含有哌嗪基的吲哚类衍生物及其制备方法和应用
【专利摘要】本发明属于医药技术领域，涉及含有哌嗪基的吲哚类衍生物及其医药应用。苯基吲哚类衍生物包括该类化合物的立体异构体和药学上适用的盐，其结构通式如下：含有哌嗪基的吲哚类衍生物以及该类化合物药学上适用的酸加成的盐可以与现有药物合并或单独使用作为雌激素受体调节剂，用于治疗或预防与雌激素功能相关的各种疾病，如：骨丢失，骨折，骨质疏松，潮热，LDL胆固醇水平升高，心血管疾病，认知功能缺损，大脑退化疾病，焦虑，由于雌激素缺乏所致的抑郁，性功能障碍，高血压，视网膜变性和癌症，尤其是骨质疏松症。
【专利说明】
含有哌嗪基的吲哚类衍生物及其制备方法和应用
技术领域
[0001] 本发明涉及含有哌嗪基的吲哚类衍生物及其制备方法，和其在制备雌激素受体调 节剂的药物中的应用。
【背景技术】
[0002] 模拟雌激素样作用的化合物具有广泛的治疗及预防作用，其中包括:治疗骨质疏 松，缓解绝经期症状，治疗痤疮，治疗痛经和功能障碍性子宫出血，前列腺癌和预防心血管 疾病。
[0003] 研究发现雌激素受体(ER)有两种类型:ERa和ER0。配体与这两个亚型结合后，以不 同的组织特异性发挥生理作用。
[0004] 本领域需要的是与雌激素替代疗法一样可产生阳性反应但无不良副作用或副作 用减小的化合物，且对机体发挥组织特异性的雌激素样作用。苯基吲哚类衍生物因其具有 与雌激素类似的空间结构，可模拟雌激素，在生物体内与雌激素受体结合，发挥生理作用。
[0005] 雌激素是人体中一类重要的激素化合物，当妇女进入绝经期后，体内雌激素水平 下降，由此引发骨质疏松症、更年期综合征、老年痴呆症和心血管系统等疾病。针对绝经后 雌激素水平下降，米取雌激素替代疗法(est rogen replacement therapy，ERT)，能够显著 降低绝经后骨质疏松性骨折和冠心病的发生率（Turner RT，Riggs BL, Spelsberg TC.Endocr Rev,1994,15(3):275-300；Mora S1Kershner Dff1Vigilance CP,et al.Curr Treat Options Cardiovasc Med,2001,3( I) :67-79)。但是,ERT可能诱发乳腺癌和子宫内 膜癌（Persson I ,ffeiderpass E1Bergkvist L,et al .Cancer Causes Control, 1999,10 (4) :253-260)。为克服雌激素致癌变的不良反应，人们又发展了雌、孕激素联合使用的性激 素替代疗法(hormone replacement therapy，HRT)，但长期的HRT治疗仍可能增加乳腺癌的 发生率，即使使用孕激素，并非在所有的情况下均能克服由雌激素所导致的子宫内膜癌的 发生，这些不良反应限制了 HRT的长期应用。选择性雌激素受体调节剂（selective estrogen receptor modulators，SERMs)对骨骼和心血管系统具有雌激素样作用，而对子 宫和乳腺表现出抗雌激素作用的药物。但是临床上使用的他莫西芬和雷洛昔芬能导致子宫 内膜癌和热潮红等不良反应(Fisher B，Costantino JP，Wickerham DL,et al.J Nati Cancer Inst,1998,90:1371-1388；Walsh Bff1Kuller LH1Wild RA,et al.J Am Med Assoc,1998,279:1445-1451)。
【发明内容】
[0006] 本发明所解决的技术问题是提供一种如式I所示的化合物、其前体药物和药物活 性代谢物，以及上述化合物的立体异构体及其药学上可接受的盐，并提供了其在制备预防 和治疗雌激素相关的疾病的药物中的应用。
[0007]
[0008] 其中：R独立的选自氢、C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，取代或未取代的苯基;其中取代 基选自Cl -C6烷基，卤素 ，Cl -C6烷氧基，Cl -C6卤代烷基。
[0009] 优选地，R独立的选自氢、C1-C4烷基，C1-C4烷氧基，取代或未取代的苯基;其中取 代基选自C1-C4烷基，卤素，C1-C4烷氧基，C1-C4卤代烷基。
[0010] 更优选地，R独立的选自氢、甲基、乙基、丙基，异丙基、叔丁基，环己基，4-氯二苯甲 基，苯基或取代苯基;其中取代苯基选自4-甲基苯基，4-乙基苯基，2-氯苯基，3-氯苯基，4-氣苯基，4_漠苯基，4_氣苯基，2，6_二氣苯基，4_甲氧基苯基，4_二氣甲基苯基。
[0011] 本发明的化合物可以单独给予或优选与药学上可接受的载体或稀释剂，任选根据 常规的制药习惯与已知辅剂联合，在药物组合物中给予。化合物经口服给予或经非胃肠道 包括静脉内，肌肉内，腹膜内，皮下，直肠和局部途径给予。
[0012] 在用于口服的片剂中，通常加入一般使用的载体包括乳糖和玉米淀粉，以及润滑 剂如硬脂酸镁。对胶囊形式的口服药来说，可用的稀释剂包括乳糖和干燥的玉米淀粉。对根 据本发明的治疗化合物的口服途径使用来说，被选化合物可以以例如片剂或胶囊的形式， 或作为水溶液或混悬液而被给予。对片剂或胶囊形式的口服给药来说，活性药物成分能与 可口服，无毒，药学上可接受的惰性载体组合，载体例如有乳糖，淀粉，蔗糖，葡萄糖，甲基纤 维素，硬脂酸镁，磷酸二钙，硫酸钙，甘露醇，山梨醇等;对液体形式的口服给药来说，口服药 物成分可与任意的可口服，无毒，药学上可接受的惰性载体例如乙醇，甘油，水等组合。此 外，还可在混合物中加入适宜的粘合剂，润滑剂，崩解剂和着色剂。适宜的粘合剂包括淀粉， 明胶，天然糖如葡萄糖或乳糖，玉米甜味剂，天然和合成的树胶如阿拉伯胶，西黄蓍胶或海 藻酸钠，羧甲基纤维素，聚乙二醇，蜡等。适宜的润滑剂包括油酸钠，硬脂酸钠，硬脂酸镁，苯 甲酸钠，醋酸钠，氯化钠等。当水性混悬液口服使用时，可将活性成分与乳化剂和混悬剂组 合。也可加入某些甜味剂或矫味剂。对肌内，腹膜内，皮下和静脉内使用来说，通常制备成活 性成分的无菌溶液，溶液的PH应该适当的调节和缓冲。对静脉内使用来说，应当控制溶质的 总浓度以使制剂维持等渗。
[0013] 本发明的化合物还能以脂质体给药系统的形式例如小型单层囊泡，单层大囊泡和 多层囊泡的形式给予。脂质体可由各种磷脂例如胆固醇，硬脂胺或磷脂酰胆碱形成。
[0014] 本发明的化合物还可以通过使用单克隆抗体作为单独载体而给予，其中化合物分 子是被偶联的。本发明的化合物还可以与作为目标药物载体的可溶性聚合物偶联。这类聚 合物可包括聚乙烯吡咯烷酮，吡喃共聚物，聚羟丙基甲基丙烯酰胺-苯酚，聚羟基-乙基天冬 酰胺-苯酚或被棕榈酰基取代的聚氧化乙烯-聚赖氨酸。此外，本发明的化合物可以与一类 可生物降解的用于实现药物控释的聚合物偶联，所述聚合物有例如聚乳酸，聚乙醇酸，聚乳 酸和聚乙醇酸的共聚物，聚己内酯，聚羟基丁酸，聚原酸酯类，聚缩醛类，聚二氢吡喃，聚氰 基丙烯酸酯和水凝胶的交联或两性嵌段共聚物。
[0015] 本发明的化合物还可与已知的可用于治疗或预防以下疾病的药剂组合使用：骨丢 失、骨质疏松、转移性骨病、牙周病、软骨退化，子宫内膜异位，子宫纤维瘤疾病，潮热，LDL胆 固醇水平升高，心血管疾病，认知功能缺损，大脑退化疾病，焦虑，由于雌激素缺乏所致的抑 郁，炎症，炎性肠疾病，性功能障碍，高血压，视网膜变性和癌症，尤其是骨质疏松。目前公开 的化合物与可用于治疗或预防在此公开疾病的药剂的联合也在本发明的范围内。这样的药 剂包括以下物质:有机双膦酸盐;组织蛋白酶K抑制剂;雌激素或雌激素受体调节剂;雄激素 受体调节剂;破骨细胞质子ATP酶抑制剂;HMG-CoA还原酶抑制剂;整联蛋白受体拮抗剂;成 骨细胞合成代谢剂例如PTH;降钙素;维生素 D或合成的维生素 D类似物;选择性5-羟色胺再 摄取抑制剂(SSRIS);芳香酶抑制剂;及其药学上可接受的盐和混合物。优选的组合是本发 明化合物和有机膦酸盐。另一个优选的组合是本发明化合物和组织蛋白K抑制剂。另一个优 选的组合是本发明化合物和雌激素。另一个优选的组合是本发明化合物和雄激素受体调节 剂。另一个优选的组合是本发明化合物和成骨细胞合成代谢剂。
[0016] "双膦酸盐"包括双膦酸盐及其药学上可接受的盐类和衍生物。"雌激素"包括但不 限于天然存在的雌激素，合成的结合雌激素，口服避孕药和硫酸化雌激素。"雌激素受体调 节剂"指干扰或抵制雌激素与受体结合的物质，无论机制如何。"组织蛋白酶K抑制剂"指的 是能干扰半胱氨酸蛋白酶组织蛋白酶K活性的化合物。"雄激素受体调节剂"指的是能干扰 或抑制雄激素与受体结合的化合物，不论机理如何，包括非那雄胺和其它的5α还原酶抑制 剂。"破骨细胞质子ATP酶抑制剂"指的是质子ATP酶的抑制剂，其能在破骨细胞的顶膜上找 到，并且已经报道其在骨的再吸收过程中发挥了显著作用。这种质子栗表示了用于设计骨 再吸收抑制剂的引人注目的靶标，其可潜在地用于治疗和预防骨质疏松和相关的代谢疾 病。" HMG-CoA还原酶抑制剂"指的是3-羟基-3-甲基戊二酰基-CoA还原酶的抑制剂。对HMG-CoA还原酶具有抑制活性的化合物能用本领域已知的测定法容易地确定。"整联蛋白受体拮 抗剂"指的是能选择性拮抗，抑制或对抗生理学配体与αγβ3整联蛋白结合的化合物，能选 择性拮抗，抑制或对抗生理学配体与α γ β3整联蛋白结合的化合物，能选择性拮抗，抑制或 对抗生理学配体与α γ β3整联蛋白和α γ β5整联蛋白结合的化合物，能选择性拮抗，抑制或 对抗毛细管上皮细胞表达的特定整联蛋白的活性的化合物。拮抗αγβ3的作用选自抑制骨 再吸收，抑制再狭窄，抑制黄斑变性，抑制关节炎和抑制癌症及转移生长。"成骨细胞合成代 谢剂"指的是能构建骨的药剂，例如ΡΤΗ，降钙素能通过抑制破骨细胞的活性来抑制骨的重 吸收。"维生素 D"包括但不局限于维生素 D3和维生素 D2,它们是维生素 D的羟基化生物学活 性代谢物的天然存在的，生物学失活前体。"合成的维生素 D类似物"包括作用类似维生素 D 的非天然存在的化合物。选择性5-羟色胺再摄取抑制剂通过增加脑中5-羟色胺的数量而发 挥作用，其非限制性实例包括氟西汀，帕罗汀，舍曲林，西酞普兰和氟伏沙明，也能用于治疗 与雌激素功能有关的疾病。"芳香酶抑制剂"包括抑制芳香酶的化合物，其非限定性的选自： 氨鲁米特，来曲唑，福美坦，依西美坦，阿他美坦，法倔唑，氟罗唑，伏氯唑。
[0017] 有关本发明化合物的术语"给予"及其变体(例如"给予"化合物）的意思是将化合 物或化合物的前药引入需要治疗的动物系统中。当本发明的化合物或其前药与一种或多种 其它活性剂(例如双膦酸盐化合物等)组合提供时，"给予"及其变体都可以被理解为包括同 时和相继引入化合物或其前药以及其它药剂。本发明包括在其范围内的本发明化合物的前 药。通常，这种前药是将本发明化合物的官能衍生物，其在体内易于转变为所需的化合物。 这样，在本发明的治疗方法中，术语"给予"将包含用具体公开的化合物或可能未被具体公 开的化合物，但是其能在给予患者后于体内转化为特定的化合物，以治疗所述的各种疾病。 用于选择和制备适宜的前药衍生物的常规方法，在此引入作为参考。这些化合物的代谢物 包括将本发明的化合物引入生物环境后产生的活性物质。
[0018] 本发明的化合物是雌激素受体的配体，可用于治疗或预防与雌激素功能相关的各 种疾病，其中包括:如权利要求8所述的应用，其特征在于，所述的雌激素相关性疾病为:骨 丢失，骨折，骨质疏松症，转移性骨病，软骨退化，乳腺癌，子宫内膜异位，潮热，前列腺肥大， 前列腺癌，卵巢癌，绝经综合症或与接触环境化学品或天然激素失衡有关的不良生殖作用。 本发明还包含可用于治疗骨质疏松或其它骨病的药物组合物，治疗包括给予治疗有效量的 本发明化合物，该组合物含有或不含有药学上可接受的载体或稀释剂。本发明的适宜组合 物包括含有本发明化合物和药学上可接受载体例如盐水的水溶液，PH在一定水平上，例如 为7.4。溶液可以通过局部推注而被引入到患者的血流中。
[0019] 当本发明的化合物被给予人类受试中，日剂量将通常由处方医师确定，剂量一般 根据患者个体的年龄，体重和反应以及患者症状的严重程度而变化。在一个示例性应用中， 将适宜量的化合物给予接受治疗的哺乳动物。当用于所指示的作用时，本发明的口服剂量 将为约〇 · 〇 Img每kg体重每天(mg/kg/天)到约100mg/kg/天，优选0 · 01到10mg/kg/天，最优选 0.1到5 . Omg/kg/天。对口服给药来说，组合物优选以片剂的形式被提供，其中片剂包含 0.01，0.05,0.1，0.5，1.0,2.5,5.0，10.0，15.0,25.0,50.0，100和50011^的活性成分，用于调 节受治患者症状的剂量。药物一般包含约0.01 m g到约5 0 0m g的活性成分，优选约I m g到约 IOOmg活性成分。对于静脉注射，在恒速输注期间，最优选的剂量将为约0.1到约10mg/kg/分 钟。本发明的化合物可以以每日一次的剂量给予，或者是可以将每日总剂量分为每日两次， 三次或四次的剂量给予。此外，本发明的优选化合物可以以鼻内药物的形式通过局部使用 适宜的鼻内载体，或通过经皮途径，使用本领域普通技术人员已知的经皮贴剂形式而给予。 对于以经皮给药系统的形式进行的给药来说，剂量给药在整个给药方案中当然将是连续的 而不是间断的。
[0020] 本发明的化合物能与其它可用于治疗雌激素介导的状况的药剂组合使用。这种组 合的各个成分能在治疗期间以不同的次数分别或同时以分开的形式或单一组合的形式给 予。因此本发明能被理解为包含所有这样的同时或交替治疗的方案，而且术语"给予"也相 应的按此解释。本发明化合物与其它可用于治疗组织蛋白酶介导状况的药剂的组合的范 围，原则上包括与能用于治疗与雌激素功能有关疾病的任意药物组合物的任意组合。
[0021] 因此本发明还可以包括与第二种药剂组合的使用，其中第二种药剂选自：有机双 磷酸盐化合物，组织蛋白酶K抑制剂，雌激素，雌激素受体调节剂，雄激素受体调节剂，破骨 细胞质子ATP酶抑制剂，HMG-CoA还原酶抑制剂，整联蛋白受体拮抗剂，成骨细胞合成代谢 剂，降钙素，维生素 D，合成的维生素 D类似物，选择性5-羟色胺再摄取抑制剂，芳香酶抑制 剂，及其药学上可接受的盐和混合物。
[0022] 本发明的化合物能与其它可用于治疗由雌激素介导的状况的药剂组合使用。这种 组合的每个成分都能在治疗期间以不同的次数分别给予或同时以分开的形式或单一组合 的形式给予。因此本发明应被理解为包含所有这样的同时或交替治疗的方案，而且术语"给 予"也应按此解释。应该理解，本发明化合物与其它可用于治疗雌激素介导状况的药剂的组 合的范围原则上包括与能用于治疗与雌激素功能有关疾病的任意药物组合物的任意组合。
[0023] 使用本发明化合物的剂量方案将根据多种因素进行选择，这包括患者的类型，种 属，年龄，体重，性别和医学状况;受治状况的严重程度;给药途径;患者的肾和肝功能；以及 所用的特定化合物或其盐。普通技术医师，兽医或临床医师可容易的确定和开具需要预防， 抗击或阻止状况发展的有效药量。
[0024] 在本发明的方法中，在此详细描述的化合物能形成活性成分，并根据给药形式即 口服片剂，胶囊，酏剂，糖浆剂等而与适当选择的适宜的药学稀释剂，赋形剂或载体(在此统 称为'载体'物质)混合，并符合常规的药学习惯。
[0025] 本发明化合物的药学上可接受的盐类包括由无机或有机酸形成的常规无毒盐。常 规的无毒盐包括源自无机酸例如盐酸，氢溴酸，硫酸，氨基磺酸，磷酸，硝酸等的盐，以及由 有机酸例如醋酸，丙酸，琥珀酸，乙醇酸，硬脂酸，乳酸，苹果酸，酒石酸，柠檬酸，抗坏血酸， 双羟萘酸，马来酸，羟基马来酸，苯乙酸，谷氨酸，苯甲酸，水扬酸，对氨基苯磺酸，2-乙酰氧 基-苯甲酸，反丁烯二酸，甲苯磺酸，甲磺酸，乙烷二磺酸，草酸，羟乙磺酸，三氟醋酸等制备 的盐类。本发明化合物的药学上接受的盐类能由包含酸性或碱性部分的本发明化合物经常 规的化学方法合成。通常，碱性化合物的盐类能通过离子交换色谱法制备，或将游离碱与化 学计量或过量的所期望的成盐无机或有机酸在适宜的溶剂或溶剂的各种组合中进行反应 来制备。类似的，酸性化合物的盐类可通过与适宜的无机或有机碱进行反应来形成。
[0026] 本发明的化合物能根据以下的一般方案使用适宜的物质来制备，并且通过随后的 具体实施例进一步的举例说明。以下制备步骤的条件和方法的各种已知变化也能用于制备 这些化合物。所有的温度均为摄氏度，除非另有指明。
[0027] 下面的流程描述了本发明几个代表性实施例的制备。
[0029]其中：R独立的选自氢、C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，取代或未取代的苯基；其中取代 基选自Cl -C6烷基，卤素 ，Cl -C6烷氧基，Cl -C6卤代烷基。
[0030] 优选地，R独立的选自氢、甲基、乙基、丙基，异丙基、叔丁基，环己基，4-氯二苯甲 基，苯基或取代苯基;其中取代苯基选自4-甲基苯基，4-乙基苯基，2-氯苯基，3-氯苯基，4-氣苯基，4_漠苯基，4_氣苯基，2，6_二氣苯基，4_甲氧基苯基，4_二氣甲基苯基。
[0031] 本发明所述化合物制备方法简单，收率稳定，制备的化合物能较好的预防和治疗 雌激素相关的疾病。
【具体实施方式】
[0032]以下述实例详细叙述本发明。但是，应当明白，本发明不限于具体叙述的下述实 例。
[0033] 实施例1:1-[4-(4_甲基哌嗪-1-基）丁基]-5-羟基-2-(4-羟基苯基)-3-甲基-IH- Π 引噪的制备
[0034] 步骤A): ^(4-苄氧基苯基)-2-(4-苄氧基苯基氨基)-1-丙酮的制备
[0035] 将 4-苄氧基苯胺（7.88,0.039111〇1)、1-(4-苄氧基苯基）-2-溴-1-丙酮（10.58， 0·033mol)置于500mL圆底烧瓶中，乙醇作溶剂，加入三乙胺(6 ·6g，0 ·065mol)，回流反应5h〇 自然冷却至室温，抽滤，得乳白色固体12.38，收率85.3%。1114.125-126°(：<^51-]^:111/2 438 ([M+H]+)。
[0036] 步骤B) :5_苄氧基-2-(4-苄氧基苯基)-3-甲基-IH-吲哚的制备
[0037] 将1-(4-苄氧基苯基)-2-(4-苄氧基苯基氨基)-1-丙酮（12.38,0.028111〇1)、4-苄氧 基苯胺（14.Og，0.070mol)置于500mL烧瓶中，乙二醇单乙醚作溶剂，回流反应6h。减压蒸除 溶剂，剩余物加乙醇搅拌，抽滤，得棕色固体9.5g，收率80.5 % a. p. 151-152 °C iSI-MS: m/z ASOGM+^lc/H-NMRHOOMHz.CDChWT.SWsJH)，7.45(m，14H)，7.28((1, J = 2.6Hz，1H)， 7.11(d，J = 8.4Hz，2H)，6.97(dd，Ji = 8.5Hz，j2 = 1.5Hz，lH)，5.18(s，2H)，5.15(s，2H)，2.43 (s，3H)〇
[0038] 步骤C) :1-(4-溴丁基)-5-苄氧基-2-(4-苄氧基苯基)-3-甲基-IH-吲哚的制备
[0039] 将氢化钠（1.18,0.048111〇1)置于25011^圆底烧瓶中，加入1.二甲基甲酰胺 (15mL)，冰浴下搅拌IOmin，滴加溶有5-苄氧基-2-(4-苄氧基苯基）-3-甲基-IH-吲哚 (10.0 g，0.024mo 1)的N，N-二甲基甲酰胺溶液，滴毕，冰浴下继续搅拌30min。同温下滴加含 有1，4-二溴丁烷(7.7g，0.036mo 1)的N，N-二甲基甲酰胺溶液，滴毕，升温至室温，反应2.5h。 将反应液倒入冰水中，二氯甲烷萃取(3X50mL)，饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸 除溶剂，柱层析得浅黄色固体8.(^。收率60.6%。111|89-90°(： (^31-13:111/2 554([1+!1] + )， 576([M+Na] + )〇1H-NMR(400MHz,DMS0-d6)57.42(m,14H),7.17(d ,J = 8.7Hz,lH),7.10(d J = 2.3Hz,lH) ,6.88(dd,Ji = 8.8Hz,j2 = 2.4Hz,lH) ,5.17(s,2H) ,5.13(s,2H) ,4.04(t,J = 6.5Hz, 2H), 3.31 (t ,J = 6. OHz, 2H), 2.10( s, 3H), 1.54(m, 4H) 〇
[0040] 步骤D):l-[4-(4-甲基哌嗪-I-基)丁基]-5-羟基-2-(4-羟基苯基)-3-甲基-IH-吲 噪的制备
[0041] 将卜^-溴丁基)-5-苄氧基-2-(4-苄氧基苯基)-3-甲基-IH-吲哚(2mmol)，l-甲基 哌嗪(2.4mmol)，三乙胺(4mmol)置于茄型瓶中，正丁醇作溶剂，回流反应4h。减压蒸除溶剂， 剩余物用二氯甲烷溶解，冰盐浴下搅拌l〇min，缓慢滴加三溴化硼(50mmol)，滴毕后有大量 固体产生，抽滤，柱层析，得黄色固体0 · 46g，收率50 · 0 %。111 · p · 116-118°C C3ESI-MS:m/z 394 (d ,J = 8.6Hz,2H),6.89(d ,J = 8.5Hz,2H),6.77(d ,J = 2.2Hz,lH),6.64(dd ,Ji = 8.7Hz J2 = 2.2Hz,lH),4.22(t,J=6.6Hz,2H),3.95(m,2H),3.64(m,2H),3.41(m,2H),2.97(m,2H), 2.33(s,3H) ,2.18( t, J = 7.4Hz,2H) ,2.04( s,3H) ,1.06( t, J = 7.0Hz, 2H) ,0.91( t, J = 7·4Hz，2H)〇
[0042] 实施例2: l-[4-(4-乙基哌嗪-1-基）丁基]-5-羟基-2-(4-羟基苯基)-3-甲基-IH-Π 引噪的制备
[0043] 按照实施例1方法，得黄色固体0.31g，收率Sej^am.p.lOe-lOTT^ESI-MSzm/z 408( [M+H] + ) ,H-匪R(400MHz，DMS0-d6)S8.53(s，lH)，7· 96(s，lH)，7.23((1, J = 8.7Hz，lH)， 7.17(d,J = 8.6Hz,2H) ,6.89(d,J = 8.5Hz,2H) ,6.77(d,J = 2.2Hz,lH) ,6.64(dd,J = 8.4, 1.9Hz,lH),4.22(t ,J = 6.6Hz,2H),3.95(t ,J = 7.1Hz,2H),3.62(m,2H),3.47(m,2H),2.98 (m,2H),2.67(m,2H),2.18(m,2H),2.04(s,3H),1.62(m,4H),1.06(t,J=5.6Hz,3H)〇
[0044] 实施例3: ^4-(哌嗪-丨-基）丁基]-5-羟基-2-(4-羟基苯基)-3-甲基-IH-吲哚的 制备
[0045] 按照实施例1方法，得橘黄色固体0.32g，收率M.g^m.p.lSS-lSet^ESI-MSim/z 380( [M+H] + ) ,H-匪R(400MHz，DMS0-d6)S9.78(s，lH)，8· 52(s，lH)，7.23((1, J = 8.7Hz，lH)， 7.17(d,J = 8.6Hz,2H) ,6.89(d,J = 8.5Hz,2H) ,6.77(d,J = 2.2Hz,lH) ,6.64(dd,Ji = 8.7Hz j2 = 2.2Hz,lH),4.22(t ,J = 6.6Hz,2H),3.95(m,2H),3.64(m,2H),3.47(m,2H),2.98 (m,2H),2.39(s,lH),2.18(t,J=7.1Hz,2H),2.04(s,3H),1.07(m,4H)〇
[0046] 实施例4: ^{4^4-(2-乙基苯基）哌嗪-I-基]丁基}-5-羟基-2-(4-羟基苯基)-3-甲基-1Η-Π 引噪的制备
[0047] 按照实施例1的方法，得浅黄色固体0.30g，收率51.0%。111. p. 193-194°C iSI-MS: m/zdSWEM+HyhSOeGM+Nallc/H-MffiHOOMHz.DMSO-dsMgJTbJHhS.eWsJHhS 7.49(d ,J = 5.2Hz,lH) ,7.26(d ,J = 8.8Hz , 1H), 7.19(d ,J = 8.3Hz , 2H), 7.15(d ,J = 6.9Hz , 1H) ,7.05(d,J = 7.0Hz,lH) ,7.02(d,J = 8.5Hz,lH) ,6.90(d,J = 8.5Hz,2H) ,6.78(d J = 2.2Hz,lH) ,6.64(dd ,Ji = 8.6Hz j2 = 2.4Hz,lH),4.22(t ,J = 6.5Hz,2H),3.51(t,2H) ,3.42 (m,2H),2.74(m,2H),2.67(m,2H),2.61(m,2H),2.14(m,2H),2.05(s,3H),1.64(t,J= 5.3Hz,3H),1.16(m,4H)〇
[0048] 实施例5:1-{4-[4-(2-氯苯基）哌嗪-I-基]丁基}-5-羟基-2-(4-羟基苯基)-3-甲 基-1Η-Π 引噪的制备
[0049] 按照实施例1的方法，得黄色固体0.38g，收率 490( [M+H] + ) ,H-匪R(400MHz，DMS0-d6)S9.78(s，lH)，8· 71(s，lH)，7.24((1, J = 8.8Hz，lH)， 7.20(d ,J = 7.5Hz,2H) ,7.18(d ,J = 8.2Hz , 1H), 6.91 (d ,J = 3. IHz , 2H), 6.89(d ,J = 2.9Hz , lH),6.87(d,J = 8.4Hz,lH),6.78(d,J = 2.3Hz,lH),6.76(d,J = 8.8Hz,2H) ,6.63(dd Ji = 8.7Hz ,J2 = 2.2Hz,1H) ,3.96(t ,J = 6.6Hz,2H) ,3.09(s,8H),2. ll(t,J = 7.0Hz,2H) ,2.05 (s,3H),1.23(m,4H)〇
[0050] 实施例6:1-{4-[4-(2,6-二氟苯基）哌嗪-I-基]丁基}-5_羟基-2-(4-羟基苯基)_ 3-甲基-1Η-Π 引噪的制备
[0051 ] 按照实施例1的方法，得黄色固体0.28g，收率 492( [M+H] + ) ,H-匪R(400MHz，DMS0-d6)S9.00(s，lH)，8· 36(s，lH)，7.24((1, J = 8.7Hz，lH)， 7.21(d ,J = 9.0Hz,2H) ,7.17(d ,J = 8.4Hz , 1H), 6.91 (d ,J = 6. OHz , 2H), 6.89(d ,J = 5.4Hz , 2H),6.78(d ,J = 2.2Hz,lH) ,6.63(dd ,Ji = 8.7Hz ,J2 = 2.3Hz , 1H), 3.96(t ,J = 7.2Hz , 2H), 3.04(m,4H),2.32(m,4H),2.12(m,2H),2.05(s,3H),1.06(m,2H),0.85(m,2H)〇
[0052] 实施例7:l-{4-[4-(3-氯苯基）哌嗪-I-基]丁基}-5-羟基-2-(4-羟基苯基)-3-甲 基-1Η-Π 引噪的制备
[0053] 按照实施例1的方法，得黄色固体0.23g，收率 490( [M+H] + ) ,H-匪R(400MHz，DMS0-d6)S9.80(s，lH)，8· 71(s，lH)，7.42((1, J = 8.5Hz，lH)， 7.37(d ,J = 7.4Hz,lH) ,7.33(d ,J = 8.4Hz , 1H), 7.27(d ,J = 7.6Hz , 1H), 7.21 (d ,J = 8.5Hz , lH),7.15(d,J = 8.5Hz,2H),6.87(d,J = 8.4Hz,2H),6.76(d,J = 2.0Hz,lH) ,6.62(dd Ji = 8.6Hz j2 = 2.0Hz,lH),3.91(t ,J = 7.3Hz,2H),2.98(m,4H),2.20(m,4H),2.06(m,2H),2.03 (s，3H)，1.44(m，2H)，1.14(m，2H)〇
[0054] 实施例8:1-{4-[4-( 4-氯苯基）哌嗪-丨-基]丁基}-5-羟基-2-(4-羟基苯基)-3-甲 基-1Η-Π 引噪的制备
[0055] 按照实施例 1 的方法，得黄色固体0 · 28g，收率43 · 7 %。111 · p · 213-214°C C3ESI-MS:m/z 490( [M+H] + ) ,H-匪R(400MHz，DMS0-d6)S9.14(s，lH)，8· 33(s，lH)，7.24((1, J = 8.7Hz，lH)， 7.21(d ,J = 9.0Hz,2H) ,7.17(d ,J = 8.4Hz , 2H), 6.91 (d ,J = 6. OHz , 2H), 6.89(d ,J = 8.4Hz , 2H),6.78(d ,J = 2.2Hz,lH) ,6.63(dd ,Ji = 8.7Hz ,J2 = 2.3Hz , 1H), 3.96(t ,J = 7. OHz , 2H), 3.04(m,4H),2.32(m,4H),2.11(t,J=7.0Hz,2H),2.05(s,3H),1.46(m,4H)〇
[0056] 实施例9:1-{4-[4-( 4-溴苯基）哌嗪-丨-基]丁基}-5-羟基-2-(4-羟基苯基)-3-甲 基-1Η-Π 引噪的制备
[0057] 按照实施例1的方法，得黄色固体0.40g，收率Slj^Dm.p.iei-ieSt^ESI-MSzm/z 534([M+H] + )〇1H-NMR(400MHz,DMS0-d6)59.78(s,lH),8.69(s,lH) ,7.24(d,J = 8.8Hz,lH), 7.20(d ,J = 7.5Hz,2H) ,7.18(d ,J = 8.2Hz , 2H), 6.90(d ,J = 8.4Hz , 2H), 6.87(d ,J = 8.4Hz , 2H),6.78(d ,J = 2.3Hz,lH),6.63(dd ,Ji = 8.7 j2 = 2.2Hz,lH),3.96(t ,J = 7.0Hz,2H),3.09 (m,4H),2.32(m,4H),2.11(t,J=7.0Hz,2H),2.05(s,3H),1.22(m,4H)〇
[0058] 实施：10:l-{4-[4-(4-氯二苯甲基）哌嗪-I-基]丁基}-5-羟基-2-(4-羟基苯基)- 3-甲基-1Η-Π 引噪的制备
[0059] 按照实施例1的方法，得黄色固体0.25g，收率 580([M+H] + )〇1H-NMR(400MHz,DMS0-d6)59.78(s,lH),8.70(s,lH) ,7.42(d,J = 8.5Hz,lH), 7.29(m,9H) ,7.15(d ,J = 8.5Hz,2H) ,6.87(d ,J = 8.4Hz , 2H), 6.76(d J = 2. OHz , 1H) ,6.62 (dd ,Ji = 8.6Hz ,J2 = 2.0Hz,1H),4.26(s,1H) ,3.91(t ,J = 7.3Hz,2H),3.43(m,2H),2.20(m, 8H),2.03(s,3H),1.43(m,2H),1.13(m,2H)〇
[0060] 实施例n : ^{444-(4-氟苯基)哌嗪-丨-基]丁基}-5-羟基-2-(4-羟基苯基)-3-甲 基-1Η-Π 引噪的制备
[0061 ] 按照实施例1的方法，得黄色固体0.43g，收率 474(^+^ + ),512(^+^ + ),^^^(40010^,01^0-(16)39.76(8,1!!)，8.70(s，1H)，7.25((1, J = 8.8Hz，lH)，7.21(d，J = 7.5Hz，2H)，7.18(d，J = 8.2Hz，2H)，6.90(d，J = 8.4Hz，2H)，6.87 (d ,J = 8.4Hz,2H),6.78(d ,J = 2.3Hz,lH),6.64(dd ,Ji = 8.7Hz j2 = 2.2Hz,lH),3.96(t J = 7.0Hz,2H),3.08(m,4H),2.33(m,4H),2.10(t,J=7.0Hz,2H),2.05(s,3H),1.23(m,4H)〇
[0062] 药物组合物
[0063] 在下述制剂中，"活性成分"是指式I化合物，或其盐或溶剂化物。
[0064]实施例12:明胶胶囊
[0065]
[0066]
[0067]
[0068]
[0069]
[0070] 将活性组分，淀粉和纤维素通过45目U. S.筛并充分混合，将所得粉末与聚乙烯吡 咯烷酮混合，然后通过14目U.S.筛，将这样得到的颗粒在50-60°C干燥并通过18目U.S.筛。 将羧甲基纤维素钠，硬脂酸镁和滑石，先通过60目U. S.筛，然后加入至上述颗粒中，混合后， 在压片机上压制成片剂。
[0071] 实施例15:悬浮剂
[0072]
[0073]将药物通过45目U.S.筛并与羧甲基纤维素钠及糖浆混合以形成均匀糊状物，将苯 甲酸溶液，矫味剂，和着色剂用一些水稀释，并边搅拌边加入，然后加入足够量水以达到所 需的体积。
[0074] 实施例16:气溶胶
[0075]
[0076]将活性成分与乙醇混合，并将所得混合物加入至部分的抛射剂22中，冷却至30°C， 并转移至容器中。然后将所需量加入至不锈钢容器中并用剩余喷射剂稀释，然后安装阀门 装置。
[0077] 实施例17:栓剂
[0078]
[0079] 将活性组分通过60目U.S.筛并将其悬浮于预先熔化的饱和脂肪酸甘油酯类化合 物中，然后将混合物倾入至标准的2g腔栓剂模中并冷却。
[0080] 实施例18:可注射制剂
[0081：
[0082]将以上溶液静脉内注射给药至患者，速度约ImL每分钟。
[0083] 药理药效实验
[0084] 实施例19:雌激素受体结合实验
[0085] 雌激素受体配体结合试验设计为采用闪烁亲近检测，使用含氚的雌二醇和重组表 达的雌激素受体。在杆状病毒表达系统中生产全长重组人类ERa及ERf3蛋白。ERa及ERf3提取 物在含有6mMa-单硫代甘油的磷酸缓冲盐水中以1:400稀释。将200yL等分样的稀释受体制 备物加入96孔Flashplate板每一孔中。用Saran Wrap覆盖培养板，于4°C温育过夜。第二天 早上将20yL含有10%牛血清白蛋白的磷酸缓冲盐水等分试样加入至该96孔板的每一孔中， 且使其在4°C温育2h。然后用200yL含有20mMTris (pH7.2)，ImM EDTA，10 % 丙三醇，50mM KCl 及6mMa-单硫代甘油的缓冲液洗涤培养板。为在这些受体包被的培养板中进行测试，加入 178yL相同缓冲液至96孔板的每一孔中。然后将20yL IOnM 3H-雌二醇溶液加入至该培养板 的每一孔中。
[0086] 在0.0 lnM到1000 nM的浓度范围内评估测试化合物。测试化合物储液应在100% DMSO中制备为试验中测试所期望终浓度的100X。在96孔板测试孔中的DMSO量不应超过1 %。 最终加入至测试中的为配制于100 % DMSO中的2yL测试化合物等分试样。密封这种板并使其 在室温平衡3h。在为计数96孔板装备的闪烁计数器中计数板。
[0087]部分样品对雌激素受体ERi3结合实验抑制率列表如下：
[0089] 实施例1-11的化合物表现出对ERa的结合亲和力在IC5Q = 75至ΙΟΟΟΟμΜ范围内，而 对ERP的结合亲和力在IC5〇 = 8.3至40μΜ的范围内。在上述标准药理测试步骤中得到的结果 表明，本发明的化合物属于雌激素受体活性化合物，某些化合物对ERa受体具有强烈的优先 亲和力。本发明化合物从对ERa具有比ERi3高的优先亲和力到对两种受体同时具有几乎相当 的亲和力变动。因此，本发明化合物具有各种至少部分基于其受体亲和力选择性特征的活 性。另外，由于各种新受体配体络合物不同，因此它与各种辅调节蛋白之间的相互作用也是 不相同的，本发明化合物根据所处细胞环境将显示出不同的调节活性。例如，在某些细胞类 型中，某化合物可作为雌激素激动剂，而在其它组织中，该化合物却是拮抗剂。具有上述活 性的化合物通常被称为SERM(选择性雌激素受体调节剂）。然而，与大多数雌激素不同的是， 很多SERM不引起子宫湿重的增加。这些化合物在子宫中具有抗雌激素活性，因而在子宫组 织中可以完全拮抗雌激素激动剂的营养活性。然而，这些化合物在骨，心血管和中枢神经系 统中作为雌激素激动剂。由于这些化合物具有上述的组织选择性，因而可用于治疗或预防 由于雌激素缺乏(在某些组织例如骨和心血管中）或雌激素过量(在子宫或乳腺中）引起的 或者与之相关的病理状态或综合症。甚至超出上述细胞特异性调节作用之上，本发明化合 物还潜在的对某种受体类型是激动剂，而对另一种受体却是拮抗剂。例如，对ERi3是拮抗剂， 而对ERa是激动剂。这种雌激素受体选择性激动剂拮抗剂活性为这一系列化合物提供了药 理学上显著不同的雌激素活性。
[0090] 可以方便的利用标准药理学测试步测得本发明化合物的活性特征。本发明所述化 合物均表现出与雷洛昔芬类似的生物活性。
[0091] 实施例16:对HOB细胞中IL-6和GM-CSF生产的作用
[0092]将人体破骨细胞HOB铺板在96孔皿内使其在常规HOB培养基（Ham氏Fl 2,补充有 28mM HEPES，Ph7.4，10 %FCS，I. ImM CaCl2，2mM谷酰胺和1 %抗生素-抗真菌剂）中的密度为 7 X IO3个细胞/孔。次日，细胞用化合物或载体处理(0.2%DMS0)处理30分钟，随后加入IL-I f3(lng/mL)和TNF-a(l〇 ng/mL)。培养持续18至24小时。利用市售ELISA试剂盒测定培养基中 IL-6和GM-CSF水平。本发明化合物显示出对IL-6和GM-CSF的抑制作用。
[0093]部分样品活性列表如下：
【主权项】
1. 式I所示的化合物，其前体药物和药物活性代谢物，以及上述化合物的立体异构体及 其药学上可接受的盐：其中：R独立的选自氢、C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，取代或未取代的苯基;其中取代基选 自Cl -C6烷基，卤素，Cl -C6烷氧基，Cl -C6卤代烷基。2. 如权利要求1所述的化合物，其前体药物和药物活性代谢物，以及上述化合物的立体 异构体及其药学上可接受的盐： 其中：R独立的选自氢、C1-C4烷基，C1-C4烷氧基，取代或未取代的苯基;其中取代基选 自Cl-C4烷基，卤素，Cl-C4烷氧基，Cl-C4卤代烷基。3. 如权利要求1或2所述的化合物，其前体药物和药物活性代谢物，以及上述化合物的 立体异构体及其药学上可接受的盐： 其中，R独立的选自氢、甲基、乙基、丙基，异丙基、叔丁基，环己基，4-氯二苯甲基，苯基 或取代苯基;其中取代苯基选自4-甲基苯基，4-乙基苯基，2-氯苯基，3-氯苯基，4-氯苯基， 4-漠苯基，4_氣苯基，2，6_二氣苯基，4_甲氧基苯基，4_二氣甲基苯基。4. 如权利要求1-3任何一项所述的化合物，其前体药物和药物活性代谢物，以及上述化 合物的立体异构体及其药学上可接受的盐:选自， 1-[4-(4_甲基哌嗪-1-基)丁基]-5-羟基-2-(4-羟基苯基)-3-甲基-1H-吲哚； 1-[4-(4_乙基哌嗪-1-基)丁基]-5-羟基-2-(4-羟基苯基)-3-甲基-1H-吲哚； 1-[4-(哌嗪-1-基)丁基]-5-羟基-2-(4-羟基苯基)-3-甲基-1H-吲哚； 1-{4-[4-(2_乙基苯基)哌嗪-1-基]丁基}-5_羟基-2-(4-羟基苯基)-3-甲基-1H-吲哚； 1-{4-[4-(2_氯苯基)哌嗪-1-基]丁基}-5_羟基-2-(4-羟基苯基)-3-甲基-1H-吲哚； 1-{4-[4-(2,6_二氟苯基）哌嗪-1-基]丁基}-5_羟基-2-(4-羟基苯基)-3-甲基-1H-吲 噪； 1-{4-[4-(3_氯苯基)哌嗪-1-基]丁基}-5_羟基-2-(4-羟基苯基)-3-甲基-1H-吲哚； 1-{4-[4-(4_氯苯基)哌嗪-1-基]丁基}-5_羟基-2-(4-羟基苯基)-3-甲基-1H-吲哚； 1-{4-[4-(4_溴苯基)哌嗪-1-基]丁基}-5_羟基-2-(4-羟基苯基)-3-甲基-1H-吲哚； 1-{4-[4-(4_氯二苯甲基）哌嗪-1-基]丁基}-5_羟基-2-(4-羟基苯基)-3-甲基-1H-吲 噪； 1-{4-[4-(4_氟苯基)哌嗪-1-基]丁基}-5_羟基-2-(4-羟基苯基)-3-甲基-1H-吲哚。5. -种药物组合物，包含权利要求1-4任何一项所述的化合物，其前体药物和药物活性 代谢物，以及上述化合物的立体异构体及其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体或稀 释剂。6. 权利要求1-4任何一项所述的式I化合物，其前体药物和药物活性代谢物，以及上述 化合物的立体异构体及其药学上可接受的盐或权利要求5所述的药物组合物在制备治疗骨 吸收性疾病药物中的应用。7. 根据权利要求6所述的应用，其特征在于:所述骨吸收性疾病为骨质疏松 症。8. 权利要求1-4任何一项所述的式I化合物，其前体药物和药物活性代谢物，以及上述 化合物的立体异构体及其药学上可接受的盐或权利要求5所述的组合物在表达雌激素受体 细胞中调苄基因表达中的应用。9. 根据权利要求8所述的应用，其特征在于:所述雌激素受体为雌激素受体α或雌激素 受体β;所述细胞是骨骼，膀胱，子宫，卵巢，前列腺，睾丸，附睾，胃肠道，肾脏，乳腺，眼，心 脏，血管壁，免疫系统，肺，脑垂体，海马或下丘脑的细胞。10. 权利要求1-4任何一项所述的式I化合物，其前体药物和药物活性代谢物，以及上述 化合物的立体异构体及其药学上可接受的盐或权利要求5所述的药物组合物在制备治疗或 预防雌激素相关性疾病的药物中的应用。11. 权利要求10所述的应用，其特征在于，所述的雌激素相关性疾病为:骨丢失，骨折， 骨质疏松症，转移性骨病，软骨退化，乳腺癌，子宫内膜异位，潮热，前列腺肥大，前列腺癌， 卵巢癌，绝经综合症或与接触环境化学品或天然激素失衡有关的不良生殖作用。
【文档编号】A61P19/08GK105859606SQ201610218190
【公开日】2016年8月17日
【申请日】2016年4月6日
【发明人】胡春, 左莉, 滕雨, 刘晓平, 黄二芳, 金辄
【申请人】沈阳药科大学