一种塞来昔布的药物组合物及其医药用图
【专利摘要】本发明公开了一种塞来昔布的药物组合物及其医药用途，本发明提供的塞来昔布的药物组合物中含有塞来昔布和一种结构新颖的天然产物化合物(Ⅰ)，塞来昔布、化合物(Ⅰ)单独作用时，对癫痫具有治疗作用；塞来昔布和化合物(Ⅰ)联合作用时，对癫痫的治疗效果进一步提高，可以开发成治疗癫痫的药物，与现有技术相比具有突出的实质性特点和显著的进步。
【专利说明】
一种塞来昔布的药物组合物及其医药用途
技术领域
[0001] 本发明属于生物医药领域，涉及塞来昔布的新用途，具体涉及塞来昔布的药物组 合物及其医药用途。
【背景技术】
[0002] 塞来昔布临床用于缓解骨关节炎的症状和体征、缓解成人类风湿关节炎的症状和 体征、治疗成人急性疼痛。
[0003] 塞来昔布是非留体类抗炎药，动物模型中观察到其有抗炎、镇痛和退热的作用。塞 来昔布的作用机理是通过抑制环氧化酶-2(C0X_2)来抑制前列腺素生成。且在人体治疗浓 度下，本品对同工酶-环氧化酶-I(COX-I)没有抑制作用。
[0004] 在动物结肠肿瘤模型中塞来昔布减缓了肿瘤的发生和进展。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于提供一种塞来昔布的药物组合物，该药物组合物中含有塞来昔 布和一种结构新颖的天然产物，塞来昔布和该天然产物可以协同治疗癫痫。
[0006] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：
[0007] 一轴目.右?^太娃拔]才的O各物im _
[0008]
[0009] -种塞来昔布的药物组合物，包括塞来昔布、如权利要求1所述的化合物（I)和药 学上可以接受的载体，制备成需要的剂型。
[0010] 进一步地，药学上可以接受的载体包括稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、 崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体或润滑剂。
[0011] 进一步地，所述剂型包括片剂、胶囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、 膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、注射剂、栓剂、喷雾剂、滴剂或贴剂。
[0012] 上述化合物（I)的制备方法，包含以下操作步骤：（a)将亚麻子粉碎，用75~85%乙 醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃 取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步骤(a)中正丁醇取物用 大孔树脂除杂，先用25 %乙醇洗脱8个柱体积，再用70 %乙醇洗脱12个柱体积，收集70 %洗 脱液，减压浓缩得70%乙醇洗脱浓缩物；（c)步骤(b)中70%乙醇洗脱浓缩物用正相硅胶分 离，依次用体积比为85:1、45:1、25:1和15:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到4个组分；（d)步 骤(c)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为20:1、15:1和1:1的二氯甲烷-甲醇 梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积 百分浓度为72%的甲醇水溶液等度洗脱，收集10~16个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得 到化合物(I)。
[0013]进一步地，化合物（I)的制备方法中，步骤(a)用80%乙醇热回流提取，合并提取 液。
[0014]进一步地，化合物（I)的制备方法中，所述大孔树脂为DlOl型大孔吸附树脂。
[0015]进一步地，化合物（I)的制备方法中，步骤(a)中用二氯甲烷代替乙酸乙酯进行萃 取，得到二氯甲烷萃取物。
[0016] 上述化合物(I)在制备治疗癫痫的药物中的应用。
[0017] 上述塞来昔布的药物组合物在制备治疗癫痫的药物中的应用。
[0018] 本发明的优点：
[0019] 本发明提供的塞来昔布的药物组合物中含有塞来昔布和一种结构新颖的天然产 物，塞来昔布和该天然产物单独作用时，对癫痫具有治疗作用；二者联合作用时，对癫痫的 治疗效果进一步提尚，可以开发成治疗癒瘤的药物。
【具体实施方式】
[0020] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0021 ]实施例1:化合物(I)分离制备及结构确证
[0022]分离方法：（a)将亚麻子(2kg)粉碎，用80%乙醇热回流提取（15LX 3次），合并提取 液，浓缩至无醇味（3L)，依次用石油醚（3L X 3次）、乙酸乙酯（3L X 3次）和水饱和的正丁醇 (3LX3次）萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步骤(a)中 乙酸乙酯萃取物用DlOl型大孔树脂除杂，先用25%乙醇洗脱8个柱体积，再用70%乙醇洗脱 12个柱体积，收集70%洗脱液，减压浓缩得70%乙醇洗脱浓缩物；（c)步骤(b)中70%乙醇洗 脱浓缩物用正相硅胶分离，依次用体积比为85:1 (10个柱体积）、45:1 (8个柱体积）、25:1 (10 个柱体积)和15:1 (8个柱体积)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得至1」4个组分；（d)步骤(c)中组分 4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为20:1 (10个柱体积）、15:1 (8个柱体积)和1:1 (6个 柱体积)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合 的反相硅胶分离，用体积百分浓度为72 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集10~16个柱体积洗 脱液，洗脱液减压浓缩得到化合物（I) (HPLC归一化纯度大于98% )。
[0023] 结构确证:HR-ESI-MS显示[Μ+Na]+为m/z 377.1467,结合核磁特征可得分子式为 C21H22O5,不饱和度为11。核磁共振氢谱数据δΗ(ρρπι，CD 3COCD3,500MHz) :Η-3(7· 12,s)，H-4 (7.24，s)，H-7(6.75，s)，H-2'（7.04，d，J=1.8Hz)，H-4'（6.41，t，J = 2.1Hz)，H-6'（7.04，d， J=1.8Hz)，H-4"（2.78，dd，J=15.6,8.4Hz)，H-4"（2.43，dd，J=15.6,9.0Hz)，H-5"（3.62， dd，J = 8.4,9.0Hz)，H-7"（1.31，s)，H-8"（1.32，s)，0CH3-3'（3.85，s)，0CH 3-5'（3.83，s);核 磁共振碳谱数据^(ppm，CD3COCD3，125MHz): 156 · 4(C，2-C)，103 · 5 (CH，3-C)，122 · I (C，3a- C)，117.1(CH，4-C)，125.1(C，5-C)，161.2(C，6-C)，93.8(CH，7-C)，154.1(C，7a-C)，132.1 (C，1'-C)，107.4(CH，2'-C)，162.2(C，3'-C)，105.4(CH，4'-C)，162.2(C，5'-C)，107.4(CH， 6'-C)，35.5(CH2,4"-C)，66.7(CH，5"-C)，71.4(C，6"-C)，25.2(CH 3,7"-C)，25.7(CH3,8"-C)， 56.6(CH3，3 ' -OCH3)，56.6(CH3，5 ' -OCH3)。该化合物的氢谱显示二取代2-芳基苯并呋喃结构 [SH7.12(lH，s，H-3)，7.24(lH，s，H-4)，6.75(lH，s，H-7)，7.04(lH，d，J=1.8Hz，H-2'），6.41 (1!1，^ = 2.1抱，!1-4'），7.04(1!1，(1，了=1.8抱，!1-6'）]，两个甲氧基质子信号[3113.85(3!1， s)和 3.83(3H，s)]，以及一个2,3环氧-3-甲基-丁基取代基[2.78(lH，dd，J=15.6,8.4Hz，H-4"），2·43(lH，dd，J=15·6,9·0Hz，H-4"），3·62(lH，dd，J=8·4,9·0Hz，H-5"），l·31(lH，s，H-7"），1.32(lH，s，H-8"）]。该化合物的碳谱显示该化合物具有21个碳谱信号，包括四个甲基 (两个甲氧基），一个亚甲基，七个次甲基以及九个季碳。HMBC谱中甲氧基质子信号与C-3'和 C-5'的相关性表明C-3'和C-5'位分别连有一个甲氧基。HMBC谱中，H2-4"/C-5"，H3-7"/C-5"， H3-8" /C-5"之间的相关性说明该化合物的C-5"和C-6"位为环氧结构。综合氢谱、碳谱、HMBC 谱和NOESY谱，以及文献关于相关类型核磁数据，可基本确定该化合物如下所示，立体构型 进一步通过ECD试验确定，理论值与实验值基本一致。
[0024] 该化合物化学式及碳原子编号如下：
[0025]
[0026] 实施例2:药理作用
[0027]本实施例以大鼠腹腔注射青霉素 600万U/kg制作癫痫模型，观察药物治疗癫痫的 效果。
[0028] 1、材料与方法
[0029] 1.1动物
[0030] Wistar大鼠90只，雌雄各半，体重120±20g，由黑龙江中医药大学实验动物中心提 供。
[0031] 1.2试剂与样品
[0032] 塞来昔布购自中国药品生物制品检定所。化合物（I)自制，制备方法见实施例1。苯 妥英钠:天津市力生制药总厂生产;青霉素:哈尔滨制药总厂;乌拉坦:哈尔滨制药总厂。
[0033] 1.3仪器
[0034] LMB-2B型二道生理记录仪:成都仪器厂生产。
[0035] 1.4动物分组及模型制备
[0036] 取大鼠50只，雌雄各半，随机分为5组，每组10只，分别为:模型对照组、阳性对照组 (苯妥英钠4.2mg · kg-4、塞来昔布组(80mg · kg-4、化合物（I)组(80mg · kg-4、塞来昔布与 化合物（I)组合物组【40mg · kg<塞来昔布+40mg · kg<化合物（I)】。各组给药组按照各自剂 量给药，均为口服灌胃给药。模型组灌服同体积水。各组动物均在给药或蒸馏水Ih后，腹腔 注射青霉素 600万U/kg，观察大鼠行为。
[0037] 1.5癫痫大鼠惊厥潜伏期测定实验
[0038] 腹腔注射青霉素后，观测各组小鼠痫性发作行为及痫性发作的潜伏期。
[0039] 1.6大鼠痫性发作程度观测实验
[0040] 痫性发作行为观察，参照Racine标准:0级:无反应或抽搐停止。I级:节律性嘴或面 部抽动。Π 级：点头或甩尾。ΙΠ 级:单肢抽动。IV级：多肢抽动或强直。V级:全面性强直-阵挛 发作。
[0041 ] 1.7统计学方法
[0042]实验数据用均数土标准差（i±s)表示，应用SPSS18.0版统计软件进行单因素方差 分析和t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。
[0043] 2、实验结果
[0044] 2.1对青霉素诱导癫痫大鼠惊厥潜伏期的影响
[0045]与模型对照组比较，阳性对照组大鼠惊厥潜伏期显著延长(P<0.01);与模型对照 组相比，塞来昔布与化合物（I)组合物组大鼠惊厥潜伏期显著延长(P<〇.01);与模型对照 组比较，塞来昔布组、化合物（I)组大鼠惊厥潜伏期延长(P < 0.05)。结果见表1。
[0046] 2.2对青霉素诱导大鼠痫性发作程度的影响
[0047]与模型对照组比较，阳性对照组大鼠痫性发作程度显著减小(P<0.01);与模型对 照组相比，塞来昔布与化合物（I)组合物组大鼠痫性发作程度显著减小(P<〇.01);与模型 对照组比较，塞来昔布组、化合物(I)组大鼠痫性发作程度减小(P<〇.05)。结果见表2。
[0048]表1对青霉素诱导癫痫大鼠惊厥潜伏期的影响
[0052] 青霉素是经典的致痫剂，其急性或点燃癫痫动物模型已获公认。青霉素能抑制 GABA能神经元，引起抑制性突触活动减弱或兴奋性突触活动增强，从而导致神经元兴奋性 增高。当神经元兴奋性突触后电位(EPSP)综合超过一定阈值即可产生阵发性去极化飘移 (PDS)0
[0053] 上述结果表明，塞来昔布、化合物（I)单独作用时，对癫痫具有治疗作用;塞来昔布 和化合物(I)联合作用时，对癫痫的治疗效果进一步提高，可以开发成治疗癫痫的药物。 [0054]上述实施例的作用在于说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明的保护 范围。本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换， 而不脱离本发明技术方案的实质和保护范围。
【主权项】
1. 一种具有下述结构式的化合物α)，2. -种塞来昔布的药物组合物，其特征在于:包括塞来昔布、如权利要求1所述的化合 物(I)和药学上可以接受的载体，制备成需要的剂型。3. 根据权利要求2所述的塞来昔布的药物组合物，其特征在于:药学上可以接受的载体 包括稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体 或润滑剂。4. 根据权利要求2所述的塞来昔布的药物组合物，其特征在于:所述剂型包括片剂、胶 囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、注射剂、 栓剂、喷雾剂、滴剂或贴剂。5. 权利要求1所述的化合物（I)的制备方法，其特征在于，包含以下操作步骤：（a)将亚 麻子粉碎，用75~85%乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙 酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b) 步骤(a)中正丁醇取物用大孔树脂除杂，先用25%乙醇洗脱8个柱体积，再用70%乙醇洗脱 12个柱体积，收集70%洗脱液，减压浓缩得70%乙醇洗脱浓缩物；（c)步骤(b)中70%乙醇洗 脱浓缩物用正相硅胶分离，依次用体积比为85:1、45:1、25:1和15:1的二氯甲烷-甲醇梯度 洗脱得到4个组分；（d)步骤(c)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为20:1、15:1 和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的 反相硅胶分离，用体积百分浓度为72 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集10~16个柱体积洗脱 液，洗脱液减压浓缩得到化合物(I)。6. 根据权利要求5所述的化合物（I)的制备方法，其特征在于:步骤(a)用80%乙醇热回 流提取，合并提取液。7. 根据权利要求5所述的化合物（I)的制备方法，其特征在于:所述大孔树脂为D101型 大孔吸附树脂。8. 根据权利要求5所述的化合物（I)的制备方法，其特征在于:步骤(a)中用二氯甲烷代 替乙酸乙酯进行萃取，得到二氯甲烷萃取物。9. 权利要求1所述的化合物（I)在制备治疗癫痫的药物中的应用。10. 权利要求2~4任一所述的塞来昔布的药物组合物在制备治疗癫痫的药物中的应 用。
【文档编号】A61K31/635GK105859702SQ201610340405
【公开日】2016年8月17日
【申请日】2016年5月20日
【发明人】秦勇, 李波, 朱亚芳, 牛绍雄, 王声音, 徐成, 王 琦, 陈建芳
【申请人】江苏神龙药业有限公司