复合异养硝化菌剂及其在含氨氮废水脱氮处理中的应用的制作方法

专利名称：复合异养硝化菌剂及其在含氨氮废水脱氮处理中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种复合异养硝化菌剂及其在高浓度氨氮废水中的脱氮处理的应用， 属于环境微生物领域。
背景技术：
氨氮是水体中的一种常见污染物，在养殖水体、工业废水、农业废水和垃圾渗滤液中常含高浓度的氨氮，这些废水中的氨氮若未得到有效处理将会给环境和人类的身体健康带来巨大的危害，因此氨氮的去除是污水治理的一个关键问题。污水脱氮一般有物理、化学及生物方法，实践证明，相较前两种方法而言，生物是最经济有效的方法之一，其处理成本低，效果好，且无二次污染，在国内外得到广泛的应用。传统的生物脱氮的基本原理是，氨氮通过硝化作用氧化为硝酸盐，再通过反硝化作用将硝酸盐还原成气态氮从水中逸出，从而达到脱氮的目的。硝化作用是通过自养型硝化细菌完成的，包括两个类群，第一类群为亚硝酸细菌，它们把铵盐氧化为亚硝酸盐；第二类群为硝酸细菌，它们把亚硝酸盐氧化为硝酸盐。反硝化菌一般为兼性细菌，在有氧条件下以氧气为电子受体，在缺氧条件下以硝酸根为电子受体，所以必须在缺氧环境中进行反硝化作用。传统的生物脱氮工艺因将上述两种脱氮微生物作为脱氮“主力军”而存在许多缺点，如(1)硝化过程是在好氧环境中完成的，而反硝化过程是在缺氧环境中进行的，这使得整个脱氮过程必须经过好氧和缺氧两个反应器，工艺比较复杂，调控也比较困难，如A2/ 0工艺、氧化沟工艺、Bardenpho工艺等，从而增加了基建面积和成本；(2)自养型的硝化菌增殖速度慢，代时长(平均IOh以上)，特别是在低温冬季，难以维持较高的生物浓度，造成系统总水力停留时间较长。此外在有大量有机物存在条件下，其对氧气和营养物的竞争不如好氧异养菌，从而导致其难以在系统中成为优势菌；C3)硝化过程会产酸，反硝化过程会产碱，到一定程度会抑制脱氮反应的进行，所以需要定时往硝化池投碱、反硝化池投酸来中和，增加了处理成本和二次污染的风险。自1949年Quastel和kholefield首次以丙酮酸肟作为选择性培养基筛选出产 NO2-的异养硝化菌株以来，异养硝化菌逐渐成为研究热点。目前的研究成果表明，异养硝化菌相比自养硝化菌虽代谢速率慢，但具有生长速率快、细菌生物量高、要求的溶解氧浓度低、能够在偏酸性的环境中生长、代谢活动范围大、可利用的基质多、分布广泛等优点，因此其总体的硝化效果并不比自养硝化菌低。更重要的是，一些异养硝化菌同时也是好氧反硝化菌，这就为同步硝化反硝化的实现奠定了理论基础。同步硝化反硝化能够缩短脱氮流程，节省碳源，降低动力消耗，提高处理能力，简化系统的设计和操作等。但由于影响同步硝化反硝化的因素较多，如D0、C/N比、0RP、污泥形态、PH、温度、污泥龄等都会对同步硝化反硝化产生重要影响，这些因素的微小变化都可能导致反应器中具有同步硝化反硝化功能的菌株成为非优势菌而失去同步硝化反硝化功能，因此实际工作中通过控制反应器的反应条件很难实现同步硝化反硝化。
一般脱氮反应器的活性污泥中含有大量的微生物，这些微生物种类繁多，脱氮能力或强或弱，而通过特定的筛选方法将一些脱氮能力较强的或具有同步硝化反硝化功能的菌株(如异养硝化菌)筛选出来并大量培养制成菌剂，用这种含人工选育过的、具有高效脱氮能力的菌株的菌剂代替活性污泥脱氮，不但具有脱氮高效、使用方便的特点，而且可以在不需复杂调控的条件下实现同步硝化反硝化，节省基建成本。异养硝化菌是 异养硝化菌剂的最重要成份，目前国内外学者筛选出的异养硝化菌也较多，但依然存在单位生物量的氨氧化速率较自养硝化菌慢的问题。此外，目前筛出的大多数异养硝化菌在处理高浓度氨氮废水(NH4+-N浓度大于200mg/L)时，往往有较高浓度的氨氮残留。在筛得异养硝化菌的基础上，一些异养硝化菌剂也陆续被开发出来。中国专利“200810045484. 6”公开了一种异养硝化微生物菌剂、其培养条件和用途，该菌剂对高浓度氨氮有较强的耐受能力，对氨氮的去除率能达到87 88%，但残留的氨氮浓度依然较高，达59mg/L以上，且在处理过程中需定期投加大量的有机碳源。另外中国专利 “200910027019. 4”公开了一种复合异养硝化细菌水质改良固体粉剂或颗粒剂型的制备方法，经该菌剂处理后，水中残留氨氮浓度较低，但其起始氨氮浓度也较低。

发明内容
本发明的目的是克服现有技术中存在的不足，提供一种复合异养硝化菌剂，该复合异养硝化菌剂能解决在C/N比较低的条件下，普通生物脱氮处理中对高浓度氨氮废水脱氨氮率不高的问题。本发明的另一个目的是提供一种复合异养硝化菌剂在含氨氮废水脱氮处理中的应用，使该复合异养硝化菌剂在高效脱除水体中的氨氮的同时，对水体中的总氮也有去除效果，具有同步硝化反硝化的功能。本发明提供的假单胞菌(Pseudomonas sp. )N4，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号CCTCC M 2011416。本发明提供的假单胞菌(Pseudomonas sp. )N5，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号CCTCC M 2011417。本发明提供的节杆菌(Arthrobacter sp. )N6，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号CCTCC M 2011418。本发明保护一种复合异养硝化菌剂，特征是，所述复合异养硝化菌剂含有假单胞菌 CCTCC M 2011416、假单胞菌 CCTCC M 2011417 和节杆菌 CCTCC M 2011418。所述复合异养硝化菌剂还含有驯化菌液。所述驯化菌液、假单胞菌CCTCC M 2011416、假单胞菌CCTCC M 2011417、节杆菌 CCTCC M 2011418的体积比为1 5 1 3 1 3 1 3。所述驯化菌液由活性污泥进行驯化培养得到。本发明还保护一种复合异养硝化菌剂的制备方法，特征是，包括以下工艺步骤(1)驯化菌液的制备取1 2g活性污泥置于200mL驯化培养基中，在20 35°C 的摇床上进行驯化培养，摇床的转速为180 200转/分钟；所述驯化培养以3 4天为一个驯化周期，每一驯化周期结束后取IOmL驯化菌液于置于容器中，再向容器中加入190mL 驯化培养基继续进行驯化培养；每一驯化周期结束后，取驯化菌液以氨试剂检测氨氮去除情况，以格里斯试剂和二苯胺-硫酸试剂检测亚硝酸盐氮和硝酸盐氮积累情况，当向驯化菌液中加入氨试剂、格里斯试剂和二苯胺-硫酸试剂，均不出现沉淀时，即得到驯化菌液；(2)将驯化菌液、假单胞菌CCTCC M 2011416、假单胞菌CCTCC M 2011417和节杆菌CCTCC M 2011418分别于异养硝化培养基上进行扩大培养18 M小时，培养PH值为 6 9，温度为20 30°C，摇床转速为120 200转/分钟；(3)按体积比1 5 1 3 1 3 1 3将驯化菌液、假单胞菌CCTCC M 2011416、假单胞菌CCTCC M 2011417和节杆菌CCTCC M 2011418的菌液混合，即得到所述的复合异养硝化菌剂。所述驯化培养基的成份为(1)柠檬酸三钠，5. Og ；⑵NH4Cl, 1. Og ； (3) MgSO4 · 7Η20,0. 1 0. 2g ； (4) KH2PO4,0. 5 1. Og ； (5) K2HPO4, 3. 0 4. Og ； (6) NaCl，0. 5g ； (7)微量元素溶液，ImL ； (8)蒸馏水，999mL ；所述微量元素溶液成份为=CaCl2 5. 5g，ZnSO4 2. 2g, MnCl2 · 4H20 5. 0g, FeSO4 · 7H20 5. Og, (NH4) 6Mo702 · 4H20 1. lg, CuSO4 · 5H20 1. 6g, CoCl2 · 6H20 1. 6g, H2O IOOOmL0所述异养硝化培养基的成份为⑴柠檬酸三钠、琥珀酸钠或乙酸钠，5. 0 8. Og ； (2) NH4Cl, 1. 0 1. 7g ； (3)MgSO4 ‘ 7H20,0. 1 0. 2g ； (4) KH2PO4,0. 5 1. Og ； (5) K2HPO4, 1. 0 3. Og ； (6)NaCl,0. 5g ； (7)微量元素溶液，ImL ； (8)蒸馏水，999mL，所述微量元素溶液成份为CaCl2 5. 5g, ZnSO4 2. 2g, MnCl2 · 4H20 5. Og, FeSO4 · 7H20 5. Og, (NH4)6Mo7R · 4H20 1. lg, CuSO4 · 5H20 1. 6g, CoCl2 · 6H20 1. 6g, H2O IOOOmL0本发明还保护一种复合异养硝化菌剂在含氨氮废水脱氮处理中的应用，特征是 将所述复合异养硝化菌剂按0. 1 5%的接种量接入含氨氮的水体中，所述复合异养硝化菌剂中的活菌数为IO9 IOltl个/mL，处理条件为温度20 35°C，pH为6 9，曝气时间为48 72小时。所述含氨氮水体经复合异养硝化菌剂脱氮处理后，氨氮脱除率> 99%。本发明的有益效果1、本发明所使用的复合异养硝化菌剂对高浓度氨氮废水有较强的耐受能力，可用于氨氮浓度高达400mg/L以上的废水的脱氮处理；2、本发明所使用的复合异养硝化菌剂对高浓度氨氮废水有较高的去除能力，氨氮去除率可达99%以上，可显著降低水体中的氨氮含量，改善水质状况；3、本发明所使用的复合异养硝化菌剂在脱氨氮过程中所需的有机碳源少，C/N比在3左右即可达到理想的脱氨氮效果，节省了脱氮费用；4、本发明所使用的复合异养硝化菌剂在脱氨氮过程中无亚硝态氮和硝态氮的积累，在脱除氨氮的同时亦可有效降低总氮，具有同步硝化反硝化功能；5、本发明所使用的复合异养硝化菌剂使用方便、用量少，可直接投入水体中使之形成优势菌种。


图1为本发明对照例一中8株菌株m N8的脱氨氮效果图，横坐标为菌株类别， 纵坐标为氨氮浓度，单位为mg/L。图2为本发明对照例二中配伍菌株的脱氨氮效果图，横坐标为菌株配伍方式，纵坐标为氨氮浓度，单位为mg/L。图3为本发明 实施例三中复合异养硝化菌剂对高浓度氨氮废水的脱氮效果，横坐标为时间，单位为小时，纵坐标为氨氮浓度，单位为mg/L，曲线从下往上依次代表硝酸盐氮、 亚硝酸盐氮、氨氮、总无机氮、总氮。
具体实施例方式下面结合具体实施例对本发明作进一步说明。本发明所使用的水样检测方法为NH4+-N采用纳氏试剂光度法；Ν02__Ν采用 N-(l-萘基)-乙二胺光度法；Ν03_-Ν采用酚二磺酸光度法；ΤΝ(总氮)、ΤΙΝ(总无机氮)采用过硫酸钾氧化_紫外分光光度法。检测ΝΗ4+-Ν、Ν02--Ν、NO3--N和TIN时，均用经离心后的细菌培养液的上清液；检测TN时则用细菌悬浊液，其中包括无机氮和有机氮。本发明所使用的驯化培养基的成份为⑴柠檬酸三钠，5.0g;(2)NH4Cl，1.0g; (3) MgSO4 ·7Η20，0· 1 0. 2g ； (4) KH2PO4,0· 5 1. Og ； (5) K2HPO4, 3. 0 4. Og ； (6) NaCl，0. 5g ； (7)微量元素溶液，ImL; (8)蒸馏水，999mL;(9)琼脂(制作固体培养基时需加入)，16 20g ；所述微量元素溶液成份为=CaCl2 5. 5g，ZnSO4 2. 2g，MnCl2 · 4H20 5. 0g, FeSO4 · 7H20 5. Og, (NH4)6Mo7O2 · 4H20 1. lg, CuSO4 · 5H20 1. 6g, CoCl2 · 6H20 1. 6g, H2O 1000mL。本发明所使用的异养硝化培养基的成份为(1)柠檬酸三钠、琥珀酸钠或乙酸钠， 5. 0 8. Og ； (2) NH4Cl，1. 0 1. 7g ； (3) MgSO4 · 7Η20,0. 1 0. 2g ； (4) KH2PO4,0. 5 1. Og ； (5)K2HPO4,1.0 3. Og ； (6)NaCl,0. 5g ； (7)微量元素溶液，ImL ； (8)蒸馏水，999mL，所述微量元素溶液成份为=CaCl2 5. 5g, ZnSO4 2. 2g，MnCl2 · 4H20 5. 0g，FeSO4 · 7H20 5. Og, (NH4)6Mo7O2 · 4H20 1. lg, CuSO4 · 5H20 1. 6g, CoCl2 · 6H20 1. 6g, H2O 1000mL。实施例一复合异养硝化菌剂的制备方法，采用以下步骤(1)驯化菌液的制备将自多个污水处理厂取得的活性污泥、化肥厂取得的土壤及有机肥厂取得的有机肥均勻混合，取1 2g混合泥土置于含有200mL驯化培养基的 500mL锥形瓶中，在20 35°C的摇床上进行驯化培养，摇床的转速为180 200转/分钟； 所述驯化培养过程以3 4天为一个周期，每一周期结束后取IOmL驯化菌液于置于另一个 500mL的锥形瓶中，再向锥形瓶中加入190mL新鲜的驯化培养基继续进行驯化培养，每一驯化周期结束后均以氨试剂检测氨氮去除情况，以格里斯试剂和二苯胺-硫酸试剂检测亚硝酸盐氮和硝酸盐氮积累情况，当驯化培养基中的氨氮去除较彻底，且亚硝酸盐氮和硝酸盐氮积累较少时，即往驯化菌液中加入氨试剂、格里斯试剂和二苯胺-硫酸试剂不出现沉淀时，认为驯化培养过程完成，即得到驯化菌液；(2)菌株的分离纯化将所述驯化菌液梯度稀释、涂布平板，以本领域的常规方法平板划线分离方法分离纯化菌株；将所有能在平板上生长的菌株接入异养硝化液体培养基中，在30°C、摇床转速180 200转/分钟的条件下培养48小时，检测氨氮残留量与硝态氮、 亚硝态氮的生成量，选取8株脱氨氮效果最好，且硝态氮和亚硝态氮产生量最少的菌株，将其分别命名为 Nl、N2、N3、N4、N5、N6、N7 和 N8 ；(3)最佳脱氨氮效果配伍菌株的获得将上述8株菌三三配伍，组合方式为 N1+N2+N3, N2+N3+N4、N3+N4+N5、N4+N5+N6、N5+N6+N7、N6+N7+N8、N2+N4+N7，其中的 N2、N4、 N7为脱氮效果最优的3株菌，单独作为一组合；每一组合各菌株等量接种，扩大培养后按0. 1 %的总接种量接入起始氨氮浓度约为^0mg/L、C/N = 5. 5的异养硝化培养基中，培养48 小时后检测氨氮浓度的变化，从而获得脱氨氮效果最好的配伍菌株组合N4+N5+N6 ；(4)菌株的种属鉴定分别提取上述菌株N4、N5和N6的基因组，克隆其16 S rDNA，测序得到其16S rDNA长度分别为138^ρ、1271bp、136^p ；经基于GenBank中已收录的种属或性能相近微生物的16S rDNA序列相似性的比对鉴定N4和N5均属假单胞菌属 (Pseudomonas sp.)，N6 属节杆菌(Arthrobacter sp.)，其 16S rDNA 序列分别见序列表的序列1、2和3 ；将该三株菌株进行保藏，N4的保藏名称分别为假单胞菌(I^eudomonas sp. )N4，保藏单位为中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2011年11月M日，保藏编号为 CCTCC M 2011416 ;N5的保藏名称分别为假单胞菌(Pseudomonas sp. )N5，保藏单位为中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2011年11月M日，保藏编号为CCTCC M 2011417 ；N6 的保藏名称分别为节杆菌(ArthrcAacter sp. )N6，保藏单位为中国典型培养物保藏中心， 保藏日期为2011年11月M日，保藏编号为CCTCC M 2011418 ；(5)复合异养硝化菌剂的制备将驯化菌液、假单胞菌CCTCC M 2011416、假单胞菌CCTCC M 2011417和节杆菌CCTCC M 2011418分别于异养硝化培养基上进行扩大培养 18 M小时，培养pH值为6 9，温度为20 30°C，摇床转速为120 200转/分钟；按体积比为1 1 1 1或5 1 1 1或5 3 3 3将驯化菌液、假单胞菌CCTCC M 2011416、假单胞菌CCTCC M 2011417和节杆菌CCTCC M 2011418的菌液混合，即得到所述的复合异养硝化菌剂。对照例一异养硝化菌m N8的脱氮处理，采用以下步骤将实施例一中得到的8株菌株Ni、N2、N3、N4、N5、N6、N7和N8分别接入异养硝化培养基中培养72小时后，进行脱氮处理，脱氮处理效果如图1所示，图1中横坐标为菌株类别，纵坐标为氨氮浓度，单位为mg/L ；由图1可见，在起始氨氮浓度为256. 9mg/L、C/N = 5. 5 的条件下，经72小时培养后，各菌株的脱氮率约在65 80%之间，表明这些菌株附 N8 能耐受较高浓度的氨氮，但硝化脱氮并不彻底，氨氮残留量依然较大。对照例二 配伍菌株的脱氨氮处理，采用以下步骤将实施例一得到的8株菌株三三配伍，组合方式为W+N2+N3、N2+N3+N4、 N3+N4+N5、N4+N5+N6、N5+N6+N7、N6+N7+N8、N2+N4+N7,按 0. 1 % 的接种量接入起始氨氮浓度为261. lmg/L, C/N = 5. 5的人工废水中，在30°C、摇床转速180转/分钟的条件下进行培养，脱氨氮效果如图2所示，图2中横坐标为菌株配伍方式，纵坐标为氨氮浓度，单位为mg/ L ；由图2可见，7种配伍方式的菌株对起始lmg/L的氨氮48小时后的去除率约为69 88%，其中组合N4+N5+N6的效果最好，氨氮去除率为88. 2%，高于任一单菌株的氨氮去除率，说明一些菌株之间存在协同作用，但残留氨氮浓度仍然较高。实施例二 复合异养硝化菌剂的实验室脱氨氮处理，采用以下步骤将菌株N4、N5、N6和驯化菌液分别接入异养硝化培养基进行扩大培养，培养pH值为6，温度为20°C，摇床转速为120转/分钟，培养M小时后将其培养物按1 :1:1:1 的体积比混合，得到复合异养硝化菌剂；将上述复合异养硝化菌剂按0. 的接种量接入起始氨氮浓度约为^0mg/L、C/N = 5. 5的人工废水中，在30°C、摇床转速180转/分钟的条件下培养48小时，定时检测其脱氮效果，并与驯化菌液的脱氮效果比较，结果如表1所示。表1驯化菌液与复合异养硝化菌剂的脱氮效果(n=3 )
含氮化浓度(mg/L)—
合物种驯化菌液ι复合异养硝化菌剂
__Oh241i48hOli24h48h
"NH4+-N261.8士3.12101.5士2.178.7士1.02259.2士2.3378.3士 1.140.48士0.12
"NO2--N0.82±0.0021.07±0.0030.01 士0.002 0.63±0.0011.27士0.0030.04±0.001
"NO3--N0.52士0.0170.08士0.0040.08士0.0050.69士0.0280.12士0.009 0.03士0.002
TlN269.2±2.98105.6±1.7310.1±2.03267.2±3.8283.8士2.181.1±0.25
JN268.5士3.57207.60士4.68131.8士2.36 265.5士4.02189.3士2.33116.3士 1.18由表1可知，在C/N = 5. 5的条件下，驯化菌液对261. 8mg/L的氨氮废水，经48 小时后去除率达96.9%，比任一单菌株和配伍菌株的脱氨氮效率均要高，说明驯化菌液中有许多菌未能分离出来，这些菌株对氨氮的去除却发挥着重要作用。而在将驯化菌液与配伍菌株混合后，氨氮去除率提高至99. 8%，几乎完全去除，氨氮残余为0. 48mg/L,出水水质 (按氨氮计)优于国家地表水II类标准(GB3838-2002)，可见加入脱氨氮效果优异的配伍菌株对驯化菌液的脱氨氮效果有强化作用。在2种脱氮方式过程中，几乎都没有亚硝酸盐氮和硝酸盐氮的产生，总无机氮也几乎与氨氮、亚硝酸盐氮和硝酸盐氮之和相等，证明损失的氨氮除一部分被同化为生物质氮外，其余转变为气体逸出。实施例三复合异养硝化菌剂对高浓度氨氮废水的脱氮处理，采用以下步骤将上述菌株N4、N5、N6和驯化菌液分别接入异养硝化培养基扩大培养，培养pH值为9，温度为30°C，摇床转速为200转/分钟，培养24小时后将其培养物按1 1 1 3 的体积比混合，制成复合异养硝化菌剂；将上述复合异养硝化菌剂按0. 的接种量接入起始氨氮浓度约为450mg/L、C/N = 3. 2的人工废水中，在30°C、摇床转速180转/分钟的条件下进行培养，定时检测其脱氮效果，结果如图3所示，图3中横坐标为时间，单位为小时， 纵坐标为氨氮浓度，单位为mg/L，图3中曲线从下往上依次代表硝酸盐氮、亚硝酸盐氮、氨氮、总无机氮、总氮；由图3可见，培养10小时后氨氮浓度开始快速下降，52小时时氨氮浓度已由起始的446. 9mg/L降至0. 61mg/L，去除率达99. 9%，期间亚硝酸盐氮有一定量的积累，最高积累量为10. 23mg/L，但在60小时时已被完全降解；硝酸盐氮的积累一直不显著；总氮的去除比氨氮稍滞后，总体上随着氨氮的去除而减少，最终去除率为66. 5%，比在起始氨氮浓度为 260mg/L时有大幅提高。总无机氮的去除曲线几乎与氨氮去除曲线重合，结合硝酸盐氮和亚硝酸盐氮积累曲线，可知培养液中无机氮几乎全部由氨氮、亚硝酸盐氮和硝酸盐氮组成，无其他形式的无机氮。因此脱除的氨氮除一部分被菌株同化外，其余均被转化为含氮气体从培养液中逸出。在将氨氮浓度瞬间提高约70% (由约260mg/L提高至450mg/L)的条件下，混合菌株能够快速适应且脱氮效果优异，表明混合菌株耐环境冲击能力较强。实施例四复合异养硝化菌剂对实际废水的脱氨氮处理，采用以下步骤将驯化菌液、菌株N4、N5、N6分别于异养硝化培养基上进行扩大培养20小时，培养PH值为7，温度为25°C，摇床转速为150转/分钟；体积比2 1 1 1将驯化菌液、 假单胞菌CCTCC M 2011416、假单胞菌CCTCC M 2011417和节杆菌CCTCC M 2011418的菌液混合，即得到所述的复合异养硝化菌剂；将复合异养硝化菌剂按5%的接种量分别无锡市某养猪场废水和某焦化厂废水中，该养猪厂废水氨氮浓度465. 2mg/L, CODcr为3785. 5mg/L, pH为7. 8 ；该焦化厂废水氨氮浓度301. 7mg/L, CODcr为1653. 2mg/L, pH为8. 0 ；处理结果如表2和表3所示。表2复合异养硝化菌剂对养猪场废水的脱氨氮效果
权利要求
1.假单胞菌(Pseudomonassp. )N4，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号 CCTCC M 2011416。
2.假单胞菌(Pseudomonassp.)N5，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号 CCTCC M 2011417。
3.节杆菌(Arthrobactersp.)N6，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号CCTCC M 2011418。
4.一种复合异养硝化菌剂，其特征是，所述复合异养硝化菌剂含有假单胞菌CCTCC M 2011416、假单胞菌 CCTCC M 2011417 和节杆菌 CCTCC M 2011418。
5.如权利要求4所述的复合异养硝化菌剂，其特征是所述复合异养硝化菌剂还含有驯化菌液。
6.如权利要求4所述的复合异养硝化菌剂，其特征是所述驯化菌液、假单胞菌CCTCC M 2011416、假单胞菌CCTCC M 2011417、节杆菌CCTCC M 2011418的体积比为1 5 1 3 1 3 1 3。
7.如权利要求4所述的复合异养硝化菌剂，其特征是所述驯化菌液由活性污泥进行驯化培养得到。
8.一种复合异养硝化菌剂的制备方法，其特征是，包括以下工艺步骤(1)驯化菌液的制备取1 2g活性污泥置于200mL驯化培养基中，在20 35°C的摇床上进行驯化培养，摇床的转速为180 200转/分钟；所述驯化培养以3 4天为一个驯化周期，每一驯化周期结束后取IOmL驯化菌液于置于容器中，再向容器中加入190mL驯化培养基继续进行驯化培养；每一驯化周期结束后，取驯化菌液以氨试剂检测氨氮去除情况， 以格里斯试剂和二苯胺_硫酸试剂检测亚硝酸盐氮和硝酸盐氮积累情况，当向驯化菌液中加入氨试剂、格里斯试剂和二苯胺-硫酸试剂，均不出现沉淀时，即得到驯化菌液；(2)将驯化菌液、假单胞菌CCTCCM 2011416、假单胞菌CCTCC M 2011417和节杆菌 CCTCC M 2011418分别于异养硝化培养基上进行扩大培养18 24小时，培养pH值为6 9，温度为20 30°C，摇床转速为120 200转/分钟；(3)按体积比1 5 1 3 1 3 1 3将驯化菌液、假单胞菌CCTCC M 2011416、 假单胞菌CCTCC M 2011417和节杆菌CCTCC M 2011418的菌液混合，即得到所述的复合异养硝化菌剂。
9.如权利要求8所述的复合异养硝化菌剂的制备方法，其特征是所述驯化培养基的成份为(1)柠檬酸三钠，5. Og ； (2) NH4Cl，1. Og ； (3) MgSO4 · 7Η20，0. 1 0. 2g ； (4) KH2PO4, 0. 5 1. Og ； (5)K2HPO4, 3. 0 4. Og ； (6)NaCl, 0. 5g ； (7)微量元素溶液，ImL ； (8)蒸馏水， 999mL ；所述微量元素溶液成份为=CaCl2 5. 5g，ZnSO4 2. 2g，MnCl2 · 4H20 5. 0g, FeSO4 · 7H20 5. Og, (NH4)6Mo7O2 · 4H20 1. lg, CuSO4 · 5H20 1. 6g, CoCl2 · 6H20 1. 6g, H2O 1000mL。
10.如权利要求8所述的复合异养硝化菌剂的制备方法，其特征是所述异养硝化培养基的成份为(1)柠檬酸三钠、琥珀酸钠或乙酸钠，5.0 8. 0g;(2)NH4Cl，1.0 1.7g;(3) MgSO4 · 7Η20，0· 1 0. 2g ； (4)KH2PO4jO. 5 l.Og ； (5)K2HPO4,1. 0 3. Og ； (6)NaCl,0. 5g ； (7)微量元素溶液，ImL ； (8)蒸馏水，999mL，所述微量元素溶液成份为=CaCl2 5. 5g，ZnSO4 2. 2g, MnCl2 · 4H20 5. 0g, FeSO4 · 7H20 5. Og, (NH4)6Mo7O2 · 4H20 1. lg, CuSO4 · 5H20 1. 6g, CoCl2 · 6H20 1. 6g, H2O IOOOmL0
11.一种复合异养硝化菌剂在含氨氮废水脱氮处理中的应用，其特征是将所述复合异养硝化菌剂按0. 1 5%的接种量接入含氨氮的水体中，所述复合异养硝化菌剂中的活菌数为IO9 IOltl个/mL，处理条件为温度20 35°C，pH为6 9，曝气时间为48 72 小时。
12.如权利要求11所述的复合异养硝化菌剂在含氨氮废水脱氮处理中的应用，其特征是所述含氨氮水体经复合异养硝化菌剂脱氮处理后，氨氮脱除率> 99%。
全文摘要
本发明涉及一种复合异养硝化菌剂，特征是，所述复合异养硝化菌剂含有假单胞菌CCTCC M 2011416、假单胞菌CCTCC M 2011417和节杆菌CCTCC M 2011418。所述复合异养硝化菌剂还含有驯化菌液。本发明还保护一种复合异养硝化菌剂在含氨氮废水脱氮处理中的应用，特征是将所述复合异养硝化菌剂按0.1～5％的接种量接入含氨氮的水体中，所述复合异养硝化菌剂中的活菌数为109～1010个/mL，处理条件为温度20～35℃，pH为6～9，曝气时间为48～72小时。本发明所述的复合异养硝化菌剂对高浓度氨氮废水有较强的耐受能力，可对氨氮浓度大于400mg/L的废水进行脱氮处理；本发明所述的复合异养硝化菌剂对高浓度氨氮废水有较高的去除能力，氨氮去除率达99％以上，显著降低水体中氨氮含量，改善水质状况。
文档编号C02F101/16GK102443558SQ201110431799
公开日2012年5月9日 申请日期2011年12月21日 优先权日2011年12月21日
发明者司文攻 申请人:江苏江达生态科技有限公司