本发明涉及的是一种日本黄姑鱼鱼骨明胶的制备方法，属于鱼类资源综合利用领域。
背景技术：
鱼骨的主要成分明胶是一种优质的生物材料，被广泛应用于食品、医药和电子领域。由于疯牛病、口蹄疫、禽流感等疾病的发生使人们对畜禽动物明胶的安全性产生了质疑，宗教信仰因素也限制了畜源明胶的应用。来源于水产动物的明胶具备低抗原性、低过敏性、可溶性好等特点，可逐步代替畜禽动物明胶。
日本黄姑鱼，是石首鱼科黄姑鱼属的一种鱼类。分布在朝鲜、日本南部以及中国沿海等地区。日本黄姑鱼精深加工的过程中产生大量的废弃物鱼皮、鱼鳞、鱼骨以及内脏等下脚料，对下脚料进行加工利用有利于提高经济效益。
技术实现要素：
本发明的目的在于克服现有技术存在的不足，而提供一种制备工艺简单，能够充分利用日本黄姑鱼的下脚料，有利于提高经济效益的日本黄姑鱼鱼骨明胶的制备方法。
本发明的目的是通过如下技术方案来完成的，一种日本黄姑鱼鱼骨明胶的制备方法，所述的制备方法包括如下步骤：
(a)水解预处理：先进行鱼骨的清洗，然后进行水解，利用碱性蛋白酶进行水解，水解条件为：温度30—70℃，ph值7—12，料液比0.5—10ml/g，时间0.5—2小时，加酶量100—10000u/g，水解结束后100℃灭酶，其后分离出鱼骨清洗、烘干后组织分碎机制成鱼骨粉；
(b)脱脂：加入200％～400％(w/w)的异丙醇，45-50℃保温4.5—5.5h，离心去除异丙醇，重复脱脂1次，用纯水清洗至无味，去除绝大部分脂肪；
(c)碱处理：用0.1—2.0％(w/w)naoh溶液浸泡脱脂后的日本黄姑鱼鱼鱼皮3.5—4.5h，每隔1h换一次naoh溶液，用去离子水清洗至中性；
(d)酸处理：用0.1—2.0％(v/v)h2so4溶液浸泡经naoh处理并清洗干净后的鱼皮3.5—4.5h，每隔1h换一次h2so4溶液，处理结束后用除水清洗至中性；
(e)提胶：按料液比1∶10—20(w/w)的比率加去离子水，在温度45—55℃中性条件下提取4.5—5.5h；
(f)离心：所得的溶液在7000—9000r/min的条件下离心取上清液；残渣按步骤(e)重复提胶2次；
(g)纳滤浓缩：合并上述胶液，纳滤去除胶液中的大部分水；
(h)喷雾干燥：将纳滤后的胶液进行喷雾干燥，日本黄姑鱼鱼皮明胶产品。
作为优选：所述的步骤(a)中，水解条件为：温度45—55℃，ph值9—11，料液比2—5ml/g，时间1—1.5小时，加酶量1000—8000u/g；
所述的步骤(b)中，加入300％(w/w)的异丙醇，48℃保温5h；
所述的步骤(c)中，用1.0％(w/w)naoh溶液浸泡脱脂后的日本黄姑鱼鱼鱼皮4h；
所述的步骤(d)中，用1％(v/v)h2so4溶液浸泡经naoh处理并清洗干净后的鱼皮4h；
所述的步骤(e)中，按料液比1∶15(w/w)的比率加去离子水，在温度50℃中性条件下提取5h；
所述的步骤(f)中，所得的溶液在8000r/min的条件下离心取上清液；
所述的步骤(g)中，采用的纳滤膜孔径为500da。
本发明具有制备工艺简单，能够充分利用日本黄姑鱼的下脚料，有利于提高经济效益等特点。
具体实施方式
下面将结合具体实施例对本发明作详细的介绍：本发明所述的一种日本黄姑鱼鱼骨明胶的制备方法，其特征在于：所述的制备方法包括如下步骤：
(a)水解预处理：先进行鱼骨的清洗，然后进行水解，利用碱性蛋白酶进行水解，水解条件为：温度30—70℃，ph值7—12，料液比0.5—10ml/g，时间0.5—2小时，加酶量100—10000u/g，水解结束后100℃灭酶，其后分离出鱼骨清洗、烘干后组织分碎机制成鱼骨粉；
(b)脱脂：加入200％～400％(w/w)的异丙醇，45-50℃保温4.5—5.5h，离心去除异丙醇，重复脱脂1次，用纯水清洗至无味，去除绝大部分脂肪；
(c)碱处理：用0.1—2.0％(w/w)naoh溶液浸泡脱脂后的日本黄姑鱼鱼鱼皮3.5—4.5h，每隔1h换一次naoh溶液，用去离子水清洗至中性；
(d)酸处理：用0.1—2.0％(v/v)h2so4溶液浸泡经naoh处理并清洗干净后的鱼皮3.5—4.5h，每隔1h换一次h2so4溶液，处理结束后用除水清洗至中性；
(e)提胶：按料液比1∶10—20(w/w)的比率加去离子水，在温度45—55℃中性条件下提取4.5—5.5h；
(f)离心：所得的溶液在7000—9000r/min的条件下离心取上清液；残渣按步骤(e)重复提胶2次；
(g)纳滤浓缩：合并上述胶液，纳滤去除胶液中的大部分水；
(h)喷雾干燥：将纳滤后的胶液进行喷雾干燥，日本黄姑鱼鱼皮明胶产品。
实施例1：本发明所述的一种日本黄姑鱼鱼骨明胶的制备方法，所述的制备方法包括如下步骤：
(a)水解预处理：先进行鱼骨的清洗，然后进行水解，利用碱性蛋白酶进行水解，水解条件为：温度45—55℃，ph值9—11，料液比2—5ml/g，时间1—1.5小时，加酶量1000—8000u/g，水解结束后100℃灭酶，其后分离出鱼骨清洗、烘干后组织分碎机制成鱼骨粉；
(b)脱脂：加入300％(w/w)的异丙醇，48℃保温5h，离心去除异丙醇，重复脱脂1次，用纯水清洗至无味，去除绝大部分脂肪；
(c)碱处理：用1.0％(w/w)naoh溶液浸泡脱脂后的日本黄姑鱼鱼鱼皮4h，每隔1h换一次naoh溶液，用去离子水清洗至中性；
(d)酸处理：用1.0％(v/v)h2so4溶液浸泡经naoh处理并清洗干净后的鱼皮4h，每隔1h换一次h2so4溶液，处理结束后用除水清洗至中性；
(e)提胶：按料液比1∶15(w/w)的比率加去离子水，在温度50℃中性条件下提取5h；
(f)离心：所得的溶液在8000r/min的条件下离心取上清液；残渣按步骤(e)重复提胶2次；
(g)纳滤浓缩：合并上述胶液，纳滤去除胶液中的大部分水；采用的纳滤膜孔径为500da；
(h)喷雾干燥：将纳滤后的胶液进行喷雾干燥，日本黄姑鱼鱼皮明胶产品。
实施例2：一种日本黄姑鱼鱼骨明胶的制备方法，所述的制备方法包括如下步骤：
(a)水解预处理：先进行鱼骨的清洗，然后进行水解，利用碱性蛋白酶进行水解，水解条件为：温度30℃，ph值7，料液比0.5ml/g，时间0.5小时，加酶量100u/g，水解结束后100℃灭酶，其后分离出鱼骨清洗、烘干后组织分碎机制成鱼骨粉；
(b)脱脂：加入200％(w/w)的异丙醇，45℃保温4.5h，离心去除异丙醇，重复脱脂1次，用纯水清洗至无味，去除绝大部分脂肪；
(c)碱处理：用0.1％(w/w)naoh溶液浸泡脱脂后的日本黄姑鱼鱼鱼皮3.5h，每隔1h换一次naoh溶液，用去离子水清洗至中性；
(d)酸处理：用0.1％(v/v)h2so4溶液浸泡经naoh处理并清洗干净后的鱼皮3.5h，每隔1h换一次h2so4溶液，处理结束后用除水清洗至中性；
(e)提胶：按料液比1∶10(w/w)的比率加去离子水，在温度45℃中性条件下提取4.5—5.5h；
(f)离心：所得的溶液在7000r/min的条件下离心取上清液；残渣按步骤(e)重复提胶2次；
(g)纳滤浓缩：合并上述胶液，纳滤去除胶液中的大部分水；
(h)喷雾干燥：将纳滤后的胶液进行喷雾干燥，日本黄姑鱼鱼皮明胶产品。
实施例3：一种日本黄姑鱼鱼骨明胶的制备方法，所述的制备方法包括如下步骤：
(a)水解预处理：先进行鱼骨的清洗，然后进行水解，利用碱性蛋白酶进行水解，水解条件为：温度70℃，ph值12，料液比10ml/g，时间2小时，加酶量10000u/g，水解结束后100℃灭酶，其后分离出鱼骨清洗、烘干后组织分碎机制成鱼骨粉；
(b)脱脂：加入400％(w/w)的异丙醇，50℃保温5.5h，离心去除异丙醇，重复脱脂1次，用纯水清洗至无味，去除绝大部分脂肪；
(c)碱处理：用2.0％(w/w)naoh溶液浸泡脱脂后的日本黄姑鱼鱼鱼皮4.5h，每隔1h换一次naoh溶液，用去离子水清洗至中性；
(d)酸处理：用2.0％(v/v)h2so4溶液浸泡经naoh处理并清洗干净后的鱼皮4.5h，每隔1h换一次h2so4溶液，处理结束后用除水清洗至中性；
(e)提胶：按料液比1∶20(w/w)的比率加去离子水，在温55℃中性条件下提取5.5h；
(f)离心：所得的溶液在9000r/min的条件下离心取上清液；残渣按步骤(e)重复提胶2次；
(g)纳滤浓缩：合并上述胶液，纳滤去除胶液中的大部分水；
(h)喷雾干燥：将纳滤后的胶液进行喷雾干燥，日本黄姑鱼鱼皮明胶产品。