一种用于进行吲哚试验的改良培养基的制作方法
【专利摘要】本发明提供一种用于进行吲哚试验的改良培养基，所述培养基由以下质量体积百分含量的各组分组成：1%胰蛋白胨水，1%的色氨酸。应用本发明的培养基进行吲哚试验能够加速细菌生长，从而减少吲哚试验所需时间，使时间缩短至4?6个小时。
【专利说明】
-种用于进行间哄试验的改良培养基
技术领域
[0001] 本发明设及一种用于进行吗I噪试验的改良培养基。
【背景技术】
[0002] 吗I噪试验是指有些细菌如大肠埃希菌、变形杆菌、霍乱弧菌等能分解培养基中的 色氨酸生成吗I噪（說基质），经与试剂中的对二甲基氨基苯甲醒作用，生成玫瑰吗I噪而呈红 色，则为吗I噪试验阳性。
[0003] 现有的吗I噪试验方法为： 根据实验室使用量，配制300~500ml 1%普通蛋白腺水，取2ml分装于12 X 150mm试管 中，加盖硅胶塞，115°C 10磅15分钟高压灭菌。试剂冷却后，装塑料袋扎口，4°C冰箱保存。
[0004] 反应试剂： Kovac试剂:对二氨基苯甲醒lOg 纯戊醇 150ml 纯浓盐酸 50ml 先将试剂对二氨基苯甲醒溶于纯戊醇中，缓慢加入纯浓盐酸即成。
[0005] 试验方法:挑取待检测纯培养物接种培养基。于35°C培养，传统方法培养18~2地。
[0006] 结果观察:培养后，沿管壁徐徐加入Kovac试剂2~3滴，使分成两层，与两者液面接 触处出现红色为阳性，无色为阴性。
[0007] 质控菌株:阳性菌株：ATCC 25922大肠埃希菌； 阴性菌株：ATCC 029M阴沟肠杆菌。
[000引上述吗I噪试验传统方法检测时间长，需用培养基18-24小时后，方能查看结果，耗 时长。
【发明内容】
[0009] 为了解决现有技术中存在的问题，本发明提供了一种用于进行吗I噪试验的改良培 养基，能够加速细菌生长，从而减少吗I噪试验所需时间。
[0010] 本发明的第一个目的是提供一种用于进行吗I噪试验的改良培养基，所述培养基由 W下质量体积百分含量的各组分组成:1%膜蛋白腺水，1%的色氨酸。
[0011] 有些细菌可W分解色氨酸生成吗I噪可W与二甲基氨基苯甲醒反应生成红色的玫 瑰吗I噪，因此可根据细菌能否分解色氨酸产生吗I噪来鉴定菌种，所W加入色氨酸能够加快 试验速度。
[0012] 本发明的第二个目的是提供用于进行吗I噪试验的改良培养基的制备方法，在1%膜 蛋白水中加入1%的色氨酸，高压灭菌即得。
[0013] 本发明的第=个目的是提供改良培养基在吗I噪试验中的应用。
[0014] 本发明的第四个目的是提供一种吗I噪试验方法，步骤如下： (1)制备培养基:在1%膜蛋白水中加入1%的色氨酸，高压灭菌； (2) 制备反应试剂： Kovac试剂:对二氨基苯甲醒 lOg 纯戊醇 150ml 纯浓盐酸 50ml 先将试剂对二氨基苯甲醒溶于纯戊醇中，缓慢加入纯浓盐酸即成； (3) 进行试验:挑取待检测纯培养物接种本发明的培养基，于35 °C培养，培养4~化； (4) 结果观察:培养后，沿管壁徐徐加入Ko vac试剂2~3滴，使成两层，与两者液面接触 处出现红色为阳性，无色为阴性。
[0015] 作为优选，在试验时，还使用质控菌株进行质控，阳性质控菌株为ATCC 25922大肠 埃希菌，阴性质控菌株为ATCC 029M阴沟肠杆菌。
[0016] 应用本发明的培养基进行吗I噪试验能够加速细菌生长，从而减少吗I噪试验所需时 间，使时间缩短至4-6个小时。
【具体实施方式】
[0017] W下的实施例便于更好地理解本发明，但并不限定本发明。下述实施例中的实验 方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为市 售。如无特殊说明，本发明中"妃'为质量体积百分比。
[001引实施例1 本发明提供一种用于进行吗I噪试验的改良培养基，配方为： 1%膜蛋白腺水(青岛海博生物科技有限公司，即取1克膜蛋白腺水干粉加100ml水溶 解）、1%的色氨酸。
[0019] 本发明的用于进行吗I噪试验的改良培养基的制备方法为： 根据实验室使用量，配制1%膜蛋白腺水(代替普通蛋白腺水)培养基300~500ml，另加 入1%的色氨酸，取0.5ml加入2ml西林瓶中，封口。115°C 10磅15分钟高压灭菌。试剂冷却后， 室溫保存。
[0020] 应用本发明的改良培养基进行吗I噪试验的具体方法为： (1))反应试剂的制备： Ko vac试剂:对二氨基苯甲醒 lOg 纯戊醇 150ml 纯浓盐酸 50ml 先将试剂对二氨基苯甲醒溶于纯戊醇中，缓慢加入纯浓盐酸即成。
[0021] (2)试验方法:挑取待检测纯培养物接种本发明的培养基，于35°C培养，培养4~ 6h〇
[0022] (3)结果观察:培养后，沿管壁徐徐加入Kovac试剂2~3滴，使成两层，与两者液面 接触处出现红色为阳性，无色为阴性。
[0023] 质控菌株:阳性菌株：ATCC 25922大肠埃希菌； 阴性菌株：ATCC 029M阴沟肠杆菌。
[0024] 分别应用不同的培养基，相同的吗I噪试验条件及方法，对不同待检菌株进行试验， 培养时间如表1所示，检测结果均相同。 表1
最后应说明的是：w上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管 参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可W对 前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在 本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护 范围之内。
【主权项】
1. 一种用于进行吲哚试验的改良培养基，其特征在于：所述培养基由以下质量体积百 分含量的各组分组成:1%胰蛋白胨水，1%的色氨酸。2. 权利要求1所述的用于进行吲哚试验的改良培养基的制备方法，其特征在于:在1%胰 蛋白水中加入1 %的色氨酸，高压灭菌即得。3. 权利要求1所述的改良培养基在吲哚试验中的应用。4. 一种吲哚试验方法，其特征在于:步骤如下： (1) 制备培养基:在1%胰蛋白水中加入1%的色氨酸，高压灭菌;所述百分比为质量体积 百分比； (2) 制备反应试剂： Kovac试剂:对二氨基苯甲醛 10g 纯戊醇 150ml 纯浓盐酸 50ml 先将试剂对二氨基苯甲醛溶于纯戊醇中，缓慢加入纯浓盐酸即成； (3) 进行试验:挑取待检测纯培养物接种本发明的培养基，于35°C培养，培养4~6h; (4) 结果观察:培养后，沿管壁徐徐加入Kovac试剂2~3滴，使成两层，与两者液面接触 处出现红色为阳性，无色为阴性。5. 根据权利要求4所述的方法，其特征在于:在试验时，还使用质控菌株进行质控，阳性 质控菌株为ATCC 25922大肠埃希菌，阴性质控菌株为ATCC 029M阴沟肠杆菌。
【文档编号】C12R1/19GK106047982SQ201610507992
【公开日】2016年10月26日
【申请日】2016年7月1日
【发明人】车团结, 刘刚, 魏莲花, 邹凤梅, 常运朝, 张莹, 冯海霞
【申请人】兰州百源基因技术有限公司