专利名称：：碳青霉烯类化合物侧链的含量测定方法
技术领域：
：本发明涉及医药领域，具体涉及一种碳青霉烯类化合物侧链的含量测定方法。
背景技术：
：随着近年来抗生素耐药问题日趋明显，多药耐药性菌株屡见报道，除了需要对抗生素的使用进行更为合理的控制外，临床上亟需开发新一代拥有高效抗菌活性的新型抗感染治疗药物，碳青霉烯类化合物的出现，满足了这种需要。碳青霉烯(carbapenem)类化合物是20世纪70年代发展起来的新型结构的(3-内酰胺类抗生素。先后上市的有亚胺培南(imipenem)、帕尼培南(panipenem)、美罗培南(meropenem)、比阿培南(biapenem)、厄他培南(ertapenem)和多尼培南(doripenem)等。由于该类药对革兰氏阳性、革兰氏阴性菌、需氧菌和厌氧菌等均具有超广谱强效抗菌作用，并有良好的组织渗透性，对各种细菌感染疗效优异，毒副作用少。近几年来-直受到人们的关注。碳青霉烯类化合物的结构都是由母核和侧链两部分构成，母核部分基本相同，而且已经产业化生产；侧链部分则不尽相同，但都有一个共同的特点，就是侧链都含有巯基。侧链通过该巯基与母核对接，经过一系列反应，得到产品。由于该类药大多都是注射剂，产品质量至关重要。侧链中间体的纯度，直接影响对接反应的结果。如果测定侧链的纯度不准确，就无法确定母核与侧链的投料比，造成原料的浪费，而且给后处理造成很大的困难，使生产成本大幅上升；更严重的是可能造成最终产品质量不合格。侧链的合成过程中有可能产生大量的无机盐(如氯化钠、碳酸钠、氯化铵)和有机盐，(如乙酸钠、甲酸钠)。某些侧链在水中溶解度较大，而反应液中又有大量的有机盐和无机盐与之共存，这些与产品共存的盐很难通过常规的方法除去。为了获得高纯度的侧链需要反复精制，即使经过反复精制，是否能达到合理的纯度，也无法证明，所以真正意义上的分离十分困难。现有技术中碳青霉烯类化合物侧链的含量测定一般都采用HPLC法。但这种含量测定方法的缺点是显而易见的反应过程中产生的无机盐和有机盐在HPLC中没有吸收峰，所以如果采用HPLC面积归一化法不能准确反映侧链的含量，而且受到对照品的限制，无法准确、快速的进行测定。基于碳青霉烯类化合物巨大的应用前景，人们一直迫切希望找到一种简单、快速，而且能准确反映碳青霉烯类化合物侧链真实含量的通用的测定方法。
发明内容为了解决上述问题，本发明提供了一种碳青霉烯类化合物侧链的含量测定方法。本发明的测定方法包括如下步骤-(1)将碳青霉烯类化合物侧链溶于溶剂中；(2)用碘滴定液标定；(3)将滴定结果用空白试验校正；(4)按下式计算侧链的含量y(l/2/2)x(F母Mx腿其中，C(丄12):碘滴定液摩尔浓度；2V:为滴定碳青霉烯类化合物侧链时消耗碘滴定液的体积，ml;V(l:为滴定空白时消耗的碘滴定液的体积，ml;M:为碳青霉烯类化合物侧链的摩尔分子量；W:为样品称样量，mg;X:为所测样品的含量，mg。其中，歩骤(1)中所述的碳青霉烯类化合物侧链优选自如下化合物化合物l:比阿培南侧链6，7-二氢-6-巯基-5H-吡唑[l，2-a][l，2，4]三氮唑内錄氯化物；化合物2:关罗培南侧链(2S,4S)-4-巯基-1-(对硝基苄氧羰基)-1-吡咯垸-2-(N，N-二甲基)甲酰胺；化合物3:帕尼培南侧链(3S)-1-(对硝基苄氧羰酰乙酰亚胺)-3-巯基吡咯烷；化合物4:厄他培南侧链(2S,4S)-l-对硝基苄氧羰基-2-[(3-对硝基苄氧酰基)苯氨甲酰基]-4-巯基吡咯烷；化合物5:亚胺培南侧链N-[(N-对硝基苄氧羰基)亚胺甲撑基]胺基乙基硫醇；化合物6:多尼培南侧链(2S,4S)-1-对硝基苄氧羰基-2-(N-氨磺酰氨基)甲基-4-巯基吡咯院；化合物7:多尼培南侧链(2S,4S)-l-对硝基苄氧羰基-2-(N-对硝基苄氧羰基-4-氨磺酰氨基)甲基-4-巯基吡咯烷；化合物8:多尼培南侧链(28，48)-1-叔丁氧羰基-2-(^叔丁氧羰基-4-氨磺酰氨基)甲基-4-巯基吡咯烷。进步优选自6，7-二氢-6-巯基-5H-吡唑[1,2-a][1，2，4]三氮唑内鑰氯化物；(2S，4S)-4-巯基-1-(对硝基苄氧羰基)-1-吡咯垸-2-(N，N-二甲基)甲酰胺；(3S)-1-(对硝基苄氧羰酰乙酰亚胺)-3-巯基吡咯烷；(2S，4S)-l-对硝基苄氧羰基-2-[(3-对硝基苄氧酰基)苯氨甲酰基]-4-巯基吡咯烷；N-[(N-对硝基节氧羰基)亚胺甲撑基]胺基乙基硫醇；(:2S,4S)-l-对硝基苄氧羰基-2-(N-对硝基苄氧羰基-4-氨磺酰氨基)甲基-4-巯基吡咯烷。最优选为6，7-二氢-6-巯基-5H-吡唑[l，2-a][1，2，4]三氮唑内鐵氯化物。歩骤(1)中所述的溶剂选自(a)水，(b)缓冲液，(c)水和有机溶剂的混合溶剂，(d)缓冲液和有机溶剂的混合溶剂；所述的水优选为新沸过放冷的水；所述的缓冲液优选pH4--8，进-一歩优选S氨-氯化铵缓冲液、枸橼酸盐缓冲液、枸橼酸-磷酸氢二钠、醋酸-醋酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液；所述的有机溶剂优选自甲醇、乙醇、异丙醇、丙酮、四氢呋喃、乙腈、二氧六环和二甲基甲酰胺，最优选四氢呋喃。所述步骤(2)中，碘滴定液的浓度优选为0.05-0.1mol/L。所述步骤(2)中，在用碘滴定液滴定前，还包括加入指示剂的歩骤，所述的指示剂优选为淀粉或亚甲蓝指示液。所述歩骤(2)中，在用碘滴定液滴定时，还包括接近终点时加入指示剂的歩骤，所述的指示剂优选为淀粉或亚甲蓝指示液。碳青霉烯类化合物侧链用量优选为O.]-lg;淀粉指示液用量优选为l-5ml;亚甲蓝指示液用量优选为0.05-0.3ml。在用碘滴定液进行标定吋，终点的判断为(1)加入淀粉指示液，滴定至溶液呈浅蓝色不褪；(2)加入亚甲蓝指示液，滴定至溶液呈绿色不褪；(3)不加指示液，滴定至溶液呈浅黄色不褪。对有机化合物进行HPLC测定，一般采用归一化法，这具有简单、快速的特点，适十反应的监测；进行精确的含量测定，则需要内标法或外标法。通常情况下，HPLC测定方法具有化学测定方法无法比拟的优势。但内标法和外标法需要符合要求的对照品，这对于某些碳青霉烯类化合物侧链来说，如6，7-二氢-6-巯基-5H-吡唑[1，2-a][1，2，4]三氮唑内総氯化物，是非常困难的；而且由于某些侧链中含有大量在HPLC中无吸收的盐类物质，利用归一化法不能真实反应侧链的纯度。所以，利用HPLC法无法建立碳青霉烯类化合物侧链的通用测定方法。考虑到侧链产品中的杂质只含有无机盐和有机盐，不含有巯基，本发明人尝试用检测侧链巯基的方法测定含量，即化学测定法。根据巯基易氧化的特性，尝试用高锰酸钾、重铬酸钾和溴酸钾等氧化剂进行氧化，由于碳青霉烯类化合物侧链结构复杂，除含有巯基外还含有氧、氮、双键和季铵盐，均因氧化剂氧化性过强或其它原因得不到满意结果。分析原因可能是这三种氧化剂除对巯基氧化外，侧链上的氮原子也被氧化形成氮氧化物，或侧链被氧化破坏。基于以上原因，考虑用相对弱的氧化剂碘来氧化巯基成二硫化合物的特性来对其进行测定，而其结构上的氧、氮、双键和季铵盐不受影响，结果获得满意结果，该方法不但可以用于含量测定，还可用于指导反应进程。本发明的有益效果在于(1)测定方法操作简单，易于掌握，不需要任何设备，不需要标准样品，无需繁琐的操作。(2)测定方法快速，测试一个样品一般只需要几分钟即可以完成，适用于实验室或者工业生产过程中中间体含量的准确测定；不仅适用于含量测定，还可用于指导反应进程。(3)由于侧链产品中杂质只含有无机盐和有机盐，不含有巯基，不会对测定造成千扰。所以本发明测定方法能准确反映侧链的真实含量，进而能准确地计算投料比，保证了产品的质量。具体实施例方式下面将结合具体实施例对本发明作进一步说明，但不作为对本发明的限定。试剂碘、碘化钾、三氧化二砷、氢氧化钠、酚酞、淀粉、盐酸、氢氧化钠、甲基橙、硫酸、碳酸氢钠均为分析纯。碘滴定液(0.05mol/L)的配制取碘13.0g，加碘化钾36g与水50ml溶解后，加盐酸3滴与水适量使成1000ml，摇匀，用垂熔玻璃滤器滤过，保存于棕色具塞瓶中。碘滴定液的标定取在105。C干燥至恒重的基准三氧化二砷约0.15g，精密称定，加氢氧化钠滴定液(lmol/L)10ml，微热使溶解，加水20ml与甲基橙指示液1滴，加硫酸滴定液(0.5mol/L)适量使黄色转变为粉红色，再加碳酸氢钠2g、水50ml与淀粉指示液2ml,用本液滴定至溶液显浅蓝紫色。每lml碘滴定液(0.05mol/L)相当于4.946mg的三氧化二砷。根据本液的消耗量与三氧化二砷的取用量，算出本液的浓度。即得。0.1mol/L的碘滴定液配制和标定按照与0.05mol/L碘滴定液相似的方法进行。实施例1淀粉指示液的配制取可溶性淀粉0.5g。加水5ml搅匀后，缓缓倾入100ml沸水，随加随搅拌，继续煮沸2分钟，放冷，倾取上层清液，即得。取化合物l:6，7-二氢-6-巯基-5H-吡唑[，2-a][1，2，4]三氮唑内鎗氯化物约0.5g，精密称定，置锥形瓶中，加新沸过放冷的水20ml使溶解，加2ml淀粉指示液，摇匀，用碘滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液显浅蓝色，即为滴定的终点。并将滴定结果用空白试验校正，计算样品含量。结果如表1所示。表6，7-二氢-6-巯基-5H-吡唑[1，2-a][1，2，4]三氮唑内鎗氯化物含量测定结果样品测定值(％)平均值(％)RSD(%)198.2198.2698.3598.270.07298.8898.7698.6998.78().K)398.9298.8599.0398.930.09实施例2氨-氯化铵缓冲液的配制(pH8.0):取氯化铵1.07g，加水使溶解成100ml，再加稀氨溶液(1—30)调节pH值至8.0，即得。取化合物l:6，7-二氢-6-巯基-5H-吡唑[1，2-a][1，2，4]三氮唑内鎿氯化物约0.3g，精密称定，置锥形瓶中，加氨-氯化铵缓冲液20ml使溶解，加3ml淀粉指示液，摇匀，用碘滴定液(O.lmol/L)滴定至溶液显浅蓝色，即为滴定的终点。并将滴定结果用空白试验校正，计算样品含量。结果如表2所示。表26，7-二氢-6-巯基-5H-吡唑卩，2-a][1，2，4]三氮唑内鎗氯化物含量测定结果样品测定值(％)平均值(％)RSD(%)199.0699.1299.1999.120.07299.2399.1799.1199.170.06398.7998.7498.8398.790.05实施例3亚甲蓝指示液的配制取亚甲蓝0.5g，加水使溶解成100ml。取化合物l:6，7-二氢-6-巯基-5H-吡唑[l，2-a][1，2，4]三氮唑内鐺氯化物约0.3g，精密称定，置锥形瓶中，加新沸过放冷的水30ml使溶解，加3-5滴亚甲蓝指示液，摇匀，用碘滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液显绿色，即为滴定的终点。并将滴定结果用空白试验校正,计算样品含量。结果如表3所示。表36，7-二氢-6-巯基-5H-吡唑[1，2-a][1,2，4]三氮唑内総氯化物含量测定结果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>实施例4取化合物2:(2S,4S)-4-巯基-卜(对硝基苄氧羰基)-1-吡咯垸-2-(N，N-二甲基)甲酰胺约O.lg，精密称定，置锥形瓶中，用四氢呋喃10ml使其溶解，再加新沸过放冷的水10ml，摇匀，用碘滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液显浅黄色，即为滴定的终点。并将滴定结果用仝白试验校正，计算样品含量。结果如表4所示。表4(2S.4S)-4-巯基-l-(对硝基苄氧羰萄-l-吡咯垸-2-(N，N-二甲基)甲酰胺含量测定结果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>实施例5枸橼酸盐缓冲液的配制(pH6.2):取2.1%枸櫞酸水溶液，用50。/。氢氧化钠溶液调节pH值至6.2，即得。取化合物2:(2S,4S)-4-巯基-1-(对硝基苄氧羰基)-1-吡咯垸-2-(凡N-二甲基)甲酰胺约0.5g,精密称定，置锥形瓶中，用乙醇30ml使其溶解，再加枸櫞酸盐缓冲液20ml，摇匀，用碘滴定液(O.lmol/L)滴定至溶液显浅黄色，即为滴定的终点。并将滴定结果用^白试验校正，计算样品含量。结果如表5所示。表5(2S,4S)-4-巯基-l-(对硝基苄氧羰基)-l-吡咯烷-2-(N，N-二甲基)甲酰胺含量测定结果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>实施例6醋酸-醋酸盐缓冲液的配制(pH4.6):取醋酸钠54.6g，加水50ml使溶解，用冰醋酸调节pH值至4.6，再加水稀释至100ml，即得。取化合物2:(2S,4S)-4-巯基-l-(对硝基苄氧羰基)-l-吡咯垸-2-(N，N-二甲基)甲酰胺约O.lg，精密称定，置锥形瓶中，用丙酮10ml使其溶解，再加醋酸-醋酸盐缓冲液10ml，摇匀，用碘滴定液(O.lmol/L)滴定至溶液显浅黄色，即为滴定的终点。并将滴定结果用空白试验校正，计算样品含量。结果如表6所示。表6(2S，4S)-4-巯基-l-(对硝基苄氧羰基)-l-吡咯烷-2-(N，N-二甲基)甲酰胺含量测定结果样品测定值(％)平均值(％)RSD(%)199.5399.6199.4899.540.07299.1599.2299.2999.220.07399.2799.3599.4299.350.08实施例7取化合物3:(3S)-1-(对硝基苄氧羰酰乙酰亚胺)-3-巯基吡咯烷约0.1g，精密称定，覽锥形瓶中，用乙腈10ml使其溶解，再加水10ml，摇匀，用碘滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液显浅黄色，即为滴定的终点。并将滴定结果用空白试验校正，计算样品含量。结果如表7所示。表7(3S)-1-(对硝基苄氧羰酰乙酰亚胺)-3-巯基吡咯烷含量测定结果样品测定值(％)平均值(％)RSD(%)198.3998.3198.4398.380.06298.8398.7798.6898.760.08398.6498.798.5898.640.06实施例8枸櫞酸-磷酸氢二钠缓冲液的配制(pH4.0):甲液取枸橼酸21g或无水枸橼酸19.2g，加水使溶解成1000ml，置冰箱内保存。乙液取磷酸氢二钠71.63g，加水使溶解成l()O()ml。取上述甲液61.45ml与乙液38.55ml混合，摇匀，即得。取化合物3:(3S)-1-(对硝基苄氧羰酰乙酰亚胺)-3-巯基吡咯烷约0.3g，精密称定，置锥形瓶中，用二甲基甲酰胺20ml使其溶解，再加枸櫞酸-磷酸氢二钠20ml，摇匀，用碘滴定液(O.lmol/L)滴定至溶液显浅黄色，即为滴定的终点。并将滴定结果用空白试验校正，计算样品含量。结果如表8所示。表8(3S)-1-(对硝基苄氧羰酰乙酰亚胺)-3-巯基吡咯烷含量测定结果样品测定值(％)平均值(％)RSD(%)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>实施例9取化合物3:(3S)-1-(对硝基苄氧羰酰乙酰亚胺)-3-巯基吡咯垸约0.18，精密称定，置锥形瓶中，用二氧六环10ml使其溶解，再加水10ml，摇匀，用碘滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液显浅黄色，即为滴定的终点。并将滴定结果用空白试验校正，计算样品含量。结果如表9所示。表9(3S)-卜(对硝基苄氧羰酰乙酰亚胺)-3-巯基吡咯烷含量测定结果<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>实施例0取化合物4:(2S,4S)-l-对硝基苄氧羰基-2-[(3-对硝基节氧酰基傳氨甲酰基H-巯基吡咯烷约0.6g，精密称定，置锥形瓶中，用四氢呋喃30ml使其溶解，再加水30ml，摇匀，用碘滴定液(O.lniol/L)滴定至溶液显浅黄色，即为滴定的终点。并将滴定结果用空白试验校正，计算样品含量。结果如表10所示。表10(2S，4S)-l-对硝基苄氧羰基-2-[(3-对硝基苄氧酰基)苯氨甲酰基]-4-巯基吡咯烷含量测定结果<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>实施例11氨-氯化铵缓冲液的配制(pH8.0):取氯化铵1.07g，加水使溶解成100ml，再加稀氨溶液(1—30)调节pH值至8.0，即得。取化合物4:(2S,4S)-l-对硝基苄氧羰基-2-[(3-对硝基苄氧酰基)苯氨甲酰基]-4-巯基吡咯垸约0.4g，精密称定，置锥形瓶中，用甲醇30ml使其溶解，再加氨-氯化钹缓冲液30ml，摇匀，用碘滴定液(0.mol/L)滴定至溶液显浅黄色，即为滴定的终点。并将滴定结果用空白试验校正，计算样品含量。结果如表ll所示。表11(2S，4S)-1-对硝基苄氧羰基-2-[(3-对硝基苄氧酰基)苯氨甲酰基]-4-巯基吡咯烷<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>取化合物4:(2S,4S)-l-对硝基苄氧羰基-2-[(3-对硝基苄氧酰基)苯氨甲酰基]-4-巯基吡咯烷约0.1g，精密称定，置锥形瓶中，用乙腈10ml使其溶解，再加枸櫞酸盐缓冲液10ml，摇匀，用碘滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液显浅黄色，即为滴定的终点。并将滴定结果用空白试验校正，计算样品含量。结果如表12所示。表12(2S,'1S)-1-对硝基节氧羰基-2-[(3-对硝基节氧酰基)苯氨甲酰基]-l-巯基吡咯垸含量测定结果样<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>实施例13取化合物5:N-f(N-对硝基苄氧羰萄亚胺甲撑基]胺基乙基硫醇约O.lg，精密称定，置锥形瓶屮，用乙腈10ml使其溶解，再加枸橼酸盐缓冲液10ml，摇匀，用碘滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液显浅黄色，即为滴定的终点。并将滴定结果用空白试验校正，计算样品含量。结果如表3所示。表13N-[(N-对硝基苄氧羰基)亚胺甲撑基]胺基乙基硫醇含量测定结果<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>实施例14取化合物5:N-[(N-对硝基苄氧羰基)亚胺甲撑基]胺基乙基硫醇约O.lg，精密称定，置锥形瓶中，用乙腈10ml使其溶解，再加枸橼酸盐缓冲液10ml，摇匀，用碘滴定液(().lmol/L)滴定至溶液显浅黄色，即为滴定的终点。并将滴定结果用空O试验校正，计算样品含量。结果如表14所示。<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>实施例15磷酸盐缓冲液的配制(pH7.0):取磷酸氢二钠0.68g，加0.1mol/L氢氧化钠29.1ml,用水稀释至100ml,即得。取化合物5:N-[(N-对硝基苄氧羰基)亚胺甲撑基]胺基乙基硫醇约O.lg，精密称定，置锥形瓶中，用四氢呋喃10ml使其溶解，再加磷酸盐缓冲液10ml，摇匀，用碘滴定液(0.1niol/L)滴定至溶液显浅黄色，即为滴定的终点。并将滴定结果用空白试验校正，计算样品含量。结果如表15所示。<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>实施例16取化合物6:(2S,4S)-l-对硝基苄氧幾基-2-(N-氨磺酰氨基)甲基-4-巯基吡咯烷约0.1g，精密称定，置锥形瓶中，用异丙醇10ml使其溶解，再加磷酸盐缓冲液10ml，摇匀，用碘滴定液ro.lmol/L)滴定至溶液显浅黄色，即为滴定的终点。并将滴定结果用空白试验校正，计算样品含量。结果如表16所示。<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>实施例17取化合物6:(2S,4S)-l-对硝基苄氧羰基-2-(N-氨磺酰氨萄甲基-4-巯基吡咯烷约O.lg，精密称定，置锥形瓶中，用乙醇10ml使其溶解，再加水10ml，摇匀，用碘滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液显浅黄色，即为滴定的终点。并将滴定结果用空白试验校正，计算样品含量。结果如表n所示。表17(2S,4S)-l-对硝基节氧羰基-2-(N-氨磺酰氨基)甲基-4-巯基吡咯烷含量测定结果样品测定值(％)平均值(％)RSD(%)199.3399.5199.499.410.09299.1499.2199.0999.150.06398.2698.3598.4298.340.08实施例18取化合物7:(2S,4S)-l-对硝基苄氧羰基-2-(N-对硝基苄氧羰基-4-氨磺酰氨基)甲基-4-巯基吡咯烷约0.1g，精密称定，置锥形瓶中，用四氢呋喃10ml使其溶解，再加水10ml，摇匀，用碘滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液显浅黄色，即为滴定的终点。并将滴定结果用空白试验校正，计算样品含量。结果如表18所示。表18(2S,4S)-l-对硝基苄氧羰基-2-(N-对硝基苄氧羰基-4-氨磺酰氨基)甲基-4-巯基吡咯烷含量测定结果样品测定值(％)平均值(％)RSD(%)199.3799.5199.4299.430.07298.9398.8798.7898.860.08398.7498.6798.5798.660.09实施例19取化合物7:(2S,4S)-l-对硝基苄氧羰基-2-(N-对硝基苄氧羰基-4-氨磺酰氨基)甲基-4-巯基吡咯烷约0.1g，精密称定，置锥形瓶中，用甲醇10ml使其溶解，再加水10ml，摇匀，用碘滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液显浅黄色，即为滴定的终点。并将滴定结果用空白试验校正，计算样品含量。结果如表19所示。表19(2S,4S)-l-对硝基苄氧羰基-2-(N-对硝基苄氧拨基-4-氨磺酰氨基)甲基-4-巯基吡咯烷含量测定结果样品测定值(％)平均值(％)RSD(%)199.4699.5199.3699.440.08298.6998.7798.5598.670.11398.7398.6598.5898.650.08实施例20取化合物8:(2S,4S)-1-叔丁氧羰基-2-(^叔丁氧羰基-4-氨磺酰氨基)甲基-4-巯基吡咯烷约O.lg，精密称定，置锥形瓶中，用异内醇10ml使其溶解，冉加水10ml，摇匀，用碘滴定液14(0.05mol/L)滴定至溶液显浅黄色，即为滴定的终点。并将滴定结果用空白试验校正，计算样品含量。结果如表20所示。表20(2S,4S)-l-叔丁氧羰基-2-(N-叔丁氧羰基-4-氨磺酰氨基)甲基-4-巯基吡咯垸含量测定结果<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>实施例21取化合物8:(2S,4S)-l-叔丁氧羰基-2-(N-叔丁氧羰基-4-氨磺酰氨基)甲基-4-巯基吡咯垸约O.lg，精密称定，置锥形瓶中，用异丙醇10ml使其溶解，再加水10ml，摇匀，用碘滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液显浅黄色，即为滴定的终点。并将滴定结果用空白试验校:lH，计算样品含量。结果如表21所示。表21(2S,4S)-l-叔丁氧羰基-2-(N-叔丁氧羰基-4-氨磺酰氨基)甲基-4-巯基吡咯垸含量测定结果<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>权利要求1.一种碳青霉烯类化合物侧链的含量测定方法，其特征在于包括如下步骤(1)将碳青霉烯类化合物侧链溶于溶剂中；(2)用碘滴定液滴定；(3)将滴定结果用空白试验校正；(4)按下式计算侧链的含量<mathsid="math0001"num="0001"><math><![CDATA[<mrow><mi>X</mi><mo>=</mo><mfrac><mrow><mi>C</mi><mrow><mo>(</mo><mn>1</mn><mo>/</mo><mn>2</mn><msub><mi>I</mi><mn>2</mn></msub><mo>)</mo></mrow><mo>×</mo><mrow><mo>(</mo><mi>V</mi><mo>-</mo><msub><mi>V</mi><mn>0</mn></msub><mo>)</mo></mrow><mo>×</mo><mi>M</mi></mrow><mi>W</mi></mfrac><mo>×</mo><mn>100</mn><mo>%</mo></mrow>]]></math>id="icf0001"file="A2008100532890002C1.tif"wi="62"he="9"top="60"left="90"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/></maths>式中，id="icf0002"file="A2008100532890002C2.tif"wi="15"he="9"top="71"left="40"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/>为碘滴定液的摩尔浓度；V为滴定碳青霉烯类化合物侧链时消耗碘滴定液的体积；V0为滴定空白时消耗的碘滴定液的体积；M为碳青霉烯类化合物侧链的摩尔分子量；W为样品称样量；X为所测样品的含量。2.权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述的碳青霉烯类化合物侧链选自如下化合物:6，7-二氢-6-巯基-5H-吡唑[1，2-a][l，2，4]三氮唑内総氯化物；(2S,4S)-4-巯基-l-(对-硝基苄氧羰基)-l-吡咯烷-2-(N，N-二甲基)甲酰胺；(3S)-卜(对硝基苄氧羰酰乙酰亚胺)-3-巯基吡咯烷;(2S,4S)-l-对硝基苄氧羰基-2-[(3-对硝基苄氧酰基)苯氨甲酰基]-4-巯基吡咯烷；N—[(N-对硝基苄氧羰基)亚胺甲撑基]胺基乙基硫醇；(2S，4S)-l-对硝基苄氧羰基-2-(N-氨磺酰氨基)甲基-4-巯基吡咯烷；(2S,4S)-l-对硝基苄氧羰基-2-(N-对硝基苄氧羰基-4-氨磺酰氨基)甲基-4-巯基吡咯烷；(2S,4S)-l-叔丁氧羰基-2-(N-叔丁氧羰基-4-氨磺酰氨基)甲基-4-巯基吡咯烷。3.权利要求2所述的测定方法，其特征在于，所述的碳青霉烯类化合物侧链为6，7-二氢-6-巯基-5H-吡唑[1，2-a]卩，2，4]三氮唑内鎿氯化物。4.权利要求1所述的测定方法，其特征在于，歩骤(1)中所述的溶剂选自(a)水，(b)缓冲液，(c)水和有机溶剂的混合溶剂，(d)缓冲液和有机溶剂的混合溶剂。5.权利要求4所述的测定方法，其特征在于，所述的水为新沸过放冷的水；所述的缓冲液pH48;所述的有机溶剂选自甲醇、乙醇、异丙醇、丙酮、四氢呋喃、乙腈、二氧六环和二甲基甲酰胺。6.权利要求5所述的测定方法，其特征在于，所述的缓冲液选自氨-氯化铰缓冲液、枸橼酸盐缓冲液、枸橼酸-磷酸氢二钠、醋酸-醋酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液；所述的有机溶剂为四氢呋喃。7.权利要求l所述的测定方法,其特征在于，所述步骤(2)中，碘滴定液的浓度为0.05-0.1mo/L。8.权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述步骤(2)中，在用碘滴定液滴定前，还包括加入指示剂的步骤。9.权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述步骤(2)中，在用碘滴定液滴定时，还包括接近终点时加入指示剂的步骤。10.权利要求8或9所述的测定方法，其特征在于，所述的指示剂为淀粉或亚甲蓝指示液。全文摘要本发明涉及一种碳青霉烯类化合物侧链的含量测定方法，包括如下步骤(1)将碳青霉烯类化合物侧链溶于溶剂中；(2)用碘滴定液滴定；(3)将滴定结果用空白试验校正；(4)按下式计算侧链的含量X＝(C(1/2I<sub>2</sub>)×(V-V<sub>0</sub>)×M)/W×100％。本发明的测定方法操作简单、快速，能准确反映侧链的真实含量，不仅适用于含量测定，还可用于指导反应进程。文档编号G01N21/77GK101592615SQ200810053289公开日2009年12月2日申请日期2008年5月29日优先权日2008年5月29日发明者刘文峥,王国成,王雅琼,郑秋莹,陈咏梅申请人:天津天士力集团有限公司