专利名称：善产双黄蛋鸭的早期鉴别方法
技术领域：
本发明涉及家禽养殖技术领域，特别是涉及一种善产双黄蛋鸭的早期鉴别方法。
背景技术：
高邮鸭(Anatis Domesticae Caro，VarityGaoyou)原产于江苏高邮境内，分布于江苏省里下河地区，是蛋肉兼用型的大型麻鸭品种。公鸭体型较大，背阔肩宽胸深，头和颈上半部羽毛墨绿色，背、腰、胸褐色芦花羽，尾羽黑色，腹部白色；母鸭颈纫长，羽毛紧密，胸宽深，后躯发达。全身羽毛淡棕褐色，如麻雀羽毛，花纹细小，主翼羽蓝黑色。春季产蛋量约100个，秋季产蛋量约60个，平均年产蛋140-160个，蛋重75.9克。高邮鸭以产双黄蛋著称，双黄蛋平均重106.35克，双黄蛋的产率约为1％。
高邮鸭双黄蛋自古就是进贡朝廷和馈赠亲友的名优士特产，有极高的价值。高邮鸭虽然善产双黄蛋，但产率并不高，而且高邮鸭鸭群中能产双黄蛋的鸭只占母鸭的20％左右，如果能够早期鉴别淘汰，则能够显著地提高双黄蛋的产率，能够使早春鸭的双黄蛋的产率约达10％左右，秋鸭的双黄蛋的产率约达4％左右。高邮鸭善产双黄蛋与高邮鸭的子宫部碳酸酐酶活力和肾脏碳酸酐酶活力比普通鸭明显高有关，双黄蛋蛋清中碳酸酐酶的活力明显高于单黄蛋的蛋消中碳酸酐酶的活力。形成双黄蛋蛋壳所必须的钙与CO32明显多于单黄蛋，这就需要蛋清中碳酸酐酶的活力的加强来驱使蛋清向蛋壳膜上转运更多的HCO3，带动碳酸钙的沉积。Fernandez，M.S，Passalacqua，K，Arias，J.I andArias，J.L.Partial biomimetic reconstitution of avian eggshell formation.J Struct Biol，2004，148(1)1-10的研究表明，碳酸酐酶的活力的加强可以促进碳酸钙的沉积。因此增加蛋清中碳酸酐酶的活力能达到促进双黄蛋产生的频率。而蛋清中碳酸酐酶的活力与体内血细胞的碳酸酐酶的活力直接相关。幼年母鸭血细胞的碳酸酐酶的活力与成体母鸭的血细胞的碳酸酐酶的活力具有平行关系。因此可以通过测定幼年母鸭血细胞的碳酸酐酶的活力来对母鸭的产双黄蛋的能力来进行甄别。
碳酸酐酶的测定方法很多，主要有以下儿种方法1.放射免疫分析法；2.pH计法；3.同位素CO2质谱分析法；4.比色法；5.荧光光度法；6.mRNA测定法；7.凝胶电泳法等等。各种方法有优缺点。放射免疫分析法，有较高的灵敏度，重现性好，但操作复杂；同位素CO2质谱分析法，较高的灵敏度，操作简单，重现性好但设备昂贵；比色法，荧光光度法，精确度较高，但测试成本较高。mRNA测定法和凝胶电泳法灵敏度高，但操作烦琐；pH计法，操作简单，便利快速，设备便宜，用得较广泛，但由于灵敏度较低，在一些活力范围内线性较好，但超出该范围，线性较差，且所反映的酶活性非生理条件。
发明内容
本发明的目的在于提供一种善产双黄蛋鸭的早期鉴别方法，通过对幼年母鸭血细胞的碳酸酐酶的活力进行测定，达到早期鉴别善产双黄蛋鸭的目的。
取30-40日龄的幼年母鸭的血液，测定其血液中碳酸酐酶活力，经过统计学检验，选择碳酸酐酶活力值在1％的统计水平上显著地大于群体平均值的母鸭，作为被选鸭。
由于采用统计学检验，样本容量至少在50只以上。抽取的血液在50～100微升，从每只鸭的翼根静脉抽取；进行碳酸酐酶活力测定，采用常用的pH计法，将测得的结果，进行统计学检验，优选t检验。选择碳酸酐酶活力在1％的统计水平上显著地大于群体平均值的母鸭，作为被选鸭。这些鸭单独饲养，它们产双黄蛋的概率明显大于未进行选择的鸭子。这种做法使早春鸭的双黄蛋的平均产率由3.10％增加到9.45％-10.63％，秋鸭的双黄蛋的产率由0.87％增加到3.74％-4.13％。
本发明的优点(1)本方法选择出的高邮鸭，双黄蛋的产率大大提高。
(2)无副作用。
(3)本方法不增加饲料，增加饲养的比较效益。
具体实施例方式
实施例1选取于4月下旬孵出高邮鸭的母鸭50只作为一个群体，在它们达到30-33日龄时，从每只鸭的翼根静脉抽取50微升血液，放入研钵中；倒入少量液氮，研磨，等液氮挥发完以后，再倒入少量液氮，研磨，等液氮挥发完以后，再倒入少量液氮，研磨，如此3次后至血细胞完全破碎；再用预冷的巴比妥缓冲液(20mmol/L，pH8.30，0℃)清洗研钵，并定容到l0毫升，再用冷冻离心机10000g离心5分钟，上清液用于碳酸酐酶活力的测定，随后的测定方法采用pH计法。保持反应系统在0℃，取待测上消液5ml加入到含10ml的巴比妥缓冲液(20mmol/L，pH8.30)的反应容器中，然后迅速加入10ml预冷的(0℃)的饱和CO2的蒸馏水，用pH电极监测反应体系pH值变化，记下pH值下降一个单位(例如pH值从8.2-7.2)所需的时间，记为t，同时记录在酶失活条件下pH值下降一个单位所需的时间，记为t0，酶的活力用WA-unit表示。WA＝t/t0-1。，将测得的结果，进行t检验，选择碳酸酐酶活力极显著(P＜0.01)地大于群体平均值的母鸭，作为被选鸭。这些鸭单独饲养，它们产双黄蛋的概率明显大于未进行选择的鸭子。这种做法选出了12只鸭，年产2286个蛋，每只鸭年平均产蛋数为190.5枚，产双黄蛋218枚，双黄蛋的产率为9.45％。而常规未经筛选的早春鸭的双黄蛋的平均产率为3.10％。
实施例2选取于4月下旬孵出高邮鸭的母鸭80只作为一个群体，在它们达到37-40日龄时，从每只鸭的翼根静脉抽取100微升血液，碳酸酐酶活力测定同实施例1，将测得的结果，进行t检验。选择碳酸酐酶活力极显著(P＜0.01)地大于群体平均值的母鸭，作为被选鸭。这些鸭单独饲养，它们产双黄蛋的概率明显大于未进行选择的鸭子。这种做法选出了16只鸭，年产3255个蛋，每只鸭年平均产蛋数为203.4枚，产双黄蛋346枚，双黄蛋的产率为10.63％。而常规未经筛选的早春鸭的双黄蛋的平均产率为3.10％。
实施例3选取于8月下旬孵出高邮鸭的母鸭50只作为一个群体，在它们达到32-36日龄时，从每只鸭的翼根静脉抽取50微升血液，进行碳酸酐酶活力测定，碳酸酐酶活力测定同同实施例1，将测得的结果，进行t检验。选择碳酸酐酶活力极显著(P＜0.01)地大于群体平均值的母鸭，作为被选鸭。这些鸭单独饲养，它们产双黄蛋的概率明显大于末进行选择的鸭子。这种做法选出了14只鸭，年产2356个蛋，每只鸭年平均产蛋数为168.3枚，产双黄蛋88枚，双黄蛋的产率为3.74％。而常规未经筛选的秋鸭的双黄蛋的平均产率为0.87％。
实施例4选取于8月下旬孵出高邮鸭的母鸭80只作为一个群体，在它们达到35-40日龄时，从每只鸭的翼根静脉抽取100微升血液，进行碳酸酐酶活力测定，碳酸酐酶活力测定同同实施例1，将测得的结果，进行t检验。选择碳酸酐酶活力极显著(P＜0.01)地大于群体平均值的母鸭，作为被选鸭。这些鸭单独饲养，它们产双黄蛋的概率明显大于末进行选择的鸭子。这种做法选出了20只鸭，年产3441个蛋，每只鸭年平均产蛋数为172.1枚，产双黄蛋142枚，双黄蛋的产率为4.13％。而常规未经筛选的秋鸭的双黄蛋的平均产率为0.87％。
权利要求
1.善产双黄蛋鸭的早期鉴别方法，其特征在于取30-40日龄的幼年母鸭的血液，测定其血液中碳酸酐酶活力，经过统计学检验，选择碳酸酐酶活力值在1％的统计水平上显著地大于群体平均值的母鸭，作为被选鸭。
2.根据权利要求1所述的善产双黄蛋鸭的早期鉴别方法，其特征在于测定的母鸭只数在50只以上。
3.根据权利要求1所述的善产双黄蛋鸭的早期鉴别方法，其特征在于抽取的血液在50～100微升，从每只鸭的翼根静脉抽取。
4.根据权利要求1所述的善产双黄蛋鸭的早期鉴别方法，其特征在于碳酸酐酶活力测定，采用常用的pH计法，统计学检验采用t检验。
全文摘要
善产双黄蛋鸭的早期鉴别方法，涉及家禽养殖技术领域，即取30－40日龄的幼年母鸭的血液，测定其血液中碳酸酐酶活力，经过统计学检验，选择碳酸酐酶活力值在1％的统计水平上显著地大于群体平均值的母鸭，作为被选鸭。本方法选择出的高邮鸭，双黄蛋的产率大大提高、无副作用、本方法不增加饲料，增加了饲养的比较效益。
文档编号G01N31/00GK1944664SQ20061009674
公开日2007年4月11日 申请日期2006年10月13日 优先权日2006年10月13日
发明者吴沿友, 赵新政, 李萍萍, 毛罕平, 章友, 许文祥 申请人:江苏大学