专利名称：一种量子点荧光关-开模式可视化检测农药残留的方法
技术领域：
本发明涉及一种农用化学品的分析方法，特别涉及一种痕迹量农用化学品的分析检测方法，具体地说是一种量子点荧光关-开模式可视化检测农药残留的方法。
背景技术：
量子点主要是由II - VI族元素或III - V族元素组成的半导体纳米粒子。做为一种 具有潜在应用价值的荧光探针，与传统有机荧光染料相比，量子点的光致发光性质十分优 越激发范围宽，发射峰窄而对称，斯托克斯位移大，量子产率高，亮度强，光稳定性高。近年 来，量子点的荧光性质已经广泛应用于检测各种离子、有机小分子和生物大分子。随着农药在农业生产中的广泛应用，农药在农产品及环境中的残留问题已经引起 了人们的关注，农药现在已成为世界上主要的污染源之一。由于农药滥用或者使用不当，农 药残留严重的影响着人类的健康。加强对农药残留的检测研究对于合理使用农药、保护环 境和保障人类健康具有重要的意义。农药残留检测方法要求具有精细的操作手段、较高的 灵敏度和较强的特异性。同时，由于农药品种多、化学结构和性质各异、样品基质复杂等因 素的影响，使得农药残留检测具有相当的难度，成为一项重大的研究课题。虽然对农药残留 的检测已有较成熟的方法，气相色谱法、液相色谱法及气相色谱/质谱法等。这些大型仪器 的检测结果准确可靠，但在存在仪器价格昂贵，检测成本高，需要复杂的样品前处理，操作 人员需经专业培训等不足，难以用于现场检测。近些年来，基于纳米材料对农药的荧光分析方法得到重视。李海兵等人2007年在 chem. mater.上发表的文章报道了杯芳烃修饰的包含量子点的二氧化硅微球应用于农药检 测，对农药灭多威具有很好的选择性，检测限达到0. 08 μ M0但大多荧光分析检测都是基于 turn-off的荧光猝灭过程，这种检测方式容易受到很多环境条件的影响。而基于turn-on 的荧光增强型的检测方式报道很少。
发明内容
本发明针对现有技术的上述不足，旨在提供一种快速检测毒死蜱、对硫磷、甲基对 硫磷、辛硫磷等含硫磷键结构的有机磷农药残留量的方法，所要解决的技术问题利用量子 点的荧光性质提高检测方法的灵敏度和选择性。本发明利用量子点荧光猝灭(turn-off)和荧光增强(turn-on)的性质，将其联合 应用到检测方法中，开发出一种量子点荧光关_开模式的可视化检测方法。这就是在紫外 光照射下，首先将荧光猝灭，然后加入待测样品，荧光又被恢复，随着待测样品浓度的增加， 恢复的荧光发生由弱到强的可视化变化，从而实现定性和定量的检测。本发明的技术方案包括镉系量子点的制备、荧光的猝灭和恢复，其特征是所述的 荧光猝灭就是将量子点溶液加入浓度0. 01 IM的碱液中，直至在紫外光下可见明亮的绿 色，然后逐次加入猝灭剂，荧光逐渐减弱，直至猝灭(即荧光关)，也就是肉眼看不到颜色的 存在；所述的荧光恢复，就是将待测样品溶液逐次加入荧光猝灭的量子点溶液中，随着样品浓度的增加，绿色荧光开始出现并逐渐由弱到强，直至明亮的绿色(即荧光开)。待测样品的浓度范围对应荧光开始出现至明亮绿色的恢复过程。这就是说通过荧光关-开模式可确 立待测样品浓度与荧光恢复强度之间的线性关系，从而实现待测样品的定量检测。所述的镉系量子点选自CdTe、CdTe/CdS、CdSe, CdSe/CdS或CdS中任一种发射绿 色荧光的量子点，荧光激发波长250 470nm，发射波长490 530nm。所述的碱液选自NaOH或KOH溶液。所述的猝灭剂选自双硫腙、汞离子或1-(4_吡啶基)吡啶氯盐酸盐等，优选双硫脉。具体操作步骤如下1、量子点的制备参考文献M. Y. Gao et al, J. Phys. Chem.，1998，102，8360 公开的方法。将镉盐(高氯酸镉，氯化镉，醋酸镉等)与巯基表面修饰剂(巯基丙酸，巯基乙酸 等)按1 2 1 3的摩尔比溶于pH值9 12的水中。将硼氢化钠和碲粉按2 1 10 1的摩尔比加入水中，冰浴下反应生成碲氢化 钠，用过量的稀硫酸溶液和碲氢化钠反应生成的H2Te直接通入上述镉溶液中(镉与碲的摩 尔比在1 0.2 1 0.8之间)，搅拌15 30分钟后加热回流。控制回流时间，得到荧 光发射峰位在490nm至530nm之间的任意调变的碲化镉量子点。制得的量子点原始溶液在 15W的紫外灯下照射10 40天以提高荧光量子产率，然后纯化一次以去除原始溶液未反应 物质，备用。2、荧光关模式的确立取适量量子点溶液于浓度0. 01 IM的碱性溶液中，保证在紫外灯下能看出明亮 的绿色。逐次加入猝灭剂，量子点荧光由强变弱，直至猝灭，在紫外灯下观察看不到颜色。荧 光关过程实现。荧光激发波长为250 470nm，荧光发射波长为490 530nm。3、在比色皿中进行荧光检测将待检测的有机磷农药溶液加入到上述荧光关体系中进行荧光检测。在0. InM含 量就有响应，检测非常灵敏。随着有机磷农药的量逐渐加大，荧光渐渐恢复，直至不再增强。 此时在紫外灯又能看出明亮的绿色，据此确立有机硫农药浓度与荧光恢复强度之间的线性 关系。荧光关到荧光开的过程明显，实现可视化检测。本发明的优点和积极效果本发明利用首次量子点turn-on形式荧光增强的性质检测有机磷农药，设计荧光 关到荧光开模式探针，对农药残留进行荧光检测，以有机磷农药毒死蜱为例。其线性范围为 1 ΙΟμπιοΙ/L，检出限为0. 22nmol/L。农药残留量在10 μ mol/L可实现可视化检测。本发明方法在一定程度上可以避免使用大型仪器，仅需一个手持式紫外灯就可进 行可视化检测，操作简单，方便快速，灵敏度高，效果显著；本方法能有效避免样品中其他杂 质的干扰，所以选择性好，也省略了预处理过程。采用增强荧光的方式达到对农药残留的高 灵敏选择性检测。
四
图1是碲化镉量子点的荧光光谱图。
图2是荧光光谱检测时荧光关开过程图。图3是荧光关开过程的可视化照片，中间的比色皿是完全关闭的状态。图4是有机磷农药毒死蜱浓度与荧光恢复强度之间的线性关系图。
五具体实施例方式现以碲化镉量子点在碱性溶液中双硫腙为猝灭剂为例非限定实施例叙述如下实施例1毒死蜱的检测1、碲化镉量子点的制备将0. 2284g氯化镉(CdCl2 · 2. 5H20)加入到250mL除氧的超纯水中，随后加入0. 21mL巯基丙酸，再用IM NaOH溶液将其pH值调至11. 2，形成含有巯基化合物和镉离子的 溶液。另一方面，取0. 0319g碲粉和0. 05g硼氢化钠于2mL超纯水中，在氮气保护下，冰浴 反应8小时以上。将5mL0. 5M稀硫酸溶液注入到生成的碲氢化钠溶液中。将生成的H2Te全 部通入上述镉离子溶液中，搅拌20分钟后，加热回流。控制回流时间，可得到巯基丙酸稳定 的、荧光发射峰位在490 680nm的碲化镉量子点水溶液。制得的量子点原始溶液在15W 的紫外灯下照射15天以提高荧光量子产率，备用。荧光光谱见图1。2、双硫腙作用致荧光关实现取2微升发射峰位在520nm的碲化镉量子点原始溶液加入到0. OlM NaOH溶液中， 在比色皿中进行荧光检测。双硫腙浓度10 μ M能够猝灭荧光94% 98%。激发波长为 254nm。双硫腙加入前后在紫外灯下能明显看出荧光关过程。3、毒死蜱存在荧光恢复致荧光开待检测的毒死蜱溶液加入到上述荧光关体系进行荧光检测。在0. InM含量就有响 应，检测非常灵敏。随着毒死蜱的量逐渐加大，荧光渐渐恢复。在加入毒死蜱到ΙΟμΜ时荧 光基本不再增强。此时在紫外灯下又能看出明亮的绿色。荧光关到荧光开过程明显，实现 可视化检测。荧光光谱检测关开过程见图2。可视化照片见图3。毒死蜱浓度与荧光恢复 强度之间的线性关系见图4。实施例2甲基对硫磷的检测1、硒化镉量子点的制备将0. 2575g高氯酸镉(Cd(ClO4)2 · 6H20)加入到250mL除氧的超纯水中，随后加入 0. 175mL巯基乙酸，再用IM NaOH溶液将其pH值调至9，形成含有巯基化合物和镉离子的溶 液。另一方面，取0. 0145g硒粉和0. 05g硼氢化钠于2mL超纯水中，在氮气保护下，冰浴反 应8小时以上。将5mL 0.5M稀硫酸溶液注入到生成的硒氢化钠溶液中。将生成的H2Se全 部通入上述镉离子溶液中，搅拌20分钟后，加热回流。控制回流时间，可得到巯基乙酸稳定 的、荧光发射峰位在500nm的硒化镉量子点水溶液。制得的量子点原始溶液在15W的紫外 灯下照射20天以提高荧光量子产率，备用。2、双硫腙作用致荧光关实现取2微升发射峰位在500nm的硒化镉量子点原始溶液加入到0. OlM KOH溶液中，在 比色皿中进行荧光检测。双硫腙浓度10 μ M能够猝灭荧光94% 98%。激发波长为400nm。 双硫腙加入前后在紫外灯下能明显看出荧光关过程。3、甲基对硫磷存在荧光恢复致荧光开
待检测的甲基对硫磷溶液加入到上述荧光关体系进行荧光检测。在0. InM含量就有响应，检测非常灵敏。随着甲基对硫磷的量逐渐加大，荧光渐渐恢复。在加入甲基对硫磷 到10 μ M时荧光基本不再增强。此时在紫外灯下又能看出明亮的绿色。从而确立甲基对硫 磷浓度与荧光恢复强度之间的线性关系。荧光关到荧光开过程明显，实现可视化检测。
权利要求
一种量子点荧光关-开模式可视化检测农药残留的方法，包括镉系量子点的制备、荧光的猝灭和恢复，其特征在于所述的荧光猝灭就是将镉系量子点溶液加入浓度0.01～1M碱液中，然后逐次加入猝灭剂直至明亮的绿色荧光猝灭，所述的荧光恢复就是将待测样品溶液逐次加入荧光猝灭的量子点溶液中，使荧光恢复直到明亮的绿色，据此确立样品浓度与荧光恢复强度之间的线性关系。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的镉系量子点选自CdTe、CdTe/CdS、 CdSe, CdSe/CdS或CdS中任一种发射绿色荧光的量子点。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的碱液选自NaOH或KOH溶液。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的猝灭剂选自双硫腙、汞离子或 1-(4_吡啶基)吡啶氯盐酸盐。
5.根据权利要求1或4所述的方法，其特征在于所述的猝灭剂选自双硫腙。
全文摘要
一种量子点荧光关-开模式可视化检测农药残留的方法，包括镉系量子点的制备、荧光的猝灭和恢复，其中荧光猝灭就是将镉系量子点溶液加入浓度0.01～1M碱液中，然后加入双硫腙使明亮的绿色荧光猝灭；荧光恢复就是将待测样品溶液加入荧光猝灭的量子点溶液中，使荧光恢复到明亮的绿色。根据样品浓度与荧光恢复强度之间的线性关系实现定量检测。镉系量子点选自CdTe、CdTe/CdS、CdSe、CdSe/CdS或CdS中任一种发射绿色荧光的量子点。本方法在一定程度上可以避免使用大型仪器，操作简单，方便快速，并能有效避免样品中其他杂质的干扰。
文档编号G01N21/64GK101839857SQ201010170569
公开日2010年9月22日 申请日期2010年5月4日 优先权日2010年5月4日
发明者关贵俭, 刘变化, 张奎, 张忠平, 王振洋, 王素华 申请人:中国科学院合肥物质科学研究院