核酸分子长期保存的方法和实施这种长期保存的包装的制作方法

文档序号:4291133阅读:994来源:国知局

专利名称::核酸分子长期保存的方法和实施这种长期保存的包装的制作方法
技术领域
:本发明属于化工或生物领域,具体涉及一种适合于保存DNA的包装以及DNA分子的长期保存方法。
背景技术
:核酸(nucleicacid)是生物特有的重要的大分子化合物,广泛存在于各类生物细胞中。核酸及其组成单位在生物的个体发育、生长、繁殖、遗传和变异等生命过程中起着重要的作用。核酸主要包括核糖核酸(RNA)或脱氧核糖核酸(DNA)。DNA通常是生命的物质基础,由五种元素---碳、氢、氧、氮、磷构成的四种核苷酸序列。目前,核酸的研究越来越成为生物科学的核心,带动了生物化学、分子生物学和分子遗传学乃至整个生命科学研究的发展。核酸携带有生物遗传信息,并且,不同的生物种类所携带的遗传信息差别较大,而同种类个体之间所携带的遗传信息相对而言差别较小,然而由于核酸的多样性,即使同一种类的不同个体之间也均是有差异的。具有亲缘关系的亲本和子代之间遗传信息较接近,核酸上所携带的遗传信息的鉴别现在也成为鉴定亲缘关系的标志,正在越来越广泛地被应用。此外,核酸作为传递遗传信息的载体,也是极其具有收藏价值的。例如可采集自身或他人的核酸,长期保存,作为纪念。然而,核酸是一种非常不稳定的大分子化合物,其在许多条件下均可能发生降解。造成核酸降解的外界物理因素如温度、湿度、紫外线等;化学因素如pH值、水解反应、氧化反应等;生物因素如酶解及微生物侵染等。这些因素都直接与核酸的构型、分子组成有关。即使在核酸提取的时候,也极易于因操作不当而造成降解。特别是当将核酸作为纪念用途,保存于例如挂件等饰品中时,由于会被佩带于人体或与人体接近,随着人体的活动,易于接触到高温或强光线等不利环境因素,从而更易于造成降解。因此,需要一种可长期保存核酸的包装器具,其具有良好的保护作用,可有效地阻止核酸的降解。
发明内容本发明的目的在于提供一种复合材料组合物。本发明的目的还在于提供由所述复合材料组合物制成的容器。本发明的目的还在于提供含有核酸的饰品。在本发明的第一方面,提供一种复合材料组合物,所述的组合物含有以下组分:(a)双酚A-环氧氯丙垸环氧树脂63-69重量份;(b)聚苯乙烯31-35重量份;和(c)2-(2,-羟基-3,,5,-二叔-甲基苯基)苯并三唑0.15-0.4重量份,并且,组分(a)+(b)+(c)在占复合材料组合物总重量的40-100%。在另一优选例中,组分(a)+(b)+(c)在占复合材料组合物总重量的55-100%;较佳的,组分(a)+(b)+(c)在占复合材料组合物总重量的80-100%;更佳的,组分(a)+(b)+(c)在占复合材料组合物总重量的99-100%。较佳的,各组分的含量如下(a)双酚A-环氧氯丙烷型环氧树脂(b)聚苯乙烯(c)2-(2,-羟基-3,,5,-二叔-甲基苯基)苯并三唑更佳的,各组分的含量如下(a)双酚A-环氧氯丙烷型环氧树脂(b)聚苯乙烯(c)2-(2,-羟基-3,,5,-二叔-甲基苯基)苯并三唑在另一优选例中,所述的聚苯乙烯为65.5-67.5重量份;32-34重量份;和0.2-0.35重量份。66.75重量份;33重量份;和0.25重量份。其中,n是选自20-40(较佳的28-35;更佳的为29-31)的正整数'在另一优选例中,所述的双酚A-环氧氯丙垸型环氧树脂的为其中,m为选自30-50(较佳的35-45;更佳的为39-41)的正整数。在另一优选例中,所述的组合物通过以下方法制备以有机溶剂溶解所述的聚苯乙烯;之后加入双酚A-环氧氯丙烷型环氧树脂和2-(2'-羟基-3',5'-二叔-甲基苯基)苯并三唑;在5055。C的温度下进行溶解和混合;其中,所述的组分(a)+(b)+(c)的总重量与有机溶剂体积的比例为1:(5-15)(g:ml)。在另一优选例中,在进行溶解和混合时,以N,N,N-三丁基-l-丁铵溴化物作为相转移催化剂。在另一优选例中,N,N,N-三丁基-l-丁铵溴化物的用量按照体积比是0.1-0.5%(如0.2%)。最优选的,所述的有机溶剂是三氯甲垸。在另一优选例中,所述的组分(a)+(b)+(c)的总重量与有机溶剂体积比例为1:(8-12);最佳的是约l:10(g:ml)。在另一优选例中,所述方法还包括将充分混合后的复合材料组合物进行成形,从而获得一种容器。在本发明的第二方面,提供一种用于保存核酸的容器,所述的容器是由所述的复合材料组合物制备而成。在另一优选例中,所述的容器长度为2-50rora(较佳的3-20鹏,更佳的5-10irnn),其横截面积在4-2000mm2(较佳的9-300咖2;更佳的25-6Smm2)。在另一优选例中,所述的容器的形状可以是圆柱形、圆球型、螺旋形、长方体形、圆锥形等,或者也可以是不规则的形状。在另一优选例中,所述的容器包括外壳(11)和外壳盖(12);且外壳(ll)与外壳盖(12)可密合。在本发明的第三方面,提供所述的容器的用途,用于保存核酸。在另一优选例中,所述的核酸包括脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)。在本发明的第四方面,提供一种饰品,所述的饰品包括外饰(2),被外饰(2)包被或装载的容器(1),和位于容器(1)内的核酸。在另一优选例中,所述的外饰(2)的材料选自(但不限于)水晶、玻璃、塑料、金属、玛瑙、玉、石材、陶瓷、木材。较佳的,所述的材料是透明的材料。本发明的其它方面由于本文的公开内容,对本领域的技术人员而言是显而易见的。图l显示了核酸保存用的容器的示意图。其中,ll为外壳,lll为核酸的装入口,12为外壳盖。图2显示了饰品的示意图。其中,l为核酸保存用的容器,2为外饰。具体实施例方式本发明人针对目前核酸样品易于降解,难以长期保存等特点,研制了一种可用于长期保存核酸的容器,所述的容器由含有以下组分的复合材料制备而成双酚A-环氧氯丙垸型环氧树脂、聚苯乙烯和2-(2,-羟基-3',5'-二叔-甲基苯基)苯并三唑。本发明人意外地发现,该容器可极好地保护核酸不被降解。如本文所用,术语"含有"或"包括"包括了"包含"、"主要由......构成(制成)"、"基本上由......构成"、和"由......构成"。组合物本发明提供一种复合材料组合物,所述的复合材料组合物含有如表1所述的组分表1<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>本发明人意外地发现,以双酚A-环氧氯丙烷型环氧树脂、聚苯乙烯和2-(2,-羟基-3',5'-二叔-甲基苯基)苯并三唑以适当的配比混合并制成容器后,该容器可极好地保护核酸不被降解。所述的双酚A-环氧氯丙垸型环氧树脂是一种本领域常用的环氧树脂,可通过商购获得,或可通过本领域常规的制备方法制备,例如将双酚A与环氧氯丙烷在碱性催化剂作用下縮聚形成。作为本发明的优选方式,所述的双酚A-环氧氯丙烷型环氧树脂的结构式为其中,m为选自30-50(较佳的35-45)的正整数。所述的聚苯乙烯也是一种本领域常用的材料,其通常无色透明,可由苯乙烯单体经自由基縮聚反应形成。作为本发明的优选方式,所述的聚苯乙烯(人>)中,n为选自20-40(较佳的28-35)的正整数。当用于本发明时,与双酚A-环氧氯丙垸型环氧树脂和聚苯乙烯相配合,所述的2-(2'-羟基-3',5'-二叔-甲基苯基)苯并三唑可发挥优异的吸收紫外线的作用。作为一种优选方式,本发明的组合物可通过以下方式制备而成以三氯甲烷作为溶剂,以N,N,N-三丁基-1-丁铵溴化物作为相转移催化剂,溶解所述的聚苯乙烯;之后加入双酚A-环氧氯丙垸型环氧树脂和2-(2,-羟基-3',5'-二叔-甲基苯基)苯并三唑,充分混合;较佳地,在5055。C的温度下进行溶解和混合。核酸保存用容器本发明还提供了一种用于保存核酸的容器,所述的容器是由本发明所述的复合材料制备而成。所述的容器可通过将上述制备的组合物置于模具中成形而获得,成形的方法是本领域己知的。例如可将所述复合材料置于模具中,加温到60-7(TC,然后降温获得。对所述的容器的形状没有特别的限制,可以是圆柱形、圆球型、螺旋形、长方体形、圆锥形等,或者也可以是不规则的形状。对所述的容器的大小没有特别的限制,主要取决于所需保存的核酸的量。作为本发明的优选方式,所述的容器包括外壳11和外壳盖12,且外壳ll与外壳盖12可密合。核酸可以由外壳11上的装入口111加入到容器中。所述的容器具有结构稳定、抗挤压、防紫外线等作用。对所述的外壳与外壳该之间密合的方式没有特别的限制,可采用本领域常用的方式。例如,通过设置相配合的螺旋结构(旋盖式封闭),或卡式结构;此外,也可采用一些黏合剂(如环氧树脂黏合剂)进行黏合。作为本发明的优选方式,当用于制备饰品时,所述的容器长度为2-50mra,较佳的3-20ram,更佳的5-10mm;其横截面积在4-2000mm2,较佳的9-300mm2,更佳的25-65mra2。作为本发明的优选方式,所述的外壳11或外壳盖12是通过一次成型技术制成的,从而保证DNA分子受到外力挤压和光照作用下保持稳定的化学结构和物理性质。本发明的容器可以是透明的,也可以通过在复合材料中加入一些本领域常用的着色剂(如二氧化钛),使容器具有所需的颜色。本发明还提供了一种饰品,所述的饰品包括外饰2,被外饰2包被或装载的容器l,和位于容器1内的核酸。可通过在外饰上预留放入口,将容器1置于外饰2内部。也可通过黏合材料(如环氧树脂黏合剂)将容器1粘合到外饰2的内部。对于外饰2的材料没有特别的限制,可以是本领域常规用于制备饰品的材料;其形状和大小也可可参照本领域常规的饰品。例如所述的外饰2的材料选自(但不限于)水晶、玻璃、琉璃、塑料、金属、玛瑙、玉、石材、陶瓷、木材。此外,两个或多个包含相同种或不同种核酸的容器可被置于同一外饰中。核酸本发明所述的核酸包括脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)。核酸通常存在于溶液(如缓冲液)中,或被制成冻干粉的形式。由于DNA溶解在液体溶液中,一般常温下只能保存最多一周就会降解,保存在4t大概12个月(冰箱冷藏室),保存在-2(TC度会久一点(冰箱冷冻室)。反复冻融也是造成DNA降解的一种因素。干燥状态的DNA更有利于保存。因此,作为本发明的优选方式,所述的核酸是冻干处理的。核酸的提取是分子生物学研究的基础技术,提取的核酸的纯度及结构完整性是进行基因工程(分子生物学)各项研究所必需的条件。酚抽提法、异丙醇沉淀法和甲酰胺裂解法是提取DNA最为经典的方法,目前很多新方法都是在它们的基础上经过改进而得来的。这三种方法均要利用蛋白酶K和十二烷基硫酸钠(SDS)来消化破碎细胞。在酚抽提法、异丙醇沉淀法中,裂解液先用酚/氯仿(体积比为25:24)去除蛋白质,再分别用乙醇或异丙醇沉淀DNA。甲酰胺法是利用高浓度的甲酰胺解聚蛋白质(各种核蛋白)与DNA的结合,然后利用透析来处理DNA样品。目前也可运用一些全自动核酸提取工作站(如Kurabo公司生产的核酸提取工作站),对样品中的核酸进行全自动的制备。提高核酸的纯度,最大程度减少被降解的风险。在这种工作站中,离心机和机械加样系统整合其中,可实现全自动的制备,完全避免了传统抽提方法的弊端(操作过程繁琐,用时长,且所用试剂有毒性)。利用全自动的核酸制备方法具有以下特点操作简单、自动处理,降低了在核酸制备过程中被污染的风险。本发明的主要优点在于选用合适的材料制备成对于核酸具有良好的保护作用的容器,从而使得核酸可被长期保存(保存时间可超过500年)。将含有核酸的容器置于饰品中,从而使其更有纪念价值。下面结合具体实施例,进一步阐述本发明。应理解,这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。实施例1DNA保护容器1的制作采用的组分配方如下表1。<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>将聚苯乙烯按照上述配方分别称取后置于容器中,然后加入1000ml三氯甲烷,以1.5mlN,N,N-三丁基-l-丁铵溴化物为相转移催化剂使之溶解,然后加入双酚A-环氧氯丙烷型环氧树脂和2-(2,-羟基-3',5'-二叔-甲基苯基)苯并三唑,在53"C下充分混合后,用于制备成形的DNA外壳。根据所需的DNA外壳的形状,制备用于一次成型的模具,所述的模具包括核酸外壳的模具的以及外壳盖的模具。将上述混合的材料加料到模具中,加热至65'C,进行一次定型,从而获得合适的DNA外壳,该外壳的尺寸是长度为10ram,其横截面积在65mm2,外壳盖与外壳可通过螺旋结构密合。按照前述方法,分别获得容器l(配方l,获得5个成品),容器2(配方2,获得5个成品),容器3(配方3,获得5个成品),容器4(配方4,获得5个成品)。所述的容器的示意图如图l所示,其中,ll为外壳,lll为核酸的装入口,12为外壳盖。实施例2全自动的核酸制备法提取DNA运用Kurabo公司的全自动核酸提取工作站,对样品中的DNA进行全自动的制备。提高DNA的纯度,同时最大程度减少被降解的风险。抽取2ml人体静脉血作为样本,置于离心管中离心弃上清,获取下层血细胞,取下层溶液溶解于2ml氯仿/异戊醇(l:l)溶液中,置于全自动核酸提取工作站(Kurabo公司)进行全自动DNA提取。获得溶解于TRIS-EDTA缓冲液中的DNA,将该DNA进行冻干处理,最终获得以干粉状态存在的DNA。实施例3包含DNA的水晶饰品的制备用移液器将上述制备的DNA转移入上述制备的容器中,密封,从而获得内里装有DNA的容器。在水晶饰品的里面预留一个与容器的外形相匹配的空间,在容器的外表面上涂敷一层环氧树脂黏合剂,然后黏合于水晶饰品的内部,从而获得携带DNA的水晶饰品。所述的水晶饰品的示意图如图2。其中,l为核酸保存用的容器,2为外饰。实施例4不同环境下水晶饰品内DNA的稳定性测试为了证明本发明的容器对于核酸样品具有防止降解的作用,本发明人进行了试验。扩大样品量的基础上,按照前述相同的方法提取DNA,制成冻干粉状样品,将各冻干样品分成等量的35份。取20份等量的DNA样品,分别置于本发明人前述制备的容器1(5个),容器2(5个),容器3(5个),容器4(5个)中,每一容器1份。取5份等量的DNA样品,分别置于由褐色玻璃制成的5个形状大小与容器l相同的容器a中。取5份等量的DNA样品,分别置于5个形状大小与容器1相同的容器b中,其中,容器b的材料的配方为双酚A-环氧氯丙烷型环氧树脂(m二40)58重量份、聚苯乙烯(『30)41重量份、2-(2,-羟基-3,,5,-二叔-甲基苯基)苯并三唑l重量份;制备方法同实施例1。取5份等量的DNA样品,分别置于5个形状大小与容器1相同的容器c中,其中,容器c的材料的配方为双酚A-环氧氯丙烷型环氧树脂(n^40)72重量份、聚苯乙烯(『30)27.9重量份、2-(2,-羟基-3,,5,-二叔-甲基苯基)苯并三唑0.l重量份;制备方法同实施例l。在密封装样后,将上述35个容器分别置于35个相同的水晶饰品的内部,制成35个水晶饰品。将上述35个水晶饰品在波长为260nm的紫外光下照射30分钟,然后将各水晶饰品拆开,并从各容器中移取出DNA,采用荧光光度法(g卩PicoGreen荧光试剂与DNA结合能产生可激发荧光的复合物、再用荧光分光光度计对复合物进行定量检测)鉴定DNA的降解情况。结果发现,在较长时间的紫外光照射后,5个以容器1制备的水晶饰品中DNA的降解率为0。/。;5个以容器2制备的水晶饰品中DNA的降解率为0。/。;5个以容器3制备的水晶饰品中DNA的降解率为20%;5个以容器4制备的水晶饰品中DNA的降解率为20%。在较长时间的紫外光照射后,5个以容器a制备的水晶饰品中DNA的降解率为100%;5个以容器b制备的水晶饰品中DNA的降解率为60。/。;5个以容器c制备的水晶饰品中DNA的降解率为80%。在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考,就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解,在阅读了本发明的上述讲授内容之后,本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改,这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。权利要求1.一种复合材料组合物,其特征在于,所述的组合物含有以下组分(a)双酚A-环氧氯丙烷型环氧树脂63-69重量份;(b)聚苯乙烯31-35重量份;和(c)2-(2’-羟基-3’,5’-二叔-甲基苯基)苯并三唑0.15-0.4重量份,并且,组分(a)+(b)+(c)在占复合材料组合物总重量的40-100%。2.如权利要求l所述的复合材料组合物,其特征在于,各组分的含量如下:(a)双酚A-环氧氯丙垸型环氧树脂65.5-67.5重量份;(b)聚苯乙烯32-34重量份;和(c)2-(2,-羟基-3,,5'-二叔-甲基苯基)苯并三唑0.2-0.35重量份。3.如权利要求l所述的复合材料组合物,其特征在于,所述的聚苯乙烯为:其中,n是选自20-40的正整数。4.如权利要求1所述的复合材料组合物,其特征在于,所述的双酚A-环氧氯丙烷型环氧树脂的为其中,m为选自30-50的正整数。5.如权利要求1所述的复合材料组合物,其特征在于,所述的组合物通过以下方法制备以有机溶剂溶解所述的聚苯乙烯;之后加入双酚A-环氧氯丙垸型环氧树脂和2-(2,-羟基-3,,5,-二叔-甲基苯基)苯并三唑;在5055。C的温度下进行溶解和混合;其中,所述的组分(a)+(b)+(c)的总重量与有机溶剂体积的比例为1:(5-15)。6.如权利要求5所述的复合材料组合物,其特征在于,在进行溶解和混合时,以N,N,N-三丁基-l-丁铵溴化物作为相转移催化剂。7.—种用于保存核酸的容器,其特征在于,所述的容器是由权利要求l-6任一所述的复合材料组合物制备而成。8.如权利要求7所述的容器,其特征在于,所述的容器包括外壳(ll)和外壳盖(12);且外壳(11)与外壳盖(12)可密合。9.权利要求7-8任一所述的容器的用途,其特征在于,所述的容器用于保存核酸。10.—种饰品,其特征在于,所述的饰品包括外饰(2),被外饰(2)包被或装载的容器(1),和位于容器(1)内的核酸。全文摘要本发明公开了一种可用于制备核酸保存用容器的复合材料组合物,其包括双酚A-环氧氯丙烷型环氧树脂、聚苯乙烯和2-(2’-羟基-3’,5’-二叔-甲基苯基)苯并三唑。本发明还公开了以该组合物制成的核酸保存用容器,以及含有核酸的饰品。文档编号B65D85/00GK101575441SQ20081003704公开日2009年11月11日申请日期2008年5月7日优先权日2008年5月7日发明者卢莉琼申请人:上海优你生物科技有限公司
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