一种高纯度egc的纯化方法
【专利摘要】本发明公开了一种高纯度EGC的纯化方法，包括S1溶解：将茶多酚加入纯化水中溶解至澄清，过滤，得滤液；S2吸附：将滤液过大孔树脂柱，上样完全后，水洗至流出液无明显EGC显色，收集流出液；S3萃取、浓缩、结晶：利用乙酸乙酯对流出液进行萃取，然后将萃取液浓缩至浸膏状，再利用纯化水将浸膏溶解至澄清后，放置在4?10℃条件下结晶48小时，过滤洗涤烘干得到高纯度EGC。本发明所述的树脂处理过程为过载上样，不需再对大孔树脂柱进行解吸附处理，大大降低了生产周期，减少了生产工序；且本发明充分应用了大孔树脂对茶多酚中不同类型色素及成分吸附能力不同的特性，得到了高纯度、低色度的EGC。
【专利说明】
一种高纯度EGC的纯化方法
技术领域
[0001 ]本发明涉及一种高纯度EGC的纯化方法，属于医药化工技术领域。
【背景技术】
[0002]EGC和EGCG是茶叶中的主要儿茶素之一，占茶多酚总量的80%以上，作为天然抗氧化剂和自由基清除剂，具有明显的抗衰老、抗突变、防癌抗癌、预防心血管疾病、防辐射等多种生物学活性，广泛运用于食品加工、医药保健和日用化工领域。儿茶素单体的分离纯化，成为儿茶素分离、纯化与临床应用研究的焦点，具有重要的社会意义。
目前分离制备儿茶素单体的方法有很多，主要有柱色谱法、柱色谱预分离-制备型HPLC纯化法、有机溶剂富集-柱色谱纯化、高效液相色谱法、高速逆流色谱法(HSCCC)、沉淀-吸附法、有机溶剂萃取法等，然而这些方法大多集中用于分离纯化EGCG，对于EGC的分离研究还很少见，而且在降低成本、提高得率、保持产物的天然活性以及实现工业化等方面依然存在技术瓶颈。
[0003]如龚志华等在其论文“HP-20大孔吸附树脂分离纯化儿茶素EGCG的效果”一文中，以EGCG含量为31.52%的儿茶素粗提物为原料，应用体积为125 mL的HP-20树脂柱进行等梯度洗脱时，1.8g上样量、2BV/h流速、40 %乙醇体积分数、2BV洗脱体积，EGCG的纯度和得率分别达55.92 %和95.22 % ;以同样的柱进行梯度洗脱时，1.8 g上样量、30 %乙醇洗脱、2BV/h流速、2BV洗脱体积、收集1-2BV的体积段，EGCG的纯度和得率分别达68.32 %和72.08 %。该工艺虽然可以明显地提高EGCG的纯度，但该纯度仍然较低，且所得产品色素成分较多，无法满足高质量的要求，而且树脂上样量受到限制，溶剂回收也会增加生产成本，难以适用于工业化生产。
[0004]而朱斌等在其论文“茶多酚制备高纯度EGCG的工艺研究”中，选择聚酰胺为柱填料，以茶多酚为原料，上样量为42.9 mgTP/g聚酰胺，用洗脱剂(甲醇:水=4:1)，pH值3.5-4.5，温度为室温(或25°C )，流速为4.0ml/min的情况下洗脱，可以得到EGCG的纯度达93 %以上，回收率达86.83 %以上的产品。该工艺虽然得到纯度更高的EGCG产品，但聚酰胺处理时流速很慢，死吸附也较严重，再生处理后难以维持原有的分离效果，造成工艺周期过长，成本高，而且运用甲醇-水作为洗脱剂，也增加了回收成本。
【发明内容】
[0005]为了解决上述问题，本发明的目的在于提供一种制备方法简单、纯度高的EGC的纯化方法。
[0006]本发明的技术方案为:
一种高纯度EGC的纯化方法，包括以下步骤:
SI溶解:将茶多酚加入纯化水中溶解至澄清，过滤，得滤液；
S2吸附:将SI步骤中的滤液过大孔树脂柱，上样完全后，流速为l_2BV/h，水洗，水洗流速为2-3BV/h，至流出液无明显EGC显色，收集流出液； S3萃取、浓缩、结晶:利用乙酸乙酯对流出液进行萃取，然后将萃取液在40-70°C的温度条件下浓缩至浸膏状，再利用纯化水将浸膏溶解至澄清后，放置在4-10°C条件下结晶48小时，过滤，冰水洗涤，在低于70 0C的温度条件下烘干，得到高纯度EGC。
[0007]进一步，所述的茶多酚为茶多酚细粉。
[0008]且在SI步骤中，所述的茶多酚与纯化水的料液比为(400-450)g:4L。
[0009]在32步骤中，所述的大孔树脂柱中大孔树脂的型号为0101、即0-826、1^-15^8-8中的任一种。优选AB-8。
[0010]在S2步骤中，所述的上样为过载上样。
[0011]更进一步，在S3步骤中，萃取分三次进行，且以体积计量，乙酸乙酯的用量分别为流出液体积的I/2、I/2、I/4。
[0012]且在S3步骤中，纯化水溶解浸膏的过程中，纯化水与浸膏的质量比为2:1。
[0013]本发明的有益效果为:本发明所述的树脂处理过程为过载上样，不需再对大孔树脂柱进行解吸附处理，大大降低了生产周期，减少了生产工序;且本发明充分应用了大孔树脂对茶多酚中不同类型色素及成分吸附能力不同的特性，得到了高纯度、低色度的EGC。
【具体实施方式】
[0014]下面结合具体实施例对本发明进行详细的说明。
[0015]实施例1:
将茶多酚细粉(EGC质量百分含量为31.2%)400g加入4L纯化水中溶解至澄清，过滤得滤液;滤液过已经处理好的2kgD101大孔树脂柱，过载上样，上样完全后，水洗至流出液无明显EGC显色，收集流出液;利用流出液体积I /2、I /2、I /4的乙酸乙酯对流出液进行三次萃取，合并乙酸乙酯溶液(萃取液)，将萃取液浓缩至浸膏状，再利用2倍浸膏质量的纯化水将浸膏溶解至澄清后，放置在4-10°C条件下结晶48小时，过滤洗涤，烘干，得到25.6g白色细颗粒状EGC，经HPLC检测纯度为93.2%。
[0016]
实施例2:
将茶多酚细粉(EGC质量百分含量为46.3%)400g加入4L纯化水中溶解至澄清，过滤得滤液;滤液过已经处理好的2kgHPD-826大孔树脂柱，过载上样，上样完全后，水洗至流出液无明显EGC显色，收集流出液;利用流出液体积1/2、1/2、1/4的乙酸乙酯对流出液进行三次萃取，合并乙酸乙酯溶液(萃取液)，将萃取液浓缩至浸膏状，再利用2倍浸膏质量的纯化水将浸膏溶解至澄清后，放置在4-10°C条件下结晶48小时，过滤洗涤，烘干，得到45.9g白色细颗粒状EGC，经HPLC检测纯度为94.7%。
[0017]
实施例3:
将茶多酚细粉(EGC质量百分含量为51.0%)450g加入4L纯化水中溶解至澄清，过滤得滤液;滤液过已经处理好的2kgAB-8大孔树脂柱，过载上样，上样完全后，水洗至流出液无明显EGC显色，收集流出液;利用流出液体积I /2、I /2、I /4的乙酸乙酯对流出液进行三次萃取，合并乙酸乙酯溶液(萃取液)，将萃取液浓缩至浸膏状，再利用2倍浸膏质量的纯化水将浸膏溶解至澄清后，放置在4-10°C条件下结晶48小时，过滤洗涤，烘干，得到61.2g白色细颗粒状EGC，经HPLC检测纯度为95.9%。
[0018]上述实施例1-3所述的制备方法过程简单、最后纯化后的EGC的纯度均达到了93%以上，纯化效果非常好。
[0019]以上【具体实施方式】不以任何形式限制本发明，凡是以等同替换或等效变换的方式所获得的技术方案，均落在本发明的保护范围内。
【主权项】
1.一种高纯度EGC的纯化方法，其特征在于，包括以下步骤: Si溶解:将茶多酚加入纯化水中溶解至澄清，过滤，得滤液； S2吸附:将SI步骤中的滤液过大孔树脂柱，上样完全后，流速为l_2BV/h，水洗，水洗流速为2-3BV/h，至流出液无明显EGC显色，收集流出液； S3萃取、浓缩、结晶:利用乙酸乙酯对流出液进行萃取，然后将萃取液在40-70°C的温度条件下浓缩至浸膏状，再利用纯化水将浸膏溶解至澄清后，放置在4-10°C条件下结晶48小时，过滤，冰水洗涤，在低于70 0C的温度条件下烘干，得到高纯度EGC。2.根据权利要求1所述的一种高纯度EGC的纯化方法，其特征在于，所述的茶多酚为茶多酸细粉。3.根据权利要求1所述的一种高纯度EGC的纯化方法，其特征在于，在SI步骤中，所述的茶多酚与纯化水的料液比为(400-450)g:4L。4.根据权利要求1所述的一种高纯度EGC的纯化方法，其特征在于，在S2步骤中，所述的大孔树脂柱中大孔树脂的型号为D11、HPD-826、LX-15、AB-8中的任一种。5.根据权利要求1所述的一种高纯度EGC的纯化方法，其特征在于，所述的大孔树脂柱中大孔树脂的型号为AB-8。6.根据权利要求1所述的一种高纯度EGC的纯化方法，其特征在于，在S2步骤中，所述的上样为过载上样。7.根据权利要求1所述的一种高纯度EGC的纯化方法，其特征在于，在S3步骤中，萃取分三次进行，且以体积计量，乙酸乙酯的用量分别为流出液体积的1/2、1/2、1/4。8.根据权利要求1所述的一种高纯度EGC的纯化方法，其特征在于，在S3步骤中，纯化水溶解浸膏的过程中，纯化水与浸膏的质量比为2:1。
【文档编号】C07D311/62GK106008441SQ201610406474
【公开日】2016年10月12日
【申请日】2016年6月12日
【发明人】季浩, 张宇, 于燕燕, 阚建伟, 刘佳, 徐娟
【申请人】江苏天晟药业股份有限公司