专利名称：：一种用于流式细胞原理测定尿液有形成分的染色剂的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种尿液分析用染色剂，特别涉及一种用于流式细胞原理测定尿液有形成分的染色剂。
背景技术：
：在高档尿沉渣分析仪检测分析中，应用了流式细胞和电阻抗分析的原理尿液中细胞等经荧光染料染色后，在鞘液的作用下，形成单个、纵列细胞流、快速通过氩激光检测区，仪器检测荧光、散射光和电阻抗的变化。前向散射光信号强度和荧光强度用于分辨红细胞、白细胞、细菌这样的小细胞；前向散射光脉冲宽度用于分辨上皮细胞、管型等大细胞。荧光染色技术在高档尿沉渣分析仪中的应用越来越重要。由于目前流式细胞原理用染液存在的问题是试剂配方难度大，使用成本高、长期依赖进口，购买渠道繁琐等，无法及时满足医院的正常使用。
发明内容本发明的目的在于提供一种用于流式细胞原理测定尿液有形成分的染色剂，具有试剂配方简单，使用成本低，效果好的优点。本发明的用于流式细胞原理测定尿液有形成分的染色剂，包括以下重量百分比的组分乙二醇95.81-97.88%甲醇2~4%染料I0.11~0.15%染料no.oio.o4%。本发明所述染色剂含有荧光染料I，主要染细胞的核酸成分(DNA)，在488nm光波激发时，产生610nm的光波，用于区别有核的细胞和无核的细胞。如白细胞和红细胞，病理管型和透明管型。荧光染料I是以下组分的一种或一种以上(1)溴化乙啶(简称EthidiumBromide或EB)，最大吸收波长506nm，别名3,8-二氨基-5-乙基-6-苯基菲啶溴化物；2，7-二氨基-10-乙基-9-苯基菲啶溴化物；菲啶溴红，其结构式如下:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>(2)TOTAB,为TOTO菁类荧光染料，其结构式如下:(3)乙菲啶二嗪(4)碘化丙菲啶。本发明所述染色剂含有荧光染料II，它应具有穿透能力强，能够与细胞质膜(细胞膜、核膜和线粒体)的脂层成分发生结合的特征，并且在460nm的光波激发时，产生505nm光波，主要用于区别细胞的大小，如上皮细胞与白细胞的区别。这些染料具有反应迅速，背景干扰小，染料与细胞结合的量与荧光强度成比例。其结构式如下本发明的用于流式细胞原理测定尿液有形成分的染色剂，属荧光染料，分析结果准确性高，稳定性好，特别适合应用于流式细胞原理。图1:本发明实施例1的染色剂与进口原装染色剂测试结果比较图(图1-1~图1-5)图2:本发明实施例1的染色剂可见-紫外扫描图谱具体实施方式实施例1:本发明染色剂主要组分如下物品名称含量乙二醇96.85%甲醇3%染料I溴化乙啶0.12%染料II0.03%实施例2:本发明染色剂主要组分如下物品名称含量乙二醇97.84%甲醇2%染料ITOTAB0.15%染料II0.01%实施例3:本发明染色剂主要组分如下物品名称含量乙二醇95.84%甲醇4%染料I乙菲啶二嗪0.15%染料no.oi%实施例4:本发明染色剂主要组分如下物品名称含量乙二醇97.26%甲醇2.6%染料I碘化丙菲啶0.12%染料II0.02%将实施例l一4的染色剂进行尿质控品测试，结果见表2。表l:尿质控品测试结果比对<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>测试例1:进一步将本发明实施例1的染色剂与进口染色剂在UF-50尿沉渣分析仪测试样本，将测试结果进行相关性分析。所得结果见附图l-l图1-5。将本发明实施例1染色剂用甲醇稀释后在紫外分光光度计进行图谱扫描，结果见附图2。本发明用两种荧光染料配以染料溶剂和细胞稳定剂，所得的染色剂适合应用于流式细胞原理测定尿液有形成分，临床测试结果优良。权利要求1、一种用于流式细胞原理测定尿液有形成分的染色剂，其特征是包括以下重量百分比的组分乙二醇95.81～97.88％甲醇2～4％染料I0.11～0.15％染料II0.01～0.04％；所述的荧光染料I是以下组分的一种或一种以上(1)溴化乙啶，其结构式如下id="icf0001"file="A2008101387260002C1.tif"wi="83"he="30"top="82"left="92"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/>(2)TOTAB，其结构式如下id="icf0002"file="A2008101387260002C2.tif"wi="93"he="68"top="115"left="73"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/>(3)乙菲啶二嗪(4)碘化丙菲啶；所述的荧光染料II的结构式如下全文摘要本发明涉及一种尿液分析用染色剂，特别涉及一种用于流式细胞原理测定尿液有形成分的染色剂，包括以下重量百分比的组分乙二醇95.81～97.88％，甲醇2～4％，染料I0.11～0.15％，染料II0.01～0.04％。本发明的用于流式细胞原理测定尿液有形成分的染色剂，属荧光染料，分析结果准确性高，稳定性好，特别适合应用于流式细胞原理。文档编号G01N33/48GK101324495SQ20081013872公开日2008年12月17日申请日期2008年7月30日优先权日2008年7月30日发明者宫奇林,张国栋,张忠房,王春莲,韩作湘申请人:山东兰桥医学科技有限公司