一种马来酰氨基阿维菌素的制备方法
【专利摘要】本发明提供一种马来酰氨基阿维菌素的制备方法，所述该药物通过中间体与马来酸酐酰化制得，在乙腈液体中反应制得。具体地，所述该反应的原料配比为：中间体：马来酸酐：乙腈（W:V:V）为1:5?20:50?150；反应温度为?15?00C；反应时间为1?10小时。奶牛寄生虫的虫体移行不仅可以造成机械损伤，引起器官组织发炎或损坏干扰生命活动，甚至造成死亡；还与动物机体争营养，吸取血液和组织液等，使饲料报酬降低，影响产能，降低产品品质，投入产出不成比例。马来酰氨基阿维菌素可用于奶牛寄生虫的驱除，对泌乳奶牛生产性能影响较小，为一种非常有前途的抗寄生虫新药。
【专利说明】
一种马来酰氨基阿维菌素的制备方法
技术领域
[0001] 本发明属于兽药技术领域，具体涉及一种马来酰氨基阿维菌素的制备方法。
【背景技术】
[0002] 在世界上，阿维菌素系列衍生物包括伊维菌素、甲氨基阿维菌素、乙酰氨基阿维菌 素等原药。它们可分别应用于农业杀虫(农药）、兽用驱虫、卫生用杀虫、人用驱虫四大行业， 可以制成30多种剂型上百种产品，市场容量极大。就现在的国内外市场来看，年销售额可 达几十亿美元。世界主要农牧业国家普遍应用此药，如在美国、南美、澳大利亚、新西兰、欧 洲等国家和地区，IVM占驱虫药市场50%以上。以发明本产品的美国默克公司为例，1995 年该产品销售额10亿美元，1996年6月-1997年6月为12亿美元，而该公司1996 年6月-1997年6月几千个产品（涉及医药、农药、兽药等）总的营销额为168亿美元。 1998年全世界仅IVM的年销售额即为17亿美元，居兽药单项销售额第一位。年销售额 在百亿美元以上的十几个世界知名的跨国公司，都在纷纷从中国购买AVM和IVM原料 药，从事制剂的生产和销售，据这些大公司估计，在2002~2006年左右，随着各种剂型专 利的全面到期，AVM、IVM、甲氨基AVM和乙酰氨基AVM系列产品(包括农药、兽药、医药)的 全世界年营销额可达上百亿美元。在世界上，阿维菌素系列衍生物包括伊维菌素、甲氨基阿 维菌素、乙酰氨基阿维菌素等原药。它们可分别应用于农业杀虫(农药）、兽用驱虫、卫生用 杀虫、人用驱虫四大行业，可以制成30多种剂型上百种产品，市场容量极大。就现在的国 内外市场来看，年销售额可达几十亿美元。世界主要农牧业国家普遍应用此药，如在美国、 南美、澳大利亚、新西兰、欧洲等国家和地区，IVM占驱虫药市场5 0 %以上。以发明本产品的 美国默克公司为例，1995年该产品销售额10亿美元，1996年6月-1997年6月为12 亿美元，而该公司1996年6月-1997年6月几千个产品（涉及医药、农药、兽药等)总的 营销额为168亿美元。1998年全世界仅IVM的年销售额即为17亿美元，居兽药单项销 售额第一位。年销售额在百亿美元以上的十几个世界知名的跨国公司，都在纷纷从中国购 买AVM和IVM原料药，从事制剂的生产和销售，据这些大公司估计，在2002~2006年左 右，随着各种剂型专利的全面到期，AVM、IVM、甲氨基AVM和乙酰氨基AVM系列产品（包括 农药、兽药、医药)的全世界年营销额可达上百亿美元。
[0003] 马来酰氨基阿维菌素是由阿维菌素 B1(AVM B1)半合成得到的，具有高生物活性， 是一种高效抗奶牛寄生虫药剂。作为最新的抗虫药物，意义非常重大。研究开发新衍生物， 筛选更加有效的化合物，是药物化学永远的主题。
【发明内容】
[0004] 本发明提供了一种纯度高、生产效率高的马来酰氨基阿维菌素的制备方法。
[0005] 本发明解决其技术问题所采用的技术方案为： 一种马来酰氨基阿维菌素的制备方法，其特征在于包括如下步骤： A、酯化反应--C5-OH反应
在三颈烧瓶上安装温度计、滴液漏斗及干燥管，先加入质量浓度96%的叔丁基甲基醚 500 ml，再分别加入阿维菌素 Bl-AVMBdeAJg、三乙胺溶液41ml和冰盐水lOOOg，所述冰盐 水按盐与水重量比1:5混合并冷却至O-St，滴加质量浓度90%的烯丙基甲酰氯80ml，80ml烯 丙基甲酰氯用2h滴加完，将上述混合液倒入质量浓度2%磷酸溶液中，搅拌沉降直至分离，取 上层有机相备用，下层水相用质量浓度96%的叔丁基甲基醚提取2次，下层水相提取后取上 层有机相备用，将有机相合并使用旋转蒸发仪蒸去液体，得到白色泡沫状固体； B、 阿维菌素 B1-一C4〃-OH氧化反应
取步骤A的白色泡沫状固体100g，加入质量浓度95%氯甲酸烯丙酯90ml、质量浓度95%二 甲亚砜DMS0 58.8ml、质量浓度95%三乙胺190.2ml和质量浓度95%乙酸异丙酯980ml，上述 液体混合搅拌均匀，冷却至-15°C，滴加磷酸苯酯酰氯48.4ml，静置反应1小时； C、 氨化与还原反应
取步骤B反应液92g，加入质量浓度98%乙酸异丙酯450ml、质量浓度99%六甲基二硅氮烷 64ml和氯化锌14g，加热搅拌升温至50°C，50°C下保持反应5h，随后冷却到-5°C ;加入质量 浓度99%硼氢化钠10.5g和质量浓度100%无水乙醇170ml，还原反应1.5小时，反应结束后再 次加入体积浓度10%乙酸溶液275ml分解过量的硼氢化钠，静置反应1小时，用质量浓度20% 氢氧化钠调节pH值至8,过滤除去析出的氢氧化锌沉淀物，取溶液备用， 滤除沉淀物用乙酸异丙酯提取3次，取有机相与备用溶液合并，在l-2Pa压力下通过旋 转蒸发仪蒸馏，蒸馏得到黄色泡沫状固体还原产物； D、 还原反应
取步骤C黄色泡沫状固体还原产物15g，黄色泡沫状固体还原产物降温至O-St时加入 的质量浓度100%无水乙醇70ml，在氮气保护下，加入质量浓度99%硼氢化钠30g，30g硼氢化 钠1小时加完，静置反应30分钟； E、 解保护反应：
步骤D温度保持在-S-Ot，继续加入质量浓度99%硼氢化钠30g，静置反应2h，取有机相 备用，将水相用乙酸异丙酯萃取2次，合并有机相获得中间体； F、 马来酰化反应
将中间体放入干燥的四口烧瓶中，中间体反应液冷却到0?C时，漏斗中滴加马来酸酐与 乙腈液体，反应温度降至-15~Ot，反应时间为1~10小时，用饱和碳酸氢钠溶液调pH值为 8.0，静置分层，取有机相蒸干得到马来氨基AVMB1粗品。
[0006] 还包括如下步骤： G、 马来氨基AVMB1粗品提纯 在四颈烧瓶中，加入粗品马来氨基MAVMB1，每g粗品马来氨基MAVMB1如乙腈溶液 1 〇ml，水浴加热80QC，直至粗品马来氨基MAVMB1全部溶解，过滤杂质转入另一四颈烧瓶中 降温析晶，降温至35%，维持析晶温度35%下静止1小时，取晶体并用乙腈溶液洗2次，真空干 燥得到马来氨基AVMB1精品。
[0007] 步骤F中马来酸酐溶液的质量浓度95%，乙腈液体质量浓度95%。
[0008]步骤G中乙腈液体质量浓度95%。
[0009] 步骤F中每lg中间体中添加马来酸酐5-20mL、乙腈50-150mL。
[0010] 步骤F中每lg中间体中添加马来酸酐10mL、乙腈100mL。
[0011]步骤F中优选反应温度为-10%。
[0012]步骤F中优选反应时间为5小时。
[0013] 本发明马来酰氨基阿维菌素，可作为一种新的抗奶牛寄生虫药剂。奶牛寄生虫的 虫体移行不仅可以造成机械损伤，引起器官组织发炎或损坏干扰生命活动，甚至造成死亡； 还与动物机体争营养，吸取血液和组织液等，使饲料报酬降低，影响产能，降低产品品质，投 入产出不成比例。马来酰氨基阿维菌素可用于奶牛寄生虫的驱除，对泌乳奶牛生产性能影 响较小，为一种非常有前途的抗寄生虫新药。
【附图说明】
[0014] 图1为阿维菌素结构式； 图2为阿维菌素出结构式。
【具体实施方式】
[0015] 材料与试剂 阿维菌素也质量浓度99%，武汉易泰科技有限公司。马来酸酐质量浓度95%，西韦伯力 扬化工有限公司。乙腈，市售工业品，质量浓度95%。
[0016] 试验设备 FC204型电子分析天平、101综合仪、R200旋转蒸发器、电子恒温不锈钢水浴锅、式恒温 磁力搅拌器。
[0017] -种马来酰氨基阿维菌素的制备方法，其特征在于包括如下步骤： A、 酯化反应 C5-OH反应
在三颈烧瓶上安装温度计、滴液漏斗及干燥管，先加入质量浓度96%的叔丁基甲基醚 500 ml，再分别加入阿维菌素 Bl-AVMBdeAJg、三乙胺溶液41ml和冰盐水1000g，所述冰盐 水按盐与水重量比1:5混合并冷却至O-St，滴加质量浓度90%的烯丙基甲酰氯80ml，80ml烯 丙基甲酰氯用2h滴加完，将上述混合液倒入质量浓度2%磷酸溶液中，搅拌沉降直至分离，取 上层有机相备用，下层水相用质量浓度96%的叔丁基甲基醚提取2次，下层水相提取后取上 层有机相备用，将有机相合并使用旋转蒸发仪蒸去液体，得到白色泡沫状固体； B、 阿维菌素 B1-一C4〃-OH氧化反应
取步骤A的白色泡沫状固体100g，加入质量浓度95%氯甲酸烯丙酯90ml、质量浓度95%二 甲亚砜DMS0 58.8ml、质量浓度95%三乙胺190.2ml和质量浓度95%乙酸异丙酯980ml，上述 液体混合搅拌均匀，冷却至-15°C，滴加磷酸苯酯酰氯48.4ml，静置反应1小时； C、 氨化与还原反应
取步骤B反应液92g，加入质量浓度98%乙酸异丙酯450ml、质量浓度99%六甲基二硅氮烷 64ml和氯化锌14g，加热搅拌升温至50°C，50°C下保持反应5h，随后冷却到-5°C ;加入质量 浓度99%硼氢化钠10.5g和质量浓度100%无水乙醇170ml，还原反应1.5小时，反应结束后再 次加入体积浓度10%乙酸溶液275ml分解过量的硼氢化钠，静置反应1小时，用质量浓度20% 氢氧化钠调节pH值至8,过滤除去析出的氢氧化锌沉淀物，取溶液备用， 滤除沉淀物用乙酸异丙酯提取3次，取有机相与备用溶液合并，在l-2Pa压力下通过旋 转蒸发仪蒸馏，蒸馏得到黄色泡沫状固体还原产物； D、 还原反应
取步骤C黄色泡沫状固体还原产物15g，黄色泡沫状固体还原产物降温至O-St时加入 的质量浓度100%无水乙醇70ml，在氮气保护下，加入质量浓度99%硼氢化钠30g，30g硼氢化 钠1小时加完，静置反应30分钟； E、 解保护反应：
步骤D温度保持在-S-Ot，继续加入质量浓度99%硼氢化钠30g，静置反应2h，取有机相 备用，将水相用乙酸异丙酯萃取2次，合并有机相获得中间体； F、 马来酰化反应
将中间体放入干燥的四口烧瓶中，中间体反应液冷却到〇uC时，漏斗中滴加马来酸酐与 乙腈液体，反应温度降至-15~Ot，反应时间为1~10小时，用饱和碳酸氢钠溶液调pH值为 8.0，静置分层，取有机相蒸干得到马来氨基AVMB1粗品。
[0018] 还包括如下步骤： G、 马来氨基AVMB1粗品提纯 在四颈烧瓶中，加入粗品马来氨基MAVMB1，每g粗品马来氨基MAVMB1如乙腈溶液 1 〇ml，水浴加热80QC，直至粗品马来氨基MAVMB1全部溶解，过滤杂质转入另一四颈烧瓶中 降温析晶，降温至35%，维持析晶温度35%下静止1小时，取晶体并用乙腈溶液洗2次，真空干 燥得到马来氨基AVMB1精品。
[0019] 步骤F中马来酸酐溶液的质量浓度95%，乙腈液体质量浓度95%。
[0020]步骤G中乙腈液体质量浓度95%。
[0021] 步骤F中每lg中间体中添加马来酸酐5-20mL、乙腈50-150mL。
[0022] 步骤F中每lg中间体中添加马来酸酐10mL、乙腈100mL。
[0023]步骤F中优选反应温度为-10QC。
[0024] 步骤F中优选反应时间为5小时。
[0025] 实施例1 一种马来酰氨基阿维菌素的制备方法，其特征在于包括如下步骤： A、 酯化反应 C5-OH反应
在三颈烧瓶上安装温度计、滴液漏斗及干燥管，先加入质量浓度96%的叔丁基甲基醚 500 ml，再分别加入阿维菌素 Bl-AVMBdeAJg、三乙胺溶液41ml和冰盐水lOOOg，所述冰盐 水按盐与水重量比1:5混合并冷却至O-St，滴加质量浓度90%的烯丙基甲酰氯80ml，80ml烯 丙基甲酰氯用2h滴加完，将上述混合液倒入质量浓度2%磷酸溶液中，搅拌沉降直至分离，取 上层有机相备用，下层水相用质量浓度96%的叔丁基甲基醚提取2次，下层水相提取后取上 层有机相备用，将有机相合并使用旋转蒸发仪蒸去液体，得到白色泡沫状固体； B、 阿维菌素 B1-一C4〃-OH氧化反应
取步骤A的白色泡沫状固体100g，加入质量浓度95%氯甲酸烯丙酯90ml、质量浓度95%二 甲亚砜DMS0 58.8ml、质量浓度95%三乙胺190.2ml和质量浓度95%乙酸异丙酯980ml，上述 液体混合搅拌均匀，冷却至-15°C，滴加磷酸苯酯酰氯48.4ml，静置反应1小时； C、 氨化与还原反应
取步骤B反应液92g，加入质量浓度98%乙酸异丙酯450ml、质量浓度99%六甲基二硅氮烷 64ml和氯化锌14g，加热搅拌升温至50°C，50°C下保持反应5h，随后冷却到-5°C ;加入质量 浓度99%硼氢化钠10.5g和质量浓度100%无水乙醇170ml，还原反应1.5小时，反应结束后再 次加入体积浓度10%乙酸溶液275ml分解过量的硼氢化钠，静置反应1小时，用质量浓度20% 氢氧化钠调节pH值至8,过滤除去析出的氢氧化锌沉淀物，取溶液备用， 滤除沉淀物用乙酸异丙酯提取3次，取有机相与备用溶液合并，在l-2Pa压力下通过旋 转蒸发仪蒸馏，蒸馏得到黄色泡沫状固体还原产物； D、 还原反应
取步骤C黄色泡沫状固体还原产物15g，黄色泡沫状固体还原产物降温至o-st时加入 的质量浓度100%无水乙醇70ml，在氮气保护下，加入质量浓度99%硼氢化钠30g，30g硼氢化 钠1小时加完，静置反应30分钟； E、 解保护反应：
步骤D温度保持在-S-Ot，继续加入质量浓度99%硼氢化钠30g，静置反应2h，取有机相 备用，将水相用乙酸异丙酯萃取2次，合并有机相获得中间体； F、 马来酰化反应
将中间体放入干燥的四口烧瓶中，中间体反应液冷却到0?C时，漏斗中滴加马来酸酐与 乙腈液体，反应温度降至-Kt，反应时间为1小时，用饱和碳酸氢钠溶液调pH值为8.0,静置 分层，取有机相蒸干得到马来氨基AVMB1粗品。马来酸酐溶液的质量浓度95%，乙腈液体质 量浓度95%。每1 g中间体中添加马来酸酐5mL、乙腈50mL。
[0026] G、马来氨基AVMB1粗品提纯 在四颈烧瓶中，加入粗品马来氨基MAVMB1，每g粗品马来氨基MAVMB1如乙腈溶液 1 〇ml，水浴加热80QC，直至粗品马来氨基MAVMB1全部溶解，过滤杂质转入另一四颈烧瓶中 降温析晶，降温至35%，维持析晶温度35%下静止1小时，取晶体并用乙腈溶液洗2次，真空干 燥得到马来氨基AVMB1精品。
[0027] 实施例2 一种马来酰氨基阿维菌素的制备方法，其特征在于包括如下步骤： A、酯化反应--C5-OH反应
在三颈烧瓶上安装温度计、滴液漏斗及干燥管，先加入质量浓度96%的叔丁基甲基醚 500 ml，再分别加入阿维菌素 Bl-AVMBd64.2g、三乙胺溶液41ml和冰盐水lOOOg，所述冰盐 水按盐与水重量比1:5混合并冷却至O-St，滴加质量浓度90%的烯丙基甲酰氯80ml，80ml烯 丙基甲酰氯用2h滴加完，将上述混合液倒入质量浓度2%磷酸溶液中，搅拌沉降直至分离，取 上层有机相备用，下层水相用质量浓度96%的叔丁基甲基醚提取2次，下层水相提取后取上 层有机相备用，将有机相合并使用旋转蒸发仪蒸去液体，得到白色泡沫状固体； B、 阿维菌素 B1--C4〃-OH氧化反应
取步骤A的白色泡沫状固体100g，加入质量浓度95%氯甲酸烯丙酯90ml、质量浓度95%二 甲亚砜DMS0 58.8ml、质量浓度95%三乙胺190.2ml和质量浓度95%乙酸异丙酯980ml，上述 液体混合搅拌均匀，冷却至-15°C，滴加磷酸苯酯酰氯48.4ml，静置反应1小时； C、 氨化与还原反应
取步骤B反应液92g，加入质量浓度98%乙酸异丙酯450ml、质量浓度99%六甲基二硅氮烷 64ml和氯化锌14g，加热搅拌升温至50°C，50°C下保持反应5h，随后冷却到-5°C ;加入质量 浓度99%硼氢化钠10.5g和质量浓度100%无水乙醇170ml，还原反应1.5小时，反应结束后再 次加入体积浓度10%乙酸溶液275ml分解过量的硼氢化钠，静置反应1小时，用质量浓度20% 氢氧化钠调节pH值至8,过滤除去析出的氢氧化锌沉淀物，取溶液备用， 滤除沉淀物用乙酸异丙酯提取3次，取有机相与备用溶液合并，在l-2Pa压力下通过旋 转蒸发仪蒸馏，蒸馏得到黄色泡沫状固体还原产物； D、 还原反应
取步骤C黄色泡沫状固体还原产物15g，黄色泡沫状固体还原产物降温至O-St时加入 的质量浓度100%无水乙醇70ml，在氮气保护下，加入质量浓度99%硼氢化钠30g，30g硼氢化 钠1小时加完，静置反应30分钟； E、 解保护反应：
步骤D温度保持在-S-Ot，继续加入质量浓度99%硼氢化钠30g，静置反应2h，取有机相 备用，将水相用乙酸异丙酯萃取2次，合并有机相获得中间体； F、马来酰化反应
将中间体放入干燥的四口烧瓶中，中间体反应液冷却到0?C时，漏斗中滴加马来酸酐与 乙腈液体，反应温度降至〇%，反应时间为10小时，用饱和碳酸氢钠溶液调pH值为8.0,静置 分层，取有机相蒸干得到马来氨基AVMB1粗品。马来酸酐溶液的质量浓度95%，乙腈液体质 量浓度95%，每1 g中间体中添加马来酸酐20mL、乙腈150mL。
[0028] G、马来氨基AVMB1粗品提纯 在四颈烧瓶中，加入粗品马来氨基MAVMB1，每g粗品马来氨基MAVMB1如乙腈溶液 1 〇ml，水浴加热80QC，直至粗品马来氨基MAVMB1全部溶解，过滤杂质转入另一四颈烧瓶中 降温析晶，降温至35%，维持析晶温度35%下静止1小时，取晶体并用乙腈溶液洗2次，真空干 燥得到马来氨基AVMB1精品。乙腈液体质量浓度95%。
[0029] 实施例3 一种马来酰氨基阿维菌素的制备方法，其特征在于包括如下步骤： A、 酯化反应 C5-OH反应
在三颈烧瓶上安装温度计、滴液漏斗及干燥管，先加入质量浓度96%的叔丁基甲基醚 500 ml，再分别加入阿维菌素 Bl-AVMBdeAJg、三乙胺溶液41ml和冰盐水1000g，所述冰盐 水按盐与水重量比1:5混合并冷却至O-St，滴加质量浓度90%的烯丙基甲酰氯80ml，80ml烯 丙基甲酰氯用2h滴加完，将上述混合液倒入质量浓度2%磷酸溶液中，搅拌沉降直至分离，取 上层有机相备用，下层水相用质量浓度96%的叔丁基甲基醚提取2次，下层水相提取后取上 层有机相备用，将有机相合并使用旋转蒸发仪蒸去液体，得到白色泡沫状固体； B、 阿维菌素 B1-一C4〃-OH氧化反应
取步骤A的白色泡沫状固体lOOg，加入质量浓度95%氯甲酸烯丙酯90ml、质量浓度95%二 甲亚砜DMS0 58.8ml、质量浓度95%三乙胺190.2ml和质量浓度95%乙酸异丙酯980ml，上述 液体混合搅拌均匀，冷却至-15°C，滴加磷酸苯酯酰氯48.4ml，静置反应1小时； C、 氨化与还原反应
取步骤B反应液92g，加入质量浓度98%乙酸异丙酯450ml、质量浓度99%六甲基二硅氮烷 64ml和氯化锌14g，加热搅拌升温至50°C，50°C下保持反应5h，随后冷却到-5°C ;加入质量 浓度99%硼氢化钠10.5g和质量浓度100%无水乙醇170ml，还原反应1.5小时，反应结束后再 次加入体积浓度10%乙酸溶液275ml分解过量的硼氢化钠，静置反应1小时，用质量浓度20% 氢氧化钠调节pH值至8,过滤除去析出的氢氧化锌沉淀物，取溶液备用， 滤除沉淀物用乙酸异丙酯提取3次，取有机相与备用溶液合并，在l-2Pa压力下通过旋 转蒸发仪蒸馏，蒸馏得到黄色泡沫状固体还原产物； D、 还原反应
取步骤C黄色泡沫状固体还原产物15g，黄色泡沫状固体还原产物降温至O-St时加入 的质量浓度100%无水乙醇70ml，在氮气保护下，加入质量浓度99%硼氢化钠30g，30g硼氢化 钠1小时加完，静置反应30分钟； E、 解保护反应：
步骤D温度保持在-S-Ot，继续加入质量浓度99%硼氢化钠30g，静置反应2h，取有机相 备用，将水相用乙酸异丙酯萃取2次，合并有机相获得中间体； F、 马来酰化反应
将中间体放入干燥的四口烧瓶中，中间体反应液冷却到0?C时，漏斗中滴加马来酸酐与 乙腈液体，反应温度降至-10%，反应时间为5小时，用饱和碳酸氢钠溶液调pH值为8.0,静置 分层，取有机相蒸干得到马来氨基AVMB1粗品。马来酸酐溶液的质量浓度95%，乙腈液体质 量浓度95%，每1 g中间体中添加马来酸酐1 OmL、乙腈1 OOmL G、 马来氨基AVMB1粗品提纯 在四颈烧瓶中，加入粗品马来氨基MAVMB1，每g粗品马来氨基MAVMB1如乙腈溶液 1 〇ml，水浴加热80QC，直至粗品马来氨基MAVMB1全部溶解，过滤杂质转入另一四颈烧瓶中 降温析晶，降温至35%，维持析晶温度35%下静止1小时，取晶体并用乙腈溶液洗2次，真空干 燥得到马来氨基AVMB1精品。
[0030]下表为实施例1-3的平均收率效果：
本研究以4"-氧-5-0-烯丙氧甲酰基阿维菌素 B1为起始原料，在一个反应器中连续进 行AVMB 1C4" =0的氨化反应、AVMB 1C4" -NH2还原反应、C5-0-C00CH2CH=CH2的解保护反应。所 得反应物料进行过滤、萃取，将液态有机相直接用于马来酰化反应，反应所得有机相蒸干得 马来酰氨基MAVMB1粗品，再经结晶得到马来酰氨基阿维菌素，反应较高。该方法操作方便， 过程易控，所用原料易购，收率较高，产品纯度达到92%，是较理想的合成方法。
[0031 ]马来酰氨基阿维菌素对奶牛的驱虫效果及生产性能的影响： 奶牛寄生虫的虫体移行不仅可以造成机械损伤，引起器官组织发炎或损坏干扰生命活 动，甚至造成死亡;还与动物机体争营养，吸取血液和组织液等，使饲料报酬降低，影响产 能，降低产品品质，投入产出不成比例。马来酰氨基阿维菌素可用于奶牛寄生虫的驱除，对 泌乳奶牛生产性能影响较小，为一种非常有前途的抗寄生虫新药。为评估马来酰氨基阿维 菌素的驱虫效果以及指导推广其临床使用，选择了河北某牛场进行了马来酰氨基阿维菌素 对泌乳奶牛生产性能影响及驱虫试验。
[0032] 试验药物选择：马来酰氨基阿维菌素注射液规格为10mg/ml(自制，溶剂为1，3_丙 二醇），乙酰氨基阿维菌素注射液规格为l〇mg/ml，每瓶为10ml，河北威远动物药业有限公司 生产[(2006)030412270]。
[0033] 试验动物:河北某良种奶牛有限责任公司提供的 泌乳奶牛共40头用于本试验。
[0034] 试验时间：2015年3月到6月底，共计90d。
[0035]试验方法:在泌乳奶牛群中随机选择40头，分为2组，分乙酰氨基阿维菌素给药组 和空白对照组，进行编号。乙酰氨基阿维菌素给药组，按每l〇kg体重0.2ml皮下一次注射给 药，空白对照组不给药。
[0036] 结果评定：（1)临床观察:在给药前和给药后观察奶牛群的营养状况，主要观察奶 牛的被毛的变化。（2)寄生虫感染情况:在给药前和给药后进行奶牛寄生虫的粪样检测，分 析用药前后奶牛粪样中寄生虫虫卵的变化。（3)产奶情况:在给药前和给药后，检测奶牛的 产奶量，分析实验组和对照组产奶的变化。
[0037] 结果： 临床观察驱虫前观察:驱虫前试验组和空白对照组的奶牛的体温、脉搏和呼吸次数正 常，饮食欲、排粪情况均无异常，精神状态良好。其中，试验组20头奶牛中有7头奶牛明显有 被毛粗乱、干枯，无光泽的现象。空白对照组中有6头明显有被毛粗乱、干枯，无光泽的现象。 驱虫后观察：试验组和空白对照组的奶牛用药后均无不良反应，体温、脉搏和呼吸次数正 常，饮食欲、排粪情况均无异常，精神状态良好;试验组的20头奶牛被毛光亮，7头被毛粗乱、 干枯的奶牛除1头毛色变化不彻底外，其余6头奶牛的被毛粗乱、干枯，无光泽的现象消失， 被毛光亮。空白对照组奶牛的被毛无变化，6头奶牛被毛粗乱、干枯，无光泽的现象没有改 变。
[0038] 寄生虫感染情况采集了试验组和空白对照组的奶牛的粪样，用饱和盐水漂浮法 检查进行了检测，40头泌乳奶牛中，没有发现线虫卵，试验组各有7头有球虫卵囊，空白对照 组有6头有球虫卵囊。用药后的30d和60d，分别进行粪样的采集检测，结果空白6头有球虫卵 囊，没有线虫。马来酰氨基阿维菌素试验组未见球虫卵囊与线虫。乙酰氨基阿维菌素3头球 虫卵囊，没有线虫。
[0039] 生产性能观察该奶牛场在奶牛挤奶车间安装了自动记录奶牛产奶量的计算机系 统，可以详细的记录每1头奶牛每天的产奶量，并且能自动生成Excl表格并保存，通过计算 机系统，可以详细了解试验组和空白对照组奶牛的产奶情况。通过调看计算机系统，用药后 试验组和空白对照组奶牛的产奶情况统计结果如附表。
[0040] 用药前后奶牛产奶量的情况
产奶的情况无论试验组还是对照组，驱虫后奶牛的产奶量均有所下降，其中试验组奶 牛的产奶量从26.01kg/d ?头下降到23.73kg/d，下降了 1.28kg/d ?头;对照组奶牛的产奶 量从26.16kg/d ?头下降到23.56kg/d ?头，下降了2.6kg/d ?头。试验组比对照组少下降 1 ? 32kg/d ?头。
[0041] 奶牛临床变化试验前试验组的20头奶牛中7头被毛粗乱、干枯的奶牛除1头毛色 变化不彻底外，其余6头奶牛的被毛粗乱、干枯，无光泽的现象消失，被毛光亮，其余的奶牛 的被毛颜色较驱虫前也有明显的变化，营养状况也明显改善。空白对照组奶牛的被毛无变 化，6头奶牛被毛粗乱、干枯，无光泽的现象没有改变，营养状况也没有改善。说明马来酰氨 基阿维菌素注射液对奶牛体内外的寄生虫有明显的驱虫作用，驱虫后奶牛体未见球虫卵囊 与线虫，状况得到改善。
[0042] 驱虫情况本养殖场的粪样内线虫，无论是在给药前还是给药后，都没有检测到， 首先是线虫的防治相对容易，目前市场上的驱虫药大多数对线虫有效，如阿福丁、阿维菌 素、伊维菌素、丙硫苯咪唑等，价格也较为便宜，通过进行定期或不定期驱虫，达到驱虫防治 效果。其次，本养殖场执行了严格的饲养管理制度，卫生状态较好，环境和粪便进行了及时 清理和消毒，有效地减少了寄生虫的感染和传播，所以几次粪样检测中都没有发现有线虫。 养殖场很少用驱球虫药，乙酰氨基阿维菌素注射液对球虫卵囊没有杀灭作用，因此，几次粪 样检测球虫的情况就没有什么变化。
[0043] 产奶的情况变化无论试验组还是对照组，驱虫后奶牛的产奶量均有所下降，其中 试验组比对照组少下降1.32kg/d ?头。虽然给药后，试验组和空白对照组的产奶量都有所 下降，但试验组1下降的幅度小，说明马来氨基阿维菌素对奶牛的产奶有一定的影响，从试 验的时间来看，此时正值高温高湿季节，对试验效果会产生一定影响。
【主权项】
1. 一种马来酷氨基阿维菌素的制备方法，其特征在于包括如下步骤： A、 醋化反应--Cs-OH反应在Ξ颈烧瓶上安装溫度计、滴液漏斗及干燥管，先加入质量浓度96%的叔下基甲基酸 500 ml,再分别加入阿维菌素 Bl-AVMBil64.2g、S乙胺溶液41ml和冰盐水lOOOg，所述冰盐 水按盐与水重量比1:5混合并冷却至0-5?，滴加质量浓度90%的締丙基甲酯氯80ml，80ml締 丙基甲酯氯用化滴加完，将上述混合液倒入质量浓度2%憐酸溶液中，揽拌沉降直至分离，取 上层有机相备用，下层水相用质量浓度96%的叔下基甲基酸提取2次，下层水相提取后取上 层有机相备用，将有机相合并使用旋转蒸发仪蒸去液体，得到白色泡沫状固体； B、 阿维菌素 B1--C4"-OH氧化反应取步骤A的白色泡沫状固体lOOg，加入质量浓度95%氯甲酸締丙醋90ml、质量浓度95%二 甲亚讽DMS0 58.8ml、质量浓度95%Ξ乙胺190.2ml和质量浓度95%乙酸异丙醋980ml，上述 液体混合揽拌均匀，冷却至-15°C，滴加憐酸苯醋酷氯48.4ml，静置反应1小时； C、 氨化与还原反应取步骤B反应液92g，加入质量浓度98%乙酸异丙醋450ml、质量浓度99%六甲基二娃氮烧 64ml和氯化锋14g，加热揽拌升溫至50°C，5(rC下保持反应5h，随后冷却到-5°C;加入质量 浓度99%棚氨化钢10.5g和质量浓度100%无水乙醇170ml，还原反应1.5小时，反应结束后再 次加入体积浓度10%乙酸溶液275ml分解过量的棚氨化钢，静置反应1小时，用质量浓度20% 氨氧化钢调节pH值至8,过滤除去析出的氨氧化锋沉淀物，取溶液备用， 滤除沉淀物用乙酸异丙醋提取3次，取有机相与备用溶液合并，在l-2Pa压力下通过旋 转蒸发仪蒸馈，蒸馈得到黄色泡沫状固体还原产物； D、 还原反应取步骤C黄色泡沫状固体还原产物15g，黄色泡沫状固体还原产物降溫至0-5化时加入的 质量浓度100%无水乙醇70ml，在氮气保护下，加入质量浓度99%棚氨化钢30g，30g棚氨化钢 1小时加完，静置反应30分钟； E、 解保护反应：步骤D溫度保持在-5-0化，继续加入质量浓度99%棚氨化钢30g，静置反应化，取有机相 备用，将水相用乙酸异丙醋萃取2次，合并有机相获得中间体； F、 马来酷化反应将中间体放入干燥的四口烧瓶中，中间体反应液冷却到0?时，漏斗中滴加马来酸酢与 乙腊液体，反应溫度降至-15~0<^(：，反应时间为1~10小时，用饱和碳酸氨钢溶液调9巧直为 8.0，静置分层，取有机相蒸干得到马来氨基AVMB1粗品。2. 根据权利要求1所述的一种马来酷氨基阿维菌素的制备方法，其特征在于还包括如 下步骤： G、 马来氨基AVMB1粗品提纯 在四颈烧瓶中，加入粗品马来氨基MAVMB1，每g粗品马来氨基MAVMB1如乙腊溶液 10ml，水浴加热80化，直至粗品马来氨基MAVMB1全部溶解，过滤杂质转入另一四颈烧瓶中 降溫析晶，降溫至35化，维持析晶溫度35化下静止1小时，取晶体并用乙腊溶液洗2次，真空干 燥得到马来氨基AVMB1精品。3. 根据权利要求1所述的一种马来酷氨基阿维菌素的制备方法，其特征在于步骤F中马 来酸酢溶液的质量浓度95%，乙腊液体质量浓度95%。4. 根据权利要求2所述的一种马来酷氨基阿维菌素的制备方法，其特征在于步骤G中乙 腊液体质量浓度95%。5. 根据权利要求2所述的一种马来酷氨基阿维菌素的制备方法，其特征在于步骤F中每 1 g中间体中添加马来酸酢5-20mL、乙腊50-150mL。6. 根据权利要求4所述的一种马来酷氨基阿维菌素的制备方法，其特征在于步骤F中每 Ig中间体中添加马来酸酢lOmL、乙腊lOOmL。7. 根据权利要求1所述的一种马来酷氨基阿维菌素的制备方法，其特征在于步骤F中优 选反应溫度为-1〇化。8.根据权利要求1所述的一种马来酷氨基阿维菌素的制备方法，其特征在于步骤F中优 选反应时间为5小时。
【文档编号】C07H1/00GK105968155SQ201610566565
【公开日】2016年9月28日
【申请日】2016年7月19日
【发明人】孟凡桥, 梁剑平, 陶蕾, 赵军华, 王卫华, 赵凤舞, 贾忠, 高亚琪, 王闪
【申请人】河北美荷药业有限公司