一种二羟丙茶碱的药物组合物及其医药用图

文档序号:10564214阅读:795来源:国知局
一种二羟丙茶碱的药物组合物及其医药用图
【专利摘要】本发明公开了一种二羟丙茶碱的药物组合物及其医药用途,本发明提供的二羟丙茶碱的药物组合物中含有二羟丙茶碱和一种结构新颖的天然产物化合物(Ⅰ),二羟丙茶碱、化合物(Ⅰ)单独作用时,对慢性肾衰竭具有治疗作用;二羟丙茶碱和化合物(Ⅰ)联合作用时,对慢性肾衰竭的治疗效果进一步提高,可以开发成治疗慢性肾衰竭的药物,与现有技术相比具有突出的实质性特点和显著的进步。
【专利说明】
-种二哲丙茶碱的药物组合物及其医药用途
技术领域
[0001] 本发明属于生物医药领域,设及二径丙茶碱的新用途,具体设及二径丙茶碱的药 物组合物及其在治疗慢性肾衰竭中的应用。
【背景技术】
[0002] 二径丙茶碱是一种平滑肌松弛药,有扩张支气管和冠状动脉的作用,并有利尿作 用。在胃液中稳定。平喘作用与氨茶碱相似,尤适用于伴有屯、动过速的哮喘患者。由茶碱与 一氯丙二醇在碱性溶液中缩合而制得。
[0003] 迄今为止,尚未见二径丙茶碱及其药物组合物与治疗慢性肾衰竭的相关性报道。

【发明内容】

[0004] 本发明的目的在于提供一种二径丙茶碱的药物组合物,该药物组合物中含有二径 丙茶碱和一种天然产物,二径丙茶碱和该天然产物可W协同治疗慢性肾衰竭。
[0005] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得W实现的:
[0006] -种具有下述结构式的化合物(I),
[0007]
[000引一种二径丙茶碱的药物组合物,包括二径丙茶碱、如权利要求1所述的化合物(I) 和药学上可W接受的载体,制备成需要的剂型。
[0009] 进一步地,药学上可W接受的载体包括稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、 崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体或润滑剂。
[0010] 进一步地,所述剂型包括片剂、胶囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、 膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、注射剂、栓剂、喷雾剂、滴剂或贴剂。
[0011] 上述化合物(I)的制备方法,包含W下操作步骤:(a)将金沸草粉碎,用70~80%乙 醇热回流提取,合并提取液,浓缩至无醇味,依次用石油酸、乙酸乙醋和水饱和的正下醇萃 取,分别得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物和正下醇萃取物;(b)步骤(a)中正下醇萃取物 用大孔树脂除杂,先用15 %乙醇洗脱6个柱体积,再用70 %乙醇洗脱10个柱体积,收集70 % 洗脱液,减压浓缩得70%乙醇洗脱浓缩物;(C)步骤(b)中70%乙醇洗脱浓缩物用正相硅胶 分离,依次用体积比为80:1、30:1、15:1和5:1的二氯甲烧-甲醇梯度洗脱得到4个组分;(d) 步骤(C)中组分3用正相硅胶进一步分离,依次用体积比为25:1、15:1和2:1的二氯甲烧-甲 醇梯度洗脱得到3个组分;(e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离,用体 积百分浓度为72 %的甲醇水溶液等度洗脱,收集8~14个柱体积洗脱液,洗脱液减压浓缩得 到纯的化合物(I)。
[0012] 进一步地,化合物(I)的制备方法中,所述大孔树脂为DlOl型大孔吸附树脂。
[0013] 上述化合物(I)在制备治疗慢性肾衰竭的药物中的应用。
[0014] 上述二径丙茶碱的药物组合物在制备治疗慢性肾衰竭的药物中的应用。
[001引本发明的优点:
[0016] 本发明提供的二径丙茶碱的药物组合物中含有二径丙茶碱和一种结构新颖的天 然产物,二径丙茶碱、化合物(I)单独作用时,对慢性肾衰竭具有治疗作用;二径丙茶碱和化 合物(I)联合作用时,对慢性肾衰竭的治疗效果进一步提高,可W开发成治疗慢性肾衰竭的 药物。本发明与现有技术相比具有突出的实质性特点和显著的进步。
【具体实施方式】
[0017] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容,但并不W此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明,本领域的普通技术人员应当理解,可W对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换,而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0018] 实施例1:化合物(I)分离制备及结构确证
[0019] 试剂来源:乙醇、石油酸、乙酸乙醋、正下醇、二氯甲烧为分析纯,购自上海凌峰化 学试剂有限公司,甲醇,分析纯,购自江苏汉邦化学试剂有限公司。
[0020] 分离方法:(a)将金沸草(2kg)粉碎,用75%乙醇热回流提取(2化X3次),合并提取 液,浓缩至无醇味(化),依次用石油酸(化X3次)、乙酸乙醋(化X3次)和水饱和的正下醇 (化X3次)萃取,分别得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物和正下醇萃取物;(b)步骤(a)中 正下醇萃取物用DlOl型大孔树脂除杂,先用15%乙醇洗脱6个柱体积,再用70%乙醇洗脱10 个柱体积,收集70%洗脱液,减压浓缩得70%乙醇洗脱浓缩物;(C)步骤(b)中70%乙醇洗脱 浓缩物用正相硅胶分离,依次用体积比为80:1 (8个柱体积)、30:1 (8个柱体积)、15:1 (8个柱 体积)和5:1(10个柱体积)的二氯甲烧-甲醇梯度洗脱得到4个组分;(d)步骤(C)中组分3用 正相硅胶进一步分离,依次用体积比为25:1 (8个柱体积)、15:1 (10个柱体积)和2:1 (5个柱 体积)的二氯甲烧-甲醇梯度洗脱得到3个组分;(e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的 反相硅胶分离,用体积百分浓度为72%的甲醇水溶液等度洗脱,收集8~14个柱体积洗脱 液,洗脱液减压浓缩得到化合物(IKHPLC归一化纯度大于98% )。
[0021] 结构确证:皿-ESI-MS显示[M+化r为m/z 457.2211,结合核磁特征可得分子式为 C2姐3407,不饱和度为8。核磁共振氨谱数据SH(ppm,CDCb,500MHz): H-Ia(1.47,m),H-Ib (1.66,m),H-2a(2.11,m),H-2b(2.23,m),H-5(1.98,dd J = 6.7,11.3Hz),H-6a(2.28,d J = 14.6Hz),H-^(3.07,ddJ=14.6,3.7Hz),H-9a(2.15,d,J=12.6Hz),H-9b(2.31,d,J = 12.6Hz),H-12(1.83,s),H-13(2.07,s),H-14(1.02,s),H-15(1.88,s),H-3'(5.23,q,J= 6.3Hz),H-4'(1.26,d,J = 6.3Hz),H-5'(1.63,s),2'-Ac0(2.07,s),3'-Ac0(2.09,s);核磁 共振碳谱数据 5c(邮m,CDCl3,125MHz ):29.4(C出,1-C) ,24.1 (C出,2-C),137.9(C,3-C), 127.4(C,4-C),49.3(CH,5-C),28.9(Ol2,6-C),132.2(C,7-C),200.8(C,8-C),56.3(ai2,9- C),38.2(C,10-C),146.2(C,ll-C),22.5(afe,12-C),23.3(CH3,13-C),18.6(ai3,14-C), 12.6(Ol3,15-C),168.6(C,r-C),82.6(C,2'-C),72.4(CH,3'-C),14.9(ai3,4'-C),20.7 (C出,5,-C),170.3(C,2,-Ac0),21.3(Ol3,2,-Ac0),169.3(C,3,-Ac0),21.0(CH3,3,-Ac0)。 红外波谱中的1715cnfi与1680cm-i吸收带表明结构中存在幾基与双键结构。i3C-NMR、DEPT和 HSQ村普中显示有24个碳信号,包括八个甲基,四个亚甲基,两个次甲基(一个连氧次甲基), W及十个季碳(四个幾基碳和四个締控碳)。W上功能结构再结合不饱和数表明该化合物为 双环结构。Ih-匪R谱结合HSQC谱显示六个甲基质子信号SHl.22(3H,s)、1.26(3H,d,J = 6.3Hz)、1.63(3H,s)、1.83(3H,s)、1.88(3H,s)、2.07(3H,s),两个乙酷基甲基质子信号 Sh 2.07(3山3)与2.09(3山3),一个连氧次甲基质子信号如5.23(1山9,1 = 6.3化);^上醒尺数 据可W确认该化合物为阔巷菊酬衍生物。丽BC谱中曲-12与C-Il、出-13与C-Il、曲-14与C- 10、出-15与C-4相关信号可W归属为阔巷菊酬上的甲基片段。此外,HMB幻普中H-3'与C-3'相 关信号W及移向低场的H-3'与C-2'信号,可知该化合物中存在2',3'-二乙酷基-2'-甲基下 酷氧基边链结构,而质子信号Sh 1.63与1.26(J = 6.3Hz)可W归属为出-5 '与出-4'的甲基信 号。NOESY谱中He-I/出-14,Ha-l/H-5相关信号表明H-5与出-14在阔巷菊酬骨架的异侧,该化 合物的相对构型进一步通过X-单晶衍射确认。综合氨谱、碳谱、HMBC谱和NOESY谱,W及文献 关于相关类型核磁数据,可基本确定该化合物如下所示,立体构型进一步通过ECD试验确 定,理论值与实验值基本一致。
[0022] 该化合物化学式及碳原子编号如下:
[0023]
[0024] 实施例2:药理作用
[0025] 本实例使用腺嚷岭(Adenine)制备慢性肾衰竭(CRF)大鼠模型,观察药物升高动物 一氧化氮(NO)、促红细胞生成素化PO),降低肾组织径脯氨酸含量等方面的抗CRF作用。
[0026] 1、材料与方法
[0027] 1.1 动物
[0028] SD大白鼠(购自四川省抗菌素工业研究所),开始实验时体重130~160g。
[00巧]1.2试剂与样品
[0030] 二径丙茶碱购自中国药品生物制品检定所。化合物(I)自制,制备方法见实施例1。 腺嚷岭(购自上海伯奥生物科技公司),一氧化氮测定(北京帮定泰克生物技术公司试剂), 促红细胞生成素测定(美国LIFEKEYBiomeditech公司试剂)。
[0031] 1.3 仪器
[0032] 全自动生化分析仪(购自贝克曼公司)。
[0033] 1.4大鼠分组及模型制备
[0034] 大鼠随机分为5组,每组12只,分别为正常对照组、模型对照组、二径丙茶碱组 (80mg ? kg-i)、化合物(I)组(80mg ? kg-i)、二径丙茶碱与化合物(I)组合物组【40mg ? kg-i二 径丙茶碱+40mg ? kg-i化合物(I)】。肾衰造模方法:给实验大白鼠喂饲含0.75%腺嚷岭食物 10周,其余饲养动物条件按常规动物实验标准要求进行。治疗组从第15天开始按上述剂量 灌胃药物,共喂药8周,同时模型对照组与正常对照组给等体积生理盐水。
[0035] 1.5肾组织NO测定实验
[0036] 硝酸血原酶法;测定10 %肾组织匀浆。肾脏EPO测定:BLISA(ABC夹屯、法);测定10 % 肾组织匀浆。
[0037] 1.6肾组织径脯氨酸测定实验
[0038] W分析纯明胶作标准品,与肾组织匀浆同样处理、检测。明胶水解液含量12扣g/ml 内线性关系佳,丫 =0.9965。
[0039] 1.7统计学方法
[0040] 实验数据用均数±标准差(x±s)表示,应用SPSS18.0版统计软件进行单因素方差 分析和t检验,WP<0.05为差异有统计学意义。
[0041 ] 2、实验结果
[0042] 2.1对慢性肾衰竭模型大鼠 N0、EP0含量的影响
[0043] 与正常对照组比较,模型对照组大鼠 NO及EPO含量明显下降(P<0.0 l);与模型对 照组比较,二径丙茶碱与化合物(I)组合物组NO及Ero含量明显升高(P<0.01);与模型对照 组比较,二径丙茶碱组、化合物(I)组NO及Ero含量升高(P<0.05)。结果见表1。
[0044] 2.2对慢性肾衰竭模型大鼠肾组织径脯氨酸含量的影响
[0045] 与正常对照组比较,模型对照组大鼠大鼠肾组织径脯氨酸含量明显升高(P< 0.0 l)。与模型对照组比较,二径丙茶碱与化合物(I)组合物组大鼠肾组织径脯氨酸含量明 显降低(P<〇.01);与模型对照组比较,二径丙茶碱组、化合物(I)组大鼠肾组织径脯氨酸含 量降低(p<0.05)。结果见表1。
[0046] 表1对慢性肾衰竭模型大鼠 N0、EP0含量和肾组织径脯氨酸含量的影响
[0047]
[0048」慢性肾衰竭是危害人群健康的重大疾病,其发病机制为进行性肾小球硬化和肾间 质纤维化,而后者更能决定CRF预后。近年发现一氧化氮(NO)在肾脏疾病的发生发展及病理 生理中起重要作用,机体内NO代谢异常易造成病情加重或反复,而干预性调节NO合成有利 CRF的防治。Raymond和化ng等学者发现在尿毒症时,内源性NO合成抑制物-非对称性二甲精 氨酸(ADMA)堆积,W及此类患者NO合成原料左旋精氨酸化-Arg)浓度降低,均使NO处于低水 平状态。短期的NO减少直接引起血压升高与肾血管收缩,长期阻断还可影响交感神经、肾素 血管紧张素、前列腺素、血管加压素共同导致高血压,并可加重蛋白尿及肾小球硬化。NO尚 能特异性调节肾髓质血流动力学和氧供,进而有可能影响EPO的产生,因为90%EP0在肾远 曲小管和肾皮质外髓部分小管周围内皮细胞产生。
[0049]上述结果表明,二径丙茶碱、化合物(I)单独作用时,对慢性肾衰竭具有治疗作用; 二径丙茶碱和化合物(I)联合作用时,对慢性肾衰竭的治疗效果进一步提高,可W开发成治 疗慢性肾衰竭的药物。
[0050]上述实施例的作用在于说明本发明的实质性内容,但并不W此限定本发明的保护 范围。本领域的普通技术人员应当理解,可W对本发明的技术方案进行修改或者等同替换, 而不脱离本发明技术方案的实质和保护范围。
【主权项】
1. 一种具有下述结构式的化合物α),2. -种二羟丙茶碱的药物组合物,其特征在于:包括二羟丙茶碱、如权利要求1所述的 化合物(I)和药学上可以接受的载体,制备成需要的剂型。3. 根据权利要求2所述的二羟丙茶碱的药物组合物,其特征在于:药学上可以接受的载 体包括稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载 体或润滑剂。4. 根据权利要求2所述的二羟丙茶碱的药物组合物,其特征在于:所述剂型包括片剂、 胶囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、注射 剂、栓剂、喷雾剂、滴剂或贴剂。5. 权利要求1所述的化合物(I)的制备方法,其特征在于,包含以下操作步骤:(a)将金 沸草粉碎,用70~80%乙醇热回流提取,合并提取液,浓缩至无醇味,依次用石油醚、乙酸乙 酯和水饱和的正丁醇萃取,分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物;(b) 步骤(a)中正丁醇萃取物用大孔树脂除杂,先用15%乙醇洗脱6个柱体积,再用70%乙醇洗 脱10个柱体积,收集70%洗脱液,减压浓缩得70%乙醇洗脱浓缩物;(c)步骤(b)中70%乙醇 洗脱浓缩物用正相硅胶分离,依次用体积比为80:1、30:1、15:1和5:1的二氯甲烷-甲醇梯度 洗脱得到4个组分;(d)步骤(c)中组分3用正相硅胶进一步分离,依次用体积比为25:1、15:1 和2:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分;(e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的 反相硅胶分离,用体积百分浓度为72%的甲醇水溶液等度洗脱,收集8~14个柱体积洗脱 液,洗脱液减压浓缩得到纯的化合物(I)。6. 根据权利要求5所述的化合物(I)的制备方法,其特征在于:所述大孔树脂为D101型 大孔吸附树脂。7. 权利要求1所述的化合物(I)在制备治疗慢性肾衰竭的药物中的应用。8. 权利要求2~4任一所述的二羟丙茶碱的药物组合物在制备治疗慢性肾衰竭的药物 中的应用。
【文档编号】A61K31/22GK105924351SQ201610466736
【公开日】2016年9月7日
【申请日】2016年6月22日
【发明人】丁俣汀
【申请人】丁俣汀
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