烷基?n?乙酰氨基葡萄糖苷的制造方法

烷基?n?乙酰氨基葡萄糖苷的制造方法
【专利摘要】提供一种以低成本且简便、高效地获得作为杂质的N?乙酰葡萄糖胺的含量少的烷基?N?乙酰氨基葡萄糖苷的方法。一种烷基?N?乙酰氨基葡萄糖苷的制造方法，包括通过使烷基?N?乙酰氨基葡萄糖苷和N?乙酰葡萄糖胺的混合物与强碱性阴离子交换树脂接触来降低N?乙酰葡萄糖胺的含量的工序。
【专利说明】
烷基-N-乙酰氨基葡萄糖苷的制造方法
技术领域
[0001] 本发明涉及一种对于皮肤外用剂、肠道双歧杆菌的生长等有用的物质的、以下述 式（1)(式中，R表示碳原子数为1-4的烷基)表示的烷基-N-乙酰氨基葡萄糖苷的制造方法。 进一步具体的，涉及一种通过简便且工业上有利的方法来获得作为杂质的N-乙酰葡萄糖胺 的含量少的、以下述式（1)(式中，R表示碳原子数为1-4的烷基)表示的烷基-N-乙酰氨基葡 萄糖苷的方法。
[0002]

【背景技术】
[0003] N-乙酰葡萄糖胺是葡萄糖的2位上的羟基被乙酰氨基取代的单糖，在动物界广泛 分布存在。人们认为N-乙酰葡萄糖胺具有各种各样的生理作用，据说具有促进透明质酸产 生的效果、皮肤保湿效果、改善关节疼痛的效果等。
[0004]已知通过本发明制造的将N-乙酰葡萄糖胺的1位上的羟基取代为烷氧基的烷基_ N-乙酰氨基葡萄糖苷是具有各种活性的有用的物质。作为其活性，例如，已知有肠道细菌的 双歧杆菌的生长作用(非专利文献1)、抑制幽门螺杆菌繁殖的效果(专利文献1)、促进透明 质酸产生的效果(专利文献2)等。
[0005] 作为烷基-N-乙酰氨基葡萄糖苷的制造方法，已知有使用酸催化剂使N-乙酰葡萄 糖胺和烷基醇直接缩合的方法，作为所使用的酸催化剂，可列举为质子酸、酸性离子交换树 月旨、三氟化硼二乙醚络合物等(非专利文献2、专利文献3、专利文献4、专利文献5)。
[0006] 另外，还已知有使乙酰卤素(acetohalogen)衍生物和醇类缩合后去除保护基来制 造的方法(非专利文献3)、使由N-乙酰葡萄糖胺衍生的恶唑啉衍生物在酸催化剂的存在下 与醇类缩合的方法(专利文献6)。但是，这些方法从工序数量、成本方面来看，并不一定能够 在工业上廉价地制造。
[0007] 另外，还提出了将N-乙酰葡萄糖胺的低聚物、聚合物作为原料，通过几丁质酶等的 酶在烷基醇中糖转移的方法(专利文献7)。在上述那样的制造方法中，经常出现未反应的N-乙酰葡萄糖胺的残存成为问题的情况。根据作为目标的活性，为了有效获得该活性，需要尽 可能减少未反应的N-乙酰葡萄糖胺。并且，由于其容易引起着色，为了抑制配合的制品的着 色，期望极力降低其含量。N-乙酰葡萄糖胺的减少，虽然可以通过硅胶柱色谱法等的精制方 法来实现，但是并不一定就能说是在工业上适用的方法，现状是目前尚未开发出以工业上 可行的方法来分离烷基-N-乙酰氨基葡萄糖苷和N-乙酰葡萄糖胺的有效手段。
[0008] 另一方面，虽然有使用阴离子交换树脂来精制烷基-N-乙酰氨基葡萄糖苷的报告 (非专利文献4)，但是该报告是通过α体和β体的分离来进行的精制，对于烷基-N-乙酰氨基 葡萄糖苷和Ν-乙酰葡萄糖胺的分离没有任何记载。
[0009] 现有技术文献
[0010] 非专利文献
[0011] 非专利文献 1 Archives of Biochemistry and Biophysics ,54,392,（1955)
[0012] 非专利文献2 Methods in Carbohydrate Chemistry，vol ·2，ρ·83,Whistler and ffolform,Eds.,Academic Press,New York,(1963)
[0013] 非专利文献3 Chemische Berichte,86,1331，（1953)
[0014] 非专利文献4 Journal of Biochemistry ,54,109,（1963)
[0015] 专利文献
[0016] 专利文献1日本特许第4811953号公报
[0017] 专利文献2日本特许第4589865号公报
[0018] 专利文献3日本特公昭35-15780号公报
[0019]专利文献4 US4,152,513
[0020] 专利文献5日本特公昭40-7886号公报
[0021] 专利文献6日本特许第4599505号公报
[0022] 专利文献7日本特开平5-244975号公报

【发明内容】

[0023]本发明要解决的问题
[0024]本发明的目的在于提供一种以低成本且简便、高效地获得作为杂质的N-乙酰葡萄 糖胺的含量少的烷基-N-乙酰氨基葡萄糖苷的方法。
[0025]解决问题的手段
[0026]本发明的发明人对于从烷基-N-乙酰氨基葡萄糖苷和N-乙酰葡萄糖胺的混合物中 分离精制烷基-N-乙酰氨基葡萄糖苷的方法，是否可以使用各种吸附剂，特别是合成吸附树 月旨，进一步的离子交换树脂而进行了潜心研究。虽然烷基-N-乙酰氨基葡萄糖苷和N-乙酰葡 萄糖胺都不是在水溶液中离子化的构造，但是令人意外的是，在与强碱性阴离子交换树脂 接触时，发现仅吸附N-乙酰葡萄糖胺而不吸附烷基-N-乙酰氨基葡萄糖苷的现象，从而完成 本发明。
[0027]于是，本发明提供以下内容。
[0028] (1) 一种烷基-N-乙酰氨基葡萄糖苷的制造方法，包括通过使烷基-N-乙酰氨基葡 萄糖苷和N-乙酰葡萄糖胺的混合物与强碱性阴离子交换树脂接触来降低N-乙酰葡萄糖胺 的含量的工序(其中，烷基是指碳原子数为1-4的烷基）。
[0029] (2)根据（1)所述的烷基-N-乙酰氨基葡萄糖苷的制造方法，烷基-N-乙酰氨基葡萄 糖苷和N-乙酰葡萄糖胺的混合物是使N-乙酰葡萄糖胺、几丁质或几丁质低聚糖在酸的存在 下与烷基醇反应而得到的混合物。
[0030] (3)根据（1)所述的烷基-N-乙酰氨基葡萄糖苷的制造方法，烷基-N-乙酰氨基葡萄 糖苷和N-乙酰葡萄糖胺的混合物是使几丁质或几丁质低聚糖在烷基醇与水的混合溶液中 通过具有N-乙酰氨基己糖苷酶活性的酶进行糖转移反应而得到的混合物。
[0031] (4)根据(3)所述的烷基-N-乙酰氨基葡萄糖苷的制造方法，其特征在于，异构体比 为 β:α = 100:0-90:10。
[0032] 发明效果
[0033] 根据本发明，能够以低成本且简便、高效地制造作为杂质的N-乙酰葡萄糖胺的含 量少的烷基-N-乙酰氨基葡萄糖苷。
【具体实施方式】
[0034] 以下，对本发明的实施方式进行说明。
[0035]在本发明中，包括使烷基-N-乙酰氨基葡萄糖苷和N-乙酰葡萄糖胺的混合物与强 碱性阴离子交换树脂接触的步骤，但烷基-N-乙酰氨基葡萄糖苷和N-乙酰葡萄糖胺的混合 物可以使用通过任意方法得到的混合物。这样的烷基-N-乙酰氨基葡萄糖苷和N-乙酰葡萄 糖胺的混合物例如可以通过使N-乙酰葡萄糖胺、几丁质或几丁质低聚糖在烷基醇中在酸或 酶的存在下糖基化来得到。
[0036] N-乙酰葡萄糖胺是葡萄糖的2位上的羟基被乙酰氨基取代的单糖，是在市场上能 够容易地入手的化合物。
[0037]几丁质是N-乙酰葡萄糖胺通过β_1，4键而聚合的化合物，是节肢动物、甲壳类的外 骨骼即外皮、软体动物的壳皮的表面这类的覆盖大多数无脊椎动物的体表的角质层、蘑菇 等菌类的细胞壁等的主成分。据启示称可期待几丁质具有强化免疫、改善高脂血症等的效 果，被认为是很有前景的保健原料。并且，实际上其已经作为保健原料而广泛普遍流通，在 市场上能够容易地入手。
[0038] 几丁质低聚糖是使几丁质化学地或酶促地部分水解而得到的物质，是以Ν-乙酰葡 萄糖胺作为组成糖、包括从单糖(Ν-乙酰葡萄糖胺）到十几糖的聚合物的多种链长的低聚 糖。虽然可期待几丁质上述那样的生理作用，但是由于溶解性较差而存在难以利用的缺点。 于是，将几丁质水解使其容易利用的几丁质低聚糖也在市场上普遍流通。几丁质低聚糖在 水、低级脂肪族醇等的溶剂中的溶解、分散性较好，且容易操作。
[0039] 可在本发明中使用的Ν-乙酰葡萄糖胺、几丁质或几丁质低聚糖如上所述，可以使 用市售品。
[0040] 可在本发明中使用的烷基醇，可示例为甲醇、乙醇、丙醇、丁醇等。其中，特别优选 乙醇。
[0041 ]在使用酸催化剂进行糖基化的情况下，在存在或不存在溶剂的情况下，以Ν-乙酰 葡萄糖胺、几丁质或几丁质低聚糖为1质量份计，使用0.01-05质量份的对甲苯磺酸、樟脑磺 酸、酸性离子交换树脂、硫酸、磷酸、三氟化硼等作为酸催化剂，以Ν-乙酰葡萄糖胺、几丁质 或几丁质低聚糖为1质量份计，使用1-100质量份的烷基醇，以20-120°C反应0.5-100小时， 可得到烷基-N-乙酰氨基葡萄糖苷和N-乙酰葡萄糖胺的混合物。在本反应中，虽然也可以通 过延长反应时间来降低原料的N-乙酰葡萄糖胺的残存量，但是在这种情况下，生成的烷基-N-乙酰氨基葡萄糖苷由于异构化而成为β体和α体的混合物的情况较多。另一方面，如果在 初期阶段结束反应，就能得到纯度比较高的β体，但是在这种情况下，会残存未反应的原料。 优选一边确认反应生成物一边决定反应时间。
[0042]在使用酶进行糖基化的情况下，作为酶可以使用几丁质酶等的具有Ν-乙酰氨基己 糖苷酶活性的各种酶。所使用的酶，可以使用从动植物、微生物分离的酶，但也可以使用市 售品，例如可列举为Yatalase(注册商标，TaKaRa Bio Inc .制造）、Sumizyme(注册商标） NAH25(新日本化学工业公司制造）、几丁质酶(SIGMA公司制造）、几丁质酶(和光纯药公司制 造 ）、Akon CHL(洛东化成工业公司制造）、Denazyme(注册商标）CBB_Pl(Nagase ChemteX Corporation制造）、Denazyme(注册商标）CET-P1 (Nagase ChemteX Corporation制造）、 Glyko(注册商标，Cosmo Bio Co.，Ltd.制造）、卵清溶菌酶(丘比公司制造）、卵清溶菌酶FG (Nagase ChemteX Corporation制造)等，这些酶可以单独使用或两种以上并用。
[0043] 所使用的酶的量，虽然也取决于作为原料的几丁质或几丁质低聚糖的聚合度、溶 剂、酶的活性，但是以几丁质或几丁质低聚糖为1质量份计，可示例为通常为0.001-10质量 份，优选为0.01-0.5质量份。烷基醇的使用量，以几丁质或几丁质低聚糖为1质量份计，使用 1-100质量份，并且，作为反应温度及反应时间，虽然也取决于酶最适温度，但是通过以0-80 °C反应1小时-5日左右，就可以得到烷基-N-乙酰氨基葡萄糖苷和N-乙酰葡萄糖胺的混合 物。作为反应溶剂，优选为水，但也可以在水中混合各种有机溶剂。并且，还可以添加磷酸缓 冲液等调节pH。
[0044] 在上述酶反应中，优先获得烷基-N-乙酰氨基葡萄糖苷的β体。更具体的，虽然因使 用的基质、反应条件的不同而不同，但是作为生成的烷基-Ν-乙酰氨基葡萄糖苷的异构体 比，可示例为β:α = 100:0-90:10的范围内。
[0045]在本发明中，使按照上述方法得到的烷基-N-乙酰氨基葡萄糖苷和N-乙酰葡萄糖 胺的混合物与强碱性阴离子交换树脂接触。通过该工序，仅N-乙酰葡萄糖胺吸附在强碱性 阴离子交换树脂上。此时，烷基-N-乙酰氨基葡萄糖苷未吸附在强碱性阴离子交换树脂上， 仍然溶解在溶剂中。通过利用这样的吸附性能的差异，能够得到去除或减少了N-乙酰葡萄 糖胺的烷基-N-乙酰氨基葡萄糖苷溶液。
[0046]作为可使用的强碱性阴离子交换树脂，并没有特别限制，但可示例为DIAI0N(注册 商标）SA10A、SA12A、SA11A、NSA100、UBA120、SA20A、PA306S、PA308、PA312、PA316、PA318L、 ?八408、？4412、？4418、冊六25以以上为三菱化学公司制造）^11^64^6(注册商标）11^-400、 IRA-400J、IRA-401、IRA-402、IRA-402BL、IRA-404J、IRA-410、IRA-410J、IRA-411、IRA-910CT、IRA-900、IRA-900J、IRA-904、IRA-910、IRA-958、IRA-458RF(以上为Oregano Corporation 制造)等。
[0047]烷基-N-乙酰氨基葡萄糖苷和N-乙酰葡萄糖胺的混合物与强碱性阴离子交换树脂 的接触工序可以是批量式、柱式中的任一种，但是在工业化生产规模中一般为柱式，作为处 理条件，可示例为使烷基-N-乙酰氨基葡萄糖苷和N-乙酰葡萄糖胺的混合物的水溶液以空 间速度(SV) =0.1-20/小时左右、优选为0.5-10/小时进行通液。
[0048]所使用的强碱性阴离子交换树脂的量，虽然还因交换容量、处理方法、处理时间等 的不同而不同，但是每lmeq交换容量的强碱性阴离子交换树脂可以处理O.lSmmol-0.25mmol左右的N-乙酰葡萄糖胺。
[0049] 处理后的强碱性阴离子交换树脂可以通过使用酸溶液、水、碱溶液等的常规方法 进行清洗来重复再生使用。
[0050] 通过对烷基-N-乙酰氨基葡萄糖苷和N-乙酰葡萄糖胺的混合物进行上述那样的强 碱性阴离子交换树脂处理，作为烷基-N-乙酰氨基葡萄糖苷与N-乙酰葡萄糖胺的比例，能够 将处理前40-60:60-40左右的比例范围变为90-10:100-0左右的范围。
[00511按照以上方式得到的、N-乙酰葡萄糖胺的含量少的烷基-N-乙酰氨基葡萄糖苷溶 液可以直接以水溶液的形态使用，也可以经过滤、溶剂的蒸馏去除、乙醇提取、活性炭处理 等的精制工序制成浓缩物。进一步的，可以在浓缩前或浓缩后，单独或两种以上混合地添加 水、乙醇、丙醇、乙二醇、丙二醇、二丙二醇、1，3_ 丁二醇、甘油、己二醇、苯甲酸苄酯、柠檬酸 三乙酯、邻苯二甲酸二乙酯、氢化松香酸甲酯(Hercolyn)、中链脂肪酸甘油三酯等的稀释剂 来制剂化。另外，还可以根据期望在上述浓缩前或浓缩后，添加脂肪酸单甘油酯、脂肪酸二 甘油酯、脂肪酸三甘油酯、丙二醇脂肪酸酯、蔗糖脂肪酸酯、聚甘油脂肪酸酯、卵磷脂、改性 淀粉、失水山梨醇脂肪酸酯、皂树提取物、阿拉伯胶、黄蓍胶、瓜尔胶、刺梧桐树胶、黄原胶、 果胶、海藻酸及其盐类、卡拉胶、明胶、酪蛋白、糊精、环糊精、单糖类、二糖类、多元醇等的表 面活性剂、赋形剂，或者可以不添加而是通过采用喷雾干燥、真空干燥、冷冻干燥等的适宜 的干燥手段进行干燥制成粉末状。
[0052]根据本发明得到的烷基-N-乙酰氨基葡萄糖苷可以在各种饮食品、保健食品、化妆 品、医药品等中使用。
[0053]接着，列举实施例进一步具体地对本发明进行说明。
[0054] 实施例
[0055]在以下的实施例中，以下述测定条件进行高效液相色谱法(HPLC)分析。
[0056] 柱:Asahipack NH2P-50 4E(昭和电工公司制造，4.6X250mm)
[0057] 移动相:75 %乙腈水溶液 [0058]流速:0.4mL/分钟 [0059]温度：35Γ
[0060] 检测:UV210nm(N-乙酰基的吸收）
[0061] (实施例1)甲基-N-乙酰氨基葡萄糖苷的制造
[0062]向100mL的反应烧瓶中加入5.4g的N-乙酰葡萄糖胺（东京化成工业公司制造）、 54.0g的甲醇及0.3g的对甲苯磺酸，在加热回流下反应8小时。反应后，HPLC分析的结果是， 甲基-N-乙酰-α-氨基葡萄糖苷、甲基-N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷、N-乙酰葡萄糖胺的面积％ 分别为 16.3%、32· 5%、14.5%。
[0063] 将约100g(约200mL，约1.3meq/mL)离子交换树脂DIAI0N(注册商标）SA10A(0H型） (三菱化学公司制造)填充到内径为4cm的柱中（作为树脂，内径为4cm X 16cm)。将上述反应 液以SV (空间速度）=5/小时从柱的上部进行通液。在全部反应液从柱中的树脂的上端流入 到树脂中后，从树脂的上端连续供给水，使从柱下端的流出不会停止地进行。采集从柱下端 流出的溶液1200mL。在减压浓缩、减压干燥得到的溶液时，得到4.3g结晶物。对该结晶物用 HPLC进行分析的结果是，甲基-N-乙酰-α-氨基葡萄糖苷、甲基-N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷的 面积％分别为30.6 %、60.9 %。并且，没有检测出Ν-乙酰葡萄糖胺。收率为76 %。
[0064](实施例2)正丁基-Ν-乙酰氨基葡萄糖苷的制造
[0065]向100mL的反应烧瓶中加入5.4g的Ν-乙酰葡萄糖胺（东京化成工业公司制造）、 54.0g的1-丁醇及0.3g的对甲苯磺酸，以60 °C反应8小时，接着以100 °C反应2小时。反应后， HPLC分析的结果是，正丁基-N-乙酰-α-氨基葡萄糖苷、正丁基-N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷、N-乙酰葡萄糖胺的面积％分别为37.7 %、16.9 %、8.2 %。
[0066] 将约100g(约200mL，约1.3meq/mL)离子交换树脂DIAI0N(注册商标）SA10A(0H型） (三菱化学公司制造)填充到内径为4cm的柱中（作为树脂，内径为4cm X 16cm)。将上述反应 液以SV (空间速度）=5/小时从柱的上部进行通液。在全部反应液从柱中的树脂的上端流入 到树脂中后，从树脂的上端供给l〇〇mL的乙醇后，连续供给水，使从柱下端的流出不会停止 地进行。采集1200mL从柱下端流出的溶液。在减压浓缩、减压干燥得到的溶液时，得到5.9g 结晶物。对该结晶物用HPLC进行分析的结果是，正丁基-N-乙酰-α-氨基葡萄糖苷、正丁基-Ν-乙酰-β-氨基葡萄糖苷的面积％分别为61.9%、24.8%。并且，没有检测出Ν-乙酰葡萄糖 胺。收率为87 %。
[0067](实施例3)乙基-Ν-乙酰-β-氨基葡萄糖苷的制造
[0068]向3L的反应烧瓶中加入1500g离子交换水、4.4g乙酸钠、1.3g冰醋酸及200g的99% 乙醇，用温水浴加热至内温为50°C。在等温下，添加10g(45.2mmol)的几丁质（甲阳化学公司 制造）及2 · 0g的Denazyme(注册商标）CET-P1 (Nagase ChemteX Corporation制造），以50°C 搅拌反应20小时。反应后，用HPLC定量（内部标准法）的结果是，分别以23%的收率生成了乙 基-N-乙酰氨基葡萄糖苷（仅检测出β体），以26%的收率生成了N-乙酰葡萄糖胺。在常压下 加热反应液，蒸馏去除乙醇。以塔顶温度为80°C开始乙醇的馏出，之后持续蒸馏直至塔顶温 度达到100 °C。
[0069] 之后，冷却溶液，通过抽滤去除不溶物。在减压下将水从得到的滤液中蒸馏出去， 使总量为561.7g。向其中加入36g的离子交换树脂DIAI0N(注册商标)SK1B(H型）（三菱化学 公司制造），进行乙酸钠的中和，通过过滤去除树脂。此时，用HPLC对得到的滤液(参考品1) 进行定量（内部标准法）的结果是，与反应后的结果相比较，乙基-N-乙酰氨基葡萄糖苷与N-乙酰葡萄糖胺的组成比未见变化。
[0070] 接着，加入83g离子交换树脂DIAI0N(注册商标）SA10A(0H型）（三菱化学公司制 造），在室温下搅拌1小时。用HPLC分析上清液，确认能够减少N-乙酰葡萄糖胺后，过滤，得到 清澈的滤液。使用旋转蒸发仪浓缩滤液。
[0071] 向得到的浓缩残渣中添加600g的99%乙醇搅拌0.5小时后，过滤，去除不溶物。在 减压下将滤液中的溶剂蒸馏出去后，减压干燥，得到2.2g结晶物(本发明品1)。本发明品1中 含有的乙基-N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷为2. lg(8.4mmol)，N-乙酰葡萄糖胺为0. lg (0.5mmol)。收率为 20%。
[0072] (实施例4)树脂的研究
[0073]进行以下操作，测定在工序S1-S3的各阶段的N-乙酰葡萄糖胺的残存率。将O.lg市 售的N-乙酰葡萄糖胺(东京化成工业公司制造)溶解于10g水中，加入l.Og表1所示的树脂， 搅拌30分钟（S1)。接着，进一步追加4.0g的同一树脂搅拌30分钟（S2)。进一步的，就这样静 置树脂悬浊液16小时（S3)。对于工序S1-S3的各阶段，通过HPLC测定上清液中的N-乙酰葡萄 糖胺浓度，算出残存率。将使用的树脂的种类、结构、S1-S3中的N-乙酰葡萄糖胺的残存率表 示在表1中。
[0074]表 1
[0075]
[0076] 如表1所示，确认强酸性阳离子交换树脂及弱碱性阴离子交换树脂完全不吸附N-乙酰葡萄糖胺，而强碱性阴离子交换树脂均吸附N-乙酰葡萄糖胺。在强碱性阴离子交换树 脂之中，DIAI0N(注册商标)SA10A(三菱化学公司制造)和DIAI0N(注册商标)PA306S(三菱化 学公司制造)吸附得最多。
[0077](实施例5)树脂量的研究
[0078]通过与实施例3同样的方法，制备389g的乙基-N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷浓度为 2.7%、Ν-乙酰葡萄糖胺浓度为2.8%的水溶液(参考品1)，用于以下研究。
[0079] 将约100g(约200mL，约1.3meq/mL)离子交换树脂DIAI0N(注册商标）SA10A(0H型） (三菱化学公司制造)填充到内径为4cm的柱中（作为树脂，内径为4cmX 16cm)。将上述水溶 液以SV(空间速度）=5/小时从柱的上部进行通液。在溶出前端到达柱底部后，对从柱下端 流出的水溶液按照每l〇〇mL进行划分，采集馏分1-12。再有，在参考品1全部从柱中的树脂的 上端流入到树脂中后，从树脂的上端连续供给水，使从柱下端的流出不会停止地进行。对馏 分1-12用HPLC测定乙基-N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷及N-乙酰葡萄糖胺的浓度。
[0080] 馏分1-6完全仅流出乙基-Ν-乙酰-β-氨基葡萄糖苷，而从馏分7确认到Ν-乙酰葡萄 糖胺的流出。在馏分8之前的累计中，乙基-Ν-乙酰-β-氨基葡萄糖苷的回收率为98.0%，乙 基-Ν-乙酰-β-氨基葡萄糖苷:Ν-乙酰葡萄糖胺=99.5:0.5。
[0081] 由上述结果可以认为，虽然使用的强碱性阴离子交换树脂的量因交换容量、处理 方法、处理时间等而不同，但是每lmeq的阴离子交换树脂足可以处理0.18mmol-〇. 25mmol左 右的N-乙酰葡萄糖胺。
[0082](实施例6)制剂化
[0083]向在实施例5中得到的馏分8之前的约800g回收液（乙基-N-乙酰-β-氨基葡萄糖 苷:Ν-乙酰葡萄糖胺=99.5:0.5)中溶解30.9g丙二醇，减压浓缩，得到51.5g浓缩物。以90 °C 对浓缩物进行10分钟的加热杀菌后，冷却，填充在容器中，得到含有20质量％的乙基-N-乙 酰-β_氨基葡萄糖苷的本发明品2。
【主权项】
1. 一种烷基-N-乙酰氨基葡萄糖苷的制造方法，包括通过使烷基-N-乙酰氨基葡萄糖苷 和N-乙酰葡萄糖胺的混合物与强碱性阴离子交换树脂接触来降低N-乙酰葡萄糖胺的含量 的工序，其中，烷基是指碳原子数为1-4的烷基。2. 根据权利要求1所述的烷基-N-乙酰氨基葡萄糖苷的制造方法，其特征在于，烷基-N-乙酰氨基葡萄糖苷和N-乙酰葡萄糖胺的混合物是使N-乙酰葡萄糖胺、几丁质或几丁质低聚 糖在酸的存在下与烷基醇反应而得到的混合物。3. 根据权利要求1所述的烷基-N-乙酰氨基葡萄糖苷的制造方法，其特征在于，烷基-N-乙酰氨基葡萄糖苷和N-乙酰葡萄糖胺的混合物是使几丁质或几丁质低聚糖在烷基醇与水 的混合溶液中通过具有N-乙酰氨基己糖苷酶活性的酶进行糖转移反应而得到的混合物。4. 根据权利要求3所述的烷基-N-乙酰氨基葡萄糖苷的制造方法，其特征在于，异构体 比为 β:α = 100:0-90:10。
【文档编号】C07H15/04GK106068270SQ201580011258
【公开日】2016年11月2日
【申请日】2015年1月15日 公开号201580011258.4, CN 106068270 A, CN 106068270A, CN 201580011258, CN-A-106068270, CN106068270 A, CN106068270A, CN201580011258, CN201580011258.4, PCT/2015/50865, PCT/JP/15/050865, PCT/JP/15/50865, PCT/JP/2015/050865, PCT/JP/2015/50865, PCT/JP15/050865, PCT/JP15/50865, PCT/JP15050865, PCT/JP1550865, PCT/JP2015/050865, PCT/JP2015/50865, PCT/JP2015050865, PCT/JP201550865
【发明人】高林幸子, 小黑大地
【申请人】长谷川香料株式会社