一种一氧化氮传感器的制备方法

文档序号:6030331阅读:380来源:国知局
专利名称:一种一氧化氮传感器的制备方法
技术领域
本发明涉及一种一氧化氮传感器的制备方法,属于电化学领域。
背景技术
一氧化氮是重要的生物活性信使分子,对生物体的生理过程起着重要的调节 作用,如是血管舒张信使分子,能够防止血小板凝聚及具有免疫功能等。缺乏N0 可能导致糖尿病,心血管疾病与其他疾病。 一氧化氮十分活跃且不稳定,半衰期 短(5-60s),因此其测定非常困难。目前,常用于检测一氧化氮的方法有化学发 光法,紫外-可见光谱法,荧光光谱法,电子自旋共振光谱法,电化学方法等。 在所有的方法中,电化学方法具有操作简单,灵敏度高,选择性好,又可实现实 时、原位检测的优点,而广泛地应用在生物医学中,并成为现代生物医学中一氧 化氮的重要研究工具。常见的电极有玻碳电极、金电极和铂电极,电极修饰材料 一般有金属卟啉类化合物、金属酞菁类化合物、席夫碱金属配合物及其它如邻苯 二胺类高分子材料和纳米材料等。但是这些材料一般价格昂贵,极大地限制了大 规模的实际应用。

发明内容
本发明目的就是提供一种一氧化氮传感器的制备方法,制作出一种利用表面 活性剂在碳糊电极表面的疏水吸附来检测一氧化氮的电化学传感器,该方法制备 的一氧化氮传感器不但具有稳定性好的特点,而且该方法所用成本低廉、工艺简 单、便于大规模工业应用。
实现本发明目的采用的技术方案是 一氧化氮传感器的制备方法包括以下 步骤将石墨粉与石蜡油混合调成糊状,然后挤入到聚四乙烯管或玻璃管中,并 引出铜线制作成碳糊电极,将制备的碳糊电极打磨光滑,于十六烷基三甲基溴化 胺溶液中浸泡充分,然后取出在水中荡洗,自然凉千即为十六烷基三甲基溴化胺
膜电极,最后取阳离子交换树脂Nafion溶液滴到十六垸基三甲基溴化胺膜电极 表面,制得十六烷基三甲基溴化胺和Nafion修饰碳糊电极的一氧化氮传感器。
上述将制备的碳糊电极在称量纸上打磨光滑后置于十六烷基三甲基溴化胺 溶液中浸泡。上述将石墨粉与石蜡油以100/16毫克/微升的比例混合调成糊状,然后挤 入到聚四乙烯管或玻璃管中,并引出铜线制作成碳糊电极,将制备的碳糊电极打 磨光滑,于O.Ol mol/L十六烷基三甲基溴化胺溶液中浸泡20秒,然后取出在水 中荡洗30秒,自然凉干即为十六烷基三甲基溴化胺膜电极,最后取2微升0.1% Nafion溶液滴到表面,制得十六垸基三甲基溴化胺和Nafion修饰碳糊电极的一 氧化氮传感器。
本发明是基于表面活性剂在碳糊电极表面的疏水吸附来制备电化学传感器, 然后滴涂Nafion来提高一氧化氮传感器的抗干扰能力和稳定性。制得的一氧化 氮传感器的电流响应与N0浓度在3.6 x 10—8 1.8 x l(T5 mol/L范围内呈现良 好的线性关系,相关系数为0.9994,检测限为1.8 x 10—8mol/L。此传感器用于 小鼠肺血细胞在药物刺激和抑制下NO释放量的测量,结果令人满意。 本发明制备的一氧化氮微型传感器的突出特点是
1. 该传感器的稳定性和重现性好,线性范围宽,相对于其他的常规一氧化 氮传感器而言,该传感器的检测限低。
2. 该传感器的灵敏度高,响应时间可以低至3秒。
3. 相对于众多合成的昂贵试剂而言,表面活性剂具有价格便宜、稳定性和 生物相溶性好等优点。
4. 该发明的制备工艺简单,可以实现工业化生产,在检测一氧化氮时操作 方便,适用于生物医疗等实际应用。


下面结合附图和具体实施方式
对本发明作进一步的说明。 图1为不同修饰电极在含N0磷酸缓冲液(PBS, 0. lmol/L, pH=7. 4)中的循 环伏安图。
图2是Naf ion/CTAB/CPE的一氧化氮传感器在连续加入不同浓度N0的安培响应。
图3为图2中NO的稳态响应电流与浓度之间的关系曲线图。
图4为本发明制备的一氧化氮传感器监测小鼠肺组织中的一氧化氮释放过程。
具体实施例方式
将光谱纯石墨粉与石蜡油以100毫克/16微升的比例混合调成糊状,挤入到 一支自制的聚四乙烯管中,并用铜线引出导电。将该电极在称量纸上打磨光滑,于0.01 mol/L CTAB溶液中浸泡20秒,取出在水中荡洗30秒,自然凉干即为 CTAB/CPE。用微量注射器取2微升0. 1% Nafion溶液滴到CTAB膜电极表面,制 备Nafion/CTAB/CPE —氧化氮传感器。
在图1所示的循环伏安图中,曲线c显示N0在裸碳糊电极(CPE)上无氧化峰。 曲线a显示用CTAB修饰CPE后,在0. 60 V处出现一个高氧化峰,峰形尖锐,峰 电流达56微安。曲线b显示为进一步加涂Nafion膜后,峰电流下降30%,但峰 电位负移20 mV,同时在0.73 V处有一弱氧化峰,该峰为一氧化氮扩散峰。若 将电极转移至空白磷酸缓冲中第一圈扫描,峰I保留,峰II消失。通过这些比较 发现,CTAB膜对NO的氧化呈现良好的电催化活性和增敏作用。
在图2所示的安培响应图中,曲线a、 b、 c分别为Nafion/CTAB/CPE修饰的 一氧化氮传感器加入NO浓度为3. 6 x 10_8 mol/L mol/L、 1. 8 x 10—7 mol/L、 1. 8 x 10—6 mol/L的安培响应。由图可见,加入不浓度一氧化氮后,传感器电流响应 均迅速增加并在较快的时间内达到稳态。N0的稳态响应电流与浓度之间的关系 曲线如图3所示,结果表明传感器的电流响应与N0浓度在3.6x10—8 1.8xl(T5 mol/L范围内呈现良好的线性关系,I(纳安)=2.2476 + 84. 3607XCN。(Mmol/L), 相关系数为0. 9994;检测限为1. 8x10—8 mol/L。
图4为使用本发明制备N0传感器监测小鼠肺组织中NO的释放过程。当PBS 溶液中加入l.O mmol/L N0的前体物L-精氨酸(L-Arg)时,传感器电流响应缓 慢(曲线a)。当传感器插入肺组织样(20 mg肺脏组织/1.0 mL PBS)中响应时 间达200秒时,向其中加入1. 0 mmol/L N0的前体物L-Arg,观察到电流响应明 显,约80秒后电流响应达到一个稳态值(曲线b)。表明肺组织中一氧化氮合酶 (NOS)在L-Arg的刺激下能连续释放N0,根据前面得到的传感器的灵敏度值可 估算出肺组织中释放N0的浓度为1. 4 u mol/L。
权利要求
1. 一种一氧化氮传感器的制备方法,其特征在于包括以下步骤将碳糊电极打磨光滑,于十六烷基三甲基溴化胺溶液中浸泡充分,然后取出在水中荡洗,自然凉干即为十六烷基三甲基溴化胺膜电极,最后取Nafion溶液滴到十六烷基三甲基溴化胺膜电极表面,制得十六烷基三甲基溴化胺和Nafion修饰碳糊电极的一氧化氮传感器。
2. 根据权利要求1所述一氧化氮传感器的制备方法,其特征在于将制备的碳 糊电极在称量纸上打磨光滑后置于十六烷基三甲基溴化胺溶液中浸泡。
3. 根据权利要求1或2所述一氧化氮传感器的制备方法,其特征在于碳糊电 极是将石墨粉与石蜡油混合调成糊状,然后挤入到聚四乙烯管或玻璃管中, 并引出铜线制成。
4. 根据权利要求3所述一氧化氮传感器的制备方法,其特征在于将石墨粉与 石蜡油以100/16毫克/微升的比例混合调成糊状,然后挤入到聚四乙烯管或 玻璃管中,并引出铜线制作成碳糊电极,将制备的碳糊电极打磨光滑,于O.Ol mol/L十六烷基三甲基溴化胺溶液中浸泡20秒,然后取出在水中荡洗30秒, 自然凉干即为十六烷基三甲基溴化胺膜电极,最后取2微升0. 1% Nafion溶 液滴到表面,制得十六垸基三甲基溴化胺和Nafion修饰碳糊电极的一氧化氮 传感器。
全文摘要
本发明公开了一氧化氮传感器的制备方法,该方法先将石墨粉与石蜡油混合调成糊状,然后挤入到聚四乙烯管或玻璃管中,并引出铜线制作成碳糊电极,将制备的碳糊电极打磨光滑,于十六烷基三甲基溴化胺溶液中浸泡充分,然后取出在水中荡洗,自然晾干即为十六烷基三甲基溴化胺膜电极,最后取Nafion溶液滴到十六烷基三甲基溴化胺膜电极表面,制得十六烷基三甲基溴化胺和Nafion修饰碳糊电极的一氧化氮传感器。制得的传感器具有价格便宜、制备工艺简单,工艺参数较易控制,具有广泛的生物医学应用前景。
文档编号G01N27/407GK101430302SQ20081023694
公开日2009年5月13日 申请日期2008年12月19日 优先权日2008年12月19日
发明者张小林, 彭艳芬, 胡成国, 胡胜水 申请人:武汉大学
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