专利名称：一种高效液相色谱法对土壤中草甘膦含量的测定方法
技术领域：
本发明涉及一种土壤中草甘膦的含量的测定方法，特别是涉及一种通过高效液相色谱仪对土壤中草甘膦的含量进行检测的方法。
背景技术：
草甘膦(glyphosate)也叫镇草宁、膦甘酸，商品名称为草甘膦(glyphosate)，是广谱、非选择性的内吸传导性茎叶处理有机磷酸类除草剂，20世纪70年代初由美国孟山都公司开发。主要通过抑制植物体内烯醇丙酮基莽草素磷酸合成酶，从而抑制莽草素向苯丙氨酸、酪氨酸及色氨酸的转化，使蛋白质的合成受到干扰导致植物死亡。按我国农药毒性分级标准，草甘膦属低毒除草剂。已经报道的检测方法有采用高效液相法检测食品和水质中的草甘膦，但是目前还没有制定土壤中草甘膦含量的标准测定方法，因此建立一种快速、准确、方便和经济的检测方法，有利于检测土壤中草甘膦残留量，从而保障环境安全。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于，克服草甘膦不溶于大多数极性溶剂、从样品中提取及测定其残留量困难的缺陷，通过摸索溶解液比例、提取液最佳配比，最佳的提取方式和最佳色谱条件而提供一种土壤中草甘膦的含量测定方法。为实现上述目的，本发明采取以下设计方案本发明的一种高效液相色谱法对土壤中草甘膦含量的测定方法包括如下步骤充分混勻待测试样10. Og加入水50. 0ml，充分涡动，超声提取20min，5000r/min离心5min，取上清液双层滤纸过滤，得样品粗提液。样品粗提液中加入等体积三氯甲烷，剧烈震荡，静置分层，取2mL水相待用。取C18固相萃取小柱，先用ImL甲醇和ImL水冲洗，弃去透过液。缓慢加入2mL上述提取液，收集透过液，用洗耳球吹出柱中残余提取液，合并透过液。取ImL上述透过液于带塞试管中，加0. 05mol/L四硼酸钠水溶液0. 5mL,再加入 0. 02% FMOC甲醇溶液0. 5mL，塞紧，充分振荡，室温下反应lh，滤膜过滤后获得试样处理液。称取草甘膦标准品，用10%的甲醇溶液溶解并作为标准储备液，然后进一步用 10%的甲醇溶液稀释为具有浓度梯度的标准使用液；利用高效液相色谱仪对标准使用液和试样处理液进行检测；计算结果，试样中草甘膦的计算公式为
权利要求
1.一种高效液相色谱法对土壤中草甘膦含量的测定方法，其特征是取待测样品预处理后，加入有机溶剂提取。再向提取液中加入反应溶剂及衍生化试剂进行衍生化反应，然后用高效液相色谱法测定草甘膦衍生物的浓度。
2.根据权利要求1所述的一种高效液相色谱法对土壤中草甘膦含量的测定方法，其特征是所述的样品的预处理为称取待测试样，加入二次水涡旋振荡，超声提取、离心后，取上清液用双层滤纸过滤，得样品粗提液。用三氯甲烷萃取粗提液，将得到的水相过C18固相萃取小柱，得到样品提取液。
3.根据权利要求1所述的一种高效液相色谱法对土壤中草甘膦含量的测定方法，其特征是所述的衍生化试剂为0.02%氯甲酸-9-芴甲酯(FMOC)的甲醇溶液。
4.根据权利要求1所述的一种高效液相色谱法对土壤中草甘膦含量的测定方法，其特征在于在衍生化反应中加入了四硼酸钠水溶液作为缓冲溶液。
5.根据权利要求1所述的一种高效液相色谱法对土壤中草甘膦含量的测定方法，其特征是采用高效液相色谱荧光检测器测定草甘膦衍生物的峰面积，用标准曲线校正方程换算成草甘膦的浓度。
6.根据权利要求1和5所述的一种高效液相色谱法对土壤中草甘膦含量的测定方法， 其特征是所述的高效液相色谱法采用通用型的强碱性阴离子交换色谱柱。
全文摘要
本发明涉及一种高效液相色谱法对土壤中草甘膦含量的测定方法。即试样经水涡旋、超声提取，上清液过滤得粗提液，经三氯甲烷液液萃取去除杂质后，水相液过C18萃取小柱净化。透过液中加入四硼酸钠水溶液和氯甲酸-9-芴甲酯(FMOC)甲醇溶液，室温衍生后过0.45μm滤膜。称取草甘膦标准品，用10％甲醇水溶液溶解作为储备液，然后进一步稀释为具有浓度梯度的标准使用液；利用配备荧光检测器的高效液相色谱仪进行检测，外标法定量。采用本发明的方法检测土壤中草甘膦的含量，快速准确，相对平均偏差小于5.0％，由此可见，本发明的方法为土壤中草甘膦含量的检测，提供了一种可靠的便于实施的方法，能够满足生产和环境监测的需要。
文档编号G01N30/74GK102207495SQ20111007296
公开日2011年10月5日 申请日期2011年3月24日 优先权日2011年3月24日
发明者宋薇 申请人:深圳市谱尼测试科技有限公司