一株防治梨轮纹病和软腐病的甲基营养型芽孢杆菌及其应用

文档序号:10575873阅读:816来源:国知局
一株防治梨轮纹病和软腐病的甲基营养型芽孢杆菌及其应用
【专利摘要】本发明公开了一株防治梨轮纹病和软腐病的甲基营养型芽孢杆菌及其应用。本发明从表面灭菌的霍山石斛根中分离获得一株内生甲基营养型芽胞杆菌(Bacillus methylotrophicus),该菌株对多种植物病原菌具有广谱抗性,对由轮纹病和软腐病引起的梨果实腐烂具有良好的防治效果。作为生防菌的植物内生菌具有广谱抗菌性和高效的安全性等优势,对梨果实安全;大规模生产原料成本低,操作方便,防治效果稳定,能有效解决梨果实病害农药防治所带来的农药残留和环境污染问题。在梨采后病害的生物防治方面具有巨大的应用潜力,为研制和开发微生物农药提供了优良的基础菌株。CGMCC No.1185820151210
【专利说明】
一株防治梨轮纹病和软腐病的甲基营养型芽孢杆菌及其应用
技术领域
[0001] 本发明属于微生物领域,具体涉及一株防治梨轮纹病和软腐病的甲基营养型芽孢 杆菌及其应用。
【背景技术】
[0002] 梨是我国栽培历史久、面积大、产量高的果树之一。据统计梨是我国第3大水果,目 前全国总面积达100多万公顷,年产量800多万吨,分别占全世界梨栽培面积和产量的62% 和52 %。梨果实在生长发育及贮藏期间,时刻会受到病害的威胁,其中轮纹病 (Botryosphaeria dothidea)是最严重的果实真菌病害之一,是造成梨果实烂果的主要原 因。由于轮纹病菌是在幼果期潜伏侵染,在果实成熟及贮运期间发病,控制和防范都有很大 困难。梨软腐病主要由匍枝根霉(Rhizopus stolonifer)和梨形毛霉(Mucor piriformis) 引起,主要危害梨果实,一般零星发生,但是果实伤口多、贮藏期温度高时发生较重。高温 时,5-6天内可使病果全部软腐。
[0003] 新鲜水果采后腐烂是一个全球性的问题。我国每年因为梨轮纹病危害造成梨果减 产约25%,严重时烂果率高达80%以上,造成巨大经济损失。目前生产上常采用化学药剂防 治梨采后病害,这样不仅严重污染生态环境,而且增加农产品中有毒化学物质的残留量,对 人类健康带来潜在危害,同时也易诱致病原菌抗药性的产生。
[0004] 生物防治利用物种间的拮抗作用来减少病害的发生,对人畜安全、环境兼容性好、 病虫害不易产生抗药性,因而具有化学杀菌剂不具有的优势,正逐步成为代替化学杀菌剂 的最佳方式。获得高效拮抗菌是生物防治的基础。枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)是最 早被报道用来防治柑橘病害的细菌(Gutter and Littauer,1953)。随着研究的深入,人们 已筛选并报道多种对果蔬采后病害具有防治效果的拮抗菌,主要是酵母菌、芽胞杆菌、假单 胞菌和木霉菌。几株微生物诘抗菌已经被授权专利并商业应用,如Biosave(Pseudomonas syringae,USA)、"Shemer"(Metschnikowia Fructicola,Israel)、Serenade(Baci1lus subtilis,USA)和Candi fruit (Candida sake,Spain)。微生物诘抗菌可以产生具有高诘抗 活性的广谱抗菌物质,具有极强的抗逆能力,同时具有无毒、无残留、无致病性、对人畜安 全、环境相容性好,满足了消费者对农产品质量和安全性的要求。

【发明内容】

[0005] 本发明的一个目的是提供一株甲基营养型芽胞杆菌Bacillus methylotrophicus RlB〇
[0006] 本发明提供的甲基营养型芽胞杆菌Bacillus methylotrophicus RIB的保藏编号 为CGMCC No.11858。
[0007] 上述菌株RIB的分类命名为甲基营养型芽胞杆菌Bacillus methylotrophicus,该 菌株于2015年12月10日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称 CGMCC,地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所,邮编100101),保 藏编号为CGMCC No.11858。
[0008] 本发明的另一个目的是提供上述甲基营养型芽胞杆菌RIB或其菌悬液或其培养液 或其发酵产物或含有其的菌剂的新用途。
[0009] 本发明提供了上述甲基营养型芽胞杆菌R1B或其菌悬液或其培养液或其发酵产物 或含有其的菌剂在防治轮纹病和/或软腐病中的应用。
[0010]本发明还提供了上述甲基营养型芽胞杆菌R1B或其菌悬液或其培养液或其发酵产 物或含有其的菌剂在制备防治轮纹病和/或软腐病的产品中的应用。
[0011] 上述应用中,所述轮纹病和/或软腐病为梨轮纹病和/或梨软腐病。
[0012] 本发明还提供了上述甲基营养型芽胞杆菌R1B或其菌悬液或其培养液或其发酵产 物或含有其的菌剂在抗菌和/或抑菌中的应用。
[0013] 本发明还提供了上述甲基营养型芽胞杆菌R1B或其菌悬液或其培养液或其发酵产 物或含有其的菌剂在制备抗菌和/或抑菌的产品中的应用。
[0014] 上述应用中,所述抗菌和/或抑菌是通过抑制菌丝生长体现的。
[0015] 上述应用中,所述菌为轮纹病菌Botryosphaeria dothidea和/或软腐病菌 Rhizopus stolonifer和/或石斛黑斑病菌Alternaria tenuissima和/或棉花黄萎病菌 Verticillium dahliae和/或白菜黑斑病菌Alternaria brassicae和/或灰霉病菌 Botrytis cinerea和/或辣椒立枯病菌Rizoctonia solani和/或香蕉枯萎病菌Fusarium 〇叉5^〇1'11111和/或稻痕病菌?;[1';[(3111&1^0犷5^&6和/或禾谷镜抱菌?118&1';[11111区瓜111;[116&1'11111 0
[0016] 本发明还有一个目的是提供一种产品。
[0017] 本发明提供的产品的活性成分为上述甲基营养型芽胞杆菌R1B或其菌悬液或其培 养液或其发酵产物或含有其的菌剂;
[0018] 所述产品具有如下1)或2)所述的功能:
[0019] 1)防治轮纹病和/或软腐病;
[0020] 2)抗菌和/或抑菌。
[0021 ] 上述产品中,所述抗菌和/或抑菌是通过抑制菌丝生长体现的;
[0022] 所述菌为轮纹病菌Botryosphaeria dothidea和/或软腐病菌Rhizopus stolonifer和/或石斛黑斑病菌Alternaria tenuissima和/或棉花黄萎病菌Verticillium dahliae和/或白菜黑斑病菌Alternaria brassicae和/或灰霉病菌Botrytis cinerea和/ 或辣椒立枯病菌Rizoctonia solani和/或香蕉枯萎病菌Fusarium oxysporum和/或稻痕病 菌Piricularia Oryzae和/或禾谷镜抱菌Fusarium graminearum。
[0023] 本发明的最后一个目的是提供一种防治或辅助防治梨果实轮纹病和/或软腐病的 方法。
[0024] 本发明提供的防治或辅助防治梨果实轮纹病和/或软腐病的方法包括如下步骤: 用上述甲基营养型芽胞杆菌R1B或上述产品中的菌悬液处理梨果实。
[0025] 上述方法中,所述菌悬液中甲基营养型芽胞杆菌浓度为5 X 107CFU/ml。
[0026] 本发明从表面灭菌的霍山石斛根中分离获得一株甲基营养型芽胞杆菌(Bacillus methylotrophicus),该菌株对多种植物病原菌具有广谱抗性,对由轮纹病和软腐病引起的 梨果实腐烂具有良好的防治效果。作为生防菌的植物内生菌具有广谱抗菌性和高效的安全 性等优势,用其菌体(或其产生的活性物质)作为天然保鲜剂,大规模生产原料成本低,操作 方便,防治效果稳定,能有效解决梨果实病害农药防治所带来的农药残留和环境污染问题。 在梨采后病害的生物防治方面具有巨大的应用潜力,为研制和开发微生物农药提供了优良 的基础菌株。
【附图说明】
[0027]图1为菌株R1B的形态照片。其中,图1A为菌株R1B培养7天的菌落照片;图1B为R1B 的菌落放大照片。
[0028]图2为基于菌株R1B的16S rDNA构建的系统发育树。
[0029]图3为菌株R1B与轮纹病菌和软腐病菌对峙培养的照片。其中,图3A为菌株R1B与轮 纹病菌对峙培养7天的照片;图3B为菌株R1B与软腐病菌对峙培养10天的照片。
[0030] 图4为菌株R1B作用下轮纹病菌菌丝形态和软腐病菌菌丝形态。其中,图4A为R1B处 理组的轮纹病菌菌丝形态;图4B为对照组的轮纹病菌菌丝形态;图4C为R1B处理组的软腐病 菌菌丝形态;图4D为对照组的软腐病菌菌丝形态。
[0031] 图5为菌株R1B对梨果实轮纹病的防治作用。
[0032]图6为菌株R1B对梨果实软腐病的防治作用。
[0033] 保藏说明
[0034]菌种名称:甲基营养型芽胞杆菌
[0035] 拉丁名:Bacillus methylotrophicus
[0036] 菌株编号:RIB
[0037] 保藏机构:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心 [0038] 保藏机构简称:CGMCC
[0039]地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号
[0040] 保藏日期:2015年12月10日
[0041 ] 保藏中心登记入册编号:CGMCC No. 11858
【具体实施方式】
[0042] 下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明,均为常规方法。
[0043] 下述实施例中所用的材料、试剂等,如无特殊说明,均可从商业途径得到。
[0044] 下述实施例中的梨品种为"水晶梨"。
[0045]下述实施例中的马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)配方:马铃薯200克、葡萄糖20克、 琼脂15克,用蒸馏水定容至1升,自然pH。
[0046] 下述实施例中的马铃薯葡萄糖培养基(PDB)配方:马铃薯200克、葡萄糖20克,用蒸 馏水定容至1升,自然pH。
[0047] 下述实施例中的牛肉膏培养基配方:牛肉膏5.0g、蛋白胨10.0g、NaCl 5g,用蒸馏 水定容至1升,pH 7.2~7.4。
[0048]下述实施例中的R1B菌悬液的制备方法:将R1B接种于牛肉膏培养基中,培养48hr (30°C、150r/min)后,将菌液于4°C、10000r/min离心10min,去上清,然后用无菌水调整到需 要的浓度。
[0049]实施例1、甲基营养型芽胞杆菌株R1B的分离及鉴定
[0050] 一、菌株RIB的分离和纯化
[0051 ] 1、将采自安徽六安的霍山石斛用自来水冲洗干净后,用蒸馏水冲洗,晾干后把根、 茎和叶片剪成小段进行表面消毒。消毒方法如下:70%酒精处理40-60S,无菌水冲洗,然后 用2.5 %次氯酸钠溶液处理2-5min,无菌水冲洗3-4次。
[0052] 2、在无菌条件下,取100yL最后一次冲洗所产生的无菌水涂布在牛肉膏培养基上, 30°C培养24-72h,观察有无菌落产生,依此验证此消毒方法是否杀死了供试材料表面的微 生物。
[0053] 3、在无菌状态下,将霍山石斛根、茎、叶片切成0.2cm2的片段,置于盛有牛肉膏培 养基的平皿中,28°C条件下培养。组织块出现菌落后,挑取菌落转接入新牛肉膏培养基中划 线纯化培养,反复几次即得到细菌纯化菌株,将其接种于牛肉膏培养基斜面试管中,保存于 4°C冰箱中。
[0054]从霍山石斛根、茎、叶片中共分离获得32株细菌,以梨轮纹病菌为指示菌进行拮抗 细菌的初筛和复筛,其中来自根中的1株细菌表现出强烈的拮抗活性,将该菌株命名为R1B。 [0055] 二、菌株R1B的鉴定 [0056] 1、菌株R1B的形态鉴定
[0057]菌株R1B的形态特征:革兰氏阳性菌,在牛肉膏蛋白胨培养基上菌落扁平圆形,乳 白色不透明,边缘锯齿状,表面粗糙颗粒状(图1A、B)。
[0058] 2、菌株RIB的生理生化的鉴定
[0059]菌株R1B的生理生化特性如表1所示,菌株R1B属于好氧菌,甲基红实验阴性,接触 酶反应、明胶水解、淀粉水解、VP实验、硝酸盐还原实验均为阳性,可以很好地利用葡萄糖和 蔗糖,对甘露醇的利用较弱,在28~37°C条件下生长最好。根据《常见细菌系统鉴定手册》, 将菌株R1B初步鉴定为芽孢杆菌属(Bacillus)细菌。
[0060] 表1、菌株R1B的生理生化特性
[0062] *+-:生长不好**+:生长
[0063] 3、菌株R1B的分子鉴定
[0064]提取菌株R1B的总DNA作为模板,采用通用引物27f和1492r进行PCR扩增,得到含有 菌株RIB 16S rDNA保守区的片段。引物序列如下:
[0065] 27以上游引物):5/-厶6厶61'11^丁(:0^(:1^6-3/;
[0066] 1492r(下游引物):5' -TACGGTTACCTTGTTACGACTT-3'。
[0067] PCR扩增得到的菌株R1B的16s rDNA的序列如序列1所示。基于16S rDNA序列的系 统发育树如图2所不。
[0068] 4、菌株的保藏
[0069]根据形态特征、生理生化和分子鉴定结果和分析,菌株R1B的分类命名为甲基营养 型芽胞杆菌(1^(3;[11113 11161:117101:1'(^11;[(3118),该菌株于2015年12月10日保藏于中国微生物 菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC,地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号, 中国科学院微生物研究所,邮编100101),保藏编号为CGMCC No. 11858。
[0070]实施例2、菌株RIB在抑菌或抗菌中的应用
[0071 ] -、菌株R1B对梨轮纹病菌和软腐病菌的拮抗活性
[0072] 在FOA培养基上分别活化病原菌株梨轮纹病菌(Botryosphaeria dothidea)和软 腐病菌(Rhizopus stolonifer),用6mm的打孔器打取菌饼,分别得到梨轮纹病菌饼和软腐 病菌饼。采用对峙培养法,分别将梨轮纹病菌饼和软腐病菌饼接种在直径为9cm的PDA平板 一侧,相对的一侧划线接种菌株R1B,两接种点相距3-4cm,并以单独接种在PDA平板上的病 原菌株梨轮纹病菌和软腐病菌做对照。均设3个重复,在25°C条件下培养,当对照长满全皿 时,测量处理菌落直径和抑菌带宽度,抑菌活性采用抑制率=[(对照菌落半径一处理菌半 径)/对照菌落半径]X 100%。
[0073]结果如图3所示,菌株R1B对轮纹病菌表现出强烈的抑菌作用,抑菌率达到72.7% (图3A)。软腐病菌生长迅速,一天即可满皿,菌株R1B周围有明显的抑菌带(0.5-lcm),十天 后依然清晰(图3B)。说明菌株R1B对两种梨病原菌梨轮纹病菌和软腐病菌均有明显的抑制 作用。
[0074] 二、菌株R1B的抗菌谱
[0075]以石斛黑斑病菌(Alternaria tenuissima)、棉花黄萎病菌(Verticillium dahliae)、白菜黑斑病菌(Alternaria brassicae)、灰霉病菌(Botrytis cinerea)、辣椒立 枯病菌(Rizoctonia solani)、香蕉枯萎病菌(Fusarium oxysporum)、稻痕病菌 (Piricularia Oryzae)和禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum)作为供试植物病原菌,研究 菌株R1B的抑菌谱。具体步骤如下:
[0076] 在FOA培养基上分别活化石斛黑斑病菌(Alternaria tenuissima)、棉花黄萎病菌 (Verticillium dahliae)、白菜黑斑病菌(Alternaria brassicae)、灰霉病菌(Botrytis cinerea)、辣椒立枯病菌(Rizoctonia solani)、香蕉枯萎病菌(Fusarium oxysporum)、稻 痕病菌(Piricularia Oryzae)和禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum),并用6mm的打孔器 打取菌饼,分别得到上述各病菌菌饼。采用对峙培养法,分别将上述各病菌菌饼接种在直径 9cm的TOA平板一侧,相对的一侧划线接种菌株R1B,两接种点相距3-4cm,以病原菌单独接种 在PDA平板上做对照。均设3个重复,在25°C条件下培养,当对照长满全皿时,测量各病原菌 落直径和抑菌带宽度,抑菌活性采用抑制率=[(对照菌落半径一处理菌半径)/对照菌落半 径]X100%〇
[0077] 结果如表2所示,菌株R1B对8种供试植物病原真菌石斛黑斑病菌(Alternaria tenuissima)、棉花黄萎病菌(Verticillium dahl iae)、白菜黑斑病菌(A1 ternar ia brassicae)、灰霉病菌(Botrytis cinerea)、辣椒立枯病菌(Rizoctonia solani)、香蕉枯 萎病菌(Fusarium oxysporum)、稻痕病菌(Piricularia Oryzae)和禾谷镜抱菌(Fusarium graminearum)均表现出强烈的抑制效果,抑菌率均在50 %以上。说明菌株RIB具有广谱的抑 菌能力,可用于多种病害的生物防治。
[0078]表2、R1B对不同植物病原菌的抑制结果
[0080]三、菌株RIB对梨轮纹病菌和软腐病菌菌丝生长的影响
[0081 ]在PDA培养基上分别活化病原菌株梨轮纹病菌和软腐病菌,用6mm的打孔器打取菌 饼,分别得到梨轮纹病菌饼和软腐病菌饼。将梨轮纹病菌饼和软腐病菌饼研碎后,分别接种 在l/l〇roB培养基中,25°C,150rpm/min培养2天后,加入浓度为1 X 107CFU/ml的R1B菌悬液, 并以单独接种在接种在1/10PDB培养基中的梨轮纹病菌和软腐病菌做对照。均设3个重复, 在25 °C条件下培养后镜检菌丝生长状况。
[0082]结果如图4所示,在菌株R1B作用下,轮纹病菌菌丝形态发生严重畸变,菌丝粗细不 均,有的生长菌丝的顶端畸形,形成膨胀泡后破裂,细胞内物质向外泄漏(图4A);而对照菌 丝粗细均匀且表面光滑、生长旺盛(图4B)。说明菌株R1B严重破坏了菌丝形态,具有抑制轮 纹病菌菌丝生长的作用。
[0083]在菌株R1B作用下,软腐病菌几乎不能生长,菌丝出现断裂和自溶(图4C),而对照 病菌菌丝生长旺盛(图4D)。说明菌株R1B可完全抑制软腐病菌菌丝的生长。
[0084]实施例3、菌株R1B在防治梨果实轮纹病中的应用 [0085] 一、菌株R1B对梨果实轮纹病的防治作用 [0086] 1、梨预处理
[0087] 选取外观整齐、无病虫害、无外伤的果实,先用自来水冲洗干净,然后用75%酒精 喷洒消毒,2min后用无菌滤纸擦干表面备用。
[0088] 2、R1B菌悬液处理
[0089] 用无菌打孔器(直径6mm)在果实表面对称打两个深度尽可能一致的伤口,在伤口 内分别接种50yL 5X 107CFU/ml的RIB菌悬液(RIB处理组,RIB)和等量无菌水(对照组,ck), 每处理8个果实,重复3次,室温放置一天。
[0090] 3、接种病原菌
[0091]分别在步骤2中的R1B处理组和对照组的伤口处接种直径6mm的轮纹病菌块,接种 处理后放入PE密闭箱中在25°C,RH>90%条件下培养,定时观察并记录结果,并计算平均发 病率(% )和平均病斑直径(cm) 0
[0092] 菌株R1B对梨果实轮纹病的防治作用结果如图5和表3所示,R1B处理组与对照组相 比,梨果实轮纹病的发病情况明显减弱。在接入轮纹病菌3天后,对照组开始发病,R1B处理 可以完全抑制梨果实轮纹病的发生;接入轮纹病菌5天后,对照组100 %发病,而R1B处理依 然可以100%抑制梨果实轮纹病的发生;接入病菌7天后,R1B处理组开始出现病斑;9天后, 对照组腐烂面积大于50%,直径在6cm左右,而R1B处理组的梨果实病斑直径平均在2. lcm, 比对照降低了65.1%,R1B处理有效的减缓了梨轮纹病的发生和发展,具有良好的防治效 果。
[0093]表3、R1B对梨果实轮纹病的防治作用
[0095]二、不同浓度R1B菌悬液对梨果实轮纹病的防治作用 [0096] 1、梨预处理
[0097]选取外观整齐、无病虫害、无外伤的果实,先用自来水冲洗干净,然后用75%酒精 喷洒消毒,2min后用无菌滤纸擦干表面备用。
[0098] 2、不同浓度的R1B菌悬液处理
[0099] 用无菌打孔器(直径6mm)在果实表面对称打两个深度尽可能一致的伤口,在其中 一个伤口内分别接种 1 X l〇8CFU/ml、l X 107CFU/ml、l X 106CFU/ml和 1 X 105CFU/ml R1B菌液 50yL,并在另一个伤口内加入等量无菌水为对照。每处理8个果实,重复3次,室温放置一天。
[0100] 3、接种病原菌
[0101]分别在步骤2中的各个R1B处理组和对照组的伤口处接种直径6mm的轮纹病菌块, 接种处理后放入PE密闭箱中在25°C,RH>90%条件下培养,定时观察并记录结果,并计算平 均发病率(% )和平均病斑直径(mm)。
[0102] 不同浓度R1B菌悬液对梨果实轮纹病的防治作用如表4所示。从表中可以看出:不 同浓度的R1B菌悬液处理梨果实9天,随着R1B菌悬液浓度的降低,对梨轮纹病的防治作用逐 渐减弱,1 X l〇8CFU/ml R1B处理组效果最好,延迟和减缓梨轮纹病的发生,具有良好的防治 作用。
[0103] 表4、不同浓度R1B对梨果实轮纹病的防治作用
[0105]实施例4、菌株RIB在防治梨果实软腐病中的应用 [0106] 1、梨预处理
[0107] 选取外观整齐、无病虫害、无外伤的果实,先用自来水冲洗干净,然后用75%酒精 喷洒消毒,2min后用无菌滤纸擦干表面备用。
[0108] 2、R1B菌悬液处理
[0109] 用无菌打孔器(直径6mm)在果实表面对称打两个深度尽可能一致的伤口,在伤口 内分别接种50yL 5X 107CFU/ml的R1B菌悬液(R1B处理组,R1B)和等量无菌水(对照组,ck), 每处理8个果实,重复3次,室温放置一天。
[0110] 3、接种病原菌
[0111] 分别在步骤2中的R1B处理组和对照组的伤口处接种1 X 105spores/ml的匍枝根霉 (Rhizopus stolonifer)悬液50yL接种处理后放入PE密闭箱中在25°C,RH>90%条件下培 养,定时观察并记录结果,并计算平均发病率(%)和平均病斑直径(_)。
[0112]菌株R1B对梨果实软腐病的防治作用如图6和表5所不。从表中可以看出:匍枝根霉 接种后,对照组发病迅速,在接入软腐病菌2天后,对照组病斑直径已达6-9cm,RlB处理组可 以完全抑制梨果实软腐病的发生;4天后,对照组梨果实全部腐烂,渗出大量的液体,且布满 黑色菌丝和孢子;而R1B处理组依然100%抑制梨果实软腐病的发生;直至12天后R1B处理组 才开始发病。说明菌株R1B对梨果实软腐病的发生有很好的防治作用。
[0113]表5、R1B对梨果实软腐病的防治作用
[0114]
【主权项】
1. 一株甲基营养型芽胞杆菌Bacillus methylotrophicus R1B,其保藏编号为CGMCC No.11859。2. 权利要求1所述的甲基营养型芽胞杆菌RIB或其菌悬液或其培养液或其发酵产物或 含有其的菌剂在防治轮纹病和/或软腐病中的应用; 或权利要求1所述的甲基营养型芽胞杆菌R1B或其菌悬液或其培养液或其发酵产物或 含有其的菌剂在制备防治轮纹病和/或软腐病的产品中的应用。3. 根据权利要求2所述的应用,其特征在于:所述轮纹病和/或软腐病为梨轮纹病和/或 梨软腐病。4. 权利要求1所述的甲基营养型芽胞杆菌R1B或其菌悬液或其培养液或其发酵产物或 含有其的菌剂在抗菌和/或抑菌中的应用; 或权利要求1所述的甲基营养型芽胞杆菌R1B或其菌悬液或其培养液或其发酵产物或 含有其的菌剂在制备抗菌和/或抑菌的产品中的应用。5. 根据权利要求4所述的应用,其特征在于:所述菌为轮纹病菌Botryosphaeria dothidea和/或软腐病菌Rhizopus stolonifer和/或石斛黑斑病菌Alternaria tenuissima和/或棉花黄萎病菌Verticillium dahliae和/或白菜黑斑病菌Alternaria brassicae和/或灰霉病菌Botrytis cinerea和/或辣椒立枯病菌Rizoctonia solani和/或 香蕉枯萎病菌Fusarium oxysporum和/或稻痕病菌Piricularia Oryzae和/或禾谷镰孢菌 Fusarium graminearum。6. -种产品,其活性成分为权利要求1所述的甲基营养型芽胞杆菌(Bacillus methylotrophicus )R1B或其菌悬液或其培养液或其发酵产物或含有其的菌剂; 所述产品具有如下1)或2)所述的功能: 1) 防治轮纹病和/或软腐病; 2) 抗菌和/或抑菌。7. 根据权利要求6所述的产品,其特征在于:所述轮纹病和/或软腐病为梨轮纹病和/或 梨软腐病。8. 根据权利要求6所述的产品,其特征在于:所述菌为轮纹病菌Botryosphaeria dothidea和/或软腐病菌Rhizopus stolonifer和/或石斛黑斑病菌Alternaria tenuissima和/或棉花黄萎病菌Verticil lium dahl iae和/或白菜黑斑病菌Alternaria brassicae和/或灰霉病菌Botrytis cinerea和/或辣椒立枯病菌Rizoctonia solani和/或 香蕉枯萎病菌Fusarium oxysporum和/或稻痕病菌Piricularia Oryzae和/或禾谷镰孢菌 Fusarium graminearum。9. 一种防治或辅助防治梨果实轮纹病和/或软腐病的方法,包括如下步骤:用权利要求 1所述的甲基营养型芽胞杆菌R1B或权利要求6所述的产品中的菌悬液处理梨果实。10. 根据权利要求9所述的方法,其特征在于:所述菌悬液中甲基营养型芽胞杆菌浓度 为5X107CFU/ml〇
【文档编号】A23B7/155GK105936886SQ201610560361
【公开日】2016年9月14日
【申请日】2016年7月15日
【发明人】武利勤, 尚宏忠, 顾海科, 王青, 刘桂君, 周思静, 王平
【申请人】北京市辐射中心
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