一种利用微藻制备微藻絮凝剂的方法与流程

文档序号:11186194阅读:1174来源:国知局
本发明涉及一种利用微藻制备微藻絮凝剂的方法,属于微藻处理
技术领域

背景技术
:微藻是一类可光合自养的微生物,含有丰富的蛋白质、多不饱和脂肪酸、色素等营养物质。同时,因其具有生长速度快,单位体积产量高等优点,在生物饲料、生物制药、保健品及生物燃料等诸多领域都有广泛的应用前景。然而,因其个体极其微小(3~30μm),且藻液的浓度较低(<1g/l),增加了其收获难度。因此,从藻液中高效地采收高浓度的微藻,成为了其产业工业化规模发展的瓶颈。现有的收集微藻的技术,主要包括:离心法、絮凝法、重力沉降法、气浮法、过滤法等。其中絮凝法又包括自动絮凝法、无机絮凝法和有机絮凝法。自动絮凝法利用微藻在特定ph值下产生自动絮凝,比如中国专利“微藻收集方法及应用”(专利号cn201110457543.2)通过通入空气或惰性气体减少藻液co2的浓度,降低光合作用,提高藻液ph值到9.50~11.00时,使微藻产生自动絮凝沉淀。但是该法需要较长的处理时间,同时絮凝效果不佳,回收率低。有机絮凝法和无机絮凝法通过向藻液中加入有机絮凝剂(如壳聚糖)和无机絮凝剂(比如铁、铝絮凝剂)使微藻产生絮凝沉淀,但是这些絮凝剂的使用增加了成本,回收率低,达不到很好的回收效果。因此,亟待寻找一种絮凝效果好,回收率高,能够在工业上进行大规模使用的微藻絮凝剂。技术实现要素:本发明所要解决的技术问题:针对传统的絮凝法对微藻的絮凝效果差,回收率低,不适合工业规模化应用的问题,提供了一种利用微藻制备微藻絮凝剂的方法。为解决上述技术问题,本发明采用的技术方案是:(1)按重量份数计,分别将1~3份葡萄糖、3~5份植物多糖、0.1~0.3份硫酸铵、0.1~0.3份磷酸二氢铵、0.1~0.3份硝酸钾、0.01~0.03份硫酸锌、0.1~0.3份硫酸镁、10~15份氯化钠和200~300份去离子水,搅拌混合后得培养基;(2)取微藻加入培养基中,使微藻在培养基中浓度为0.3~0.6g/l,在温度为25~27℃,转速为100~120r/min条件下进行光照黑暗循环交替培养,光照环境下培养的周期为10~12h,黑暗环境下培养的周期为8~10h;(3)光照黑暗交替培养2~4天后得微藻液,向微藻液中加入异丙醇、氢氧化钠和3-氯-2-羟丙基三甲基氯化铵,搅拌混合后继续光照黑暗交替培养3~5天,培养后得改性微藻液,将改性微藻液在2000~2500r/min转速下离心分离,收集沉淀物,得微藻藻泥;(4)按重量份数计,分别将80~100份微藻藻泥、4~8份玉米淀粉、0.1~0.3份氧化镁和0.1~0.3份硫酸铁,搅拌混合后得微藻藻泥混合物;(5)按质量比1:5,将阳离子醚化剂和氢氧化钠溶液混合,搅拌混合后得混合液,按质量比1:5,将混合液与微藻藻泥混合物混合,混合后即可得到微藻絮凝剂。步骤(1)中所述的植物多糖为阿拉伯糖、甘露糖、枸杞多糖、海带多糖中的一种。步骤(2)中所述的光照环境的光照强度为3000~3200lux。步骤(2)中所述的微藻为小球藻、栅藻、脆杆藻、小环藻和绿球藻中一种。步骤(3)中所述的异丙醇质量为微藻液质量5~10%,氢氧化钠质量为微藻液质量0.5~0.7%,3-氯-2-羟丙基三甲基氯化铵质量为微藻液质量0.2~0.4%。步骤(5)中所述的阳离子醚化剂为十二烷基二甲基苄基氯化铵、3-氯-2-羟丙基三甲基氯化铵和2,3-环氧丙基三甲基氯化铵中的一种。步骤(5)中所述的氢氧化钠溶液的质量分数为1%。本发明与其他方法相比,有益技术效果是:(1)本发明使用植物多糖制得微藻培养基,并将微藻放入培养基中进行光照黑暗交替培养,培养过程中加入3-氯-2-羟丙基三甲基氯化铵,植物多糖培养后的微藻会和3-氯-2-羟丙基三甲基氯化铵进行反应,反应后的微藻带有阳离子活性基团,作为絮凝剂使用后会和带负电荷的藻细胞相互吸引,表现出阳离子絮凝剂的性能,而微藻在培养的过程中细胞壁会产生酸性多糖和脂质,也会进行阳离子改性,使最终得到的微藻藻泥具有优异的微藻絮凝效果;(2)本发明将培养得到的微藻藻泥和玉米淀粉、氧化镁、硫酸铁混合,加入氢氧化钠溶液和阳离子醚化剂制得的混合液后,其中微藻藻泥和玉米淀粉会被阳离子处理,可与负电荷的微藻细胞静电吸引,形成较大的絮凝体而沉降,而且在絮凝微藻时,微藻细胞中会分泌多糖,而起到自絮凝的效果,而氧化镁、硫酸铁会生成具有絮凝效果氢氧化镁和氢氧化铁,可进一步提高对微藻的絮凝效果。具体实施方式按重量份数计,分别将1~3份葡萄糖、3~5份植物多糖、0.1~0.3份硫酸铵、0.1~0.3份磷酸二氢铵、0.1~0.3份硝酸钾、0.01~0.03份硫酸锌、0.1~0.3份硫酸镁、10~15份氯化钠和200~300份去离子水,搅拌混合后得培养基;取微藻加入培养基中,使微藻在培养基中浓度为0.3~0.6g/l,在温度为25~27℃,转速为100~120r/min条件下进行光照黑暗循环交替培养,光照环境下培养的周期为10~12h,光照强度为3000~3200lux,黑暗环境下培养的周期为8~10h;光照黑暗交替培养2~4天后得微藻液,向微藻液中加入微藻液质量5~10%异丙醇、微藻液质量0.5~0.7%氢氧化钠和微藻液质量0.2~0.4%3-氯-2-羟丙基三甲基氯化铵,搅拌混合后继续光照黑暗交替培养3~5天,培养后得改性微藻液,将改性微藻液在2000~2500r/min转速下离心分离,收集沉淀物,得微藻藻泥;按重量份数计,分别将80~100份微藻藻泥、4~8份玉米淀粉、0.1~0.3份氧化镁和0.1~0.3份硫酸铁,搅拌混合后得微藻藻泥混合物;按质量比1:5,将阳离子醚化剂和质量分数1%氢氧化钠溶液混合,搅拌混合后得混合液,按质量比1:5,将混合液与微藻藻泥混合物混合,搅拌混合20~30min后即可得到微藻絮凝剂。所述的植物多糖为阿拉伯糖、甘露糖、枸杞多糖、海带多糖中的一种。所述的微藻为小球藻、栅藻、脆杆藻、小环藻和绿球藻中的一种。所述的阳离子醚化剂为十二烷基二甲基苄基氯化铵、3-氯-2-羟丙基三甲基氯化铵和2,3-环氧丙基三甲基氯化铵中的一种。实例1按重量份数计,分别将3份葡萄糖、5份阿拉伯糖、0.3份硫酸铵、0.3份磷酸二氢铵、0.3份硝酸钾、0.03份硫酸锌、0.3份硫酸镁、15份氯化钠和300份去离子水,搅拌混合后得培养基;取小球藻加入培养基中,使小球藻在培养基中浓度为0.6g/l,在温度27℃,转速为120r/min条件下进行光照黑暗循环交替培养,光照环境下培养的周期为12h,光照强度为3200lux,黑暗环境下培养的周期为10h;光照黑暗交替培养4天后得微藻液,向微藻液中加入微藻液质量10%异丙醇、微藻液质量0.7%氢氧化钠和微藻液质量0.4%3-氯-2-羟丙基三甲基氯化铵,搅拌混合后继续光照黑暗交替培养5天,培养后得改性微藻液,将改性微藻液在2500r/min转速下离心分离,收集沉淀物,得微藻藻泥;按重量份数计,分别将100份微藻藻泥、8份玉米淀粉、0.3份氧化镁和0.3份硫酸铁,搅拌混合后得微藻藻泥混合物;按质量比1:5,将3-氯-2-羟丙基三甲基氯化铵和质量分数1%氢氧化钠溶液混合,搅拌混合后得混合液,按质量比1:5,将混合液与微藻藻泥混合物混合,搅拌混合30min后即可得到微藻絮凝剂。实例2按重量份数计,分别将1份葡萄糖、3份枸杞多糖、0.1份硫酸铵、0.1份磷酸二氢铵、0.1份硝酸钾、0.01份硫酸锌、0.1份硫酸镁、10份氯化钠和200份去离子水,搅拌混合后得培养基;取脆杆藻加入培养基中,使脆杆藻在培养基中浓度为0.3g/l,在温度为25℃,转速为100r/min条件下进行光照黑暗循环交替培养,光照环境下培养的周期为10h,光照强度为3000lux,黑暗环境下培养的周期为8h;光照黑暗交替培养2天后得微藻液,向微藻液中加入微藻液质量5%异丙醇、微藻液质量0.5%氢氧化钠和微藻液质量0.2%3-氯-2-羟丙基三甲基氯化铵,搅拌混合后继续光照黑暗交替培养3天,培养后得改性微藻液,将改性微藻液在2000r/min转速下离心分离,收集沉淀物,得微藻藻泥;按重量份数计,分别将80份微藻藻泥、4份玉米淀粉、0.1份氧化镁和0.1份硫酸铁,搅拌混合后得微藻藻泥混合物;按质量比1:5,将十二烷基二甲基苄基氯化铵和质量分数1%氢氧化钠溶液混合,搅拌混合后得混合液,按质量比1:5,将混合液与微藻藻泥混合物混合,搅拌混合20min后即可得到微藻絮凝剂。实例3按重量份数计,分别将2份葡萄糖、4份海带多糖、0.2份硫酸铵、0.2份磷酸二氢铵、0.2份硝酸钾、0.02份硫酸锌、0.2份硫酸镁、12份氯化钠和250份去离子水,搅拌混合后得培养基;取绿球藻加入培养基中,使绿球藻在培养基中浓度为0.4g/l,在温度为26℃,转速为110r/min条件下进行光照黑暗循环交替培养,光照环境下培养的周期为11h,光照强度为3100lux,黑暗环境下培养的周期为9h;光照黑暗交替培养3天后得微藻液,向微藻液中加入微藻液质量7%异丙醇、微藻液质量0.6%氢氧化钠和微藻液质量0.3%3-氯-2-羟丙基三甲基氯化铵,搅拌混合后继续光照黑暗交替培养4天,培养后得改性微藻液,将改性微藻液在2300r/min转速下离心分离,收集沉淀物,得微藻藻泥;按重量份数计,分别将90份微藻藻泥、6份玉米淀粉、0.2份氧化镁和0.2份硫酸铁,搅拌混合后得微藻藻泥混合物;按质量比1:5,将2,3-环氧丙基三甲基氯化铵和质量分数1%氢氧化钠溶液混合,搅拌混合后得混合液,按质量比1:5,将混合液与微藻藻泥混合物混合,搅拌混合25min后即可得到微藻絮凝剂。对照例:以聚合氯化铁为微藻絮凝剂。将实例及对照例的微藻絮凝剂进行试验检测,其具体操作如下:1.试验方法:取浓度为0.8g/l微藻溶液置于100ml的烧瓶中,取离液面深5cm处的微藻液于比色皿中,在680nm波长处测定微藻液初始的吸光值odo,再加微藻絮凝剂,使微藻絮凝剂在微藻液中的质量浓度为100mg/l,搅拌30min后,移入50ml的比色管中静止10min后,取离液面深5cm处的微藻溶液于比色皿中,在680nm处测定溶液的吸光值odf。2.计算公式:其中r代表絮凝效率(%);odo代表初始藻液吸光度;odf代表絮凝后上清液吸光度。3.计算结果如表1。表1实例1实例2实例3对照例絮凝效率(%)98.297.597.882.3由表1可知,本发明制备的微藻絮凝剂絮凝效率高,对微藻的回收率高。当前第1页12
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