专利名称：更年安片中五味子醇甲含量的测定方法
技术领域：
本发明涉及一种中药制剂中五味子醇甲含量的测定方法，特别是涉及一种利用高效液相色谱法测定中药制剂更年安片中五味子醇甲含量的测定方法。
背景技术：
目前，随着中药现代化的不断发展，中药制药工艺及质量检测水平的不断提高，越来越多的先进检测仪器及实验手段被用于中成药质量的检测中来。同时，随着人们生活水平的提高，社会对药品的质量要求也越来越高，这就要求各个制药企业要有先进、稳定、可靠的检测方法对药品的质量进行有效的控制。因此，提高中成药的质量标准势在必行。
此外，国家鼓励各个制药企业及科研单位提高现有的中成药质量标准，并通过一些途径促进质量标准的提高，例如1.2005年版《中国药典》在2000年版的基础上增加了许多中药材及中成药的定性、定量鉴别方法；2.在新品研制及老产品二次开发等药品注册申报的过程中，都要求在原有质量标准的基础上进行提高。
更年安片为中新药业天津乐仁堂制药厂研制开发的治疗更年期综合症的纯中药制剂，收载于《中国药典》2000年版，由地黄、制首乌、五味子、熟地等药味组成，具有滋阴清热、除烦安神之功，临床用于治疗更年期出现的潮热汗出、眩晕、耳鸣、失眠、烦躁不安、血压不稳等症。五味子为处方中主要成分，起养心安神、生津敛汗的作用。五味子醇甲为五味子中的主要成分之一，因五味子醇甲在五味子药材中含量较高，且性质稳定，因此，通过对更年安片中五味子醇甲含量的监控可有效地控制该产品内在质量。
发明内容
本发明的目的是提供一种更年安片中五味子醇甲含量的测定方法，本发明是利用高效液相色谱法测定更年安片中的五味子醇甲含量，以提高更年安片的质量标准。
本发明的技术方案概述如下一种更年安片中五味子醇甲含量的测定方法，由如下步骤组成(1)对照品溶液的制备取五味子醇甲对照品适量，精密称定，加甲醇制成1.066μg/ml～10.66μg/ml的溶液，最好是4.8μg/ml，作为对照品溶液；(2)供试品溶液的制备取更年安片样品20片，除去薄膜包衣，精密称定，研细，取粉末0.3g精密称定，置50ml具塞锥形瓶中，加甲醇25ml，精密称定，水浴加热回流20-90分钟，最好是30分钟，放冷至室温，精密称定，用甲醇补足减失重量，微孔滤膜滤过，作为供试品溶液，微孔滤膜孔径最好选0.45μm；(3)采用高效液相色谱仪进行测定，色谱条件为Diamonsil色谱柱C18反相色谱柱规格5μm，250×4.6mm；流动相∶乙腈与水的体积比为30～70∶70～30，优选的是50∶50；检测波长217nm；流速0.5ml/min～1.0ml/min，优选的是0.8ml/min；柱温20℃～40℃，优选的是25℃，分别精密取对照品溶液与供试品溶液各5ul，注入所述高效液相色谱仪，测定。
本发明的优点是方便、快速、专属性及重现性好，结果准确可靠，可用于更年安片的质量控制。
图1为五味子醇甲对照品的高效液相色谱图；图2为更年安片的高效液相色谱图；图3为阴性对照品的高效液相色谱图。
具体实施例方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明。
实施例1一种更年安片中五味子醇甲含量的测定方法，包括如下步骤(1)对照品溶液的制备取五味子醇甲对照品适量，精密称定，加甲醇制成4.8μg/ml，作为对照品溶液；(2)供试品溶液的制备取更年安片样品20片，除去薄膜包衣，精密称定，研细，取粉末0.3g精密称定，置50ml具塞锥形瓶中，加甲醇25ml，精密称定，水浴加热回流30分钟，放冷至室温，精密称定，用甲醇补足减失重量，选0.45μm微孔滤膜滤过，作为供试品溶液；(3)采用高效液相色谱仪进行测定，色谱条件为Diamonsil色谱柱C18反相色谱柱规格5μm，250×4.6mm；流动相∶乙腈与水的体积比为50∶50；检测波长217nm；流速0.8ml/min；柱温25℃，分别精密取对照品溶液与供试品溶液各5ul，注入所述高效液相色谱仪，测定。
实施例2一种更年安片中五味子醇甲含量的测定方法，包括如下步骤(1)对照品溶液的制备取五味子醇甲对照品适量，精密称定，加甲醇制成1.066μg/ml的溶液，作为对照品溶液；(2)供试品溶液的制备取更年安片样品20片，除去薄膜包衣，精密称定，研细，取粉末0.3g精密称定，置50ml具塞锥形瓶中，加甲醇25ml，精密称定，水浴加热回流20分钟，放冷至室温，精密称定，用甲醇补足减失重量，微孔滤膜滤过，作为供试品溶液；(3)采用高效液相色谱仪进行测定，色谱条件为Diamonsil色谱柱C18反相色谱柱规格5μm，250×4.6mm；流动相∶乙腈与水的体积比为30∶70；检测波长217nm；流速0.5ml/min；柱温20℃，分别精密取对照品溶液与供试品溶液各5ul，注入所述高效液相色谱仪，测定。
实施例3一种更年安片中五味子醇甲含量的测定方法，包括如下步骤(1)对照品溶液的制备取五味子醇甲对照品适量，精密称定，加甲醇制成10.66μg/ml的溶液，作为对照品溶液；(2)供试品溶液的制备取更年安片样品20片，除去薄膜包衣，精密称定，研细，取粉末0.3g精密称定，置50ml具塞锥形瓶中，加甲醇25ml，精密称定，水浴加热回流90分钟，放冷至室温，精密称定，用甲醇补足减失重量，微孔滤膜滤过，作为供试品溶液；(3)采用高效液相色谱仪进行测定，色谱条件为Diamonsil色谱柱C18反相色谱柱规格5μm，250×4.6mm；流动相∶乙腈与水的体积比为70∶30；检测波长217nm；流速1.0ml/min；柱温40℃，分别精密取对照品溶液与供试品溶液各5ul，注入所述高效液相色谱仪，测定。
实施例4线性关系的考察精密吸取五味子醇甲对照品(浓度为4.8μl/ml)2、4、8、12、16、20μl进样，按上述色谱条件测定，以对照品五味子醇甲的进样量为横坐标，相应峰面积积分值为纵坐标，计算回归方程为Y＝88998.64X-3418.35，r＝0.99997。五味子醇甲在1.066～10.66μg/ml范围内成良好的线性关系。
实施例5精密度实验取同一对照品溶液，连续5次进样，测得峰面积积分值，结果RSD(相对标准偏差)为0.19％。
实施例6重现性实验取同一批样品，称取供试品5份，照含量测定方法测定，平均含量为76.596μg/片，RSD为2.77％，表明本法重现性良好，精密度较高。
实施例7稳定性实验取同一供试品溶液，每隔2小时进样5μl，共进样5次，测定峰面积并计算含量，结果RSD为2.20％(n＝6)。
实施例8回收率实验采用加样回收法，取已知含量(255.32mg/g，每片重0.31g)的样品5份，分别精密加入一定量的五味子醇甲对照品溶液，照含量测定方法测定，计算加样回收率，结果见表1。
表1.回收率试验结果Table 1 Result of recovery test
实施例9空白对照液的制备与测定除五味子外按处方比例称取其他药味，按处方工艺制成不含五味子的制剂，按供试品溶液制备法制成空白对照液，测定结果见图1图2和图3，说明其他药材与辅料均不干扰五味子醇甲的测定。
实施例10样品测定 取十批更年安样品(更年安片每片重0.31g)，按供试品溶液制备项下方法制备供试品溶液，每批制备两份供试品溶液。精密吸取供试品溶液、对照品溶液各5μl，注入高效液相色谱仪，进行测定，十批样品结果见表2。
表2更年安片中五味子醇甲的测定结果Table 2 Determination of Schizandrol A in Gengnian’an Tablet
讨论提取方法考察经查阅文献，五味子醇甲易溶于有机溶剂，分别考察了甲醇回流提取20分钟、30分钟、1小时，氯仿回流提取1小时、乙酸乙酯超声提取30分钟，甲醇超声提取1小时，结果以甲醇回流提取30分钟效果最好，故采用此提取方法。
检测波长的选择对五味子醇甲对照品采用紫外分光光度法测定吸收波长，在217nm为最大吸收波长，故选择217nm作为液相含量测定波长。
本测定方法方便、快速、专属性及重现性好，结果准确可靠，可用于更年安片的质量控制。
权利要求
1.一种更年安片中五味子醇甲含量的测定方法，其特征是由如下步骤组成(1)对照品溶液的制备 取五味子醇甲对照品适量，精密称定，加甲醇制成1.066μg/ml～10.66μg/ml的溶液，作为对照品溶液；(2)供试品溶液的制备 取更年安片样品20片，除去薄膜包衣，精密称定，研细，取粉末0.3g精密称定，置50ml具塞锥形瓶中，加甲醇25ml，精密称定，水浴加热回流20-90分钟，放冷至室温，精密称定，用甲醇补足减失重量，微孔滤膜滤过，作为供试品溶液；(3)采用高效液相色谱仪进行测定，色谱条件为Diamonsil色谱柱C18反相色谱柱规格5μm，250×4.6mm；流动相乙腈与水的体积比为30～70∶70～30；检测波长217nm；流速0.5ml/min～1.0ml/min；柱温20℃～40℃，分别精密取对照品溶液与供试品溶液各5ul，注入所述高效液相色谱仪，测定。
2.根据权利要求1所述的一种更年安片中五味子醇甲含量的测定方法，其特征是所述对照品溶液的浓度为4.8μg/ml。
3.根据权利要求1所述的一种更年安片中五味子醇甲含量的测定方法，其特征是所述供试品溶液水浴加热回流时间为30分钟。
4.根据权利要求1所述的一种更年安片中五味子醇甲含量的测定方法，其特征是所述微孔滤膜孔径为0.45μm。
5.根据权利要求1所述的一种更年安片中五味子醇甲含量的测定方法，其特征是所述色谱条件中的乙腈与水的体积比为50∶50。
6.根据权利要求1所述的一种更年安片中五味子醇甲含量的测定方法，其特征是所述色谱条件中的流速为0.8ml/min。
7.根据权利要求1所述的一种更年安片中五味子醇甲含量的测定方法，其特征是所述色谱条件中的柱温为25℃。
全文摘要
本发明公开了一种更年安片中五味子醇甲含量的测定方法，由如下步骤组成(1)对照品溶液的制备取五味子醇甲对照品适量，加甲醇制成对照品溶液；(2)供试品溶液的制备取更年安片样品，除去薄膜包衣，精密称定，研细，取粉末精密称定，置具塞锥形瓶中，加甲醇，水浴加热回流，放冷，微孔滤膜滤过，作为供试品溶液；(3)采用高效液相色谱仪进行测定，本发明方便、快速、专属性及重现性好，结果准确可靠，可用于更年安片的质量控制。
文档编号G01N30/88GK1731172SQ20051001488
公开日2006年2月8日 申请日期2005年8月26日 优先权日2005年8月26日
发明者凌宁生, 杨瑾, 律兆荣, 刘志宏 申请人:天津中新药业集团股份有限公司乐仁堂制药厂