一种基于马蹄渣的蝉花液体菌种培养基以及蝉花液体菌种制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种基于马蹄渣的蝉花液体菌种培养基，包括以下重量份组分：马蹄渣56?57、多孔膨化淀粉67?68、无菌马血蛋白粉62?63、麦芽糖6?7、葡萄糖7?8、葡萄糖酸锌2?3、氨基酸螯合钙2.2?2.3、纳米级电气石粉3.6?3.8、细菌纳米纤维素3.8?4等。本发明采用马蹄渣、多孔膨化淀粉、无菌马血蛋白粉等主料制备蝉花液体菌种，培养基的营养均匀，来源广泛，为蝉花液体菌种的经济制备奠定了基础；同时，在培养基中加入细菌纳米纤维素，改善了培养基的均匀性、稳定性以及空间结构特定，为蝉花液体菌种的制备提供良好营养的同时，也提供了良好的环境，培养的蝉花液体菌种的菌丝球生长良好，分布均匀，活性强。
【专利说明】 一种基于马蹄渣的蝉花液体菌种培养基以及蝉花液体菌种制
备方法
技术领域
[0001]本发明涉及液体菌种技术领域，尤其涉及一种基于马蹄渣的蝉花液体菌种培养基以及蝉花液体菌种制备方法。
【背景技术】
[0002]蝉花生产过程中，液体菌种具有固体菌种所不可比拟的优势，液体菌种具有生产周期短，菌龄短而一致，纯度高、活力强，接种简便快捷，易实行工厂化、规模化、标准化生产等优点。现在，越来越多的人都在研究和使用液体菌种，而液体菌种的推广和使用也是实现食用菌工厂化、规模化、标准化的必然趋势。但是液体菌种也存在着自身的缺陷和不足:1、液体菌种萌发点多生长速度快，但是穿透力不强，培养料过粗菌丝不易吃透培养料，菌丝将沿着培养料表面快速生长，培养料内部菌丝量很少，严重影响了菌种产量和质量的问题;2、常规的液体菌种虽然解决了固体菌种存在的一些问题，能明显缩短栽培周期、增强菌种活力和抗逆性、降低菌种污染率、使得菌种质量整齐度提高，但仍存在例如发酵得到的液体菌种中菌球的密度、大小、均匀度等物理特性不是很理想等不足，如果用搅拌剪切的方法将菌球打碎，得到的菌种均匀度会更理想，但是，高速搅拌粉碎和打浆的剪切力对菌种伤害极大，对菌种整体的质量影响较为严重。开发分布均匀且具有更小粒径菌丝球的高质量的液体菌种具有重要意义。公开号CN105309194A《食用菌微粒液体菌种生产新技术》提供了一种菌丝球粒径在0.5mm的食用菌微粒液体菌种，采用的增加食用菌液体菌种培养液通气量，使通气量在1: 0.6—0.9V/V.min为适宜，同时在通气发酵罐内装置搅拌器使培养液涡流运动延长气泡的运动路线的技术操作方法，该生产微粒液体菌种的方法是从生产工艺上进行改进，并没有液体菌种培养基方面进行改进，实施起来技术难度要求高;公开号CN105130516A《分子级生物培养基制作方法》提到了分子级生物培养基营养成分可以快速全面的被吸收，促进液体菌种的生长，但是并没有提到分子级生物培养基对液体菌种菌丝球直径大小的影响。发展一种基于液体菌种培养基原材料成分改进液体菌种菌丝球直径改善食用菌菌种产量和质量的技术，具有重要的意义。
[0003]细菌纳米纤维素是自然界的丰富的可再生产物之一，细菌纳米纤维素是纤维素的物理最小结构单元，是指直径1-1OOnm之间的纤维，细菌纳米纤维素质轻，生物相容性好，可降解、可再生，反应活性高，且具有杨氏模量高，聚合度高，洁净度高，强度高，比表面积大等优势。将细菌纳米纤维素作作为食用菌液体菌种培养基原材料，对食用菌液体菌种的菌丝球分布以及直径具有一定的影响，进而起到改善食用菌菌种质量的作用。
【发明内容】
[0004]本发明目的就是为了弥补已有技术的缺陷，提供一种基于马蹄渣的蝉花液体菌种培养基以及蝉花液体菌种制备方法。
[0005]本发明是通过以下技术方案实现的: 一种基于马蹄渣的蝉花液体菌种培养基，包括以下重量份组分:马蹄渣56-57、多孔膨化淀粉67-68、无菌马血蛋白粉62-63、麦芽糖6-7、葡萄糖7_8、葡萄糖酸锌2_3、氨基酸螯合I丐2.2-2.3、γ -轻基精氨酸1.1-1.2、酪蛋白胨2.1-2.2、食用氢化茶花油0.9-1、石霄1-1.2、过磷酸钙1.2-1.3、ΚΗ2Ρ040.8-0.9、MgS040.5-0.6、纳米级电气石粉3.6-3.8、细菌纳米纤维素3.8-4、适量的水。
[0006]—种上述的培养基制备蝉花液体菌种的方法，包括以下步骤:
(1)、将一半纳米级电气石粉和水按照0.lg/L混合，通电激发制备无菌水备用;将石膏、过磷酸钙、KH2P04、MgS04的总量和无菌水按I g/L混合在30 °C搅拌溶解得溶液一;将麦芽糖、葡萄糖、葡萄糖酸锌、氨基酸螯合钙、γ -羟基精氨酸、酪蛋白胨、食用氢化茶花油的总量和无菌水按4g/L混合搅拌溶解得溶液二;将马蹄渣放入超微粉碎机中粉碎处理30min，放入锅中加入总重量4倍的水小火文煮lh，之后过滤，得滤液和滤渣，将滤液、多孔膨化淀粉、无菌马血蛋白粉的总量和无菌水按100g/L混合搅拌，并在进行98 °C进行巴氏灭菌灭酶1min，得溶液三，将滤渣采用膨化机处理，得膨化马蹄渣微粉备用;将另一半纳米电气石粉和细菌纳米纤维素以及总重量3-4倍的水混合搅拌均匀并采用高温蒸汽灭菌，得溶液四备用；
(2 )、将溶液三保持20 0C、溶液二保持25 0C、溶液一保持30 V，先将溶液一加入到溶液二中混合搅拌均匀得复合液，在将该复合液加入到溶液三中混合搅拌均匀得营养液，并调整pH，此后对该营养液进行通电激发处理30min得液体培养基备用；
(3)、将蝉花母种在无菌环境中先接种到一半的液体培养基上进行液体发酵，发酵条件为PH5.3-5.5、接种量11%、温度21-22°C、摇床转速100r/min、培养24-25h，得蝉花液体菌种
，
(4)、将剩余一半的液体培养基以及溶液四无菌混合均匀，之后加入膨化马蹄渣微粉，并将其总量与无菌水350g/L混合，高压均质之后，通电激化配合高温再次灭菌，并放置到无菌培养瓶中，得复合培养基，将步骤(3)得到的蝉花液体菌种一按25%的接种量在无菌环境中接种到该培养瓶中，温度19-20°C，培养30-32h即得。
[0007]本发明的优点是:
本发明采用马蹄渣、多孔膨化淀粉、无菌马血蛋白粉以及麦芽糖、葡萄糖等主料配合营养添加物葡萄糖酸锌、氨基酸螯合钙、γ -羟基精氨酸以及微量物质钙钾磷镁制备蝉花液体菌种，培养基的营养均匀，来源广泛，为蝉花液体菌种的经济制备奠定了基础；同时，在培养基中加入纳米级电气石粉以及细菌纳米纤维素两种原料，改善了培养基的均匀性、稳定性以及空间结构特定，为蝉花液体菌种的制备提供良好营养的同时，也提供了良好的环境，培养的蝉花液体菌种的菌丝球生长良好，分布均匀，活性强。
【具体实施方式】
[0008]一种基于马蹄渣的蝉花液体菌种培养基，包括以下重量份组分:马蹄渣56、多孔膨化淀粉67、无菌马血蛋白粉62、麦芽糖6、葡萄糖7、葡萄糖酸锌2、氨基酸螯合钙2.2、γ羟基精氨酸1.1、酪蛋白胨2.1、食用氢化茶花油0.9、石膏1、过磷酸钙1.2、KH2P040.8、MgS040.5、纳米级电气石粉3.6、细菌纳米纤维素3.8、适量的水。
[0009]—种上述的培养基制备蝉花液体菌种的方法，包括以下步骤:
(1)、将一半纳米级电气石粉和水按照0.lg/L混合，通电激发制备无菌水备用;将石膏、过磷酸钙、KH2P04、MgS04的总量和无菌水按I g/L混合在30 V搅拌溶解得溶液一;将麦芽糖、葡萄糖、葡萄糖酸锌、氨基酸螯合钙、T羟基精氨酸、酪蛋白胨、食用氢化茶花油的总量和无菌水按4g/L混合搅拌溶解得溶液二;将马蹄渣放入超微粉碎机中粉碎处理30min，放入锅中加入总重量4倍的水小火文煮lh，之后过滤，得滤液和滤渣，将滤液、多孔膨化淀粉、无菌马血蛋白粉的总量和无菌水按100g/L混合搅拌，并在进行98°C进行巴氏灭菌灭酶lOmin，得溶液三，将滤渣采用膨化机处理，得膨化马蹄渣微粉备用;将另一半纳米电气石粉和细菌纳米纤维素以及总重量3倍的水混合搅拌均匀并采用高温蒸汽灭菌，得溶液四备用；
(2 )、将溶液三保持20 0C、溶液二保持25 0C、溶液一保持30 V，先将溶液一加入到溶液二中混合搅拌均匀得复合液，在将该复合液加入到溶液三中混合搅拌均匀得营养液，并调整pH，此后对该营养液进行通电激发处理30min得液体培养基备用；
(3)、将蝉花母种在无菌环境中先接种到一半的液体培养基上进行液体发酵，发酵条件为PH5.3、接种量11%、温度21°C、摇床转速100r/min、培养24h，得蝉花液体菌种一；
(4)、将剩余一半的液体培养基以及溶液四无菌混合均匀，之后加入膨化马蹄渣微粉，并将其总量与无菌水350g/L混合，高压均质之后，通电激化配合高温再次灭菌，并放置到无菌培养瓶中，得复合培养基，将步骤(3)得到的蝉花液体菌种一按25%的接种量在无菌环境中接种到该培养瓶中，温度19°C，培养30h即得。
【主权项】
1.一种基于马蹄渣的蝉花液体菌种培养基，其特征在于，包括以下重量份组分:马蹄渣56-57、多孔膨化淀粉67-68、无菌马血蛋白粉62-63、麦芽糖6_7、葡萄糖7_8、葡萄糖酸锌2-3、氨基酸螯合钙2.2-2.3, γ -羟基精氨酸1.1_1.2、酪蛋白胨2.1-2.2、食用氢化茶花油0.9-1、石膏 1-1.2、过磷酸钙 I.2-1.3、ΚΗ2Ρ040.8-0.9、MgS040.5-0.6、纳米级电气石粉3.6-3.8、细菌纳米纤维素3.8-4、适量的水。2.—种采用权利要求1所述的培养基制备蝉花液体菌种的方法，其特征在于，包括以下步骤: (1)、将一半纳米级电气石粉和水按照0.lg/L混合，通电激发制备无菌水备用;将石膏、过磷酸钙、KH2P04、MgS04的总量和无菌水按I g/L混合在30 °C搅拌溶解得溶液一;将麦芽糖、葡萄糖、葡萄糖酸锌、氨基酸螯合钙、γ -羟基精氨酸、酪蛋白胨、食用氢化茶花油的总量和无菌水按4g/L混合搅拌溶解得溶液二;将马蹄渣放入超微粉碎机中粉碎处理30min，放入锅中加入总重量4倍的水小火文煮lh，之后过滤，得滤液和滤渣，将滤液、多孔膨化淀粉、无菌马血蛋白粉的总量和无菌水按100g/L混合搅拌，并在进行98 °C进行巴氏灭菌灭酶1min，得溶液三，将滤渣采用膨化机处理，得膨化马蹄渣微粉备用;将另一半纳米电气石粉和细菌纳米纤维素以及总重量3-4倍的水混合搅拌均匀并采用高温蒸汽灭菌，得溶液四备用； (2)、将溶液三保持20°C、溶液二保持25°C、溶液一保持30°C，先将溶液一加入到溶液二中混合搅拌均匀得复合液，在将该复合液加入到溶液三中混合搅拌均匀得营养液，并调整pH，此后对该营养液进行通电激发处理30min得液体培养基备用； (3)、将蝉花母种在无菌环境中先接种到一半的液体培养基上进行液体发酵，发酵条件为PH5.3-5.5、接种量11%、温度21-22°C、摇床转速100r/min、培养24-25h，得蝉花液体菌种 ， (4)、将剩余一半的液体培养基以及溶液四无菌混合均匀，之后加入膨化马蹄渣微粉，并将其总量与无菌水350g/L混合，高压均质之后，通电激化配合高温再次灭菌，并放置到无菌培养瓶中，得复合培养基，将步骤(3)得到的蝉花液体菌种一按25%的接种量在无菌环境中接种到该培养瓶中，温度19-20°C，培养30-32h即得。
【文档编号】C12N1/22GK106047784SQ201610472409
【公开日】2016年10月26日
【申请日】2016年6月27日
【发明人】柯家厚
【申请人】合肥福泉现代农业科技有限公司