专利名称：8-苯胺基-1-萘磺酸及其衍生物在蛋白质荧光检测中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及蛋白质荧光检测技术，具体地说涉及蛋白质的一种新的荧光染料。
背景技术：
在生命科学研究领域，离不开对生命的基本物质蛋白质和DNA的研究，也就离不开对蛋白质的检测技术。尤其是最近几年，随着基因组学和蛋白质组学的飞速发展，使我们对蛋白质的分离检测技术有了更高的要求。蛋白质的检测方法有很多，包括浊度法、凯氏定氮法、吸光光度法、荧光光度法，以及新发展起来的共振瑞利散射法、高效液相色谱法、毛细管电泳分析法等。荧光光度法是目前研究最多、应用最广、操作较为简便、灵敏度较高的检测方法。ANS属于萘磺酸类化合物，将ANS及其衍生物应用于凝胶蛋白质检测可为蛋白质染色提供一种快速、灵敏的方法，其灵敏达到1 2ng/band，可与经典荧光染色法SYPRO Ruby相媲美。
发明内容
本发明的目的提供ANS及其衍生物在蛋白质荧光检测中的应用。本发明所述的ANS相关化合物是指以ANS为母核的钠盐、钾盐、铵盐、镁盐、钙盐或ANS 母核为
权利要求
1.ANS及其衍生物在蛋白质荧光检测中的应用。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述的ANS衍生物包括ANS的钠盐、钾盐、铵盐、镁盐、钙盐或锌盐。
3.一种蛋白质荧光检测方法，其包括步骤1)、将经SDS-PAGE电泳后的蛋白质样品凝胶置于固定液中固定10-60min，弃固定液，然后用去离子水冲洗l-20min ；2)、加入荧光染色液染色l-30min，用去离子水冲洗1-lOmin，其中所述染色液为含按重量体积比0. 0001% -0.01%的ANS或其衍生物及按体积比为10-30%乙醇、5_15%乙酸的水溶液；3)、检测。
4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤1)中蛋白固定时间为20min，然后用去离子水冲洗5min。
5.如权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤2)中染色的时间为lOmin，然后用去离子水冲洗Imin。
6.如权利要求3-5任一项所述的方法，其特征在于，步骤2)染色液中ANS的浓度按重量体积比为0. 002%。
7.如权利要求3-5任一项所述的方法，其特征在于，步骤2)中乙醇浓度为对％。
8.如权利要求3-5任一项所述的方法，其特征在于，步骤2)中乙酸浓度为7%。
9.如权利要求3-5任一项所述的方法，其特征在于，步骤3)检测波长为250-370nm。
10.如权利要求3-5任一项所述的方法，其特征在于，步骤3)中检测波长为312nm。
全文摘要
本发明涉及蛋白质荧光检测技术，具体地说是8-苯胺基-1-萘磺酸(简称ANS)及其衍生物在蛋白质荧光检测中的应用。本发明还提供了应用ANS进行蛋白质荧光检测的方法，包括步骤将蛋白质样品电泳后的凝胶在固定液中固定，去离子水冲洗；染色，去离子水冲洗；检测。本发明具有灵敏度高、操作简单迅速、重现性好、染色背景浅、线性关系好、可逆性好、兼容性好、使用安全、成本低等优点。
文档编号G01N21/25GK102590099SQ20111002074
公开日2012年7月18日 申请日期2011年1月18日 优先权日2011年1月18日
发明者丛维涛, 仇佩虹, 朱忠欣, 李校堃, 洪国赢, 王晓杰, 金利泰 申请人:温州医学院