益生菌多克隆发酵的培养基及其制备方法
【专利摘要】本发明涉及生物工程技术领域，具体是一种益生菌多克隆发酵的培养基及其制备方法。按质量分别包括以下成分：5g蛋白胨、3g葡萄糖、3g酵母粉、1g菊糖、1g果糖、1～8g琼脂、0.1g磷酸氢二钾、0.1g葡萄糖酸钙、0.05g葡萄糖酸锌、0.1柠檬酸铁、1000mL水。本发明还公开了一种益生菌多克隆发酵培养基的制备方法。本发明具有获得细菌培养物的数量多、适用于益生菌的多克隆发酵、设备条件要求低、益生菌产量高及生产流程和产品质量容易控制的优点。
【专利说明】
益生菌多克隆发酵的培养基及其制备方法
技术领域
[0001] 本发明涉及生物工程技术领域，具体是一种益生菌多克隆发酵的培养基及其制备 方法。
【背景技术】
[0002] 微生物发酵技术或称为微生物发酵工程，是使用培养基和发酵技术，对微生物进 行工业化的人工培养，从而获得大量的微生物细胞或/和微生物活性代谢产物的技术方法。 因此，微生物发酵工程主要包括微生物菌种、培养基、发酵技术、代谢产物分离提取等环节。 培养基是用于培养微生物的营养基质，其质量的好坏直接影响到微生物菌种的生长繁殖与 代谢活动以及代谢产物的性质与数量。发酵技术是提供适宜微生物生长繁殖的外界条件， 使培养基内的微生物菌种能够进行生长繁殖、代谢和产生代谢产物的技术方法。优良的发 酵技术对微生物菌种的生长繁殖及代谢活动，具有重要的或关键的影响。
[0003] 益生菌是一类对人体健康有益的人体正常菌群微生物。益生菌作为人体重要的保 健食品或医药制剂，已在当今世界进行了广泛的炎及和工业化生产与市场应用。
[0004] 目前国内外对于益生菌的微生物发酵，都是采用传统的细菌学培养基和发酵技术 或工艺。传统的益生菌培养基及其发酵技术或工艺，存在有以下缺点：1、培养基的化学组成 复杂、物理性状浑浊、培养物的细菌数量少、只能用于单克隆发酵。2、传统的发酵技术的设 备条件要求高、生产工艺复杂、生产流程和产品的质量难以控制。
【发明内容】
[0005] 针对上述现有技术中的不足之处，本发明旨在提供一种细菌数量多、适用于多克 隆发酵、设备条件要求低、益生菌产量高及生产流程和产品质量容易控制的益生菌多克隆 发酵的培养基及其制备方法。
[0006] 为解决上述技术问题，本发明益生菌多克隆发酵的培养基，按质量分别包括以下 成分:5g蛋白胨、3g葡萄糖、3g酵母粉、lg菊糖、lg果糖、1~8g琼脂、0. lg磷酸氢二钾、0. lg葡 萄糖酸钙、〇. 〇5g葡萄糖酸锌、0.1柠檬酸铁、1000mL水。
[0007] 优选的，按质量分别包括以下成分，5g蛋白胨、3g葡萄糖、3g酵母粉、lg菊糖、lg果 糖、lg琼脂、O.lg磷酸氢二钾、O.lg葡萄糖酸钙、〇.〇5g葡萄糖酸锌、0.1柠檬酸铁、1000mL水。
[0008] 优选的，按质量分别包括以下成分:5g蛋白胨、3g葡萄糖、3g酵母粉、lg菊糖、lg果 糖、8g琼脂、O.lg磷酸氢二钾、O.lg葡萄糖酸钙、0.05g葡萄糖酸锌、0.1柠檬酸铁、1000mL水。
[0009] -种益生菌多克隆发酵的培养基的制备方法，包括以下步骤：
[0010] 1)按量称取上述各成分，置于容器内，加入l〇〇〇mL水，制得溶液备用；
[0011] 2)向步骤1)的溶液中加入适量的碳酸氢钠，调节溶液PH值，直到溶液PH值为7.6~ 7.8；
[0012] 3)将步骤2)中的溶液分装，然后进行高压蒸汽灭菌，控制温度在121.3°C，时间为 15~30min，得到液体培养基或固体培养基。
[0013] 本发明的益生菌多克隆发酵的培养基及其制备方法具有以下优点：1、化学组成简 单明确，含有细菌和人体代谢活动都必需的基本营养物质、有机矿物质及多种微量元素，因 此更加适宜益生菌的生长繁殖和代谢，有利于益生菌生长现象的观察，也有利于人体服用 后的吸收与利用。2、具有碱性(pH 7.6-7.8)的酸碱度，因此有利于双歧杆菌、乳酸杆菌、嗜 热链球菌等常见益生菌的生长繁殖和代谢活动。3、适用于多克隆发酵，液体的培养基中所 具有的化学与物理性状，使其有利于益生菌形成多克隆生长，因此在益生菌的微生物发酵 生产中，能够用于进行多菌种和菌株的共同或混合培养，形成多克隆生长繁殖和代谢活动， 降低了生产的时间和原料成本。4、采用多克隆发酵技术，设备条件要求低
【具体实施方式】
[0014] 实施例1
[00? 5 ]按量称取以下成分，5g蛋白胨、3g葡萄糖、3g酵母粉、1 g菊糖、1 g果糖、1 g琼脂、0.1 g 磷酸氢二钾、O.lg葡萄糖酸钙、〇.〇5g葡萄糖酸锌、0.1柠檬酸铁、1000mL水。置于容器内，制 得溶液备用；向溶液中加入适量的碳酸氢钠，调节溶液PH值，直到溶液PH值为7.6~7.8;然 后将溶液进行分装，然后进行高压蒸汽灭菌，控制温度在121.3°C，时间为15~30min，制得 液体培养基。
[0016] 实施例2
[00?7]按量称取以下成分，5g蛋白胨、3g葡萄糖、3g酵母粉、1 g菊糖、1 g果糖、8g琼脂、0.1 g 磷酸氢二钾、O.lg葡萄糖酸钙、〇.〇5g葡萄糖酸锌、0.1柠檬酸铁、1000mL水。置于容器内，制 得溶液备用；向溶液中加入适量的碳酸氢钠，调节溶液PH值，直到溶液PH值为7.6~7.8;然 后将溶液进行分装，然后进行高压蒸汽灭菌，控制温度在121.3°C，时间为15~30min，制得 固体培养基。
[0018] 表1为使用本培养基传统发酵方法与多克隆发酵方法的基本特征比较：
[0019]
[0020]
[0021] 由上表可知:使用上述步骤制得的培养基，含有细菌和人体生理活动必需的、性质 明确和安全的营养物质、化学物质和有机矿物质或微量元素，具有碱性(pH 7.6-7.8)的酸 碱度，因此有利于双歧杆菌、乳酸杆菌、嗜热链球菌等常见益生菌的生长繁殖和代谢活动。 也可作为营养液用于人体服用，有利于人体的吸收与利用。其物理性状澄清透明，培养基的 化学组成简单和含有低浓度琼脂（固体培养基的琼脂浓度为8.Og/L，液体培养基的琼脂浓 度为1.0-2. Og/L)，不同于传统固体培养基的琼脂浓度（固体培养基的琼脂浓度为15-20g/ L，液体培养基不含琼脂）。因此具有软琼脂性质的固体培养基，更有利于各种益生菌的生长 繁殖、分离培养及其生长现象的观察。液体培养基中含有少量琼脂，有利于不同的益生菌分 散和形成多克隆分散和悬浮生长，因此能够用于益生菌的多个菌种和菌株的发酵生产。
[0022] 由于细菌在培养基内形成了多克隆生长与发酵，因此可获得极大数量的菌细胞， 使培养物的细菌数量达到十万兆亿个菌落形成单位(CFU)，从而有利于显著提高益生菌的 菌细胞数量及其代谢产物的含量。
[0023]液体的培养基所具有的化学与物理性状，使其有利于益生菌形成多克隆生长。因 此在益生菌的微生物发酵生产中，能够用于进行多菌种和菌株的共同或混合培养，形成多 克隆生长繁殖和代谢活动，降低了生产的时间和原料成本。细菌在液体培养基内形成分散 的多个克隆分布，降低了各菌种和菌株间的相互影响与拮抗作用，从而有利于细菌的长期 存活，有助于提高益生菌产品的保质期和使用效果。
【主权项】
1. 一种益生菌多克隆发酵的培养基，其特征在于：按质量分别包括以下成分：5g蛋白 胨、3g葡萄糖、3g酵母粉、lg菊糖、lg果糖、1~8g琼脂、0 . lg磷酸氢二钾、0. lg葡萄糖酸钙、 0.05g葡萄糖酸锌、0.1柠檬酸铁、lOOOmL水。2. 根据权利要求1所述的益生菌多克隆发酵的培养基，其特征在于:按质量分别包括以 下成分:5g蛋白胨、3g葡萄糖、3g酵母粉、lg菊糖、lg果糖、lg琼脂、0. lg磷酸氢二钾、0. lg葡 萄糖酸钙、〇. 〇5g葡萄糖酸锌、0.1柠檬酸铁、lOOOmL水。3. 根据权利要求1所述的益生菌多克隆发酵的培养基，其特征在于:按质量分别包括以 下成分:5g蛋白胨、3g葡萄糖、3g酵母粉、lg菊糖、lg果糖、8g琼脂、0. lg磷酸氢二钾、0. lg葡 萄糖酸钙、〇. 〇5g葡萄糖酸锌、0.1柠檬酸铁、lOOOmL水。4. 一种益生菌多克隆发酵的培养基的制备方法，其特征在于:包括以下步骤； 1) 按量称取上述各成分，置于容器内，加入lOOOmL水，制得溶液备用； 2) 向步骤1)在溶液中加入适量的碳酸氢钠，调节溶液PH值，直到溶液PH值为7.6~7.8; 3) 将步骤2)中的溶液分装，然后进行高压蒸汽灭菌，控制温度在121.3 °C，时间为15~ 30min，得到益生菌的液体培养基或固体培养基。
【文档编号】C12R1/46GK106085908SQ201610436705
【公开日】2016年11月9日
【申请日】2016年6月17日
【发明人】王和, 王丹霓
【申请人】王和