专利名称：食品中天然色素辣椒红色素的检测方法
申请名称食品中天然色素辣椒红色素的检测方法技术领域食品安全检测与分析背景技术19世纪中叶以前，人们都是用食用色素着色，自从1856年英国W.H PERKINS发明了第一个合成有机色素苯胺紫以后，相继合成了许多有机色素。由于这类色素色泽鲜艳，性质稳定，成本低廉，很快就取代了天然色素。随着科学的发展，人们发现许多合成色素对人体有害。除了其本身的化学性能危害人体健康，而且在合成过程中，还可能被砷、铝等有害物质所污染。因此，世界各国已先后禁止使用许多合成色素。据统计，世界各国曾作为食用的合成色素品种有100多种，但目前各国仍广泛使用的仅十几种，有的国家如挪威已完全禁止使用合成色素。随着人们崇尚天然、追求健康和安全第一的心理要求，以及中国进入WTO所面临的全球化经济的需要，食用天然色素的发展更加迅速。据资料统计，1971-1981年世界公开发表的食用色素专利为26个，其中87.5％是食用天然色素。天然色素因其独特功效和低毒性在食品和化妆品应用中显示出广阔的前景。
虽然绝大多数天然色素无毒和无副作用，安全性高，但是，天然并不等于绝对无毒，许多天然色素的毒性资料比较少，未能制订ADI值，即对其毒性还不清楚。为安全起见，限制其在食品中的含量是非常重要的。因此建立与国际接轨的检验方法一食品中天然色素的测定方法，创建具有我国特色的食品安全体系，对保护民族产业，提升我国食品工业以及此次涉及的相关行业标准水平的提升，对提高我国产品质量、积极参与国际竞争，防止贸易壁垒，尤其是保障我国人民生命健康，有着十分重大和深远的意义。
新疆地处欧亚大陆中温带极端干旱的荒漠地区，其独特的干旱自然生态环境孕育着许多独具特色的优势植物(如番茄、辣椒、红花和甜菜等)，天然色素资源十分丰富，具有巨大的研究和开发潜力。但对其开发力度不够，技术水平低下，没有发挥其应有的经济效益。其中一个重要的限制因素就是天然色素的检测方法比较落后，因此建立天人色素的检测体系对促进我国的食品安全和保障我国人民生命健康有重要的意义。
发明内容
采用高效液相色谱法测定辣椒中的辣椒红色素的研究，该方法可以可使辣椒红色素与其它色素完全分离，从而准确定性、定量的分析测定辣椒红色素的含量；该方法简单快速，避免了样品处理所需萃取等繁琐步骤，适于大批量样品的分析检测，结果准确、可靠。
辣椒红色素的检测方法与技术参数高效液相色谱仪(岛津LC-10ADvp)，二级管阵列检测器(SPDM10Avp)流动相V(正己烷)∶V(丙酮)＝78∶22，检测波长475nm，分析柱Shim-pack CLC-SIM(M)(150×4.6mm ID)，流速0.8ml/min，柱温40℃，进样量20μl。
图1正己烷/丙酮(81∶19)HPLC；图2正己烷/丙酮(70∶30)HPLC图3正己烷/丙酮(78∶22)HPLC；图4流速为0.6ml/minHPLC图5流速为0.8ml/minHPLC；图6流速为1.2ml/minHPLC图7流速为1.5ml/minHPLC；图8辣椒红色素标准曲线图9辣椒中辣椒红色素HPLC；图10辣椒色素的结构式(图10-1辣椒红素、图10-2辣椒玉红素)具体实施方式
1样品预处理准确称取辣椒粉或含辣椒红色素的样品2.2mg于50ml容量瓶中，溶于25m190％丙酮(AR)，超声波处理2min，在HZQ-F恒温振荡箱上振荡10min，用丙酮定容至50ml，离心(3000r/min)5min，取一定量在恒温真空干燥机中除去丙酮(温度小于40℃)，之后用流动相定容至5ml，经0.45μm微孔滤膜过滤后直接上高效液相色谱测定。为了减少误差，标准品的处理同样品的处理保持一致。
2流动相比例的确定从图1-图3可以得到以下结果利用流动相体系正己烷∶丙酮(81∶19)可以看出峰形不完全分离；以流动相体系正己烷∶丙酮(70∶30)可看出峰分离不完全；以流动相体系正己烷∶丙酮(78∶22)可看出峰分离良好，峰形美观，无拖尾。所以在今后的实验选用正己烷∶丙酮(78∶22)的流动相体系。
3流速的选择分别比较了0.6ml/min、0.8ml/min、1.2ml/min、1.5ml/min 4个流速，由图4-图7可看出流速过快分离不完全，峰形较差，保留时间太短；流速太慢，保留时间较长，峰形展宽。为保证分离完全，峰形的美观，流速定为0.8ml/min。
4线性关系和检出限精确称取辣椒红色素标准品2.2mg于10ml容量瓶中，经过处理后，配制成浓度分别为0.022、0.044、0.088、0.132、0.176mg/ml的溶液，按上述色谱条件测定，以浓度和峰面积分别为横纵坐标作标准曲线图，见图8，其线性方程为y＝1.0×107×-3.735×104(r＝0.9994)，线性范围0.022～0.176mg/ml。
在上述分析条件下，以基线噪声的2倍对应浓度为方法的检出限，测得辣椒红色素的检出限为5ug/L。
5回收率的测定采用加样同收率测定法。精确量取含辣椒红色素浓度0.048，0.096，0.144mg/ml各1ml于10ml容量瓶中，用已知浓度样品溶液定容，按上述色谱条件，测定其中辣椒红色素含量，每次进样20μl，每样平行测定5次，取其平均值，按公式[(样品测得含量一本底含量)/加标样含量]计算回收率。数据由表1可看出平均回收率为99.17％，RSD＝1.64％，加样回收率良好。
表1回收率实验结果
6精密度实验取同一样品溶液，按上述色谱条件，进样量20μl，重复5次，结果见表2。
表2精密度实验结果
7样品的测定按上述色谱条件，对待测样品进行测定，样品色谱图见图9，按公式y＝1.0×107×-3.735×104计算得出辣椒红色素的含量为0.281％。
8辣椒红色素色谱测定条件采用高效液相色谱法测定辣椒中的辣椒红色素的研究，其测定条件为流动相V(正己烷)∶V(丙酮)＝78∶22，检测波长475mm，分析柱Shim-pack CLC-SIM(M)(150×4.6mm ID)，流速0.8ml/min，柱温40℃，进样量20μl。测定结果表明，可以使辣椒红色素在10min内得到较好的分离，其线性范围为0.022~0.176mg/ml，r＝0.9994，平均回收率达到99.17％，变异系数为1.63％(n＝5)，精密度RSD＝0.23％，重现性良好，检测限为0.05ug/ml。
权利要求
采用高效液相色谱法测定辣椒中的辣椒红色素的研究，该方法可以可使辣椒红色素与其它色素完全分离，从而准确定性、定量的分析测定辣椒红色素的含量；该方法简单快速.避免了样品处理所需萃取等繁琐步骤，适于大批量样品的分析检测，结果准确、可靠。要求保护范围为辣椒红色素的检测方法与技术参数高效液相色谱仪(岛津LC-10ADvp)，二级管阵列检测器(SPDM10Avp)流动相V(正己烷)∶V(丙酮)＝78∶22，检测波长475nm，分析柱Shim-pack CLC-SIM(M)(150×4.6mm ID)，流速0.8ml/min，柱温40℃，进样量20μl。
全文摘要
食品中天然色素番茄红色素的检测方法隶属于食品安全检测技术领域，其主要技术问题就是探索简单、易行的检测技术，建立与国际接轨的检验方法——食品中天然色素的测定方法，创建具有我国特色的食品安全体系。本技术采用高效液相色谱法测定辣椒中的辣椒红色素的研究，该方法可以可使辣椒红色素与其它色素完全分离，从而准确定性、定量的分析测定辣椒红色素的含量；该方法简单快速，避免了样品处理所需萃取等繁琐步骤，适于大批量样品的分析检测，结果准确、可靠。
文档编号G01N30/02GK101082609SQ20061008518
公开日2007年12月5日 申请日期2006年5月30日 优先权日2006年5月30日
发明者田丽萍 申请人:田丽萍