专利名称：一种混合水溶维生素的分析方法
技术领域：
本发明涉及物质的分析方法，尤其涉及一种混合水溶维生素的分析方法。
技术背景混合水溶维生素包括维生素Bi、维生素B2、维生素B6和维生素C，传统 的毛细管电泳分离方法，由于受到压力进样和落差进样等传统进样方式的限 制，定量差，实验结果的重现性偏低， 一般在2%-5%之间。高精度定量毛细管电泳仪是一种新型的微量分析仪器，它采用压力和电渗 流驱动电解质溶液通过毛细管柱。样品以溶液状态进入毛细管柱，不同组份在 高压电场的作用下，以不同的速度定向迁移，先后依次通过紫外检测器进行检 测，根据各组分的迁移时间和响应值进行定性、定量分析。电泳的支持物是石 英毛细管，采用纳升级定量进样阀，可实现高精度定量进样。发明内容本发明的目的就是为了解决上述现有技术存在的问题，提供一种高精度定 量毛细管电泳仪的混合水溶维生素的分析方法。为了达到上述目的，本发明采用了以下技术方案 一种混合水溶维生素的 分析方法，采用高精度定量毛细管电泳仪分析，所述的高精度定量毛细管电泳 仪包含高精度微流液体输送泵、微流控制装置、进样阀、高压电源、电场隔离装置和紫外检测器，所述的混合水溶维生素的分析方法包括以下步骤A、 制备样品溶液准确称取维生素B。维生素B2、维生素B6标准品各100mg，维生素C标准 品lrag置于100ml容量瓶中，用lOmM硼砂溶液溶解并稀释至刻度，作为样品溶 液；B、 仪器准备将高精度定量毛细管电泳仪各部分连接好，检查是否漏液，保证仪器的密 闭性；打开紫外检测器电源，预热30min;打开高精度微流液体输送泵、高压 电源和微流控制装置，调节电压为15kV，泵流速为0. 02ml/min;C、 进样分析从进样阀注入样品溶液进行分析，并采集图谱；D、 连续进样分析7次，记录保留时间和积分面积，并计算相对标准偏差。 步骤c中所述的进样分析的分析条件为-毛细管柱内径150um，柱长100 cm，有效柱长60 cm; 流动相10mM硼砂缓冲溶液； 检测波长254nm。本发明混合水溶维生素的分析方法由于采用高精度定量毛细管电泳仪进 行分析，解决了传统毛细管电泳定量差的固有缺陷，四种水溶维生素达到基线 分离，定性重现性RSD7〈0. 5%，定量重现性RSD7〈1%。
图1是本发明的分析方法所采用的高精度定量毛细管电泳仪的结构原理图；图2是采用本发明的分析方法得到混合水溶维生素的图谱。
具体实施方式
本发明混合水溶维生素的分析方法，采用高精度定量毛细管电泳仪分析， 这种高精度定量毛细管电泳仪的主要结构如图l所示，它包括流动相貯液瓶l 和2、连接管3、高精度微流液体输送泵4和5、混合阀6、微流控制装置7、 电场隔离装置8、定量进样阀9、高压电源10、分离毛细管11、紫外检测器12、 高压导线13、高压电极14、三通15、连接管16和废液收集瓶17。本发明混合水溶维生素的分析方法的步骤是首先以维生素B"维生素B2、 维生素B6和维生素C标准品为样品，制备出它们的混合溶液。分别准确称取维 生素Bi、维生素B2、维生素Be标准品各100mg、维生素C标准品lmg置于100ml 容量瓶中，用10mM硼砂溶液(pH9.2)溶解并稀释至刻度，作为样品溶液。在该样品溶液中，维生素Bi、维生素B2、维生素Be的浓度均为1.0X10—3g/ml，维 生素C的浓度为1.0X10—5g/ml。将高精度定量毛细管电泳仪各部分连接好，检查是否漏液，保证仪器的密 闭性。接着打开紫外检测器电源，预热30 min;打开高精度微流液体输送泵， 控制泵流速为0. 02ml/min，开始输送流动相；打开高压电源，调节电压为15kV， 并打开微流控制装置，控制流动相的流量和流速，至紫外检测器检测出流动相 的稳定基线。然后从定量进样阀注入样品溶液进行分析。分析条件为毛细管 柱内径150um，柱长100 cm，有效柱长60 cm;流动相lOmM硼砂缓冲溶 液；检测波长254nm。采集四种水溶维生素的图谱，如图2所示。图2中3. 78 为维生素B!的谱峰，4.50为维生素B2的谱峰，5. 14为维生素Be的谱峰，6.38 为维生素C的谱峰。为了证明本方法的效果，按照上述方法连续进样分析7次，分别记录保留 时间和积分面积，并计算相对标准偏差RSD。实验结果表明，四种水溶维生素 达到基线分离，定性重现性RSD/0. 5%，定量重现性RSD7<1%。
权利要求
1、一种混合水溶维生素的分析方法，其特征在于，采用高精度定量毛细管电泳仪分析，所述的高精度定量毛细管电泳仪包含高精度微流液体输送泵、微流控制装置、进样阀、高压电源、电场隔离装置和紫外检测器，所述的混合水溶维生素的分析方法包括以下步骤A、制备样品溶液准确称取维生素B1、维生素B2、维生素B6标准品各100mg，维生素C标准品1mg置于100ml容量瓶中，用10mM硼砂溶液溶解并稀释至刻度，作为样品溶液；B、仪器准备将高精度定量毛细管电泳仪各部分连接好，检查是否漏液，保证仪器的密闭性；打开紫外检测器电源，预热30min；打开高精度微流液体输送泵、高压电源和微流控制装置，调节电压为15kV，泵流速为0.02ml/min；C、进样分析从进样阀注入样品溶液进行分析，并采集图谱；D、连续进样分析7次，记录保留时间和积分面积，并计算相对标准偏差。
2、 根据权利要求l所述的混合水溶维生素的分析方法，其特征在于步 骤C中所述的进样分析的分析条件为毛细管柱内径150um，柱长100 cm，有效柱长60 cm; 流动相lOmM硼砂缓冲溶液； 检测波长254nm。
全文摘要
一种混合水溶维生素的分析方法，采用高精度定量毛细管电泳仪进行分析，以10mM硼砂为缓冲液，利用高精度微流液体输送泵进行流动相输送，流速0.02mL/min，流动相经过专属分流装置形成极低流速用来提供电泳所需流动相。使用长100cm，有效长度60cm的带有电隔离槽的毛细管柱进行分离，分离电压为15kV。本发明混合水溶维生素的分析方法解决了传统毛细管电泳定量差的固有缺陷，四种水溶维生素达到基线分离，定性重现性RSD<sub>7</sub>＜0.5％，定量重现性RSD<sub>7</sub>＜1％。
文档编号G01N27/447GK101334375SQ200710042959
公开日2008年12月31日 申请日期2007年6月28日 优先权日2007年6月28日
发明者鹏 李, 申克宇, 超 阎, 黄晓晶, 路 黎 申请人:上海通微分析技术有限公司