的状况选自：代谢综合征、 高血压、高血糖症、炎症、2型糖尿病、心血管疾病、高胆固醇血症、激素紊乱和/或不孕症。
【文档编号】A61P3/04GK105849248SQ201480040870
【公开日】2016年8月10日
【申请日】2014年7月17日
【发明人】P·玛托雷尔格罗拉, M·E·切诺利库德罗斯, D·雷蒙维达尔, P·奥尔蒂斯塞拉诺, S·罗比斯帕拉, N·冈萨雷斯马丁内斯, S·吉诺维斯马丁内斯, B·卡司诺斯拉莫, A·席尔瓦安古洛, A·阿莱克桑德雷
【申请人】比奥波利斯有限公司