专利名称：：用于包封亲水载物的交联亲水空心圆球体的合成和用途的制作方法用于包封亲水载物的交联亲水空心圆球体的合成和用途1.
背景技术：
：使用包封的报道体系的分析是用于研究和检测生物和工业过程中的分析物的重要工具。已经开发了很多包封报道体系的方法，其包含使用交联的纳米胶囊。典型地，这些方法包含用水相乳化有机相以获得水包油乳状液，其中所述乳状液包含多个两亲聚合物和在非水性疏水相中可溶的报道体系。交联剂的加入导致交联纳米胶囊包封的报道体系的形成。尽管这些方法适用于包封水不溶的报道体系，但是仍需要寻找适于包封水溶性报道体系的方法。2.发明概述本文提供了包含水溶性报道体系的交联亲水纳米胶囊。所述纳米胶囊包含亲水聚合物，具有交联的壳区域结构和亲水的核区域结构。可以优化包含纳米胶囊的壳的孔隙率以保持水溶性报道体系，并且同时，允许靶分析物的通过，例如，通过改变交联的壳区域结构的百分比。通常，用于包封报道体系的方法需要报道体系溶于有机相中以维持亲水壳。例如，美国专利号6,393,500描述了用水包油乳状液包封药物活性试剂以形成胶束的方法，所述胶束具有渗透性的交联聚(丙烯酸)壳和聚(己内酯)核。这方法不使用水溶性报道体系，因为水溶性报道体系保留在用于胶束形成的水连续相中。相反，本文描述的交联亲水纳米胶囊由逆胶束制成，所述逆胶束用包含有机溶剂连续相，水，和多个亲水聚合物的逆乳状液系统形成。为了促进水溶性报道体系的包封，将所述报道体系溶于水性缓冲液中并且作为小滴悬浮在有机溶剂连续相中。在一些实施方案中，用于形成逆胶束的聚合两亲物包含两个聚合物嵌段经由可裂解的接头部分连接的亲水聚合物嵌段和疏水聚合物嵌段。所述亲水聚合物嵌段包含四个或更多个亲水单体单元，其可以任选用取代基取代，所述取代基给予所述两亲物亲水性。疏水聚合物嵌段包含四个或更多个疏水单体单元，以及两个或更多个包含官能团的单体单元，所述官能团在交联剂存在下，能彼此交联相邻的聚合物。疏水单体单元包含一个或多个官能团，当其存在时，其给予所述两亲物疏水性。在一些实施方案中，通过用有机相乳化水相，以获得油包水乳状液，来形成包含水溶性报道体系的交联亲水纳米胶囊，其中所述乳状液包含多个两亲聚合物和一个或多个水溶性报道体系。所述两亲物在产生聚合胶束的水性小滴周围聚集，所述水性小滴含疏水壳和含水溶性报道体系的亲水核。将疏水壳交联并且裂解和/或修饰疏水成分以获得亲水壳。在一些实施方案中，亲水聚合物嵌段可从亲水壳裂解以产生中空核。在一些实施方案中，本文描述的水溶性报道体系包含标记的蛋白质和标记的替代物分析物。标记的蛋白质可与标记的替代物分析物接触以形成替代物分析物-标记蛋白质复合物。在一些实施方案中，蛋白质包含荧光部分，这样，在替代物分析物被靶分析物取代时，可检测到荧光部分荧光的增加。在一些实施方案中，当替代物分析物结合到蛋白质时，将标记蛋白质的荧光猝灭。所述猝灭可通过各种不同的机制实现。在一些实施方案中，蛋白质和替代物分析物包含荧光部分，所述荧光部分当彼此紧密接近时能够"自猝灭"。在其它一些实施方案中，借助于猝灭部分可实现猝灭。在其它实施方案中，交联亲水纳米胶囊可用于包封其它水溶性材料，包括治疗剂和诊断剂。在其它实施方案中，包封报道体系可用于检测目的分析物的存在与否。分析物报道体系包含标记蛋白质和标记替代物分析物。标记蛋白质可与标记替代物分析物接触以形成替代物分析物-标记蛋白质复合物。在一些实施方案中，所述蛋白质包含荧光部分，以致当替代物分析物被耙分析物取代时，可检测到荧光部分的荧光增加。3.附图简述图1描述了包含官能团的聚合两亲物，所述官能团能够将疏水取代基转化为亲水取代基，或将亲水取代基转化为疏水取代基；图2描述了聚合两亲物反乳状液条件的组合；图3描述了使用反乳状液条件的聚合两亲物的交联；图4描述了交联逆胶束转化为亲水纳米胶囊；图5描述了将包含两个第二聚合物嵌段部分(A-B》和[(E-F)"-(G-H)J的交联亲水纳米胶囊，转化为含一个聚合物嵌段部分[(E-F、-(G-H)d的交联亲水纳米胶囊；图6说明了典型的报道体系；禾口，图7A-7C描述了用于合成交联亲水纳米胶囊的例示方法。4.详述应当理解，上述一般描述和以下详细描述都仅是例举性的和说明性的，且不受限于本文描述的组合物和方法。在该申请中，除非另外特别陈述，单数的使用包括复数。并且，除特别陈述外，使用"或"意味着"和/或"。类似地，"包含(comprise)"，"包含(comprises)"，"包含(comprising)"，"包括(include)"，"包括(includes)"和"包括(including)"不意欲是限制性的。4.24.1定义如本文使用的，下述术语和词组意欲具有下列含义"两亲聚合物"具有其标准含义并且意欲指的是聚合物或共聚物，其具有至少一个亲水区域结构和至少一个疏水区域结构。"抗体"具有其标准含义且意欲指的是全长以及抗体片段，如本领域已知的，包括Fab，Fab2，单链抗体(例如Fv)，单克隆抗体，多克隆抗体，嵌合抗体，等，或者可通过对整个抗体修饰而生产，或者使用重组DNA技术从新合成的那些。"检测(detect)"和"检测(detection)"具有它们的标准含义，且意欲包括分析物的检测，测量，和表征。"逆胶束"具有它们的标准含义，并且意欲指的是由有机连续相中两亲分子形成的聚集体，这样，将它们的非极性末端或部分与有机相接触，并且它们的极性末端或部分在聚集体内部。逆胶束可采用任何形状或形式，包括但不限于球形，圆柱，圆盘，针状，圆锥，泡，小球，棒，椭球，以及在本文所描述的条件下逆胶束可采取的任意其它形状，或通过两亲聚合物的聚集可釆用的任意其它形状。"蛋白质"具有其标准含义，且意欲指的是蛋白质，寡肽和肽，衍生物和类似物，包括含有非天然存在的氨基酸和氮基酸类似物的蛋白质，及拟肽结构，且包括使用重组技术生产的蛋白质，所述重组技术即通过重组核酸的表达。"猝灭"具有其标准含义，且意欲指的是当在特定波长下测量时，在不考虑实现荧光强度减少的机制情况下，荧光基团或部分的荧光强度的减少。作为具体实例，猝灭可以由于分子碰撞，能量传递如FRET，光诱导的电子传递如PET，荧光基团或部分荧光光谱(颜色)的改变或任何其它机制(或机制的组合)。减少的量不是关键的并且可在宽范围内变化。唯一的要求是所述减少可通过所用的检测系统测定。这样，如果在特定波长荧光信号强度减少任何可测的量，则荧光信号"猝灭"。如果在特定波长其强度减少至少50%，例如50%，60%，70%，75%，80%，85%，90%，95%,96%，97%，98%，99%或甚至100%，则荧光信号"基本上猝灭"。4.3交联的亲水纳米胶囊本发明公开内容提供了交联亲水的纳米胶囊，其可以包封多种水溶性报道体系和试剂(例如，治疗剂，诊断剂等)。在一些实施方案中，可使用本文描述的纳米胶囊向细胞递送包封的报道体系和试剂。在反乳状液条件下，形成交联的亲水纳米胶囊，在所述条件中向含水溶性报道体系或溶解在水性小滴中的试剂的有机溶剂中加入两亲聚合物。两亲聚合物在含水小滴周围组装，产生含疏水壳的反聚合胶束和包含水溶性报道体系的亲水核。加入交联剂导致交联疏水壳的形成。去除或修饰给予所述两亲物水不溶性的官能团，产生了围绕亲水核的交联亲水壳。4.4聚合的两亲物可以用包含有多官能度的单体的聚合物嵌段，合成本文描述的组合物和方法中使用的两亲聚合物。如本文所使用，"聚合物嵌段"或"嵌段"指的是沿聚合物骨架的区域或片段，其特征在于相似的亲水性，疏水性，或其它化学，诸如官能团和/或取代基，其能够促进共聚或与交联剂形成共价键。可选择性改变聚合物嵌段的精确数目和/或组成。例如，在一些实施方案中，两亲聚合物包含两个嵌段，一个亲水嵌段和一个疏水嵌段。在其它实施方案中，两亲聚合物可以包含三，四或更多嵌段。在使用三或更多个嵌段的实施方案中，只要得到的两亲聚合物有足够的疏水和亲水特性以形成逆胶束，则可改变亲水和疏水嵌段的组合。包含两亲聚合物的不同嵌段可通过接头部分直接或间接连接。在--些实施方案中，连接部分用于将嵌段相互连接。根据应用，可选择接头部分以形成永久的连接或暂时的连接。例如，如果需要包含中空核心的纳米胶囊，可裂解的接头部分可用于嵌段的相互连接。典型地，每个嵌段包含一，二，三，四，或更多个单体，它们可通过接头部分直接或间接连接。可选择性地改变单体的精确数目和/或组成。在使用两个或更多个单体的实施方案中，每个单体可以相同，或一些或全部单体可以不同。在一些实施方案中，由亲水和疏水嵌段合成聚合的两亲物。图1说明两亲聚合物的典型实施方案，可以如本文所描述使用所述两亲聚合物。如图1中所说明，两亲聚合物通常包含亲水嵌段(以(A-B),表示)，疏水嵌段(以(E-F)(G-H)。表示)和接头部分(以(C-D),)表示)。亲水嵌段和接头部分可任选被一个或多个取代基取代(以R,，R2，R3，和R4表示)，所述取代基可给予另外的特性。例如，亲水嵌段(A-B),可被R,和/或R2取代，其包括可给予亲水嵌段(A-B),水溶解性的取代基。如图1描述的，疏水嵌段(E-F)-(G-H)。可包含一个或多个官能团RrR6-R7代表第一官能团，RrR9-R,o代表第二官能团，Ru-R12代表第三官能团，且Rn-R"代表第四官能团。所述官能团给予所希望的特性诸如促进聚合，提供可与交联剂反应的反应性基团，或给予聚合物水溶的或水不溶的特性。下面描述适合用于本文描述的组合物和方法的亲水和疏水嵌段。4.4.1亲水嵌段如图1描述的，所述亲水嵌段包含由(A-B),表示的单体单元，其给予所述聚合物嵌段水溶性。可以选择包含亲水嵌段单体单元的数量(用/表示)，只要得到的嵌段具有足够的亲水特征以将得到的两亲聚合物整合为逆胶束。在一些实施方案中，所述亲水嵌段包含4至8个单体，或4至12个单体，或4至16个单体，或4至20个单体，或6至10个单体，或6至14个单体，或6至18个单体或6至20个单体。典型的亲水嵌段包含4，5，6，8，9，10，11，12，13，14，15,16，17，18，19，或20个单体。包含所述亲水嵌段的单体可以经由连接部分直接或间接连接。在一些实施方案中，所述单体经由原子和键直接连接，所述键由每个包含所述亲水嵌段的单体的末端提供。例如，每个单体的末端可包含能够相互形成共价键的互补反应基。众所周知，互补基团对能形成共价键。在一些实施方案中，一个末端包含亲核基团而另一个末端包含亲电子基团。众所周知，"互补的"亲核基团和亲电子基团(或可以适当活化的其前体)可用于实现对生物学的及其它测定状态稳定的连接。表1提供了适合的互补亲核基团和亲电子基团的实例，以及由此形成而得到的键。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>表l<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>*活化的酯，如本领域所理解，一般具有式-c(o)z，其中z是良好的离去基团(例如，氧代琥珀酰亚胺基，氧代磺基琥珀酰亚胺基，1-氧基苯并三唑基等)。**酰叠氮可以重排成异氰酸酯。在一些实施方案中，A和B—起表示一组原子，其提供亲水嵌段的水溶性或亲水性。示例性的(A-B)单体包含-0-CH2-CH2-，NH-CH2-CH2-，禾口/或陽S(0)-CHrCH2-。在一些实施方案中，A和B共同表示一组原子，它们都不提供亲水嵌段的水溶性。在这些实施方案中，用至少一个取代基取代A和/或B，图1中以R,和R2表示，它们将水溶性给予亲水嵌段。在典型的实施方案中，A和B—起是-CH-CH2-并且R,和/或R2可以是-C(0)NH2，-C(O)OH，-C(O)CX,S(V或其组合。4.4.2疏水嵌段如图1所描述的，疏水嵌段通常包含两个不同的单体(E-F)n和(G-H)o。以(E-F、表示的单体或单独地，或在一个或两个由Rs-R6-R7和Rs-R9-R,。表示的官能团存在下，将水不溶性给予所述疏水嵌段。由(G-H)。表示的单体，或者单独地，或者在一个或两个由Ru-R,2和R,3-R,4表示的官能团存在下，提供反应基，所述反应基在交联剂存在下将物理或化学的交联潜力给予疏水嵌段。在一些实施方案中，E和F—起包含一组亲水原子。在这些实施方案中，E禾QF包含至少一个以Rs-R6-R7和/或RrR9-R,o表示的官能团，所述官能团将水不溶性给予疏水嵌段。可通过官能团的一个成员(以单独的"R"取代基表示)，两个成员(以两个"R"取代基表示)，或所有的成员(以包含官能团的所有"R"取代基表示)提供水不溶性。例如，在一些实施方案中，官能团的所有成员包含"R"取代基，所述取代基可向疏水嵌段提供水不溶性。在这些实施方案中，可除去官能团以获得水溶性的嵌段，(E-F)n-(G-H)。。可使用化学或物理方法以除去官能团，所述官能团给予水不溶性以获得包含(E-F、-(G-H)。的水溶性嵌段。适于除去官能团的试剂，包括，但不限于，化学裂解剂，诸如氢氧化物，酸，氟化物和胺，酶裂解剂，诸如酯酶，和物理试剂，诸如光。在一些实施方案中，E和F共同包含一组在水中不溶的原子。在这些实施方案中，至少一个或多个以RrR6-R7禾口/或RrR9-R,。表示的官能团，包含一个或多个R取代基，所述取代基在存在时可向包含(E-F)n-(G-H)。的疏水嵌段提供水不溶性。可除去这些R取代基以获得水溶性成分。例如，如果存在以Rs-R6-R7表示的官能团且R7包含水不溶解性基团，除去R7可获得以Rs-R6表示的水溶性官能团，所述官能团能给予包含(E-FV(G-H)。的嵌段水溶性。在另一个实施例中，如果存在以R8-R9-R^表示的官能团，且Ru)包含水不溶性基团，除去R,o获得以RrR9表示的水溶性官能团，所述官能团能给予包含(E-F)n-(G-H)。的嵌段水溶性。在另--个实施例中，如果两个官能团Rs-R6-R7和RrR9-Ri。都存在，则R7和/或R,o可以包含水不溶性基团，其在去除时获得以R5-R6，以及Rs-R9表示的水溶性官能团，其能给予包含(E-FV(G-H)。的嵌段水溶性。除了R7和/或Ru)给予的疏水特性，R5，R6，118和119可提供其它功能特性。例如，在一些实施方案中，Rs和/或R8可以包含取代基，所述取代基能够聚合一个或多个(E-F)单体。在另一个实施例中，R6和/或Rg可以包含接头部分，其连接R5和R7以及Rs和Ru)。在一些实施方案中，至少一个包含官能团Rs，R^，及R7和Rs，R9，及Ru)的"R"取代基，不是氢。在一些实施方案中，(E-F)—起是-CH(Rs-R6-R7)-CH(R8-R9-R,0)，R5和/或或R8是羰基，R6和/或R9选自氧和氮，且R7禾口'/或R,o选自含4至iJ20个碳原子的烷基，苯基，苄基或三烷基甲硅垸基。在一些实施方案中，(E-F)—起是-CH(R5-R6-R7)-CH(R8-R9-R,0)，R5和/或或Rs是氧，R6禾口/或R9包含羰基，且R7和/或R,o选自含3到10个碳原子的烷氧基，苯氧基，苯甲酸基和三烷基甲硅垸氧基。在一些实施方案中，(E-F)—起是-CH(R5-R6-R7)-CH(R8-R9-R,0)，R5禾卩/或或R8选自氮或胺，R6和/或R9是羰基，且R7和/或Ru)选自含3到IO个碳原子的烷氧基，苯氧基，苯甲酸基和三垸基甲硅烷氧基。在一些实施方案中，(E-F)—起是-CH(R5-R6-R7)-CH(Rs-R9-R,0)，115和/或或R8选自硫酸酯，磷酸酯或硼酸酯，且117和/或R,。选自含4到20个碳原子的垸基，苯基，苄基或三烷基甲硅烷基。在一些实施方案中，(E-F)—起是-CH(R5-R6-R7)-CH(Rs-R9-R,0)，R5和/或或R8是羰基，且R7选自含3到IO个碳原子的烷氧基，苯氧基，苯甲酸基和三烷基甲硅垸氧基。在一些实施方案中，(E-F)—起是-CH2-CH2-N(R5-R7)，R5是羰基，且R7选自含3到IO个碳原子的垸氧基，苯氧基，苯甲酸基和三烷基甲硅烷氧基。在其它实施方案中，(E-F)—起是-CH2-CH-N(Rs-R7)，R5是羰基，且R7选自含3到IO个碳原子的垸氧基，苯氧基，苯甲酸基和三垸基甲硅烷氧基。在其它实施方案中，(E-F)—起是-CH2-CH-0(RrR7)，R5是羰基，且R7选自含3到IO个碳原子的垸氧基，苯氧基，苯甲酸基和三烷基甲硅烷氧基。可选择包含单体(E-F)的单体单元数目(由"表示)，条件是得到的嵌段有足够的疏水特性，以将得到的两亲聚合物整合成逆胶束。在--些实施方案中，疏水嵌段包含4到8个(E-F)单体，或4到12个(E-F)单体，或4到16个(E-F)单体，或4到20个(E-F)单体，或6到10个(E-F)单体，或6到14个(E-F)单体，或6到18个(E-F)单体或6到20个(E-F)单体。典型的疏水嵌段包含4，5，6，8，9，10，11，12，13，14，15，16，17，18，19，或20个(E-F)单体。(E-F)单体可直接连接，或如上对(A-B)单体所述的通过连接部分间接连接。在一些实施方案中，(G-H)单体包含至少一个以Rn-Ru禾卩/或R,rR,4表示的官能团，所述官能团提供反应基，所述反应基在交联剂存在的情况下，给予所述疏水嵌段物理或化学交联潜力。(G-H)可包含多原子单元，其中没有一个原子包含交联潜力或多原子单元，所述多原子单元中一个或多个原子含交联潜力。本领域熟知交联剂反应性，特异性，和溶解性。在Mattson等，MOLBIOLREP.(分子生物学报告)4月；17(3):167-83(1993)，和Double-AgentsCross-linkingReagents,SelectionGuide(Double-AgentsTM交联剂，选择指南)，PierceBiotechnologyInc.(皮尔斯生物技术公司)，2003)中可找到选择适当交联剂的指导。也参见，Wong，1993,ChemistryofProteinConjugationandCross-linking(蛋白质缀合和交联的化学)，CRCPress(CRC出版社)，BocaRaton.官能团Rn-R,2和Ru-RM可包含一个或多个取代基，所述取代基与交联剂是反应性的。例如，在一些实施方案中，Ru-Ru和Ru-Rm可包含亲电子反应基，所述反应基可用亲核试剂交联。在其它实施方案中，Rn-R,2和Rn-R,4可包含亲核反应基，所述反应基可用亲电子试剂交联。适当的互补的亲核和亲电子基团的实例，以及由此形成的所得到的连接，提供在以上的表l中。在一些实施方案中，Rn-R,2和/或Rn-Ri4包含亲电子部分。在这些实施方案中，适当的交联剂包括，但不限于，具有至少两个亲核官能团的亲核试剂，诸如聚胺(例如，乙二胺)，多元醇(polyhydroxols)(例如，乙二醇)，以及聚硫化物(例如，二硫乙烯)。在一些实施方案中，Rn-Ru和/或Rn-R^包含亲核部分。在这些实施方案中，适当的交联剂包括，但不限于，有至少两个亲电子官能团的亲电子试剂，诸如多酸氯化物(例如，己二酰二氯)，包含具有多个Michael受体部分的亲电子试剂(例如，1,2-双马来酰亚胺乙烷)，聚烃(如，二溴化乙烯)，聚异氰酸酯(如，甲苯二异氰酸酯)，以及聚酯(如，双-N-羟基琥珀酰亚胺基己二酸酯)。在一些实施方案中，Ru-R,2和Rn-R，4可包含潜在的阴离子种类，其可与多价金属阳离子交联。2006年3月15日提交的美国专利申请号11/375,825中描述了另一个合适的活性反应部分的实例，题目是"TheUseofAntibody-SurrogateAntigenSystemsforDetectionofAnalytes(抗体陽替代物抗原系统用于分析物的检测)"，将其通过参考全部结合于此，包括，但不限于，可被光，pH，热，或用电化学激活的分子。除了包含交联潜力的反应基团，Rn，R12，R13，和R"可提供其它功能特性。例如，在一些实施方案中，Ru和/或Ru可包含取代基，所述取代基能将使两个或更多个(G-H)单体与四个或更多个(E-F)单体共聚合，且R,2和/或R,4可包含反应官能取代基或基团，其与交联剂形成共价键，或与在相邻的两亲物上的反应性R,2和/或R,4基团形成物理交联键(例如，离子键)。在另一个实例中，Rn和/或Rn可包含能共聚的取代基和给予交联剂反应性的取代基。在一些实施方案中，至少一个包含官能团R5，R6，及R7和Rs，R9，及Ru)的"R"取代基不是氢。在一些实施方案中，(G-H)—起包含-CH(Rn-R,2)-CH(Rn-R,4)-，其中Rn和/或Rn选自羰基，硫酸酯，磷酸酯，或硼酸酯，并且R,2和/或Ri4是亲电子取代基，其选自垸氧基，苯氧基，取代的苯氧基，卤素，N-羟基琥珀酰亚胺基，以及有机的和无机的混合酸酐，如乙酸和磷酸酐。在一些实施方案中，(G-H)—起包含-CH(Ru-Ru)-CH(R"-R,4)-,其中Rn和/或R,3选自羰基，硫酸酯，磷酸酯，或硼酸酯，并且R,2和/或R,4是包含Michael受体的亲电子取代基，诸如乙烯基。在一些实施方案中，(G-H)—起包含-CH(Rn-R,2)-CH(R"-Rm)-，其中Rn和/或Rn选自氧或胺，并且1112和/或R14是选自烷氧基羰基，苯氧基羰基，和卤代羰基的亲电子取代基。在一些实施方案中，(G-H)—起包含-CH(Ru-R!2)-CH(R,3-Rm)-，其中Ru和/或1113选自氧或胺，并且Ru和/或Rm是包含Michael受体的亲电子取代基，其选自马来酰亚胺，乙烯基羰基，炔基羰基，乙烯基砜，和炔基砜。在一些实施方案中，(G-H)—起包含-CH(Rn-R,2)-CH(RirRl4)-，其中Rn和/或R,3是羰基，并且R,2和/或R,4是选自醇，多元醇，胺，多胺，硫化物或聚硫化物的亲核取代基。可以选择包含单体(G-H)的单体单元的数量(由o表示)，条件是得到的嵌段具有足够的交联潜力以形成具有所需孔隙率的交联亲水纳米胶囊。在一些实施方案中，所述疏水嵌段包含2至6个(G-H)单体，或3至6个(G-H)单体，或4至6个(G-H)单体。典型的疏水嵌段包括2，3，4，5，或6个(G-H)单体。所述(G-H)单体可以直接连接，或经由如上对于(A-B)单体所述的连接部分间接连接。4.4.3接头部分如图1中所述，(C-D)m包含用于将亲水嵌段(A-B》连接到疏水嵌段(E-FV(G-H)。的接头部分。典型地，(C-D)包含至少一个可以在亲水嵌段的末端与至少一个原子形成共价连接的原子，和至少一个可以在疏水嵌段的末端与至少一个原子形成共价连接的原子。部分的数量(由o表示)可以是0或1。可以选择接头部分以具有规定的性质。例如，根据特定的应用，所述接头部分在特征上可以是疏水的，在特征上是亲水的，长或短的，刚性的，半刚性的或可弯曲的，持久的或不稳定的。所述接头部分可以任选用一个或多个取代基例如R3和/或R4取代，所述取代基可以是相同的或不同的，因此增强(C-D)的连接化学。在一些实施方案中，与(C-D)组合的任选取代基可以形成能够将另外的分子或物质缀合或连接到所述两亲物的"多价"连接部分。然而，在某些实施方案中，所述接头部分不包括这样的另外的取代基或连接基团。多种的接头部分包含本领域已知的稳定的键，举例并且无限制性地包括烷基二基，取代的垸基二基，亚烷基(alkyleno)(例如，链烷基(alkano))，取代的亚烷基，杂烷基二基，取代的杂烷基二基，杂亚烷基，取代的杂亚垸基，非环的杂原子桥，芳基二基，取代的芳基二基，芳基芳基二基，取代的芳基芳基二基，芳基烷基二基，取代的芳基烷基二基，杂芳基二基，取代的杂芳基二基，杂芳基-杂芳基二基，取代的杂芳基-杂芳基二基，杂芳基烷基二基，取代的杂芳基垸基二基，杂芳基-杂烷基二基，取代的杂芳基-杂烷基二基，等。因而，接头部分可以包括单键，双键，三键或芳族碳-碳键，氮-氮键，碳-氮键，碳-氧键，碳-硫键，硅-氧键，硅-碳键，和这样的键的组合，并且可以因此包括官能度诸如羰基，醚，硫醚，甲酰胺，磺酰胺，脲，氨基甲酸酯，肼，等。在一些实施方案中，所述接头部分具有l-20个非氢原子，其选自由C、N、O、P、和S组成的组，并且由醚、硫醚、胺、酯、甲酰胺、磺酰胺、酰肼、芳族和杂芳族基团的任何组合组成。选择具有适于特殊应用的性质的接头部分在本领域技术人员的能力范围之内。例如，如果需要刚性的接头部分，则所述接头部分可以包括刚性的多肽诸如聚脯氨酸，刚性的多不饱和的垸基二基或芳基二基，联芳基二基，芳基芳二基，芳基烷基二基，杂芳基二基，二杂芳基二基，杂芳基垸基二基，杂芳基-杂芳基二基，等。在需要柔性的接头部分的情况下，所述接头部分可以包括柔性的多肽诸如聚甘氨酸或柔性的饱和链垸基二基或杂链垸基二基。亲水接头部分可以包括，例如，多元醇，聚醚，诸如聚亚烷基二醇，或聚电解质(polydectroyles)，诸如聚季胺。疏水接头部分可以包括，例如，烷基二基或芳基二基。在一些实施方案中，所述接头部分包含肽键。在一些实施方案中，由(C-D)形成的接头部分是不稳定接头。例如，在一些实施方案中，C和D—起是甲硅烷基醚。在该实施方案中，添加氟化物或酸可用于裂解C和D之间形成的连接。在一些实施方案中，C和D—起是酯。在该实施方案中，添加酸或碱可用于裂解C和D之间形成的连接。在一些实施方案中，C和D—起是亚胺。在该实施方案中，添加酸或碱可用于裂解C和D之间形成的连接。在一些实施方案中，C和D—起是烯烃。在该实施方案中，添加高锰酸盐、铬酸盐或臭氧可用于裂解C和D之间形成的连接。在一些实施方案中，C和D—起是酸酐。在该实施方案中，添加酸或碱可用于裂解C和D之间形成的连接。在一些实施方案中，C和D—起是縮醛。在该实施方案中，添加酸可用于裂解C和D之间形成的连接。4.4.4制造交联亲水纳米胶囊的方法合成两亲聚合物的方法是本领域众所周知的。合成在描述于此的方法和组合物中使用的两亲聚合物的典型方法描述在实施例1中。包封一个或多个水溶性报道体系或试剂的交联亲水纳米胶囊可以通过将两亲聚合物悬浮在包含水溶性报道体系的水性小滴的有机悬浮液形成。用于形成交联亲水纳米胶囊的典型方法描述在图2-5中。图2说明水性小滴周围的两亲聚合物产生逆胶束的组装，所述逆胶束包含疏水壳和亲水核心。在没有交联剂的情况下，包含(A-BV(C-D)"E-FXr(G-H)。)的聚合两亲物可溶于有机溶剂中，所述有机溶剂诸如如下所述的那些。如图3中所说明，交联剂的添加导致交联的疏水壳的形成。在所述交联剂存在下，包含(A-B),)-(C-DV(E-F)"-(G-H)。)的聚合两亲物通过Rn-R,2和/或R,3-Rw对于相邻的包含(A-B》)-(C-D)附-(E陽FV(G-H)。)的聚合两亲物形成不溶的连接。如图4中所描述，给予所述疏水嵌段疏水性的官能团的除去或修饰产生交联的亲水壳。如图5中所描述，在一些实施方案中，所述核亲水嵌段可以裂解，留下包含水溶性报道体系或试剂的空心圆球体。制造逆乳状液例如油包水乳状液的方法是本领域众所周知的。用于选择使用油包水乳状液形成逆胶束的适当条件的指导可以在Barton禾卩Capek,1994,在"RadicalPolymerizationinDisperseSystems(分散体系中的基团聚合)"，第186-210页，EllisHorwood中找到。在一些实施方案中，在水溶液的有机悬浮液存在下，可以通过将它们以适当的浓度添加在有机水溶剂体系中而自组装所述两亲聚合物，所述有机水溶剂体系在将所述两亲聚合物定向成逆胶束中是有效的。可以以经验确定两亲聚合物和水相的适当浓度。备选地，主动过程诸如经由加热，声波处理，剪切施加能量，可用于帮助将所述两亲聚合物定向成逆胶束。在描述于此的方法中使用的适合的有机溶剂包括，但不限于，油(例如，石蜡油)，氯化烃(例如，四氯化碳，氯甲苯，二氯苯)和芳香烃(例如，苯，乙苯，萘，硝基苯，四氢呋喃，和二甲苯)。适合的水溶剂包括，但不限于水。描述于此的纳米胶囊和逆胶束可以呈现多种形状，包括球形、圆柱、圆盘、针状、圆椎、泡、小球、棒、椭球，以及通过两亲聚合物的聚集可以采用的任何其它形状。纳米胶囊的尺寸可以大于微米，或小于微米。例如，在包含球形或大多数球形纳米胶囊的实施方案中，所述纳米胶囊可以具有约2nm至约1000nm，约5nm至约200nm，约10nm至约100nm的平均直4§。所述纳米胶囊的交联壳的厚度可以在约0.5nm至约50nm，约1nm至25nm和约3nm至约10nm的范围内。在一些实施方案中，所述交联壳可以包括中性或带电的基团。例如，如实施例l所述，如果疏水聚合物嵌段的主链的显著百分比包括可聚合的单体甲基丙烯酸羟乙酯(HEMA)的三甲代甲硅烷基(TMS)醚，则形成中性壳。在另一个实施例中，如果使用甲基丙烯酸的TMS酯代替三甲代甲硅垸基，则可以形成阴离子壳。可以以许多方式控制所述纳米胶囊的孔隙率，诸如通过改变包含疏水嵌段的(G-H)单体的数量，通过改变描述于此的组合物和方法中使用的交联取代基的结构，通过改变包含所述疏水嵌段的单体的化学组成，通过在逆胶束形成期间添加少量的缺乏交联取代基的两亲物，及其组合。因而，根据所述应用，用于包封报道复合体的纳米胶囊可以是可渗透的，半-渗透的或不能渗透的。在一些实施方案中，选择用于包封报道伴系的包含所述纳米胶囊的壳的孔隙率以维持所述报道体系，并且同时，容许靶分析物的通过。颗粒膜的孔隙率是这样的，以致它容许直径小于或等于0.5nm至5.0nm的成分通过。在一些实施方案中，所述颗粒的孔隙直径小于或等于5.0nm。在一些实施方案中，所述颗粒的孔隙直径小于或等于2.0nm。在一些实施方案中，所述颗粒的孔隙直径小于或等于1.5nm。在一些实施方案中，所述颗粒的孔隙直径小于或等于l.Onm。在一些实施方案中，所述颗粒的孔隙直径小于或等于0.5nm。在一些实施方案中，靶部分可以连接到所述纳米胶囊并且例如用于将所述纳米胶囊靶向到特定的细胞或细胞集合。如本文所用，"靶部分"包括能结合到细胞、组织、或器官中特定类型的膜和/或细胞器或以其它方式经过其运输的任何化学部分。直接定向组合物到特定细胞的多种试剂在本领域中是己知的(见，例如，Cotten等，MethodsEnzym(酶的方法)，217:618，1993)，和美国专利号6,692,911禾B6,835,393)。靶部分的适合的非限制性实例包括蛋白质(诸如胰岛素，EGF，或转铁蛋白)，凝集素，抗体和片段，糖类，脂质，寡核苷酸，DNA，RNA，或小分子和药物。有用的靶部分的另外实例包括，但是决不限于，转染试剂诸如Pro-Ject(PierceBiotechnology(Pierce生物工艺学)，病毒肽片段诸如运送子(transportans)，孔形成毒素诸如链溶素-O,疏水酯，聚阳离子诸如聚赖氨酸，脱唾液酸糖蛋白(asiaglycoproteins)，禾口白喉毒素。4.5使用包封报道体系的方法在本文还提供用于检测样品中靶分析物存在与否的测定法。要测试的样品可以是由使用者选择的任何适合的样品。样品可以是天然存在的或人造的。例如，样品可以是血样，组织样品，细胞样品，口腔样品，皮肤样品，尿样品，水样品，或土壤样品。所述样品可以来自活生物，诸如真核生物，原核生物，哺乳动物，人，酵母，或细菌。所述样品可以是细胞，组织，或器官。可以在与本教导的替代物分析物-蛋白质复合物或标记蛋白质接触之前用本领域已知的任何方法处理所述样品。例如，可以使所述样品经受溶胞步骤，沉淀步骤，柱色谱步骤，加热步骤，等。所述测定法包含将样品与包含替代物分析物-蛋白质复合物或标记的蛋白质的"报道体系"接触，如2005年3月15日递交的标题为"TheUseofAntibody-SurrogateAntigenSystemsforDetectionofAnalytes(用于分析物检测的抗体-替代物抗原体系的应用)"，系列号60/622,412的美国申请，和2006年3月15日递交的美国实用申请系列号11/375,825中所描述，将其内容通过参考全部结合于此。图6图解例举性报道体系，其包含一个或多个替代物分析物-蛋白质复合物，每个包含标记蛋白质("报道标记抗体")和替代物分析物("猝灭标记抗原")，其包封在不能渗透的可以连接到靶部分的交联亲水纳米胶囊。在上面描述了可用于将包含报道体系的纳米胶囊引入到目的细胞中的适合靶部分。如图6中所说明，替代物分析物结合到所述标记抗体猝灭来自"报道子"的信号。图6中描述的"报道子"可以包含任何描述于此的标记部分。一个或多个靶分析物进入所述胶囊的通路可以取代--个或多个替代物分析物，产生荧光的可测量的增加并且指示靶分析物的存在。在一些实施方案中，所述标记部分包括荧光部分。所述荧光部分可以包含提供荧光信号并且可以依照描述于此的方法和原则使用的任何实体。典型地，所述标记分子的荧光部分包括荧光染料，其依次包括在第一波长吸收光并且响应于所述吸收作用而在第二波长发射荧光的共振-不定域的体系或芳香环体系。各式各样的这样的荧光染料分子在本领域中是已知的。例如，荧光染料可以选自任何多种类别的荧光化合物，诸如口占吨，罗丹明，荧光素，花青，酞菁，异方酰胺(squaraines)，氟硼荧染料(bodipydyes)，香豆素，噁嗪，禾口carbopyronines。在一些实施方案中，所述荧光部分包括咕吨染料。一般地，口占吨染料的特征在于三个主要特征:(l)母体咕吨环;(2)环外羟基或胺取代基；和(3)环外氧代或imminium取代基。虽然其中母体P占吨环包含稠合到C5/C6和C3/C4碳的任一个或两者的苯并基团的"延伸的"口占吨也是已知的，但是环外取代基一般定位在母体咕吨环的C3和C6碳。在这些延伸的卩占吨中，特征性的环外取代基定位在延伸的咕吨环的相应位置。因而，如本文所用，"坫吨染料"一般包括下列母体环之一在上述母体环中，A'是OH或NH2并且八2是0或丽2+。当A'是OH并且Y是0时，所述母体环是荧光素-类型的咕吨环。当A是NH2并且AZ是NH/时，母体环是罗丹明-类型咕吨环。当A'是NH2并且八2是0时，所述母体环是对甲氨基酚类型的咕吨环。A1和A2的氮原子的一个或两个(当存在时)和/或在位置Cl,C2，C2",C4,C4"，C5,C5",C7",C7禾口C8的碳原子的一个或多个可以3虫立i也用多种多样的相同或不同的取代基取代。在一个实施方案中，典型的取代基包括，但不限于，-X，-Ra,-ORa,-SRa，-NRaRa,全卤代(C广C6)烷基，-CX3，-CF3，-CN,-OCN,-SCN，-NCO,-NCS，-NO,-N02,-N3，-S(0)2CT,-S(0)2OH,-S(0)2Ra,-C(O)R，-C(O)X,-C(S)Ra,-C(S)X，-C(0)ORa,-C(O)CT，-C(S)ORa,-C(0)SRa，-C(S)SRa，-C(0)NRaRa,-C(S)NRaR"d-C(NR)NRaRa，其中每个X独立地是卤素(优选-F或-Cl)并且每个Ra独立地是氢，(d-Q)烷基,(C,-Q)链垸基，(Q-C6)链烯基，(C厂C6)炔基，(CrC20)芳基，(CVC26)芳基烷基,(CrC2o)芳基芳基,5-20元的杂芳基，6-26元的杂芳基烷基，5-20元的杂芳基-杂芳基，羧基，乙酰基，磺酰基，亚磺酰基，砜，磷酸酯或膦酸酯。一般地，不趋向于完全猝灭所述母体环荧光的取代基是优选的，但是在一些实施方案中猝灭取代基可以是合乎需要的。趋向于猝灭母体阽吨环荧光的取代基包括重原子，诸如-N02，-Br和-I，和/或其它官能部分，诸如N02。C,和(32取代基和/或<:7和Cs取代基可以合起来形成取代的或未取代的丁[l,3]二烯并(dieno)或(C5-C2o)芳烯并(aryleno)桥。为了说明，包括稠合到CVC2和CVC8碳的未取代苯并桥的例举性的母体咕吨环如下所图解可以在一个或多个位置用多种不同的取代基基团取代苯并或芳烯并桥，诸如用于结构(Ia)-(Ic)中的碳d-C8的在前的上述取代基基团，在前。在包括多个取代基的实施方案中，所述取代基可以全部相同，或所述取代基的一些或全部可以相互不同。当A'是NH2和/或AS是NH/时，氮原子可以包括在一个或两个涉及相邻碳原子的桥中。桥接基团可以相同或不同，并且典型地选自(C，-C，2)烷基二基，(C广C，2)亚烷基并，2-12元的杂烷基二基禾卩/或2-12元杂亚烷基并桥。包括涉及环外氮的桥的非限制性的例举性母体环图解如下母体环也可以在C9位包括取代基。在一些实施方案中，所述Q)取代基选自乙炔，低级(例如，l至6个碳原子)链烷基，低级链烯基，氰基，芳基，苯基，杂芳基，和取代形式的任何前面的基团。在其中母体环包含稠合到C,/C2和CVC8位的苯并或芳烯并桥的实施方案中，诸如，例如，以上图解的环(Id)，(Ie)和(If)，C9碳优选是未取代的。在一些实施方案中，所述C9取代基是取代的或未取代的苯环，因此所述口占吨染料包括下列结构之一在位置3,4，5,6和7的碳可以是用多种不同的取代基取代的，诸如在前对于碳CrC8所描述的取代基。在一些实施方案中，位置C3的碳是用羧基(-COOH)或硫酸(-S03H)基团，或其阴离子取代的。其中A1是OH并且A2是O的式(IIa)，(IIb)和(IIe)的染料在本文称作荧光素染料；其中A1是NH2并且A2是NH2+的式(IIa),(IIb)和(IIe)的染料在本文称作罗丹明染料；并且其中A1是OH并且A2是NH/(或其中A1是NH2并且A2是O)的式(IIa),(IIb)和(IIc)的染料在本文称作对甲氨基酚染料。如上述结构所突出，当咕吨环(或延伸的站吨环)包括在荧光素、罗丹明和对甲氨基酚染料中时，它们的碳原子在数目上是不同的。具体而言，它们的碳原子编号包括最初的。虽然为了方便起见提供荧光素、罗丹明和对甲氨基酚染料的上述编号体系，但是应当理解可以采用其它的编号体系，而且它们不意欲是限制性的。还应当理解，虽然图解了染料的一个同分异构形式，但是它们可以以其它的同分异构形式存在，举例来说并且无限制性包括其它的互变异构形式或几何形式。作为具体的实例，羧基罗丹明和荧光素染料可以以内酯形式存在。在一些实施方案中，所述荧光部分包括罗丹明染料。例举性的适合的罗丹明染料包括，但不限于，罗丹明B，5-羧基罗丹明，罗丹明X(ROX)，4，7-二氯罗丹明X(dROX),罗丹明6G(R6G)，4，7-二氯罗丹明6G，罗丹明110(R110)，4,7-二氯罗丹明llO(dRllO)，四甲基罗丹明(TAMRA)和4，7-二氯-四甲基罗丹明(dTAMRA)。另外的适合的罗丹明染料包括，例如，在下列中描述的那些美国专利号6,248,884,6,111,116,6,080,852,6,051,719,6,025,505，6,017,712，5,936,087，5,847,162，5,840,999,5,750,409,5,366,860,5，231，191，和5,227,487;PCT公布WO97/36960和WO99/27020;Lee等，NUCL.ACIDSRES.(核酸研究)20:2471-2483(1992),Arden-Jacob,NEUELANWELLIGEXANTHEN-FARBSTOFFEFURFLUORESZENZSONDENUNDFARBSTOFFLASER,VerlagShaker,Germany(1993)，Sauer等，J.FLUORESCENCE(荧光杂志)5:247-261(1995),Lee等，NUCLACIDSRES.(核酸研究)25:2816-2822(1997),禾PRosenblum等，NUCL.ACIDSRES.(核酸研究)25:4500-4504(1997)。特别优选罗丹明染料的子集是4,7-二氯罗丹明。在一个实施方案中，所述荧光部分包括4,7-二氯-邻羧基罗丹明染料。在一些实施方案中，所述荧光部分包括荧光素染料。例举性适合的荧光素包括，但不限于，描述在下列中的荧光素染料美国专利6,008,379,5,840,999,5,750,409，5,654,442,5,188,934,5,066,580,4,933,471，4,481,136和4,439,356;PCT公布WO99/16832,和EPO公布050684。优选的荧光素染料的子集是4,7-二氯荧光素。其它的优选的荧光素染料包括，但不限于，5-羧基荧光素(5-FAM)和6-羧基荧光素(6-FAM)。在一个实施方案中，所述荧光素部分包括4，7-二氯-邻羧基荧光素染料。在一些实施方案中，所述荧光部分可以包括花青，酞菁，异方酰胺，或氟硼荧染料染料，诸如描述在下列参考文献及其引用的参考文献中的那些美国专利号6，080，868，6，005，113，5,945,526，5,863,753,5,863,727，5,800,996，禾卩5,436,134;禾BPCT公布WO96/04405。在一些实施方案中，所述荧光部分可以包括染料的网络，其相互协同起作用，诸如，例如通过FRET或另一个机理，以提供大的斯托克斯位移。这样的染料网络典型地包括荧光供体部分和荧光受体部分，并且可以包括另外的部分，其作为荧光受体和供体两者起作用。所述荧光供体和受体部分可以包括任何在前描述的染料，条件是选择可以相互协同起作用的染料。在一个具体实施方案中，所述荧光部分包括荧光供体部分和荧光受体部分，所述荧光供体部分包括荧光素染料，所述荧光受体部分包括荧光素或罗丹明染料。适合的染料对或网络的非限制性实例描述在美国专利号6,399,392，6,232,075，5,863,727，禾卩5,800,996中。在一些实施方案中，所述标记部分包括猝灭部分。所述猝灭部分可以是当其紧密接近时能猝灭荧光部分的荧光的任何部分，诸如，例如，通过轨道重叠(形成基态黑色复合物)，碰撞猝灭，FRET，或另一个机理或机理的组合。所述猝灭部分本身可以是发荧光的，或它可以是非荧光的。在一些实施方案中，所述猝灭部分包括具有充分重叠荧光部分的发射光谱的吸光度光谱的荧光染料，以致它在紧密接近其时猝灭荧光部分的荧光。所述测定典型地包括将报道体系与包含一个或多个目的靶分析物的样品接触。在采用两个或更多个靶分析物的实施方案中，每个包含报道体系的标记蛋白质可以相同，或所述标记蛋白质的一些或全部可以不同。在本文教导的测定典型地包括缓冲液的应用，诸如在2003西格玛-奥德里奇(Sigma-Aldrich)目录的"生物缓冲液"部分中描述的缓冲液。例举性缓冲液包括磷酸钠，乙酸钠，PBS，MES，MOPS，HEPES，Tris(Trizma)，N-二(羟乙基)甘氨酸，TAPS，CAPS，等。所述缓冲液以足以产生并且保持所需pH和/或离子强度的量存在。可以根据结合活性的pH依赖性选择结合缓冲液的pH。例如，所述pH可以是2至12，4至11，或6至10。所述缓冲液也可以含有结合所需的任何必要的辅因子或试剂。这样的辅因子和/或试剂的同一性和浓度将取决于特定的测定体系并且对于本领域技术人员将是显而易见的。报道体系中存在的标记蛋白质的浓度基本上是可以改变的。例如，所述测定的缓冲液可以包括约10—1()至10—3的标记蛋白质。在一些实施方案中，所述测定缓冲液包括约lpM至1uM的标记蛋白质。如果使用多个不同类型的标记蛋白质，则每个可以以上述浓度范围包括在所述测定缓冲液中。所述测定典型地不需要去垢剂或其它组分的存在。通常，合乎需要的是避免反应混合物中组分的高浓度，其可以不利地影响反应产物的荧光性质，或者其可以干扰靶分析物的检测。可以使用常规方法和仪器监控荧光信号。例如，本教导的替代物分析物-蛋白质复合物可以以连续监控阶段、实时方式使用，以容许使用者快速确定分析物是否存在于样品中，并且任选地，确定所述分析物的量或活性。在一些实施方案中，可以从至少两个不同的时间点测量所述荧光信号。在一些实施方案中，可以连续或在数个选定时间点监控所述信号。备选地，可以在端点实施方案中测量荧光信号，其中在一定量时间以后测量信号，并且将所述信号相对于对照信号(无分析物的样品)、阈值信号、或标准曲线比较。产生的荧光信号的量不是决定性的并且可以在广泛的范围内变化。唯一需要的是荧光通过所用检测体系可测量。在一些实施方案中，在替代物分析物-蛋白质复合物离解时，可以产生大于背景信号至少2倍的荧光信号。在一些实施方案中，在替代物分析物-蛋白质复合物离解时，可以产生大于背景信号至少3倍的荧光信号。在一些实施方案中，在替代物分析物-蛋白质复合物离解时，可以产生大于背景信号至少4倍的荧光信号。在一些实施方案中，在替代物分析物-蛋白质复合物离解时，可以产生大于背景信号至少5倍的荧光信号。在一些实施方案中，在替代物分析物-蛋白质复合物离解时，可以产生大于背景信号2-10倍的荧光信号。在一些实施方案中，所述交联的亲水纳米胶囊可用于包封水溶性试剂。可以包封在描述于此的纳米胶囊中的试剂的实例包括美国专利申请公布号2006/0159738中描述的治疗剂和诊断剂，将其公开内容通过参考全部结合于此。5.实施例根据下列实施例可以进一步理解本教导的方面，其不应该被解释为以任何方式限制本发明教导的范围。5.1例举性交联亲水纳米胶囊的制备关于图7A，在描述于此的方法和组合物中有用的聚合两亲物可以从亲水和疏水聚合物嵌段合成，所述聚合物嵌段可以通过可裂解的接头部分相互连接。在图7A中图解的例举性实施方案中，每一疏水和亲水片段的末端包括羟基官能度，其可以与二烷基甲硅烷基连接，诸如二异丙基-二氯甲硅垸，并且随后使用例如氟化物离子裂解。如图7A中所图解，显著百分比的疏水聚合物嵌段的主链可以包括可聚合的单体甲基丙烯酸羟乙酯(HEMA)的三甲代甲硅烷基(TMS)醚，其将疏水特征给予TMS-HEMA聚合物。包括在所述疏水聚合物嵌段中的是两个或多个包含官能团的单体，所述官能团可用于相互交联所述聚合物。在聚合期间，可以将甲基丙烯酸苯酯作为交联剂添加。调整添加的甲基丙烯酸苯酯的量以得到至少两个甲基丙烯酸苯酯部分/疏水嵌段。得到的苯酯与胺是反应性的，所述胺诸如二胺，三胺等，当添加时，其将包含交联官能团的单体相互交联，形成逆胶束的壳。使用化学的或物理的转化方法，可以将把疏水性给予所述疏水嵌段的官能团除去或修饰，而将亲水或水溶性特征给予所述疏水嵌段。例如，描述在图7A中的疏水嵌段，可以用氟化物离子处理以除去TMS保护基，得到包含如图7B中所述的交联的亲水壳的纳米胶囊。如图7C中所述，包封一种或多种水溶性报道体系或试剂的交联亲水纳米胶囊可以通过将两亲聚合物悬浮在包含水溶性报道体系的水性小滴的有机悬浮液中而形成。所述两亲聚合物在水性小滴周围组装，产生逆聚合胶束，其包含疏水壳和包含水溶性报道体系的亲水核。交联剂的添加导致交联疏水壳的形成。官能团的除去或修饰将疏水性给予所述疏水嵌段，产生交联的亲水壳。在一些实施方案中，所述核心亲水嵌段可以裂解，产生包含水溶性报道体系或试剂的空心圆球体。为了全部目的，将该申请中引用的全部公布、专利、专利申请及其它文件通过参考全部结合于此，达到如同每个单独的公布、专利、专利申请或其它文件是为了全部用途独立表明是通过参考结合的相同程度。虽然已经说明并描述了多种具体的实施方案，但是应当理解，在不背离本发明精神和范围的情况下可以进行多种改变。权利要求1.一种逆胶束，所述逆胶束包含多个两亲聚合物，其中每个聚合物，独立于其它的聚合物，包含下列结构其中(A-B)l代表包含第一聚合物嵌段部分的单体单元；[-(E-F)n-(G-H)o-]，各自独立于其它，代表包含第二聚合物嵌段部分的单体单元；(C-D)m代表接头部分；R1，R2，R3，R4代表任选的取代基；R5-R6-R7代表第一官能团，R8-R9-R10代表第二官能团，R11-R12代表第三官能团，并且R13-R14代表第四官能团；和l和n代表4-20的整数，m代表0到1的整数，且o代表2到6的整数。2.根据权利要求1的逆胶束，其中(A-B)包含能够给予所述第一嵌段水溶解性的水溶性单体单元。3.根据权利要求2的逆胶束，其中(A-B)包含选自由-0-CH2-CH2，-NH-CH2-CH2和-S(0)-CH2CH2组成的组的单体单元。4.根据权利要求1的逆胶束，其中(A-B)包含含有一个或多个任选取代基Rp和/或R2的单体单元，其中(A-B)包含水不溶性单体单元，且Rj，和/或R2包含能够给予所述第一嵌段水溶解性的取代基。5.根据权利要求4的逆胶束，其中(A-B)包含单体单元-CH2-CH2-并且Rp禾口/或R2选自由-C(0)NH2，-C(O)OH，-C(O)CT，和-S(V组成的组。6.根据权利要求1的逆胶束，其中(E-F)包含水溶性的单体单元，所述单体单元至少包含含有RrR6-R7的第一官能团和/或含有Rs-R9-R,o的第二官能团，其中至少所述第一官能团和/或所述第二官能团包含一个或多个能够给予所述第二嵌段水不溶性的取代基。7.根据权利要求6的逆胶束，其中将至少所述第一官能团或所述第二官能团裂解以获得水溶性的单体单元，所述单体单元包含(E-F)和所述第一官能团或所述第二官能团。8.根据权利要求6的逆胶束，其中将所述第一官能团和所述第二官能团裂解以获得包含(E-F)的水溶性单体单元。9.根据权利要求7或8的逆胶束，其中使用裂解剂裂解所述R7和/或所述R,o取代基，所述裂解剂选自由氢氧化物，酸，氟化物，和胺组成的组。10.根据权利要求7或8的逆胶束，其中使用酶裂解剂裂解所述R7和/或所述R,o取代基。11.根据权利要求7或8的逆胶束，其中使用光裂解所述117和/或所述R,o取代基。12.根据权利要求1的逆胶束，其中(E-F)包含水不溶性单体单元，所述单体单元至少包含含有Rs-R6-R7的第一官能团和/或含有Rs-R9-R,o的第二官能团，其中所述第一官能团和/或所述第二官能团的至少一个包含一个或多个能给予所述第二嵌段水不溶性的取代基。13.根据权利要求12的逆胶束，其中117和/或R,o包含能给予所述第二嵌段水不溶性的取代基。14.根据权利要求14的逆胶束，其中将所述R7和/或所述Rh)取代基裂解以获得水不溶性的单体单元(E-F)，所述(E-F)包含至少一种包含R5-R6，和/或Rs-R9的水溶性官能团。15.根据权利要求13或14的逆胶束，其中将所述R7和/或所述R,o取代基用选自由氢氧化物，酸，氟化物，和胺组成的组的裂解剂裂解。16.根据权利要求13或14的逆胶束，其中将所述117和/或所述R,o取代基用酶裂解剂裂解。17.根据权利要求13或14的逆胶束，其中将所述R7和/或所述R1()取代基用光裂解。18.根据权利要求1到17的任何一项的逆胶束，其中所述Rs和/或所述R8取代基能够促进所述(E-F)单体单元的聚合。19.根据权利要求6到17的任何一项的逆胶束，其中所述R6取代基是连接部分，所述连接部分能够将所述Rs取代基连接至所述R7取代基以形成包含R5-R6-R7的所述第一官能团。20.根据权利要求6到17的任何一项的逆胶束，其中所述R9取代基是连接部分，所述连接部分能够将所述R8取代基连接至所述R1Q取代基以形成包含R8-R9-RIQ的所述第二官能团。21.根据权利要求6到17的任何一项的逆胶束，其中所述R7取代基和/或所述Ru)取代基可给予所述第二嵌段水不溶性。22.根据权利要求6到17的任何一项的逆胶束，其中R5，R6，R7，R8，R9，和/或Ru)的至少一个不是氢。23.根据权利要求6到17的任何一项的逆胶束，其中所述(E-F)单体单元的至少一个包含-CH(Rs-R6-R7)-CH(R8-R9-R,o)-，其中R5禾口/或R8是羰基，R6和/或R9选自氧和氮，且R7禾卩/或R,o选自含4到20个碳原子的垸基，苯基，节基或三烷基甲硅烷基。24.根据权利要求6到17的任何一项的逆胶束，其中所述(E-F)单体单元的至少一个包含-CH(Rs-R6-R7)-CH(RrR9-RK))-，其中Rs和/或Rs是氧，R6和/或R9包含羰基，且R7和/或R,o选自含3到10个碳原子的烷氧基，苯氧基，苯甲酸基和三垸基甲硅垸氧基。25.根据权利要求6到17的任何一项的逆胶束，其中所述(E-F)单体単元的至少一个包含-CH(R5-R6-R7)-CH(R8-R9-Rk))-，其中115和/或118选向氮或胺，R6和/或R9是羰基，且R7禾口/或Ru)选自含3到IO个碳原子的烷氧基，苯氧基，苯甲酸基和三垸基甲硅烷氧基。26.根据权利要求6到17的任何一项的逆胶束，其中所述(E-F)单体単元的至少一个包含-CH(Rs-R7)-CH(R8-Rk))-，其中Rs和/或R8选自硫酸酯，磷酸酯或硼酸酯，且R7和/或Ru)选自含有4到20个碳原子的烷基，苯基，节基或三烷基甲硅烷基。27.根据权利要求6到17的任何一项的逆胶束，其中所述(E-F)单体单元的至少一个包含-CH2-CH2-N(Rs-R7)-，其中Rs是羰基，且R7选自含3到10个碳原子的垸氧基，苯氧基，苯甲酸基和三垸基甲硅垸氧基。28.根据权利要求6到17的任何一项的逆胶束，其中所述(E-F)单体单元的至少一个包含-CH2-CH-N(R5-R7)-，其中Rs是羰基，且R选自含3到10个碳原子的垸氧基，苯氧基，苯甲酸基和三垸基甲硅烷氧基。29.根据权利要求6到17的任何一项的逆胶束，其中所述(E-F)单体单元的至少一个包含-CH2-CH-0(Rs-R7)-，其中Rs是羰基，且117选自含3到10个碳原子的烷氧基，苯氧基，苯甲酸基和三烷基甲硅烷氧基。30.根据权利要求1的逆胶束，其中(G-H)包含至少含有第三官能团和/或第二官能团的单体单元，所述第三官能团包含Rn-R12，所述第二官能团包含R13-R14，其中所述第一和/或所述第二官能团的至少一个包含一个或多个能够与交联剂反应的取代基。31.根据权利要求30的逆胶束，其中所述取代基的一个或多个包含能够与亲核交联剂反应的亲电子基团。32.根据权利要求30的逆胶束，其中所述取代基的一个或多个包含能与亲电子交联剂反应的亲核基团。33.根据权利要求30的逆胶束，其中所述取代基的一个或多个包含潜在的能够与多价金属阳离子反应的阴离子基团。34.根据权利要求30的逆胶束，其中所述Rn和/或所述R13取代基能够促进所述(G-H)单体单元与(E-F)单体单元的共聚。35.根据权利要求34的逆胶束，其中所述Ru和/或所述Ru取代基能够促进所述(G-H)单体单元与(E-F)单体单元的共聚，并且能够与交联剂反应。36.根据权利要求30的逆胶束，其中所述Ru和/或所述Rm取代基能够与交联剂反应。37.根据权利要求30至36的任何一项的逆胶束，其中Rn,R,2,R,3和/或R"的至少一种不是氢。38.根据权利要求31的逆胶束，其中所述(G-H)单体单元的至少一个包含-CH(Rn陽R2)-CH(R,3-R,4)-，其中R,,和/或R13选自羰基，硫酸酯，磷酸酯，或硼酸酯，并且R,2和/或R,4是亲电子取代基，所述亲电子取代基选自烷氧基，苯氧基，取代的苯氧基，卤素，和N-羟基琥珀酰亚胺基，以及有机的或无机的混合酸酐，诸如乙酸或磷酸酐。39.根据权利要求31的逆胶束，其中所述(G-H)单体单元的至少一个包含-CH(Rn-R,2)-CH(RirR14)-，其中Rn和/或R13选自羰基，硫酸酯，磷酸酯，或硼酸酯，并且R,2和/或R,4是亲电子取代基，所述亲电子取代基包含Michael受体诸如乙烯基。40.根据权利要求31的逆胶束，其中所述(G-H)单体单元的至少一个包含-CH(Ru-Ru)-CH(R^-R一-，其中Ru和/或R13选自氧或胺，并且R12和/或rm是亲电子取代基，所述亲电子取代基选自垸氧基羰基，苯氧基羰基，和卤代羰基。41.根据权利要求31的逆胶束，其中所述(G-H)单体单元的至少一个包含-CH(Rn-R,2)-CH(Rn-R一-，其中Ru和/或R13选自氧或胺，并且R12和/或rm是亲电子取代基，所述亲电子取代基包含选自马来酰亚胺，乙烯基羰基，炔基羰基，乙烯基砜和炔基砜的Michael受体。42.根据权利要求32的逆胶束，其中所述(G-H)单体单元的至少一个包含-CH(Rh-R,2)-CH(R『Rm)-，其中Rn和/或Ru是羰基，并且1112和/或R,4是亲核取代基，所述亲核取代基选自醇，多元醇，胺，多胺，硫化物或聚硫化物。43.根据权利要求1的逆胶束，其中所述接头部分(C-D)还包含任选的取代基r3和/或R4。44.根据权利要求1的逆胶束，其中(C-D)表示能够被化学试剂裂解的接头部分，其中所述裂解导致所述第一聚合物嵌段部分的除去。45.根据权利要求1的逆胶束，其中(C-D)表示能够被物理试剂裂解的接头部分，其中所述裂解导致所述第一聚合物嵌段部分的除去。46.—种包含水溶性报道体系以及多种亲水聚合物的交联亲水纳米胶囊，其中所述纳米胶囊对于所述报道体系从所述纳米胶囊向外的扩散是不可渗透的。47.根据权利要求46的交联亲水纳米胶囊，其中每个聚合物，独立于其它，包含下列结构其中-(E-FV(G-H)。-各自独立于其它，表示包含聚合物嵌段部分的单体单元；Rs-R6表示第一水溶性官能团，RrR9表示第二水溶性官能团，Rn-R12表示第三官能团，并且Rn-R,4表示第四官能团，并且n表示4-20的整数且o表示2至6的整数。48.根据权利要求47的交联亲水纳米胶囊，其中所述(E-F)单体单元的至少一个包含-CH(R5-R6)-CH(Rs-R9)-，其中R5和/或R8是羰基并且R6和/或R9选自氧和氮。49.根据权利要求47的交联亲水纳米胶囊，其中所述(E-F)单体单元的至少一个包含-CH(Rs-R6)-CH(R8-R9)，其中R5和/或R8是氧并且R6和/或R9包含羰基。.50.根据权利要求47的交联亲水纳米胶囊，其中所述(E-F)单体单元的至少一个包含—CH(R5-R6)-CH(R8-R9)，其中R5和/或R8选自氮或胺并且R6和/或R9是羰基。51.根据权利要求47的交联亲水纳米胶囊，其中将所述亲水聚合物的一个或多个经由包含R,rR12的官能团和/或包含R13-R14的官能团相互交联，其中所述官能团位于相邻的亲水聚合物上。52.根据权利要求46的交联纳米胶囊，其中每个聚合物，独立于其它，包含下列结构-(E-F)-(G-H)。-，其中-(E-FV(G-H)。-各自独立于其它，表示包含亲水聚合物嵌段部分的单体单元，并且"表示4-20的整数且o表示2至6的整数。53.根据权利要求52的交联亲水纳米胶囊，其中所述(E-F)单体单元的至少一个包含-(CH2-CH2)-。54.根据权利要求52的交联亲水纳米胶囊，其中将所述亲水聚合物的-一种或多种经由位于相邻的亲水聚合物上的(G-H)单体单元相互交联。55.根据权利要求46至54的任何一项的交联亲水纳米胶囊，其中所述报道体系包含替代物分析物-蛋白质复合物，所述复合物包含在所述复合物离解时能够产生可检测的荧光信号的报道体系，所述信号比背景信号大至少3倍，其中所述可检测的荧光信号的存在表示所述靶分析物存在于所述样品中。56.权利要求55的交联亲水纳米胶囊，其中所述替代物分析物-蛋白质复合物是包含替代物抗原和抗体的替代物抗原-抗体复合物。57.权利要求55的交联亲水纳米胶囊，其中所述替代物抗原包含猝灭部分并且所述抗体包含荧光部分。58.权利要求55的交联亲水纳米胶囊，其中所述替代物抗原包含荧光部分并且所述抗体包含猝灭部分。59.—种两亲聚合物，所述两亲聚合物包含下列结构其中(A-B》表示包含第一聚合物嵌段部分的单体单元；[-(E-F、-(G-H)。-]各自独立于其它，表示包含第二聚合物嵌段部分的单体单元；(C-DV表示接头部分；Ri,R2，R3，R4表示任选的取代基；R5-R6-R7表示第一官能团，R8-R9-R,o表示第二官能团，Ru-R,2表示第三官能团，并且R,3-R,4表示第四官能团；和/和《表示4-20的整数，m表示0至1的整数，并且o表示2至6的整数。60.根据权利要求59的两亲聚合物，其中(A-B)包含能够给予所述第一嵌段水溶性的水溶性单体单元。61.根据权利要求59的两亲聚合物，其中(A-B)包含选自由-0-CH2-CH2，-NH-CH2-CH2，P-S(0)-CH2CH2组成的组的单体单元。62.根据权利要求59的两亲聚合物，其中(A-B)包含含有一个或多个任选的取代基R,，和/或R2的单体单元，其中(A-B)包含水不溶性单体单元，并且R,,和/或R2包含能够给予所述第一嵌段水溶性的取代基。63.根据权利要求62的两亲聚合物，其中(A-B)包含单体单元-CH2-CH2-并且Rl5禾口/或R2选自由-C(0)NH2，画C(O)OH,-C(O)CT,和-S(V组成的组。64.根据权利要求59的两亲聚合物，其中(E-F)包含水溶性单体单元，所述水溶性单体单元至少包含第一官能团和/或第二官能团，所述第一官能团包含Rs-R6-R7，所述第二官能团包含RrR9-Ru)，其中至少所述第一官能团和/或所述第二官能团包含一个或多个能够给予所述第二嵌段水不溶性的取代基。65.根据权利要求64的两亲聚合物，其中至少将所述第一官能团或所述第二官能团裂解以产生包含(E-F)和所述第一官能团或所述第二官能团的水溶性单体单元。66.根据权利要求64的两亲聚合物，其中将所述第一官能团和所述第二官能团都裂解以产生包含(E-F)的水溶性单体单元。67.根据权利要求65或66的两亲聚合物，其中使用裂解剂将所述R7和/或所述Ru)取代基裂解，所述裂解剂选自由氢氧化物，酸，氟化物，和胺组成的组。68.根据权利要求65或66的两亲聚合物，其中使用酶裂解剂将所述R7和/或所述R1()取代基裂解。69.根据权利要求65或64的两亲聚合物，其中使用光将所述117和/或所述R,。取代基裂解。70.根据权利要求59的两亲聚合物，其中(E-F)包含水不溶性单体单元，所述单体单元至少包含第一官能团和/或第二官能团，所述第一官能团包含R5-R6-R7，所述第二官能团包含R8-R9-R1()，其中所述第一官能团和/或第二官能团的至少一个包含一个或多个能够给予所述第二嵌段水不溶性的取代基。71.根据权利要求70的两亲聚合物，其中R7和/或所述R，。包含能够给予所述第二嵌段水不溶性的取代基。72.根据权利要求71的两亲聚合物，其中将所述R7和/或所述R,o取代基裂解以产生包含至少一个水溶性官能团的水不溶性单体单元(E-F)，所述水溶性官能团包含Rs-R6,和/或Rg-R9。73.根据权利要求71或72的两亲聚合物，其中使用裂解剂将所述R7和/或所述Ru)取代基裂解，所述裂解剂选自由氢氧化物，酸，氟化物，和胺组成的组。74.根据权利要求71或72的两亲聚合物，其中使用酶裂解剂将所述R7和/或所述Ru)取代基裂解。75.根据权利要求71或72的两亲聚合物，其中使用光将所述117和/或所述R,()取代基裂解。76.根据权利要求59至75的任何一项的两亲聚合物，其中所述R5和/或所述R8取代基能够促进所述(E-F)单体单元的聚合。77.根据权利要求59至75的任何一项的两亲聚合物，其中所述R6取代基是能够将所述R5取代基连接到所述R7取代基以形成所述包含R5-R6-R7的第一官能团的连接部分。78.根据权利要求59至75的任何一项的两亲聚合物，其中所述R9取代基是能够将所述R8取代基连接到所述R,。取代基以形成所述包含RrR9-R,。的第二官能团的连接部分。79.根据权利要求59至75的任何一项的两亲聚合物，其中所述R7和/或所述R1()取代基能够给予所述第二嵌段水不溶性。80.根据权利要求59至75的任何一项的两亲聚合物，其中R5，R6,R7,R8,R9，和/或R,。的至少一种不是氢。81.根据权利要求59至75的任何一项的两亲聚合物，其中所述(E-F)单体单元的至少一个包含-CH(RrlVR7)-CH(R8-R9-R,。)-，其中R5和/或R8是羰基，R6和/或R9选自氧和氮，并且R7和/或R,o选自含有4至20个碳原子的烷基，苯基，苄基或三垸基甲硅烷基。82.根据权利要求59至75的任何一项的两亲聚合物，其中所述(E-F)单体单元的至少一个包含-CH(RrR6-R7)-CH(IVR9-RK))-,其中115和/或118是氧，R6和/或R9是羰基，并且R7和/或Ru)选自包含3至IO个碳原子的烷氧基，苯氧基，苯甲酸基和三烷基甲硅垸氧基。83.根据权利要求59至75的任何一项的两亲聚合物，其中所述(E-F)单体单元的至少一个包含—CH(R5-R6-R7)-CH(R8-R9-R,。)-，其中R5和/或R8选自氮或胺，R6和/或R9是羰基，并且R7和/或Ru)选自含有3至IO个碳原子的烷氧基，苯氧基，苯甲酸基和三烷基甲硅烷氧基。84.根据权利要求59至75的任何一项的两亲聚合物，其中所述(E-F)单体单元的至少一个包含-CH(Rs-R7)-CH(R8-RK))-，其中115和/或118选自硫酸酯，磷酸酯或硼酸酯，并且R7和/或Ru)选自含有4至20个碳原子的烷基，苯基，苄基或三烷基甲硅垸基。85.根据权利要求59至75的任何一项的两亲聚合物，其中所述(E-F)单体单元的至少一个包含-CH2-CH2-N(RrR7)-，其中R5是羰基，并且R7选自含有3至10个碳原子的烷氧基，苯氧基，苯甲酸基和三烷基甲硅烷氧基。86.根据权利要求59至75的任何一项的两亲聚合物，其中所述(E-F)单体单元的至少一个包含-CH2-CH-N(RrR7)-，其中Rs是羰基，并且117选自含有3至10个碳原子的烷氧基，苯氧基，苯甲酸基和三垸基甲硅烷氧基。87.根据权利要求59至75的任何一项的两亲聚合物，其中所述(E-F)单体单元的至少一个包含-CH2-CH-0(RrR7)-，其中&是羰基，并且117选自含有3至IO个碳原子的院氧基，苯氧基，苯甲酸基和三垸基甲硅烷氧基。'88.根据权利要求59的两亲聚合物，其中(G-H)包含至少含有包含Rn-R,2的第三官能团和减包含Rn-Ri4的第二官能团的单体单元，，其中所述第一官能团和/或所述第二官能团的至少一个包含一个或多个能够与交联剂反应的取代基。89.根据权利要求88的两亲聚合物，其中一个或多个所述取代基包含能够与亲核交联剂反应的亲电子基团。90.根据权利要求88的两亲聚合物，其中一个或多个所述取代基包含能够与亲电子交联剂反应的亲核基团。91.根据权利要求88的两亲聚合物，其中一个或多个所述取代基包含能够与多价金属阳离子反应的潜在阴离子基团。92.根据权利要求88的两亲聚合物，其中所述Rn和/或所述R,3取代基能够促进所述(G-H)单体单元与所述(E-F)单体单元的共聚。93.根据权利要求92的两亲聚合物，其中所述Ru和/或所述Rn取代基能够促进所述(G-H)单体单元与所述(E-F)单体单元的共聚，并且能够与交联剂反应。94.根据权利要求88的两亲聚合物，其中所述R,2和/或所述R,4取代基能够与交联剂反应。95.根据权利要求88至94的任何一项的两亲聚合物，其中R，R12,R13和/或R14的至少一种不是氢。96.根据权利要求88的两亲聚合物，其中所述(G-H)单体单元的至少一种包含-CH(Rn-R,2)-CH(Rn-RM)-，其中Rn和/或R13选自羰基，硫酸酯，磷酸酯，或硼酸酯，并且R,2和/或R,4是亲电子取代基，所述亲电子取代基选自垸氧基，苯氧基，取代的苯氧基，卤素，N-羟基琥珀酰亚胺基，和有机的和无机的混合酸酐诸如乙酸或磷酸酐。97.根据权利要求88的两亲聚合物，其中所述(G-H)单体单元的至少一种包含-CH(Ru-R,2)-CH(R,3-R,4)-，其中和/或R13选自羰基，硫酸酯，磷酸酯，或硼酸酯，并且R,2和/或R,4是包含Michael受体的亲电子取代基，诸如乙烯基。98.根据权利要求88的两亲聚合物，其中所述(G-H)单体单元的至少一种包含-CH(Rn-R,2)-CH(R『Rw)-，其中Ru和/或R13选自氧或胺，并且Rn和/或R,4是选自垸氧基羰基，苯氧基羰基，和卤代羰基的亲电子取代基。99.根据权利要求88的两亲聚合物，其中所述(G-H)单体单元的至少一种包含-CH(Rn-R,2)-CH(R,3-R,4)-，其中Rn和/或R13选自氧或胺，并且R,2和/或Rm是包含Michael受体的亲电子取代基，所述亲电子取代基选自马来酰亚胺，乙烯基羰基，炔基羰基，乙烯基砜和炔基砜。100.根据权利要求88的两亲聚合物，其中所述(G-H)单体单元的至少一种包含-CH(R,广R,2)-CH(R,3-R,4)-，其中Ru和/或R13是羰基，并且R12和/或R,4是选自醇，多元醇，胺，多胺，硫化物或聚硫化物的亲核取代基。101.根据权利要求59的两亲聚合物，其中所述接头部分(C-D)还包含任选的取代基R3和/或R4。102.根据权利要求59的两亲聚合物，其中(C-D)表示能够被化学试剂裂解的接头部分，其中所述裂解导致所述第一聚合物嵌段部分的除去。103.根据权利要求59的两亲聚合物，其中(C-D)表示能够被物理试剂裂解的接头部分，其中所述裂解导致所述第一聚合物嵌段部分的除去。104.—种制造逆胶束的方法，所述方法包括用有机相乳化水相而产生油包水乳状液，其中所述乳状液包含多种根据权利要求59-103的任一项的两亲聚合物。105.根据权利要求104的制造逆胶束的方法，其中所述油包水乳状液还包含一个或多个水溶性报道体系。106.根据权利要求105的制造逆胶束的方法，所述方法还包括添加能够经由两个或更多(G-H)部分相互交联所述两亲聚合物的试剂的步骤，其中所述(G-H)部分位于相邻的两亲聚合物上，其中所述交联步骤产生交联的逆胶束。107.根据权利要求105的制造逆胶束的方法，所述方法还包括添加能够经由包含Ru和R12的官能团和/或包含R13和R14的官能团相互交联多个两亲聚合物的试剂的步骤，其中所述交联步骤产生交联的逆胶束。108.根据权利要求107的方法，其中所述报道体系包含替代物分析物-蛋白质复合物，所述复合物包含在所述复合物离解时能够产生可检测的荧光信号的报道体系，所述荧光信号比所述背景信号至少高3倍，其中所述可检测的荧光信号的存在表示所述靶分析物存在于所述样品中。109.根据权利要求108的方法，其中所述替代物分析物-蛋白质复合物是包含替代物抗原和抗体的替代物抗原-抗体复合物。110.根据权利要求108的方法，其中所述替代物抗原包含猝灭部分并且所述抗体包含荧光部分。111.根据权利要求108的方法，其中所述替代物抗原包含荧光部分并且所述抗体包含猝灭部分。112.制造交联亲水纳米胶囊的方法，所述方法包括下列步骤用有机相乳化水相而产生油包水乳状液，其中所述乳状液包括多个根据权利要求59-103的任一项的两亲聚合物和一个或多个水溶性报道体系，其包括添加能够经由两个或更多个(G-H)部分和域包含位于相邻的两亲聚合物上的Rn-R12和/或RirR14官能团以相互交联所述两亲聚合物的试剂，其中所述交联步骤产生交联的纳米胶囊，所述交联的纳米胶囊对于所述水溶性报道体系从所述纳米胶囊向外的扩散是不可渗透的，和通过添加除去所述水不溶性成分的试剂将全部水不溶性成分转化成水溶性成分。113.根据权利要求112制造交联的亲水纳米胶囊的方法，所述方法还包括添加能够裂解所述接头部分(C-D)m，并且由此释放所述(A-B)i部分的试剂的步骤。114.根据权利要求112的方法，其中所述报道体系包含替代物分析物-蛋白质复合物，所述复合物包含报道体系，在所述复合物离解时所述报道体系能够产生可检测的荧光信号，所述荧光信号比所述背景信号大至少3倍，其中所述可检测的荧光信号的存在表示所述靶分析物存在于所述样品中。'115.根据权利要求114的方法，其中所述替代物分析物-蛋白质复合物是包含替代物抗原和抗体的替代物抗原-抗体复合物。116.根据权利要求114的方法，其中所述替代物抗原包含猝灭部分并且所述抗体包含荧光部分。117.根据权利要求114的方法，其中所述替代物抗原包含荧光部分并且所述抗体包含猝灭部分。118.用于检测样品中的耙/分析物分子的存在或不存在的方法，所述方法包括将所述样品与一个或多个交联亲水纳米胶囊接触，所述纳米胶囊包含根据权利要求112或113的包封水报道体系，其中在靶分析物分子结合到所述体系时所述体系能够产生可检测的荧光信号，所述荧光信号比所述背景信号大至少3倍。全文摘要本发明提供了交联的亲水纳米胶囊和多种组合物以及它们的制备和使用方法。文档编号B01J13/00GK101394925SQ200680053648公开日2009年3月25日申请日期2006年12月29日优先权日2005年12月30日发明者史蒂文·门琴申请人:应用生物系统公司