化合物、其分离方法、合成方法及用图

化合物、其分离方法、合成方法及用图
【专利摘要】本发明涉及新化合物、其分离方法、合成方法及用途，经活性实验证明该化合物具有HMG-CoA还原酶抑制作用；另外还涉及其衍生物。
【专利说明】
化合物、其分离方法、合成方法及用途
技术领域
[0001 ] 本发明涉及从红曲中分离出的新化合物、分离方法、合成方法及用途，经活性实验 证明该化合物具有HMG-CoA还原酶抑制作用；以及另外的与其结构相似的化合物及其合成 方法。
【背景技术】
[0002] 我国的中医药具有悠久的使用和研究历史，红曲（Monascus-fermented rice)是 以大米为原料，经红曲霉（Monascus)发酵制成的一种紫红色米曲，红曲在我国的使用可追 溯到汉代。上世纪70年代，日本Endo教授首次从红色红曲霉（Monascus ruber)中分离出 生理活性物质莫纳克林K(m〇nac〇lin K)以来，众多国内外学者在红曲霉代谢产物中不断 发现生理活性物质，包括monacolin类化合物，红曲色素，降压成分GABA及抗氧化成分 dimerumic acid等等。红曲中仍有较大的研究潜力和开发空间。
[0003] 血脂康（胶囊或片）是
【申请人】研制的上市国产调脂中药红曲制剂，富含他汀等多 种活性成分，相比已有的调脂药物化药，不良反应少。适应症为高脂血症及动脉粥样硬化引 起的心脑血管疾病的治疗。除湿祛痰，活血化淤，健脾消食。用于脾虚痰淤阻滞症的气短、 乏力、头晕、头痛、胸闷、腹胀、食少纳呆等；高脂血症；也可用于由高脂血症及动脉粥样硬 化引起的心脑血管疾病的辅助治疗。
[0004] 现有技术经过对于血脂康的研究，从其中分离发现了以下成分：
[0005] 他汀成分
[0006] 血脂康中富含系列天然他汀类物质。
[0007] 异黄酮成分
[0008] 血脂康中还含有异黄酮、留醇类物质、20余种氨基酸、不饱和脂肪酸及多种微量元 素。异黄酮成分主要包括染料木素、大豆苷元、黄豆黄素，均属于大豆异黄酮。
[0009] 甾醇成分
[0010] 植物留醇是一种类似于环状醇结构的物质，广泛分布于自然界，代表了植物代谢 的终产物。
[0011] 血脂康中的留醇包括麦角留醇、豆留醇及谷留醇等。
[0012] 氨基酸成分
[0013] 血脂康中具有甘氨酸、脯氨酸、丝氨酸、天门冬氨酸、谷氨酸、精氨酸、组氨酸、牛磺 酸、y-氨基丁酸（GABA)等20余种氨基酸成分。
[0014] 不饱和脂肪酸成分
[0015] 血脂康中含大量的脂肪酸成分。采用气相色谱与质谱联用技术对血脂康中脂肪酸 类成分的甲酯化衍生物进行研究，鉴定出14种脂肪酸类成分，其中棕榈酸、亚油酸及油酸， 含量丰富。
[0016] 微量元素成分
[0017] 血脂康中主要含有镁、硒等微量元素，其中镁的含量相对较高。

【发明内容】

[0018] 本发明的一个目的是提供下式（I)的化合物或其立体异构体、互变异构体、外消 旋物、代谢产物、前药、药学上可接受的盐或溶剂化物：
[0019]
式⑴
[0020] 札选自H、C「C6烷基、卤代C fC6烷基、（CH 2) i 60H、C3-C7环烷基、卤代C 3-(：7环烷基、 Ci-Q烷氧基、卤代C 氧基、C「C6烷硫基、卤代C 烷硫基、卤素、硝基、氨基和氰基；
[0021] R2选自H、C「C6烷基、卤代C「C6烷基、（CH 2) i 60R6、C3-C7环烷基、卤代(：3-(： 7环烷基、 Ci-Q烷氧基、卤代C 氧基、C「C6烷硫基、卤代C 烷硫基、卤素、硝基、氨基和氰基；
[0022] R3选自 H、C「C6烷基；
[0023] 心和 R5各自独立地选自：H、-C0R 7、-S02Rs、-Si R9R10R11;
[0024] 其中，R7选自C 烷基、卤代C 烷基，R s选自C 烷基、任意取代的C ^(^烷 基、Q-Q。芳基、任意取代的C 6-(；。芳基，R9、R1Q、Rn独立地选自C「C 6烷基；
[0025] 其中，R6与上述对于1?4和R5的定义相同；
[0026] 其中，排除以下式（I)的化合物：&为（CH2)0H，R2S甲基，R 3、RjPR5为H。
[0027] 本发明的另一个目的是提供制备本发明式（I)化合物的方法：
[0028]
[0029] 化合物（I)由式（II)化合物，在碱性条件下反应制得，或在碱性条件下加入成酯 试剂反应制得。式（II)中&、1? 2、和R4与上文在式（I)中的定义相同。
[0030] 碱性条件的pH范围为7. 5-14,可选加入氢氧化钠、氢氧化钾、氨水、碳酸钠等碱性 试剂或溶剂。成酯试剂可选甲醇、乙醇等低级醇；酸酐（醋酸酐、磺酸酐、三氟甲磺酸酐等）、 酰氯（甲苯磺酰氯）、氯硅烷（叔丁基二甲基氯硅烷）。
[0031] 本发明的另一个目的是提供从红曲或其提取物提取化合物5的方法，所述方法包 括下列步骤：
[0032]
[0033] 1)对于红曲或其提取物使用乙酸乙酯（或二氯甲烷或甲醇或乙醇、或甲醇/乙醇 水溶液）为溶剂进行提取；
[0034] 2)对于步骤1)的乙酸乙酯（或二氯甲烷或甲醇或乙醇、或甲醇/乙醇水溶液）提 取物进行硅胶柱层析分离，用石油醚、乙酸乙酯及甲醇进行梯度洗脱，得到乙酸乙脂洗脱部 分；
[0035] 3)对于步骤2)的乙酸乙脂洗脱部分进行硅胶柱层析分离，用二氯甲烷-乙酸乙 脂-甲醇洗脱，将流分进行分析、合并后，得到步骤3)5个流分；
[0036] 4)对于步骤3)的第2流分进行C18柱层析分离，用乙腈-甲醇-水梯度洗脱，得 到82% (乙腈-甲醇1 :1)水溶液洗脱部分；
[0037] 5)对于步骤4)的82% (乙腈-甲醇1 :1)水溶液洗脱部分进一步用二氯甲烷-甲 醇为流动相进行sephadex LH-20柱层析分离，将流分进行分析、合并后，得到步骤5) 6个流 分；
[0038] 6)对于步骤5)的第3流分利用色谱纯化，以乙腈-甲醇-水为流动相，C18色谱 柱为固定相，得到化合物5。
[0039] 本发明的另一个目的是提供包含本发明化合物的药物组合物，所述药物组合物包 括至少一种本发明化合物，和任选的药学上可以接受的赋形剂。
[0040] 本发明的另一个目的是提供本发明化合物或包含该化合物的药物组合物在制备 药物、特别是用于抑制HMG-CoA还原酶的药物中的用途。相应地，本发明提供一种预防和/ 或治疗血脂异常、高血脂症、或动脉粥样硬化患者的方法，包括给予需要治疗的患者治疗有 效量的至少一种本发明的化合物。血脂异常即一种或多种与血脂相关的人体指标不在正常 数值范围内，包括总胆固醇升高、低密度脂蛋白胆固醇升高、载脂蛋白B升高、甘油三酯升 高等。本发明提供一种预防和/或治疗高胆固醇血症、混合型高脂血症患者的方法，包括给 予需要治疗的患者治疗有效量的至少一种本发明的化合物。
[0041] 本发明提供一种在生活方式干预治疗（如：调整饮食结构、控制体重、增加运动、 戒烟）效果不理想时，治疗其总胆固醇升高、低密度脂蛋白胆固醇升高、载脂蛋白B升高、甘 油三酯升高等。
[0042] 本发明化合物的上述用途，可单独使用，或与有效剂量的其他调脂药物联合使用。 其他调脂药物包括：胆固醇合成抑制剂（他汀类或其盐类，如洛伐他汀、普伐他汀、辛伐他 汀、氟伐他汀、阿托伐他汀、匹伐他汀等）、胆固醇吸收抑制剂（依折麦布等）、贝特类（诺 衡、力平脂环丙贝特、苯扎贝特、非诺贝特及吉非贝齐）、烟酸类药物（烟酸、烟酸肌醇酯、东 脂平、戊四烟酯等），胆酸螯合剂药物、苯氧芳酸类。
[0043] 本发明的化合物或其药学上可接受的盐（例如醋酸盐、丙二酸盐、酒石酸盐、琥珀 酸盐、盐酸盐、硫酸盐、硝酸盐等），可用于上述疾病的预防或治疗。
【附图说明】
[0044] 图1表示本发明的化合物5的1H-i COSY (-)(附图1A)和HMBC相关信号（〇 ) (附图1B)。
【具体实施方式】
[0045] 本发明涉及下式（I)的化合物或其立体异构体、互变异构体、外消旋物、代谢产 物、前药、药学上可接受的盐或溶剂化物：
[0046]
式⑴
[0047] 札选自H、C「C6烷基、卤代C fC6烷基、（CH 2)丨60H、C3-C7环烷基、卤代C 3-(：7环烷基、 Ci-Q烷氧基、卤代C 氧基、C「C6烷硫基、卤代C 烷硫基、卤素、硝基、氨基和氰基；
[0048] R2选自H、C「C6烷基、卤代C「C6烷基、（CH 2) i 60R6、C3-C7环烷基、卤代(：3-(： 7环烷基、 Ci-Q烷氧基、卤代C 氧基、C「C6烷硫基、卤代C 烷硫基、卤素、硝基、氨基和氰基；
[0049] R3选自 H、C「C6烷基；
[0050] 心和 R5各自独立地选自：H、-C0R 7、-S02Rs、-Si R9R10R11;
[0051] 其中，R7选自C 烷基、卤代C 烷基，Rs选自C 烷基、任意取代的C ^(^烷 基、Q-Q。芳基、任意取代的C 6-(；。芳基，R9、R1Q、Rn独立地选自C「C 6烷基；
[0052] 其中，R6与上述对于R4和R5的定义相同；
[0053] 其中，排除以下式（I)的化合物：&为（CH2)0H，R2S甲基，R 3、RdPR5为H。
[0054] 在一种实施方式中，本发明涉及式（I)的化合物，其中，札选自H、CfQ烷基、卤 代烷基、（CH 2) i 30H、C3_C6环烷基、卤代C 3_(：6环烷基、C「(：3烷氧基、卤代C「(：3烷氧基、 烷硫基、卤代C i-C3烷硫基、卤素、硝基、氨基和氰基。
[0055] 在一种实施方式中，本发明涉及式（I)的化合物，其中，&选自ICi-Q烷基、卤代 CfC 3烷基、（01山30H、卤素、硝基、氨基和氰基。
[0056] 在一种实施方式中，本发明涉及式（I)的化合物，其中，札选自H、CfQ烷基、 (CH 2)! 30H〇
[0057] 在一种实施方式中，本发明涉及式（I)的化合物，其中
[0058] R2选自 H、C fC3烷基、卤代 C fC3烷基、（CH2) i 30R6、C3-C(^烷基、卤代(：3_(： 6环烷基、 CfQ烷氧基、卤代C fCjl氧基、C「C3烷硫基、卤代C i-C3烷硫基、卤素、硝基、氨基和氰基；
[0059] 其中，R6选自 H、-COR 7、-S02Rs、-Si R9R10R11;
[0060] 其中，R7选自C 烷基、卤代C 烷基，R s选自C 烷基、任意取代的C ^(^烷 基、Q-Q。芳基、任意取代的C 6-(；。芳基，R9、R1Q、Rn独立地选自C「C 6烷基。
[0061] 在一种实施方式中，本发明涉及式（I)的化合物，其中
[0062] R2选自 H、C fC3烷基、卤代 C fC3烷基、（CH2): 30R6、C3-C(^烷基、卤代(：3_(： 6环烷基、 烷氧基、卤代C fCjl氧基、C「C3烷硫基、卤代C i-C3烷硫基、卤素、硝基、氨基和氰基；
[0063] 其中，R6选自：H、-C0R7、-S02Rs、-SiR 9R10R11;
[0064] 其中，R7选自C 烷基、卤代C 烷基，R s选自C 烷基、任意取代的C fCjl 基、Q-Q。芳基、任意取代的C 6-(；。芳基，R9、R1Q、Rn独立地选自C「C 6烷基。
[0065] 在一种实施方式中，本发明涉及式（I)的化合物，其中
[0066] R2选自 H、C「C3烷基、卤代 C「C3烷基、（CH2): 30R6、C3-C(^烷基、卤代(：3_(： 6环烷基、 CfQ烷氧基、卤代C fCjl氧基、C「C3烷硫基、卤代C i-C3烷硫基、卤素、硝基、氨基和氰基；
[0067] 其中，R6选自：H、-C0R7、-S02Rs、-SiR 9R10R11;
[0068] 其中，R7选自_CH3, Rs选自-CF3、对甲苯基，R9、R1(]、R n独立地选自甲基、叔丁基。
[0069] 在一种实施方式中，本发明涉及式⑴的化合物，其中
[0070] R2选自H、C「C3烷基、卤代C「C3烷基、（CH 2) i 30R6、卤素、硝基、氨基和氰基；
[0071] 其中，R6选自 H、-C0R7、-S02Rs、-SiR9R 10R11;
[0072] 其中，R7选自C 烷基、卤代C 烷基，R s选自C 烷基、任意取代的C ^(^烷 基、Q-Q。芳基、任意取代的C 6-(；。芳基，R9、R1Q、Rn独立地选自C「C 6烷基。
[0073] 在一种实施方式中，本发明涉及式（I)的化合物，其中
[0074] R2选自H、C「C3烷基、卤代C「C3烷基、（CH 2) i 30R6、卤素、硝基、氨基和氰基；
[0075] 其中，R6选自：H、-C0R7、-S02Rs、-SiR 9R10R11;
[0076] 其中，R7选自C 烷基、卤代C 烷基，R s选自C 烷基、任意取代的C fCjl 基、Q-Q。芳基、任意取代的C 6-(；。芳基，R9、R1Q、Rn独立地选自C「C 6烷基。
[0077] 在一种实施方式中，本发明涉及式（I)的化合物，其中
[0078] R2选自H、C「C3烷基、卤代C「C3烷基、（CH 2) i 30R6、卤素、硝基、氨基和氰基；
[0079] 其中，R6选自：H、-C0R7、-S02Rs、-SiR 9R10R11;
[0080] 其中，R7选自_CH3, Rs选自_CF3、对甲苯基，R9、R1(]、R n独立地选自甲基、叔丁基。
[0081] 在一种实施方式中，本发明涉及式（I)的化合物，其中
[0082] R2选自 H、C「C3烷基、（CH 2)丨 30R6;
[0083] 其中，R6选自 H、-COR 7、-S02Rs、-Si R9R10R11;
[0084] 其中，R7选自C 烷基、卤代C 烷基，R s选自C 烷基、任意取代的C ^(^烷 基、Q-Q。芳基、任意取代的C 6-(；。芳基，R9、R1Q、Rn独立地选自C「C 6烷基。
[0085] 在一种实施方式中，本发明涉及式（I)的化合物，其中
[0086] R2选自 H、C「C3烷基、（CH 2)丨 30R6;
[0087] 其中，R6选自 H、-COR 7、-S02Rs、-Si R9R10R11;
[0088] 其中，R7选自C 烷基、卤代C 烷基，R s选自C 烷基、任意取代的C fCjl 基、Q-Q。芳基、任意取代的C 6-(；。芳基，R9、R1Q、Rn独立地选自C「C 6烷基。
[0089] 在一种实施方式中，本发明涉及式（I)的化合物，其中
[0090] R2选自 H、C「C3烷基、（CH 2)丨 30R6;
[0091] 其中，R6选自 H、-COR 7、-S02Rs、-Si R9R10R11;
[0092] 其中，R7选自_CH3, Rs选自-CF3、对甲苯基，R9、R1(]、R n独立地选自甲基、叔丁基。
[0093] 在一种实施方式中，本发明涉及式（I)的化合物，其中，R3选自ICfQ烷基。
[0094] 在一种实施方式中，本发明涉及式（I)的化合物，其中，私为C 烷基。
[0095] 在一种实施方式中，本发明涉及式（I)的化合物，其中
[0096] 心和 R5各自独立地选自：H、-C0R 7、-S02Rs、-SiR9R10R 11;
[0097] 其中，R7选自C 烷基、卤代C 烷基，R s选自C 烷基、任意取代的C fCjl 基、Q-Q。芳基、任意取代的C 6-(；。芳基，R9、R1Q、Rn独立地选自C「C 6烷基。
[0098] 在一种实施方式中，本发明涉及式（I)的化合物，其中
[0099] 心和 R5各自独立地选自：H、-C0R 7、-S02Rs、-SiR9R10R 11;
[0] 其中，R7选自-CH3, Rs选自-CF3、对甲苯基，R9、R1(]、R n独立地选自甲基、叔丁基。
[0101] 在一种实施方式中，本发明涉及式（I)的化合物，其选自：
[0102]
[0103] 及其二乙酸酯、二对甲苯磺酯、二（三氟甲磺酸酯）、二（叔丁基二甲基硅醚），
[0104]
[0105] 及其三乙酸酯、三对甲苯磺酯、三（三氟甲磺酸酯）、三（叔丁基二甲基硅醚）。
[0106] 如本文所使用，术语"(^-(：6烷基"是指含有1-6个碳原子的直链或支链烃基。CfQ 烷基的例子包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、叔丁基、正戊基和正己基。
[0107] 类似地，术语"Q-CJI基"是指含有1-3个碳原子的直链或支链烃基。C ^(^烷基 的例子包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基。
[0108] 术语"Q-Ce烷氧基"是指-〇_C烷基。
[0109] 术语"CfC6烷硫基"是指-S-C「C6烷基。
[0110] 类似地，" Ci-Cjl氧基"、" C i-C3烷硫基"具有类似的含义。
[0111] 术语"c3-c7环烷基"是指具有饱和环的3-7元单环系统的烃，c 3-c7环烷基可以为 环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基。
[0112] 类似地，术语"C3-C6环烷基"是指具有饱和环的3-6元单环系统的烃，C 3-C7环烷基 可以为环丙基、环丁基、环戊基、环己基。
[0113] 术语"卤素"是指氟、氯、溴或碘。
[0114] 术语"卤代XX基团"是指卤素取代的XX基团。例如，"卤代心-^烷基"是指卤素 取代的烷基。术语"卤代C 3_C7环烷基"是指卤素取代的-c3-c7环烷基。类似地，术 语卤代Q-Cf；烷硫基、卤代C i-Ce烷氧基、卤代C 3-C6环烷基、卤代C i-Qj烷氧基、卤代C i-Qjl 硫基具有类似于以上的含义。
[0115] 术语"Q-Ci。芳基"是指6-10个碳原子的单价芳香烃基。芳基的例子包括但不限 于苯基、甲苯基、乙苯基、奈基等。
[0116] 如本文所使用，术语"式（I)化合物的药学上可以接受的盐"的例子是由形成药学 上可以接受的阴离子（如甲苯磺酸根、甲磺酸根、苹果酸根、醋酸根、柠檬酸根、丙二酸根、 酒石酸根、琥珀酸根、苯甲酸根、抗坏血酸根、a -酮戊二酸根和a -甘油磷酸根）的有机酸 形成的有机酸加合盐。也可形成合适的无机盐，包括但不限于盐酸盐、硫酸盐、硝酸盐、碳酸 氢盐和碳酸盐、磷酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐等。
[0117] 药学上可以接受的盐可使用本领域熟知的标准程序获得，例如，通过将足量的碱 性化合物和提供药学上可以接受的阴离子的合适的酸反应。
[0118] 本发明的红曲或提取物可以为市售的红曲（红曲干粉、红曲发酵产物、红曲米）、 或红曲提取物（如血脂康胶囊、血脂康片或其原料）。
[0119] 本发明所述红曲提取物可通过如下方法（并不限于如下方法）制得：
[0120] 1)取红曲1重量份，每次加入2 - 10体积份的50 - 100% (v/v)的乙醇或甲醇或 甲醇/乙醇水溶液，或乙酸乙酯（或其它有机溶剂）加热回流1 一 3小时，提取2 - 3次；
[0121] 2)提取液过滤，合并滤液；可选地，回收溶剂，
[0122] 3)将步骤2)中得到的滤液浓缩成稠膏。
[0123] 如本文所使用，术语"溶剂化物"可以使用常见的有机溶剂形成：例如苯或甲苯的 烃溶剂，例如氯仿、二氯甲烷的氯化溶剂，例如甲醇、乙醇或异丙醇的醇溶剂，例如乙醚或四 氢呋喃的醚溶剂，或例如乙酸乙酯的酯溶剂。或者，式（I)化合物的溶剂化物可以使用水形 成，在这种情况下，它们为水合物。
[0124] 如本文所使用，术语"水合物"是指本发明的化合物或其盐，其进一步包含通过非 共价分子间力结合的化学计量的或非化学计量的量的水。
[0125] 如本文所使用，除非另外说明，术语"前药"是指可以在生物学条件（体外或体内） 下水解、氧化或进行其他反应以提供本发明的化合物的衍生物。前药仅在生物学条件下经 过该反应成为活性化合物，或者它们在它们不反应的形式中具有活性。通常可以使用公知 的方法制备前药，例如 lBurger's Medicinal Chemistry and Drug Discovery (1995) 172-178, 949-982 (Manfred E. Wolff编，第5版）中描述的那些方法。
[0126] 本文使用的立体化学的定义和约定一般遵循MCGRAW-HILL DICTIONARY 0F CHEMICAL TERMS(S. P. Parker, Ed. , McGraw-Hi11 Book Company,New York, 1984)； 和 ELIEL,E?和 WILEN,S., STEREOCHEMISTRY OF ORGANIC COMPOUNDS(John Wiley & Sons, Inc.，New York, 1994)。许多有机化合物以光学活性形式存在，即它们具有旋转平面 偏光的平面的能力。
[0127] 本文使用的术语"治疗" 一般是指获得需要的药理和/或生理效应。该效应根据 完全或部分地预防疾病或其症状，可以是预防性的；和/或根据部分或完全稳定或治愈疾 病和/或由于疾病产生的副作用，可以是治疗性的。本文使用的"治疗"涵盖了对患者疾病 的任何治疗，包括：(a)预防易感染疾病或症状但还没诊断出患病的患者所发生的疾病或 症状；(b)抑制疾病的症状，即阻止其发展；或（c)缓解疾病的症状，即，导致疾病或症状退 化。
[0128] 本发明的化合物可以按照常规的有机化学合成方法制备。例如，本发明涉及一种 制备式（I)化合物的方法：
[0129]
[0130] 化合物（I)由式（II)化合物，在碱性条件下反应制得，或在碱性条件下加入成酯 试剂反应制得。式（II)中&、1? 2、和R4与上文在式（I)中的定义相同。
[0131] 碱性条件的pH范围为7. 5-14,可选加入氢氧化钠、氢氧化钾、氨水、碳酸钠等碱性 试剂或溶剂。成酯试剂可选甲醇、乙醇等低级醇；酸酐（醋酸酐、磺酸酐、三氟甲磺酸酐等）、 酰氯（甲苯磺酰氯）、氯硅烷（叔丁基二甲基氯硅烷）。
[0132] 常规的化学转换可用于实施本发明。本领域的技术人员可以决定用于这些化 学转换的适当的化学剂、溶剂、保护基和反应条件。相关信息描述于，例如，R.Lar 〇ck， Comprehensive Organic Transformations，VCH 出版商（1989) ;T.W. Greene 和 P.G. M. ffuts, Protective Groups in Organic Synthesis,第 3 版，John Wiley and Sons (1999) ；L. Fieser 和 M. Fieser，Fieser and Fieser' s Reagents for Organic Synthesis，John Wiley and Sons(1994);及 L. Paquette 编辑的 Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis，John Wiley and Sons (1995)及其后来的版本。
[0133] 保护基指那些一旦连接活性部分（例如，羟基或氨基），防止这些部分被后来的 反应干扰并可在反应后通过常规的方法去除的基团。羟基保护基的例子包括但不限于，烷 基、苯甲基（苄基）、烯丙基、三苯甲基（g卩，三苯基甲基）、酰基（例如，苯甲酰基、乙酰基或 H00C-X"-C0-，X"为亚烷基、亚链烯基、亚环烷基或亚芳基）、甲硅烷基（例如，三甲基甲硅 烷基、二乙基甲娃烷基和叔丁基^甲基甲娃烷基）、烷氧基幾基、氣基幾基（例如，^甲基氣 基羰基、甲基乙氨基羰基和苯基氨基羰基）、烷氧甲基、苯甲氧甲基和烷基巯甲基。氨基保护 基的例子包括但不限于，烷氧基羰基、烷酰基、芳氧基羰基、芳基取代的烷基等。羟基和氨基 保护基已在 T.W. Greene 和 P.G..M. Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，第 2 版，John Wiley and Sons (1991)中讨论。羟基和氨基保护基都可在反应后通过常规的方 法去除。
[0134] 本发明的另一个目的是提供化合物的分离方法。具体地说，本发明的另一个目的 是提供从红曲或其提取物提取化合物5的方法，所述方法包括下列步骤：
[0135]
[0136] 1)对于红曲或其提取物使用乙酸乙酯（或二氯甲烷或甲醇或乙醇，或甲醇/乙醇 水溶液）为溶剂进行提取；
[0137] 2)对于步骤1)的乙酸乙酯（或二氯甲烷或甲醇或乙醇，或甲醇/乙醇水溶液）提 取物进行硅胶柱层析分离，用石油醚、乙酸乙酯及、甲醇/乙醇进行梯度洗脱，得到乙酸乙 脂洗脱部分；
[0138] 3)对于步骤2)的乙酸乙脂洗脱部分进行硅胶柱层析分离，用二氯甲烷-乙酸乙 脂-甲醇洗脱，将流分进行分析、合并后，得到步骤3)5个流分；
[0139] 4)对于步骤3)的第2个流分进行C18柱层析分离，用乙腈-甲醇-水梯度洗脱， 得到82% (乙腈-甲醇1 :1)水溶液洗脱部分；
[0140] 5)对于步骤4)的82% (乙腈-甲醇1 :1)水溶液洗脱部分进一步用二氯甲烷-甲 醇为流动相进行sephadex LH-20柱层析分离，将流分进行分析、合并后，得到步骤5) 6个流 分；
[0141] 6)对于步骤5)的第3个流分利用色谱方法纯化，以乙腈-甲醇-水为流动相，C18 色谱柱为固定相，得到化合物5。
[0142] 在一个实施方式中，从红曲或其提取物提取化合物5的方法，所述方法包括下列 步骤：
[0143] 1)对于红曲或其提取物使用2-6倍体积的乙酸乙酯（或二氯甲烷或甲醇或乙醇， 或甲醇/乙醇水溶液）为溶剂提取3次，每次20-40分钟，合并提取液，减压浓缩并回收溶 剂，得乙酸乙脂提取物；
[0144] 2)对于步骤1)的乙酸乙酯（或二氯甲烷或甲醇或乙醇，或甲醇/乙醇水溶液）提 取物进行硅胶柱层析分离，用石油醚、乙酸乙酯及甲醇/乙醇进行梯度洗脱，得到乙酸乙脂 洗脱部分；
[0145] 3)对于步骤2)的乙酸乙脂洗脱部分进行硅胶柱层析分离，用二氯甲烷-乙酸乙 脂-甲醇（30 :30 :1)洗脱，将流分进行分析、合并后，得到步骤3)5个流分；
[0146] 4)对于步骤3)的第2个流分进行C18柱层析分离，用82% (乙腈-甲醇1 :1)水 溶液~100% (乙腈-甲醇1 :1)梯度洗脱洗脱，得到82% (乙腈-甲醇1 :1)水溶液洗脱 部分；
[0147] 5)对于步骤4)的82% (乙腈-甲醇1 :1)水溶液洗脱部分进一步用二氯甲烷-甲 醇（2 :1)为流动相进行sephadex LH-20柱层析分离，将流分进行分析、合并后，得到步骤 5) 6个流分；
[0148] 6)对于步骤5)的第3个流分利用色谱纯化，以乙腈-甲醇-水为流动相，C18色 谱柱为固定相，得到化合物5
[0149]
[0150] 本发明还提供了包含本发明式（I)化合物的药物组合物。本发明提供了这样的药 物组合物，其包含至少一种如上所述的本发明的式（I)化合物，和任选的药学上可以接受 的赋形剂。
[0151] 制备各种含有一定量的活性成分的药物组合物的方法是已知的，或根据本发 明的公开内容对于本领域技术人员是显而易见的。如REMINGTON'S PHARMACEUTICAL SCIENCES, Martin, E.W.，ed.，Mack Publishing Company, 19th ed. (1995)所述，制备所述 药物组合物的方法包括掺入适当的药学赋形剂、载体、稀释剂等。
[0152] 以已知的方法制造本发明的药物制剂，包括常规的混合、溶解或冻干方法。本发明 的化合物可以制成药物组合物，并向患者以适于选定的施用方式的各种途径施用，例如，口 服或肠胃外（通过静脉内、肌内、局部或皮下途径）。
[0153] 因此，本发明的化合物结合药学上可以接受的载体（如惰性稀释剂或可同化的可 食用的载体）可以全身施用，例如，口服。它们可以封闭在硬或软壳的明胶胶囊中，可以压 为片剂。对于口服治疗施用，活性化合物可以结合一种或多种赋形剂，并以可吞咽的片剂、 颊含片剂、含片、胶囊剂、酏剂、悬浮剂、糖浆、圆片等的形式使用。这种组合物和制剂应该包 含至少0. 1 %的活性化合物。这种组合物和制剂的比例当然可以变化，可以占给定的单位剂 型重量的大约1%至大约99%。在这种治疗有用的组合物中，活性化合物的量使得能够获 得有效剂量水平。
[0154] 片剂、含片、丸剂、胶囊剂等也可以包含：粘合剂，如黄蓍胶、阿拉伯胶、玉米淀粉或 明胶；赋形剂，如磷酸氢二钙；崩解剂，如玉米淀粉、马铃薯淀粉、藻酸等；润滑剂，如硬脂酸 镁；和甜味剂，如蔗糖、果糖、乳糖或阿司帕坦；或调味剂，如薄荷、冬青油或樱桃香味。当单 位剂型是胶囊时，除了上面类型的材料，它还可以包含液体载体，如植物油或聚乙二醇。各 种其他材料可以存在，作为包衣，或以其他方式改变固体单位剂型的物理形式。例如，片剂、 丸剂或胶囊剂可以用明胶、蜡、虫胶或糖等包衣。糖浆或酏剂可以包含活性化合物，蔗糖或 果糖作为甜味剂，对羟苯甲酸甲酯或对羟苯甲酸丙酯作为防腐剂，染料和调味剂（如樱桃 香料或桔子香料）。当然，用于制备任何单位剂型的任何材料应该是药学上可以接受的且以 应用的量基本上无毒。此外，活性化合物可以掺入缓释制剂和缓释装置中。
[0155] 活性化合物也可以通过输注或注射来静脉内或腹膜内施用。可以制备活性化合物 或其盐的水溶液，任选地混和无毒的表面活性剂。也可以制备在甘油、液体聚乙二醇、甘油 三乙酸酯及其混合物以及油中的分散剂。在普通的储存和使用条件下，这些制剂包含防腐 剂以防止微生物生长。
[0156] 适于注射或输注的药物剂型可以包括包含适于无菌的可注射或可输注的溶液或 分散剂的即时制剂的活性成分（任选封装在脂质体中）的无菌水溶液或分散剂或无菌粉 末。在所有情况下，最终的剂型在生产和储存条件下必须是无菌的、液体的和稳定的。液体 载体可以是溶剂或液体分散介质，包括，例如水、乙醇、多元醇（例如，甘油、丙二醇、液体聚 乙二醇等）、植物油、无毒的甘油酯及其合适的混合物。可以维持合适的流动性，例如，通过 脂质体的形成，通过在分散剂的情况下维持所需的粒子大小，或通过表面活性剂的使用。可 以通过各种抗细菌剂和抗真菌剂（如对羟苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、山梨酸、硫柳汞等）产生 预防微生物的作用。在许多情况下，优选包括等渗剂，如糖、缓冲剂或氯化钠。通过使用延 缓吸收剂的组合物（例如，单硬脂酸铝和明胶）可以产生可注射的组合物的延长吸收。
[0157] 通过将合适的溶剂中的需要量的活性化合物与需要的上面列举的各种其他成分 结合，然后进行过滤灭菌，制备无菌可注射溶液。在用于制备无菌注射溶液的无菌粉末的情 况下，优选的制备方法是真空干燥和冷冻干燥技术，这会产生活性成分加上任何另外需要 的以前无菌过滤溶液中存在的成分的粉末。
[0158] 有用的固体载体包括粉碎的固体（如滑石、粘土、微晶纤维素、二氧化硅、氧化铝 等）。有用的液体载体包括水、乙醇或乙二醇或水-乙醇/乙二醇混合物，本发明的化合物 可以任选在无毒的表面活性剂的帮助下以有效含量溶解或分散在其中。可以加入佐剂（如 香味）和另外的抗微生物剂来优化对于给定用途的性质。
[0159] 增稠剂（如合成的聚合物、脂肪酸、脂肪酸盐和酯、脂肪醇、改性纤维素或改性无 机材料）也可和液体载体用于形成可涂覆的糊剂、凝胶、软膏、肥皂等，直接用于使用者的 皮肤上。
[0160] 化合物或其活性盐或衍生物的治疗需要量，不仅取决于选择的特定的盐，而且取 决于施药方式、待治疗的疾病的本质和患者的年龄和状态，最终取决于在场医师或临床医 生的决定。
[0161] 上述制剂可以以单位剂型存在，该单位剂型是含有单位剂量的物理分散单元，适 于向人体和其它哺乳动物体给药。单位剂型可以是胶囊或片剂，或是很多胶囊或片剂。根 据所涉及的具体治疗，活性成分的单位剂量的量可以在大约〇. 1到大约1000毫克或更多之 间进行变化或调整。
[0162] 本发明还提供本发明的化合物或包含该化合物的组合物在制备药物、特别是用于 抑制HMG-CoA还原酶的药物中的用途。相应地，本发明提供一种治疗预防和/或治疗血脂异 常、高血脂症、或动脉粥样硬化患者的方法，包括给予需要治疗的患者治疗有效量的至少一 种本发明的化合物。血脂异常即一种或多种与血脂相关的人体指标不在正常数值范围内， 包括总胆固醇升高、低密度脂蛋白胆固醇升高、载脂蛋白B升高、甘油三酯升高等。本发明 提供一种预防和/或治疗高胆固醇血症、混合型高脂血症患者的方法，包括给予需要治疗 的患者治疗有效量的至少一种本发明的化合物。
[0163] 本发明提供一种在生活方式干预治疗（如：调整饮食结构、控制体重、增加运动、 戒烟）效果不理想时，治疗其总胆固醇升高、低密度脂蛋白胆固醇升高、载脂蛋白B升高、甘 油三酯升高等。
[0164] 本发明化合物的上述用途，可单独使用，或与有效剂量的其他调脂药物联合使用。 其他调脂药物包括：胆固醇合成抑制剂（他汀类或其盐类，如洛伐他汀、普伐他汀、辛伐他 汀、氟伐他汀、阿托伐他汀、匹伐他汀等）、胆固醇吸收抑制剂（依折麦布等）、贝特类（诺 衡、力平脂环丙贝特、苯扎贝特、非诺贝特及吉非贝齐）、烟酸类药物（烟酸、烟酸肌醇酯、东 脂平、戊四烟酯等），胆酸螯合剂药物、苯氧芳酸类。
[0165] 本发明的化合物或其药学上可接受的盐（例如醋酸盐、丙二酸盐、酒石酸盐、琥珀 酸盐、盐酸盐、硫酸盐、硝酸盐等），可用于上述疾病的预防或治疗。
[0166] 在下列实施例中，将更加具体地解释本发明。但应理解，下列实施例旨在说明本发 明而不对本发明的范围构成任何限制。
[0167] 以下实施例中所用的化学原料均为商购获得或通过本领域熟知的合成方法获得。
[0168] 实施例1
[0169] 本发明人通过对于红曲进一步的成分研究，分离纯化得到了一种新的他汀类化合 物（化合物5)。
[0170]
[0171] 1?红曲
[0172] 1)取红曲干粉（北京北大维信生物科技有限公司生产）6kg，用2-6倍体积的乙酸 乙酯（或二氯甲烷或甲醇或乙醇，或甲醇/乙醇水溶液）为溶剂超声提取3次，每次20-40 分钟，合并提取液，减压浓缩并回收溶剂，得乙酸乙脂提取物（240g)。
[0173] 2)取乙酸乙酯提取物进行硅胶柱层析分离，用石油醚、乙酸乙酯及甲醇进行梯度 洗脱，得到乙酸乙脂洗脱部分（72g)。
[0174] 3)取乙酸乙脂洗脱部分进行硅胶柱层析分离，用二氯甲烷-乙酸乙脂-甲醇（30 : 30:1)洗脱共接收了 110个流分，每流分为10ml。经TLC(或HPLC)跟踪检测后，合并色 谱行为相同或相似的流分，合并后得到5个流分（分别为合并前的第1-35 ;36-50 ;51-65 ; 66-89 ;90-110 流分）。
[0175] 4)对步骤3)的第2个（合并前36-50流分，16g)流分进行C18柱层析分离，用 82% (乙腈-甲醇1 :1)水溶液100% (乙腈-甲醇1 :1)梯度洗脱，得到82% (乙腈-甲 醇1 :1)水溶液洗脱部分（3. 2g，共接收900ml)。
[0176] 5)82% (乙腈-甲醇1 :1)水溶液洗脱部分进一步用二氯甲烷-甲醇2 :1为流动相 进行s印hadex LH-20柱层析分离，共接收了 120个流分，每流分为5ml。经TLC (或HPLC) 跟踪检测合并色谱行为相同或相似的流分，合并后得到6个流分（分别为合并前的第1-40 ; 41-65 ;66-80 ;81-95 ;96-110 ;111-120 流分）。
[0177] 6)将步骤5)的第3个（合并前66-80流分，256mg)流分，最后利用半制备高效液 相纯化，以66% (乙腈-甲醇1 :1)水溶液为流动相，流速为4ml/min，C18半制备色谱柱 (10X250mm, 5 ym)为固定相，DAD 检测器波长为 247nm，收集 22. 8min(21. 5-23. 5min)的色 谱峰流分，多次富集浓缩得到新化合物（化合物5)约13mg。
[0178] 2.血脂康
[0179] 1)取血脂康胶囊（北京北大维信生物科技有限公司）内容物干粉3kg，用2-6倍体 积的乙酸乙酯（或二氯甲烷或甲醇）为溶剂超声提取3次，每次20-40分钟，合并提取液， 减压浓缩并回收溶剂，得乙酸乙脂提取物（200g)。
[0180] 2)取乙酸乙酯提取物进行硅胶柱层析分离，用石油醚、乙酸乙酯及甲醇进行梯度 洗脱，得到乙酸乙脂洗脱部分（60g)。
[0181] 3)取乙酸乙脂洗脱部分进行硅胶柱层析分离，用二氯甲烷-乙酸乙脂-甲醇（30 : 30:1)洗脱，共接收了 110个流分，每流分为10ml。经TLC(或HPLC)跟踪检测合并色谱 行为相同或相似的流分后，得到步骤3)5个流分（分别为合并前的第1-35 ;36-50 ;51-65 ; 66-89 ;90-110 流分）。
[0182] 4)对步骤3)第2个（合并前36-50流分，14g)流分进行C18柱层析分离，用82% (乙腈-甲醇1 :1)水溶液~100% (乙腈-甲醇1 :1)梯度洗脱，得到82% (乙腈-甲醇 1 :1)水溶液洗脱部分（2. 8g)。
[0183] 5)82% (乙腈-甲醇1 :1)水溶液洗脱部分进一步用二氯甲烷-甲醇2 :1为流动 相进行s印hadex LH-20柱层析分离，共接收了 120个流分，每流分为5ml。经TLC (或HPLC) 跟踪检测合并色谱行为相同或相似的流分，合并后得到步骤5)6个流分（分别为合并前的 第 1-40 ;41-65 ;66-80 ;81-95 ;96-110 ;111-120 流分）。
[0184] 6)对步骤5)第3个（合并前66-80流分，208mg)流分，最后利用半制备高效液 相纯化，以66% (乙腈-甲醇1 :1)水溶液为流动相，流速为4ml/min，C18半制备色谱柱 (10X250mm, 5 ym)为固定相，DAD 检测器波长为 247nm，收集 22. 8min(21. 5-23. 5min)的色 谱峰流分，多次富集浓缩得到新化合物（化合物5)约11. 5mg。
[0185] 本发明也可使用其他红曲原料或制剂为原料，如血脂康片（北京北大维信生物科 技有限公司）。
[0186] 实施例2 :化合物5的合成与鉴定
[0187] 方法 A:
[0188]
[0189] 1.化合物2的合成
[0190] 20. 9g(0. 05mo 1)的化合物1 (辛伐他汀，购自sigma)溶于500ml二氯甲烷中，加 入12g(0.07mol)的间氯过氧苯甲酸，室温搅拌40min，反应结束后，加入饱和碳酸氢钠溶 液，静置分层，依次用饱和碳酸氢钠、饱和食盐水洗涤，有机层干燥浓缩，不经分离直接进行 下一步反应。
[0191] 2.化合物3的合成
[0192] 在250ml四氢咲喃中加入0? 085mol的二乙胺和0? 075mol的叔丁醇，冰浴搅拌下， 加入0. 15mmol的正丁基锂，搅拌20min，将上述步骤合成的混合物加入反应中，继续冰浴搅 拌反应，TLC监测，反应结束后依次用水和饱和食盐水洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥，浓 缩，所得混合物经柱层析分离，得4. 36g化合物3,收率21 %。
[0193] 3.化合物4的合成
[0194] 将13g化合物3 (0. 03mol)溶于60ml氯仿中，盐酸调节溶液PH至酸性，室温搅拌 过夜，依次用10%的硫代硫酸钠、水、饱和食盐水洗涤，减压蒸除有机溶剂得粗品，经柱层析 分离得5. 96g化合物4,收率62%。
[0195] 4.化合物5的合成
[0196] 氮气保护下，7g化合物4溶于150ml甲醇中，加入0. 3mol的四丁基胺硫酸氢盐，加 热搅拌反应，TCL监测反应，反应结束后减压除去溶剂，剩余物溶于150ml混合溶液（水：庚 烷=1:1)中，搅拌2小时。分离有机层，无水硫酸钠干燥，抽滤，浓缩得6. 82g目标化合物 5,收率88%。
[0197] 或方法B:
[0198]
[0199] 1.化合物2b的合成
[0200] 20. 2g (0? 05mo 1)的化合物1 (洛伐他汀，购自sigma)溶于500ml二氯甲烷中，加 入12g(0.07mol)的间氯过氧苯甲酸，室温搅拌40min，反应结束后，加入饱和碳酸氢钠溶 液，静置分层，依次用饱和碳酸氢钠、饱和食盐水洗涤，有机层干燥浓缩，不经分离直接进行 下一步反应。
[0201] 2.化合物3b的合成
[0202] 在250ml四氢呋喃中加入0? 085mol的二乙胺和0? 075mol的叔丁醇，冰浴搅拌下， 加入0. 15mmol的正丁基锂，搅拌20min，将上述步骤合成的混合物加入反应中，继续冰浴搅 拌反应，TLC监测，反应结束后依次用水和饱和食盐水洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥，浓 缩，所得混合物经柱层析分离，得4. 22g化合物3b，收率21 %。
[0203] 3.化合物4的合成
[0204] 将12. 6g化合物3b (0. 03mol)溶于60ml氯仿中，盐酸调节溶液PH至酸性，室温搅 拌过夜，依次用10%的硫代硫酸钠、水、饱和食盐水洗涤，减压蒸除有机溶剂得粗品，经柱层 析分离得5. 96g化合物4,收率62%。
[0205] 4.化合物5的合成
[0206] 氮气保护下，7g化合物4溶于150ml甲醇中，加入0. 3mol的四丁基胺硫酸氢盐，加 热搅拌反应，TCL监测反应，反应结束后减压除去溶剂，剩余物溶于150ml混合溶液（水：庚 烷=1:1)中，搅拌2小时。分离有机层，无水硫酸钠干燥，抽滤，浓缩得6. 82g目标化合物 5,收率88%。
[0207] 化合物5的结构鉴定方法为：
[0208] 1.化合物的理化数据
[0209] 淡黄色油状物，
[0210] UV 光谱中有三个最大吸收峰，分别为 Anax(CH2Cl2) = 226. 8nm，265. 4nm，301. 2nm。
[0211] FT-IROffitcm1)光谱：3422(-011)，3013,2952(饱和碳氢），1732(羰基）。
[0212] HR-ESI-MS :m/z 355. 1886[M+Na] + (计算值为 355. 1885, C2(]H2S04Na)。
[0213] 2.结构式的确定
[0214] 分析该化合物的碳谱（13C-NMR及DEPT)，有20个碳原子，分别为甲基3个（其中 甲氧基1个，与sp 2碳相连的甲基1个），亚甲基4个，次甲基9个（其中5个为sp 2碳）及 季碳为4个（其中一个为羰基碳），同时也可以发现烯碳区有8个碳原子（S 126. 9, 126. 9， 127. 2, 127. 5, 133. 4, 134. 6, 135. 9, 136. 1)。从1H-i COSY 相关信号图（附图 1A)中可以推 断出用粗线表示的C2'到C4的片段和C7-C8片段。从烯碳区的8个碳原子可以推断该化合 物有4个C = C。进一步分析HMBC相关信号，可以发现6-Me与C5, C7 ;H-5与C6, C7 ;H-4 与C5, C8a ;H-3与C4a ;H-1与C8a，C4a ;H-8与C8a，C4a等之间的相关信号，从此可以推断 该化合物具有1，2-二氢萘环部分的他汀母核。从HMBC图谱（附图1AB)中，还发现甲氧基 的甲基（S 3. 69)，H-2'（ S 2. 46/2. 48)和 H-3'（ S 2. 45)与 Cl'（ S 173. 0)之间有相关信 号，这表明甲氧基与C1'相连，从而可以推断该化合物是甲酯化的他汀类似物。进一步结合 HR-ESI-MS结果，推断该化合物为：7_ (2, 6-二甲基-1，2-二氢萘-1-基）-3, 5-二羟基庚酸 甲酯（methyl 7-(2, 6-dimethyl-l, 2-dihydronaphthalen-1-yl)-3, 5-dihydroxyheptanoa te)。结构式为图1中所表示。
[0215] 3.化合物5的NMR数据
[0216] 表1.化合物5的NMR数据（600MHz, CDC13, S以ppm表示，J以Hz表示）

[0219] 实施例3 :化合物5a的合成
[0220]
[0221] 1.化合物5a的合成
[0222] 氮气保护下，7. 4g化合物4a溶于150ml甲醇中，加入0. 3mol的四丁基胺硫酸氢 盐，加热搅拌反应，TCL监测反应，反应结束后减压除去溶剂，剩余物溶于150ml混合溶液 (水：庚烷=1:1)中，搅拌2小时。分离有机层，无水硫酸钠干燥，抽滤，浓缩得6.91g目标 化合物5a，收率85%。
[0223] 实施例4
[0224] HMG-CoA还原酶抑制活性实验
[0225] 1实验材料
[0226] 1. 1 药品
[0227] 化合物5自制
[0228] 洛伐他汀标准品一购于Sigma公司
[0229] 1. 2 酶
[0230] 大鼠肝脏微粒体（HMG-CoA还原酶）商购，或者参照下述方法制备：取出雄性大鼠 的肝脏，用KESD缓冲液冲洗之后，12, 000g离心15min，取上清液。再用105, 000g离心90min 两次之后，收集离心沉淀。离心沉淀里加入8. 3%甘油，用37°C温浴加热lh。大鼠肝脏微 粒体粗体物用饱和硫酸铵纯化并收集35-50%纯化部分即得。得到的大鼠肝脏微粒体存放 在-80 °C冰箱中。
[0231] 1.3 试剂
[0232] 氯化钾，磷酸二氢钾，乙二胺四乙酸，二硫苏糖醇一购于北京化学试剂公司
[0233] 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADPH)购于Merck公司
[0234] 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A (HMG-CoA)--购于Sigma公司
[0235] 2实验方法
[0236] 将化合物5用75 %乙醇溶液溶解，初浓度为8. 6mg/ml并逐级稀释，得4. 3mg/ ml，2. 15mg/ml ;测定体系中总体积为250 y 1，各成分的浓度为：氯化钾200mM,磷酸二氢 钾160mM，乙二胺四乙酸4mM，二硫苏糖醇10mM，两个底物烟酰胺腺嘌呤二核苷酸和3-羟 基-3-甲基戊二酰辅酶A的浓度分别为200 yM和50 yM，pH6. 8,酶加 30 yl，试验组加 5 y 1，对照组加 5 y 1 (溶解样品溶剂），在Versamax酶标仪上37°C条件下检测0D34。的动态 变化。通过检测〇D 34。在5分钟内下降的快慢（以斜率值表示），来评价HMG-CoA还原酶活 性的强弱，进而评价酶抑制剂活性的强弱，结果见表2。
[0237] 3实验结果
[0238] 实验结果表明，化合物5对HMG-CoA还原酶的活性有抑制作用，且呈浓度-效应关 系。表明该化合物对HMG-CoA还原酶的活性有较好的抑制作用。
[0239] 表2.酶抑制剂活性检测结果
[0241] *空白对照为溶剂
[0242] 洛伐他汀是阳性对照。
【主权项】
1. 下式（I)的化合物或其立体异构体、互变异构体、外消旋物、代谢产物、前药、药学上 可接受的盐或溶剂化物：Ri选自H、C I-Ce烷基、面代C I-Ce烷基、（CH 2) 1 e〇H、C3-C7环烷基、面代C 3-C,环烷基、C I-Ce 烷氧基、面代Q-Ce烷氧基、C I-Ce烧硫基、面代C I-Ce烧硫基、面素、硝基、氨基和氛基； Rz选自H、C I-Ce烷基、面代C I-Ce烷基、（CH 2) 1 6〇Re、C3-C7环烷基、面代C式7环烷基、C I-Ce 烷氧基、面代Q-Ce烷氧基、C i-Ce烧硫基、面代C i-Ce烧硫基、面素、硝基、氨基和氛基； Rs选自H、C I-Ce烷基； 尺4和R 5各自独立地选自出、-COR 7、-SOzRs、-Si RgRloRll; 其中，R7选自C I-Ce烷基、面代C I-Ce烷基，R S选自C I-Ce烷基、任意取代的C I-Ce烷基、 Ce-Cin芳基、任意取代的C 6-Ci。芳基，R 9、Ri。、Rii独立地选自C I-Ce烷基； 其中，Re与上述对于Ra和Rs的定义相同； 其中，排除W下式（I)的化合物：Ri为（CH2)0H，Rz为甲基，Rs、Ra和Rs为H。2. 根据权利要求1的化合物，其中， Ri选自H、C 1-C3烷基、面代C 1-C3烷基、（CH 2) 1 30H、Cs-Ce环烷基、面代C 环烷基、C 1-C3 烷氧基、面代Ci-Cs烷氧基、C I-Cs烧硫基、面代C I-Cs烧硫基、面素、硝基、氨基和氯基。3. 根据权利要求1的化合物，其中， Ri选自H、C I-Cs烷基、面代C I-Cs烷基、畑2) 1 30H、面素、硝基、氨基和氯基。4. 根据权利要求1的化合物，其中 Ri选自 H、C 1-C3烷基、（CH 2) 1 30H。5. 根据权利要求1 - 4中任一项的化合物，其中 Rz选自H、C I-Cs烷基、面代C I-Cs烷基、（CH 2) 1 3〇Re、Cs-Ce环烷基、面代Cs-Ce环烷基、C I-Cs 烷氧基、面代烷氧基、C 烧硫基、面代C 烧硫基、面素、硝基、氨基和氛基； 其中，Re选自 H、-COR,、-SOzRs、-Si RgRioRii; 其中，R7选自C I-Ce烷基、面代C I-Ce烷基，R S选自C I-Ce烷基、任意取代的C I-Ce烷基、 Ce-Cin芳基、任意取代的C 6-Ci。芳基，R 9、Ri。、Rii独立地选自C I-Ce烷基。6. 根据权利要求1 - 4中任一项的化合物，其中 Rz选自H、C I-Cs烷基、面代C I-Cs烷基、（CH 2) 1 3〇Re、Cs-Ce环烷基、面代Cs-Ce环烷基、C I-Cs 烷氧基、面代烷氧基、C 烧硫基、面代C 烧硫基、面素、硝基、氨基和氛基； 其中，Re选自：H、-COR 7、-SOzRs、-SiRsRioRii; 其中，咕选自〇1-〇3烷基、面代〇1-〇3烷基，1?8选自〇1-〇3烷基、任意取代的〇1-〇3烷基、 Ce-Cin芳基、任意取代的C 6-Ci。芳基，R 9、Ri。、Rii独立地选自C I-Ce烷基。7. 根据权利要求1 - 4中任一项的化合物，其中 Rz选自H、c 1-C3烷基、面代C1-C3烷基、（邸2) 13〇R6、C3-Ce环烷基、面代Cs-Ce环烷基、C 1-C3 烷氧基、面代Ci-Cs烷氧基、C I-Cs烧硫基、面代C I-Cs烧硫基、面素、硝基、氨基和氯基； 其中，Re选自：H、-COR 7、-SOzRs、-SiRsRioRii; 其中，咕选自-CH 3，Rs选自-CF 3、对甲苯基，R9、Rio、Ri 1独立地选自甲基、叔下基。8. 根据权利要求1 - 4中任一项的化合物，其中 Rz选自H、C I-Cs烷基、面代C I-Cs烷基、畑2) 1 3〇Re、面素、硝基、氨基和氯基； 其中，Re选自 H、-COR?、-SOzRs、-Si R9R10R11; 其中，R7选自C I-Ce烷基、面代C I-Ce烷基，R S选自C I-Ce烷基、任意取代的C I-Ce烷基、 Ce-Cin芳基、任意取代的C 6-Ci。芳基，R 9、Ri。、Rii独立地选自C I-Ce烷基。9. 根据权利要求1 - 4中任一项的化合物，其中 Rz选自H、C I-Cs烷基、面代C I-Cs烷基、畑2) 1 3〇Re、面素、硝基、氨基和氯基； 其中，Re选自：H、-COR 7、-SOzRs、-SiRsRioRii; 其中，咕选自〇1-〇3烷基、面代〇1-〇3烷基，1?8选自〇1-〇3烷基、任意取代的〇1-〇3烷基、 Ce-Cin芳基、任意取代的C 6-Ci。芳基，R 9、Ri。、Rii独立地选自C I-Ce烷基。10. 根据权利要求1 - 4中任一项的化合物，其中 Rz选自H、C I-Cs烷基、面代C I-Cs烷基、畑2) 1 3〇Re、面素、硝基、氨基和氯基； 其中，Re选自：H、-COR 7、-SOzRs、-SiRsRioRii; 其中，咕选自-CH 3，Rs选自-CF 3、对甲苯基，R9、Rio、Ri 1独立地选自甲基、叔下基。11. 根据权利要求1 - 4中任一项的化合物，其中 Rz选自 H、C 1-C3烷基、（CH 2) 13〇Re; 其中，Re选自 H、-COR7、-SOzRs、-Si R9R10R11; 其中，R7选自C I-Ce烷基、面代C I-Ce烷基，R S选自C I-Ce烷基、任意取代的C I-Ce烷基、 Ce-Cin芳基、任意取代的C 6-Ci。芳基，R 9、Ri。、Rii独立地选自C I-Ce烷基。12. 根据权利要求1 - 4中任一项的化合物，其中 Rz选自 H、C I-Cs烷基、（CH 2) 13〇Re; 其中，Re选自 H、-COR7、-SOzRs、-Si RgRioRii; 其中，咕选自〇1-〇3烷基、面代〇1-〇3烷基，1?8选自〇1-〇3烷基、任意取代的〇1-〇3烷基、 Ce-Cin芳基、任意取代的C 6-Ci。芳基，R 9、Ri。、Rii独立地选自C I-Ce烷基。13. 根据权利要求1 - 4中任一项的化合物，其中 Rz选自 H、C 1-C3烷基、（CH 2) 13〇Re; 其中，Re选自 H、-COR7、-SOzRs、-Si R9R10R11; 其中，咕选自-CH 3，Rs选自-CF 3、对甲苯基，R9、Rio、Ri 1独立地选自甲基、叔下基。14. 根据权利要求1 - 13中任一项的化合物，其中 Rs选自H、Ci-Cs烷基。15. 根据权利要求1 - 13中任一项的化合物，其中 Rs为C I-Cs烷基。16. 根据权利要求1 - 15中任一项的化合物，其中 尺4和R 5各自独立地选自出、-COR 7、-SOzRs、-SiRsRioRii; 其中，咕选自C I-Cs烷基、面代C I-Cs烷基，RS选自C I-Cs烷基、任意取代的C I-Cs烷基、 Ce-Cin芳基、任意取代的C 6-Ci。芳基，R 9、Ri。、Rii独立地选自C I-Ce烷基。17. 根据权利要求1 - 15中任一项的化合物，其中 尺4和R 5各自独立地选自出、-COR 7、-SOzRs、-SiRsRioRii; 其中，咕选自-CH 3，Rs选自-CF 3、对甲苯基，Rs、Rio、Ri 1独立地选自甲基、叔下基。18. W下化合物，其选自： 及其二乙酸醋、二对甲苯横I 三（叔下基二甲基娃酸）； 及其=乙酸醋、=对甲苯横醋、=(=氣甲横酸醋）、=(叔下基二甲基娃酸）。19. 一种药物组合物，其包含权利要求1 - 18中任一项的化合物和任选的药学上可W 接受的赋形剂。20. 权利要求1 - 18中任一项的化合物用于制备药物的用途，其中所述药物用于抑制 HMG-CoA还原酶活性。21. 权利要求1 - 18中任一项的化合物用于制备药物的用途，其中所述药物用于抑制 胆固醇合成。22. 从红曲或其提取物提取化合物5的方法，所述方法包括下列步骤：1)对于红曲或其提取物使用乙酸乙醋（或二氯甲烧或甲醇或乙醇、或甲醇/乙醇水溶 液）为溶剂进行提取； 2) 对于步骤I)的乙酸乙醋（或二氯甲烧或甲醇或乙醇、或甲醇/乙醇水溶液）提取物 进行硅胶柱层析分离，用石油酸、乙酸乙醋及甲醇进行梯度洗脱，得到乙酸乙脂洗脱部分； 3) 对于步骤2)的乙酸乙脂洗脱部分进行硅胶柱层析分离，用二氯甲烧-乙酸乙脂-甲 醇洗脱，对流分进行检测、合并，合并后得到步骤3)流分； 4) 对于步骤3)第2个流分进行C18柱层析分离，用乙腊-甲醇-水梯度洗脱，得到 82% (乙腊-甲醇1 :1)水溶液洗脱部分； 5) 对于步骤4)的82% (乙腊-甲醇1 :1)水溶液洗脱部分进一步用二氯甲烧-甲醇 为流动相进行Se地adex LH-20柱层析分离，对流分分析、合并，合并后得到步骤5)流分； 6) 对于步骤5)的第3个流分利用色谱方法纯化，得到化合物5。23. 根据权利要求22的方法，其中， 1) 对于红曲或其提取物使用2-6倍体积的乙酸乙醋（或二氯甲烧或甲醇或乙醇、或甲 醇/乙醇水溶液）为溶剂提取3次，每次20-40分钟，合并提取液，减压浓缩并回收溶剂，得 乙酸乙脂提取物； 2) 对于步骤1)的乙酸乙醋（或二氯甲烧或甲醇或乙醇、或甲醇/乙醇水溶液）提取物 进行硅胶柱层析分离，用石油酸、乙酸乙醋及甲醇或乙醇、或甲醇/乙醇水溶液进行梯度洗 脱，得到乙酸乙脂洗脱部分； 3) 对于步骤2)的乙酸乙脂洗脱部分进行硅胶柱层析分离，用二氯甲烧-乙酸乙脂-甲 醇（30 :30 :1)洗脱、合并流分，合并后得到5个流分； 4) 对于步骤3)合并后的第2个流分进行C18柱层析分离，用82% (乙腊-甲醇1 :1) 水溶液~100% (乙腊-甲醇1 :1)梯度洗脱洗脱，得到82% (乙腊-甲醇1 :1)水溶液洗 脱部分； 5) 对于步骤4)的82% (乙腊-甲醇1 :1)水溶液洗脱部分进一步用二氯甲烧-甲醇 (2 :1)为流动相进行Se地adex LH-20柱层析分离，合并后得到步骤5)6个流分； 6) 对于步骤5)的第3个流分利用色谱纯化，W乙腊-甲醇-水为流动相，C18色谱柱 为固定相，得到化合物524. 合成前述权利要求1 - 17中任一项中的式（I)化合物W及权利要求18中的化合 物5和化合物5a的方法： 将式（II)化合物在碱性条件下反应，或在碱性条件下加入成醋试剂反应，制得式（I) 的化合物，其中，式（n)中Ri、Rz和Ra与前述权利要求1 - 17中任一项中的式（I)中的定义相 同， 碱性条件的抑范围为7. 5-14,可选加入氨氧化钢、氨氧化钟、氨水、碳酸钢等碱性试剂 或溶剂；成醋试剂可选自甲醇、乙醇等低级醇；酸酢（醋酸酢、横酸酢、=氣甲横酸酢等）、酷 氯（甲苯横酷氯）、氯硅烷（叔下基二甲基氯硅烷）。 W化会物I F；的会成节法.26.化合物5的合成方法：
【文档编号】C07C67/03GK105985244SQ201510058282
【公开日】2016年10月5日
【申请日】2015年2月4日
【发明人】段震文, 郭树仁, 李雪梅
【申请人】北京北大维信生物科技有限公司