快速检测mtrr基因多态性试剂盒的制作方法
【技术领域】
[0001]本实用新型涉及基因测序分析领域，具体为一种快速检测叶酸代谢能力MTRR基因rsl801394位点多态性的试剂盒。
【背景技术】
[0002]叶酸(folic acid)也叫维生素B9，是一种水溶性维生素，是合成核酸所必须的元素，是细胞生长和组织修复所必需的物质，更是胚胎发育过程中不可缺少的营养素。研究证实并且机理研究清楚的与叶酸代谢密切相关的基因是MTRR和MTRR。这两个基因变异引起的相应的酶活性降低可阻抑同型半胱氨酸转化为甲硫氨酸，导致低叶酸血症和高同型半胱氨酸血症，从而增加新生儿出生缺陷风险或自发性流产等风险。MTRR基因编码甲硫氨酸合成酶还原酶，MTRR基因第2个外显子处的一个A/G多态，引起MTRR基因编码的蛋白第22个氨基酸由lie变为Met，引起甲基维生素缺乏症，并经常用来研究与脊柱裂、Down综合症、神经管缺陷、白血病等疾病的关系。
[0003]我国的叶酸代谢检测起步较晚，继一代基因测序技术之后发展起来的检测技术，但测序技术需要昂贵的测序仪器，从而限制了推广使用，无法有效广泛地用于临床诊断和科研工作。相对于测序技术，荧光定量PCR技术具有高灵敏度、高特异性，操作简便、快速等特点，因此近年来在临床检测分析中被广泛推广使用。
【实用新型内容】
[0004]本实用新型所解决的技术问题在于提供一种快速检测叶酸代谢相关的MTRR基因两个位点多态性的试剂盒，以解决上述【背景技术】中提出的问题。
[0005]本实用新型所解决的技术问题采用以下技术方案来实现
[0006]快速检测MTRR基因多态性试剂盒，包括盒体以及与盒体相连的翻盖式盒盖，盒体内放置有与盒体尺寸大小相同的海绵托，海绵托上设有八个凹槽，所述凹槽内分别放入反应液I，反应液II，探针I，探针II，野生标准品，杂合标准品，突变标准品，纯化水。
[0007]进一步的，反应液瓶I，反应液瓶II内含有不同的特异扩增引物，PCR酶，dNTPo
[0008]进一步的，探针瓶I，探针瓶II内含有不同的荧光探针。
[0009]进一步的野生标准品内含位点为野生型的基因；所述杂合标准品内含有位点只有一个突变的基因，所述突变标准品内含有位点同时突变的基因。
[0010]本实用新型的优点是:本实用新型特异性强、灵敏度高、稳定、方便，反应更充分、迅速，降低了生产成本。
【附图说明】
[0011]图1为本实用新型一实施方式的试剂盒的结构示意图。
[0012]图2为本实用新型一实施方式的试剂盒的主视图。
[0013]图3为本实用新型一实施方式的侧视图。
[0014]其中:1-盒体；2-翻盖式盒盖；3-海绵托；4-凹槽；5-反应液I ;6_反应液II ;7-探针I ;8-探针II ;9_野生标准品；10_杂合标准品；11-突变标准品；12_纯化水。
【具体实施方式】
[0015]下面结合附图对本实用新型作进一步详细的说明。
[0016]图1至图3示意性地显示了如图1快速检测MTRR基因多态性试剂盒，包括盒体1以及与盒体1相连的翻盖式盒盖2，盒体1内放置有与盒体1尺寸大小相同的海绵托3，海绵托3上设有八个凹槽4，凹槽内分别放置有反应液15，反应液116，探针17，探针118，野生标准品9，杂合标准品10，突变标准品11，纯化水12。
[0017]本实用新型使用方法如下:在检测Rsl80139位点的标本、校准品中加入反应液15，反应液116以及探针17，探针118，探针17中有特意修饰，使得探针只能与Rsl80139位点为A的碱基结合，探针118中的特异修饰使得探针只能与Rsl80139位点为G的碱基结合，只有探针结合后，才能在荧光定量PCR中收集到扩增荧光，根据荧光信号确定改为点的碱基变化，实现SNP的检测。
[0018]通过对探针进行特异修饰，使得不同的探针识别不同的碱基，从而达到很好分离基因型的效果，比普通测序的时间段，灵敏性高，易于推广检测
[0019]以上所述的仅是本实用新型的一些实施方式。对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本实用新型创造构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于发明(本实用新型)的保护范围。
【主权项】
1.快速检测MTRR基因多态性试剂盒，其特征在于:包括盒体以及与盒体相连的翻盖式盒盖，盒体内放置有与盒体尺寸大小相同的海绵托，所述海绵托上设有八个凹槽，所述凹槽内分别放入反应液I，反应液II，探针I，探针II，野生标准品，杂合标准品，突变标准品，纯化水。2.根据权利要求1所述的快速检测MTRR基因多态性试剂盒，其特征在于:所述反应液瓶I，反应液瓶II内含有不同的特异扩增引物，PCR酶，dNTPo3.根据权利要求1所述的快速检测MTRR基因多态性试剂盒，其特征在于:所述探针瓶I，探针瓶II内含有不同的荧光探针。4.根据权利要求1所述的快速检测MTRR基因多态性试剂盒，其特征在于:所述野生标准品内含位点为野生型的基因；所述杂合标准品内含有位点只有一个突变的基因，所述突变标准品内含有位点同时突变的基因。
【专利摘要】本实用新型公开了快速检测MTRR基因多态性试剂盒，包括盒体以及与盒体相连的翻盖式盒盖，盒体内放置有与盒体尺寸大小相同的海绵托，海绵托上设有八个凹槽，所述凹槽内分别放入反应液I，反应液II，探针I，探针II，野生标准品，杂合标准品，突变标准品，纯化水。本实用新型的优点是：本实用新型特异性强、灵敏度高、稳定、方便，反应更充分、迅速，降低了生产成本。
【IPC分类】C12M1/34, C12Q1/68
【公开号】CN204958923
【申请号】CN201520502662
【发明人】吴璇
【申请人】江苏苏博生物医学科技有限公司
【公开日】2016年1月13日
【申请日】2015年7月10日