互花米草与微生物组联合修复石油污染潮间带沉积物的方法
【专利摘要】本发明涉及一种互花米草与微生物组联合修复石油污染潮间带沉积物的方法，在石油污染的潮间带沉积物上种植互花米草，然后在潮间带沉积物中接入微生物。所述微生物名称：JQ716236，保藏编号CGMCC No.11525，另一个微生物名称：JN999853，保藏编号CGMCC No.11526。本发明通过本实验环节，证实了互花米草人工湿地系统中植物、土著菌、研究区域筛选的石油烃降解优势菌、降解时间、湿地长度等因素对石油污染潮间带沉积物的修复效果。CGMCC No. 1152520151021CGMCC No. 1152620151021
【专利说明】
互花米草与微生物组联合修复石油污染潮间带沉积物的方法
技术领域
[0001] 本发明属于环境领域，特别是一种互花米草与微生物组联合修复石油污染潮间带 沉积物的方法。
【背景技术】
[0002] 过去围绕人工湿地去污功能的研究多为生活污水的脱氮除磷工程，植物也都挑选 芦苇、香蒲和水葱等景观植物构建的人工湿地，不仅起到治理环境效果还具有景观价值。在 实际应用时，通常选择湿地典型植物或者能适应湿地系统特殊环境的物种，如红树林 (Mangrove)、灯芯草(Juncus effusus)、互花米草（Spartina alternifloraLoisel)等。本 文挑选在滨海生长，多年常见、有一定观赏价值、耐盐碱的互花米草作为实验植物，构建人 工湿地模拟系统，对其修复潮间带沉积物中石油类污染物效果进行研究，旨在为人工湿地 修复石油污染工程应用提供更多选择。相关研究证明，盐沼植物互花米草在湿地石油类污 染修复领域取得了良好效果。
[0003] 互花米草（Spartina alterniflora Loisel)隶属禾本科（Poaceae)米草属 (Spartina)，属多年生根莖型草本植物，分地上和地下两部分，地上植株莖杆高1~3m，地下 茎和须根可延伸至地下50cm深。互花米草生长期约为200d，在天津滨海地区，4月下旬逐渐 返青，8月中旬开始开花，11月中旬达到成熟期。
[0004] 互花米草原产于大西洋和北美墨西哥湾，基于其良好护滩固坡和促淤造陆效果， 1979年被南京大学仲崇信教授引入我国，随后迅速在我国沿岸各地生长。作为滩涂湿地的 先锋植物，不仅具有惊人的生物适应性，生长力旺盛等特点，还具有强大的耐盐能力，易形 成单优势种群落，对当地的原有植被干扰，生态环境冲击较大。2003年，被国家环保部列入 外来入侵种名单。如：1995年引入崇明东滩，对本土物种芦苇、海三棱薦草的生长和鸟类多 样性造成威胁。与美国大西洋沿岸恰恰相反，互花米草是入侵植物，说明美国与我国生长环 境差别很大。
[0005] 关于利用人工湿地处理污水，国内外已经做了大量的研究，但主要是构建陆地人 工湿地净化生活污水中氮、磷、重金属等等，对滨海湿地污染修复工程研究还较少，沿海城 市复杂多样的工业废水伴随市内河流注入近岸海域，其环境状况与人民生活息息相关。目 前，关于修复滨海湿地石油污染潮间带沉积物的研究尚未全面系统，任重道远。通过调查研 究天津北塘入海口近岸海域中沉积物中石油烃含量的分析，掌握研究区域石油污染现状， 有利于制定控制人类活动管理的科学决策，为保护天津市滨海新区滨海湿地生态环境提 供有益借鉴。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的在于克服现有技术的不足之处，提供一种互花米草与微生物组联合 修复石油污染潮间带沉积物的方法。
[0007] 本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：
[0008] -种修复石油污染潮间带沉积物微生物菌株组，其特征在于：由两个微生物组成， 其中一个名称:JQ716236,保藏编号CGMCC No.11525,保藏日期2015年10月21日，分类命名 为:弧菌属Vibrio sp.保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址： 北京市朝阳区北辰西路1号院3号，另一个名称为:JN999853，保藏编号CGMCC No. 11526，保 藏日期2015年10月21日，分类命名为:解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens，保藏 单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址:北京市朝阳区北辰西路1号 院3号。
[0009] 一种互花米草与微生物组联合修复石油污染潮间带沉积物的方法，步骤如下：
[0010] 在石油污染的潮间带沉积物上种植互花米草，然后在潮间带沉积物中接入上述微 生物组。
[0011] 而且，所述石油污染潮间带沉积物包括盐沼湿地、河口湿地和滨海湿地沉积物。
[0012] 本发明的优点和积极效果是：
[0013] 本发明通过本实验环节，证实了互花米草人工湿地系统中植物、土著菌、研究区域 筛选的石油烃降解优势菌、降解时间、湿地长度各因素对沉积物中总石油烃的去除效果。
【附图说明】
[0014] 图1为本发明实验装置图；
[0015] 图2为本发明实验系统设计整体效果图及剖面图；
[0016] 图3为本发明实验流程图；
[0017]图4-1为植物组、无植物组和空白对照组沉积物中TPH去除率，其中图4-1A代表表 层10cm，图4-1B代表中间10cm，图4-1C代表底层IOcm;
[0018]图4-2为加优势菌组和不加优势菌组沉积物中TPH去除率，其中图4-2A代表表层 10cm，图4-2B代表中间10cm，图4-2C代表底层IOcm;
[0019]图4-3-1(第一周期)与图4-3-2(第二周期）为试验各组不同深度沉积物中TPH去除 率；
[0020] 图5为优势菌JQ716236菌落形态；
[0021]图6为优势菌JQ716236扫描电镜图片；
[0022] 图7为优势菌JN999853菌落形态；
[0023]图8为优势菌JN999853扫描电镜图片。
【具体实施方式】
[0024] 下面结合附图并通过具体实施例对本发明作进一步详述，以下实施例只是描述性 的，不是限定性的，不能以此限定本发明的保护范围。
[0025] 本发明提供一种降解石油污染潮间带沉积物微生物菌株组，由两个微生物组成， 其中一个名称:JQ716236,保藏编号CGMCC No.11525,保藏日期2015年10月21日，分类命名 为:弧菌属Vibrio sp.保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址： 北京市朝阳区北辰西路1号院3号，另一个名称为另一个名称为:JN999853，保藏编号CGMCC No . 1 1526，保藏日期2015年10月21日，分类命名为：解淀粉芽孢杆菌Baci Ilus amyloliquefaciens，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址:北 京市朝阳区北辰西路1号院3号。
[0026] 同时提供一种互花米草与微生物组联合修复石油污染潮间带沉积物的方法，在石 油污染的潮间带沉积物上种植互花米草，然后在潮间带沉积物中接入上述的微生物组，下 面通过人工模拟实验证实本发明的目的。
[0027] 本试验植物参考国内外专家的研究成果并结合气候和滨海湿地植物生境特点选 取。
[0028] 1人工湿地模拟系统尺寸设计
[0029]人工湿地湿地生态系统模拟装置包括进水容器、蠕动栗、玻璃制水培湿地装置三 部分组成，实验装置如图1。进水容器选择4L棕色玻璃瓶，保证在进水过程中有效避光，同时 方便移动。水培湿地池是由玻璃缸+玻璃弯管加工而成，共有12个，单池尺寸长、宽、高分别 为30 X 30 X 50(cm)，在正面离地面30cm处设有自动出水弯管，可控制水位，便于植物生长。 实验装置设计为长、宽、高分别为30X30X50(cm)的玻璃槽，在正面离地面30cm处设置内径 为Icm的进水口，背面40cm处设置出水口，两个为一串联组，通过胶皮管连接，构造示意图如 图2。每个水培湿地池中栽种9株植物，系统于2013年6月6日始至2015年8月12日结束，在实 验室阳台上运行。
[0030] 2互花米草人工湿地模拟系统进水设计
[0031]实验装置设计的槽内储水量为9L/槽。
[0032]进水模式:模拟半日潮汐规律，白天连续进水，晚上放空装置内的水，次日将前天 放出的水放入装置后，紧接着进500mL污水，然后停止进水，使系统处于静止状态。
[0033] 进水量：（9L循环水+500mL污水)/槽/天，约25mL/min(蠕动栗控制流速度），6h(8: 00-14:00);静止2hl 4:00-16:00 )，剩余时间排空水，保证植物根部正常呼吸。
[0034]出水采集:每间隔5d在30cm出水口处采集500mL进行总石油烃的测定。
[0035]本研究所用互花米草采用现场移栽的方式，在本研究区域永定新河入海口呈带状 分布着大片互花米草。这些互花米草于4月上旬植物返青初期，采集长势均匀，地上部分平 均高达30cm，地下部分平均高达10cm，具有4~6片叶子。移栽过程注意不要损坏须根，根部 用少量原根系周围土样进行包裹运输。移栽回的植株在室内用采集到的现场污泥培育一周 后，移入实验装置内，用人工海水进行浇灌，为正式试验做准备。
[0036] 3进水试验周期及初始条件设计
[0037] 3.1实验周期设计
[0038]由于实验场地空间及装置数量的限制，试验设计为2个周期，每个周为期30d，第一 周期（2015.6.6-2015.7.7)，第二周期（2015.7.13-2015.8.12)。第一个周期，A 组：互花米草 +土著菌，研究互花米草与沉积物原有土著菌联合对石油类的修复效果;B组:土著菌(是指 土壤中原来存在的微生物，这是所有土壤或者任何沉积物不可避免的微生物菌），无植物仅 靠沉积物中原有土著菌作用下石油类的降解效果，C组:空白对照组，石油废水单纯靠光照、 温度影响下浓度的变化。第二周期在第一周期的基础上进行生物强化，分别向A、B组投加石 油烃降解优势菌(接种方式:分别取出模拟装置表层IOcm的沉积物，统一分成5份盛于塑料 桶中，然后将斜面培养的菌株进行活化，制成25mL的菌液，与上述沉积物搅拌混匀。菌株接 种浓度为25 XlO1t3个/装置）（优势菌由两个菌种组成，其中一个名称：JQ716236,弧菌属 (Vibrio sp.BJGMM-B31)，保藏编号CGMCCNo. 11525,保藏日期2015年10月21日，分类命名 为:弧菌属Vibrio sp.保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址： 北京市朝阳区北辰西路1号院3号，另一个名称为JN999853，保藏编号CGMCC No. 11526，保藏 日期2015年10月21日，分类命名为:解淀粉芽孢杆菌1^(3；[11118 3111710119116€3(^6118，保藏单 位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3 号。两个菌种以任意比例组合即可，以下论述均采用"优势菌"作为名称进行论述)C依旧作 为空白对照组。
[0039] 3.2实验初始条件设计
[0040]实验所用含油废水选用柴油废水，因为污染区域表层海水反应的油污染问题多为 柴油的瞬时污染。配置方法为将柴油溶于丙酮后再溶于人工海水。首先配置初始浓度为约 0.4mg/L的柴油废水母液，配比为:Vsgtii: Vrai: VAim= 1:1 〇: I〇4，放于阴凉避光处，用棕色瓶 储存。每日的试验进水通过稀释母液获得，配比为V母s:V自JfeR=I :500。
[0041 ] 3.3沉积物石油烃含量测定试验设计
[0042]为了保证湿地生态系统不受破坏，沉积物样品采集使用PVC管进行隔离处置。通过 插管隔离样品，统一取样、分层测定的方式来研究沉积环境不同深度石油烃的变化趋势，以 每IOd为一个监测周期，IOcm为一沉积层，测定不同时间、不同沉积层的污染物浓度，研究石 油烃的降解与迀移规律。插管具体方法为:待槽内水放干后，将内径15mm的PVC管沿着沉积 物表层垂直插到玻璃缸底部，每次插管要在管上做时间标记。测定方法见《海洋监测规范 (GB17378.5-2007)》。
[0043] 4结果与讨论
[0044] 4.1植物对沉积物中总石油烃去除效果的影响
[0045] 随着时间的延长，试验各组沉积物TPH降解率不断提高。同一时间，同一深度TPH降 解率为:互花米草-土著菌组〉土著菌组〉空白对照组（图4-1)。
[0046] 试验30d后，表层IOcm处:互花米草-土著菌组沉积物TPH降解率为25.14%，TPH含 量由 321.49mg/kg 降到 243.64mg/kg; 土著菌组降解率为 19.75%，了?!1含量由321.4911^/1^降 到257 · 99mg/kg;空白对照组降解率为10 · 60%，TPH含量由321 · 49mg/kg降到287 · 40mg/kg。
[0047] 试验30d后，中间IOcm处:互花米草-土著菌组沉积物TPH降解率为21.83%，TPH含 量由 321.49mg/kg 降到 251.32mg/kg; 土著菌组降解率为 19.04%，了?!1含量由321.4911^/1^降 到260 · 27mg/kg;空白对照组降解率为11 · 11 %，TPH含量由321 · 49mg/kg降到285 · 78mg/kg。
[0048] 试验30d后，底层IOcm处:互花米草-土著菌组沉积物TPH降解率为19.06%，TPH含 量由 321.49mg/kg 降到 260.61mg/kg; 土著菌组降解率为 16.66%，了?!1含量由321.4911^/1^降 到267 · 92mg/kg;空白对照组降解率为10 · 65%，TPH含量由321 · 49mg/kg降到287 · 25mg/kg。
[0049] 可见，同一沉积层降解规律为：互花米草-土著菌组沉积物中TPH降解率显著高于 土著菌组，土著菌组显著高于空白对照组(P〈〇. 05)。
[0050] 4.2生物强化对沉积物中总石油烃修复效果分析
[0051] 生物强化后试验各组不同时间段不同沉积层的TPH降解率如图4-2所示：互花米 草-土著菌-优势菌组〉互花米草-土著菌，土著菌-优势菌〉土著菌，说明进行生物强化的实 验组TPH降解率高于没有生物强化的试验组。
[0052] 试验30d后，表层IOcm处：各组沉积物TPH初始浓度为240.65mg/kg，30d后，互花米 草-土著菌-优势菌组TPH降解率为15.09%，互花米草-土著菌组降解率为12.64% ;土著菌- 优势菌组降解率为13.93%; 土著菌组降解率为10.26%。
[0053] 试验30d后，中层IOcm处：各组沉积物TPH初始浓度为251.32mg/kg，30d后，互花米 草-土著菌-优势菌组TPH降解率为13.19% ;互花米草-土著菌组降解率为9.26%，土著菌-优势菌组降解率为9.30 %，土著菌组降解率为5.84%。
[0054] 试验30d后，底层IOcm处：各组沉积物TPH初始浓度为260.21mg/kg，30d后，互花米 草-土著菌-优势菌组TPH降解率为10.94% ;互花米草-土著菌组降解率为7.71 %，土著菌-优势菌组降解率为6.08%，土著菌组降解率为4.23 %。
[0055] 4.3不同深度对沉积物中总石油烃去除效果的影响
[0056]对比试验各组不同沉积层的TPH降解率（图4-3)，可以看出第一周期互花米草-土 著菌组和土著菌组:表层TPH去除效果最佳，中层次之，底层最后。空白对照组，不同沉积层 的TPH降解率无显著差异(p〈0.05)。第二周期实验各组表层沉积物TPH降解率显著高于中 层，中层显著高于底层。
[0057] 4.4不同截面对沉积物中总石油烃去除效果分析
[0058] 不同实验组沉积物中总石油烃含量及降解率，实验第一周期，空白对照组两截面 降解率几乎一致，土著菌组〇~IOd两截面的降解率接近，之后第二截面处降解率逐渐略大 于第一截面，20cm处的差异最显著。植物-土著菌组与土著菌组类似。实验第二周期与第一 周期相似，实验各组不同深度两截面的降解率无明显差异。可见不同截面及流域长度对沉 积环境中石油类物质的去除无显著影响。
[0059] 4.5小结
[0060]通过对沉积物石油烃含量变化的进一步分析研究了互花米草人工湿地模拟系统 对石油类污染物的去除效果，主要结论如下：
[0061] (1)随着时间的延长，试验各组沉积物TPH降解率不断提高。同一时间，沉积环境同 一深度TPH降解率为:互花米草-土著菌组〉土著菌组〉空白对照组。
[0062] (2)石油烃优势菌可以促进沉积物中TPH的降解，进行生物强化的实验组的TPH降 解率高于没有生物强化的试验组:互花米草-土著菌-优势菌组>互花米草-土著菌，土著菌-优势菌〉土著菌。
[0063] (3)试验各组不同沉积层的TPH降解率规律为:表层最高，中层次之，底层最低。由 于沉积环境表层氧化环境优于中层和底层，有利于微生物群落的生长，从而增强了污染物 的释放及降解。
[0064] 5优势菌的性能说明
[0065] 5.1优势菌JQ716236
[0066] 名称JQ716236,弧菌属(Vibrio sp.BJGMM-B31)保藏编号CGMCC No. 11525,保藏日 期2015年10月21日，分类命名为:弧菌属Vibrio sp.保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委 员会普通微生物中心，地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
[0067] 5.1.1优势菌石油烃降解菌的驯化与分离
[0068]
【申请人】对天津港口海域海水中烷烃、芳烃含量进行检测，其中烷烃的浓度为24.44 yg/L，甲基取代的芳香烃浓度为1.60yg/L，含量远远大于渤海海域等其他海域含量;对潮 间带沉积物优控多环芳烃含量进行检测，其中低潮位的16种优控多环芳烃的浓度为 154 · 07ng/g，中潮位为42 · 21ng/g，高潮位为33 · I lng/g，含量高于其它非港口海域。分析沉 积物中PAHs含量，通过对多环芳烃混标进行选择离子扫描，低潮位、中潮位和高潮位的沉积 物中PAHs的GC-MS色谱图。其成分为:萘、危烯、危、芴、菲、蒽、焚蒽、芘、苯并(a)蒽、屈、苯并 (b)荧蒽、苯并(k)荧蒽。
[0069] 5丄1试剂：蛋白胨、酵母浸出粉、（順4)23〇4、1(!12?〇4、1( 2冊〇4.3!120、卩6?〇4.4!120、 NaOH和浓盐酸。
[0070] 材料:0#柴油、海水晶。
[0071] 培养基配方见表5-1。
[0072]表5-1实验所用培养基配方
[0074] 5.1.2石油烃降解菌的驯化、分离与纯化
[0075] 5.1.2.1石油烃降解菌的驯化步骤为：
[0076] (1)无菌实验条件下，加入5mL采集的海水于IOOmL富集培养液I中，在30°C、150rpm 条件下，进行摇瓶实验，对海水中的细菌驯化培养；
[0077] (2)培养一周后，摇匀培养液并转移约一半体积至50mL新鲜富集培养液I中继续培 养；
[0078] (3)在同上的条件下，再转移至富集培养液Π 中，依次进行2次富集培养。
[0079] 5.1.2.2石油烃降解菌的分离与纯化：
[0080] (1)采用平板涂布分离法，用无菌水对驯化四周后的培养液进行梯度稀释，稀释 HT1、10_2、10_3、10_4、10_ 5、10_6、10_7倍，分别取0.1 mL 10_5、10_6、10_7倍的稀释液于柴油平板 培养基上进行涂布，在30°C的培养箱中培养2d;
[0081] (2)挑选形态不同的单独菌落，进行划线分离，在30°C的培养箱中培养2d;
[0082] (3)重复步骤（2)对菌株进行划线纯化，直至平板上所有菌落的形态一致，即为单 一菌株，分离出的菌株用柴油斜面培养基划线保种，4°C冰箱保存。
[0083]石油烃降解菌的分离纯化结果:港口海域海水中的石油烃降解菌经过4周时间的 摇瓶驯化以及菌液的涂布划线分离，纯化筛选出得到较为优势生长的石油烃降解菌为 JQ716236。
[0084] 通过肉眼观察平板培养基上各菌株的菌落特征分别为:菌落较小，边缘均较光滑， 菌落直径约为〇. 2~0.5mm，菌落为黄色（图5)。菌株CH2体积大小为0.6~0.8μηιΧ 1.0~2.0μ m，16S rRNA序列长度分别为1421bp。
[0085] 5.1.3石油烃降解菌的降解专一性(表5-2)
[0086]表5-2菌株的降解专一性结果
[0088]注代表菌株没有生长;+代表不确定菌株是否生长;++代表菌株生长良好。
[0089] 5.1.4经过优势菌咒716236降解菌20(1的降解，菌株对柴油的降解率均达到90%以 上。
[0090] 5.1.5菌株JQ716236在有菲存在的培养液中，生长有受到抑制的趋势，表现为： lmg/L的菲浓度下生长状况较好，在5mg/L的条件下，生长受到抑制。
[0091] 5.1.6正十九烷的降解剩余浓度与空白对照的比值为：（I )50mg/L的初始浓度条件 下，菌株降解后剩余量比值为2.46%; (2)20mg/L的初始浓度条件下，菌株降解后剩余量比 值为0.28% ; (3)2mg/L的初始浓度条件下，菌株降解后剩余量比值为1.36% ; (4)200yg/L的 初始浓度条件下，菌株降解后剩余量比值为是6.95% ;(5)20yg/L的初始浓度条件下，菌株 降解后剩余量比值为7.27%。通过比值可以得出，菌株对正十九烷的降解效果较好。
[0092] 5.1.7菌株在混合烃类的培养液中，对照组相对于初始加入量，菲、荧蒽、苯并(α) 芘和姥鲛烷的剩余量分别为96.70%、38.79%、2.98%和6.95%，与对照组对比，JQ716236 菌株对菲的降解率为79.52 %，对荧蒽的降解率为97.05 %，对苯并（α )芘的降解率为 50.67%，对姥鲛烷的降解率为94.33%。
[0093] 5.2优势菌见999853
[0094]石油烃降解菌的驯化与分离筛选和分离步骤同5.1.1、5.1.2，具体描述特征如下： [0095] 名称为:JN999853,保藏编号CGMCC No.11526,保藏日期2015年10月21日，分类命 名为:解淀粉芽孢杆菌1^1(3；[11118 3111710119116€3(^6118保藏单位：中国微生物菌种保藏管理 委员会普通微生物中心，地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
[0096] 5.2.1石油烃降解菌的降解专一性(表5-3)
[0097]表5-3菌株的降解专一性结果
[0099]注代表菌株没有生长;+代表不确定菌株是否生长;++代表菌株生长良好。
[0100] 5.2.2经过优势菌州999853降解菌20(1的降解，菌株对柴油的降解率均达到90%以 上。
[0101 ] 5.2.3菌株JN999853在有菲存在的培养液中，生长有受到抑制的趋势，具体是： lmg/L的菲浓度下生长状况较好，在5mg/L的条件下，生长受到抑制。
[0102] 5.2.4正十九烷的降解剩余浓度与空白对照的比值为：（I )50mg/L的初始浓度条件 下，菌株的降解后剩余量比值为21.66% ;(2)20mg/L的初始浓度条件下，菌株的降解后剩余 量比值为38.96% ;(3)2mg/L的初始浓度条件下，菌株的降解后剩余量比值为53.92%; (4) 200?/!的初始浓度条件下，菌株的降解后剩余量比值为87.57% ; (5)20yg/L的初始浓度条 件下，菌株的降解后剩余量比值为17.51%。通过比值可以得出，菌株对正十九烷的降解效 果较差。
[0103] 5.2.5菌株在混合烃类的培养液中，对照组相对于初始加入量，菲、荧蒽、苯并(α) 芘和姥鲛烷的剩余量分别为96.70%、38.79%、2.98%和6.95%，与对照组对比，JN999853 菌株对菲的降解率为81 . 35 %，对荧蒽的降解率为98.35 %，对苯并（α )芘的降解率为 32.21 %，对姥鲛烷的降解率为61.40 %。
【主权项】
1. 一种修复石油污染潮间带沉积物微生物菌株组，其特征在于：由两个微生物组成，其 中一个名称:几716236，保藏编号0610：如.11525，保藏日期2015年10月21日，分类命名为 ： 弧菌属Vibrio sp.保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址:北京 市朝阳区北辰西路1号院3号；另一个名称为:见999853，保藏编号061〇：如.11526，保藏日 期2015年10月21日，分类命名为:解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens保藏单位： 中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号。2. -种互花米草与微生物组同时修复石油污染潮间带沉积物的方法，其特征在于：步 骤如下： 在石油污染的潮间带沉积物中种植互花米草，然后在潮间带沉积物中接入权利要求1 所述的微生物组。3. 根据权利要求2所述的互花米草与微生物联合修复石油污染潮间带沉积物的方法， 其特征在于:所述石油污染潮间带沉积物包括盐沼湿地、河口湿地和滨海湿地沉积物。
【文档编号】C12R1/07GK105861354SQ201610144519
【公开日】2016年8月17日
【申请日】2016年3月15日
【发明人】刘宪斌, 李孟沙, 褚帆, 田胜艳, 赵兴贵
【申请人】天津科技大学