专利名称：含有肟菌酯和戊唑醇残留样品测定前的处理方法
技术领域：
本发明属于农药残留量的测定技术领域，涉及蔬菜农药残留是否超标的测定方法，更具体的说，是一种含有肟菌酯和戊唑醇农产品残留样测定前的处理方法。
背景技术：
农药残留指的是在农业生产中施用农药后一部分农药直接或间接残存于谷物、蔬菜、果品、畜产品、水产品中以及土壤和水体中的现象。农药残留问题是随着农药大量生产和广泛使用而产生的。目前使用的农药，有些在较短时间内可以通过生物降解成为无害物质，而一些有机氯类农药却难以降解，是残留性强的农药。蔬菜农药残留超标，会直接危及人体的神经系统和肝、肾等重要器官。同时残留农药在人体内蓄积，超过一定量度后会导致一些慢性疾病，如肌肉麻木、咳嗽等，甚至会诱发血管疾病、糖尿病和癌症等。由于农药残留对人类和生物危害很大，各国对农药的施用都进行严格的管理，并对食品中农药残留容许量作了规定。在我国发生较多的引起农药残留中毒的农药品种主要是有机磷农药和氨基甲酸酯类农药，如氧化乐果、乐果、马拉硫磷、甲胺磷、久效磷、倍硫磷、百克威、抗芽威和西维因等。这些农药是通过抑制昆虫中枢神经中的胆碱酯酶使之死亡而发挥杀虫作用的。但这些农药对人体内的胆碱酯酶也有抑制作用，它能阻断神经递质的传递，引起肌肉麻痹造成中毒。国家虽明文规定剧毒、高毒农药不得用于蔬菜、瓜果、茶叶和中草药材，例如氧化乐果、 对硫磷、甲拌磷、甲胺磷、水胺硫磷、呋哺丹等。但某些地区的菜农仍然使用甲胺磷、甲基对硫磷等剧毒高毒农药于蔬菜，不时出现消费者因食用含有甲胺磷农药的蔬菜而急性中毒。肟菌酯隶属于甲氧基丙烯酸酯类。烯肟菌酯杀菌谱广、活性高、具有预防及治疗作用、与环境生物有良好的相容性、且与苯基酰胺类杀菌剂无交互扰性，对由鞭毛菌、结合茼、子囊菌、担子菌及半知菌引起的多种植物病害有良好的防治效果。室内试验结果表明 烯肟菌酯对黄瓜霜霉病的盆栽杀菌活性(EC90值)为11. 192 μ g/ml ；烯肟菌酯在100 200 yg / ml的处理剂量下。施药2 3次，对黄瓜霜霉病有非常优异的防治效果，防效优于甲霜灵、霜霉威、苯氧菌酯，与安克、安克·锰锌及嘧菌酯的防效相当。肟菌酯外观为白色或灰色精状粉末。熔点72. 9°C，沸点312°C。毒性原药急性经口 LD5tl大于5000mg/kg，急性经皮LD5tl > 2000 mg/kg。肟菌酯是一种呼吸抑制剂，它通过锁住细胞色素b与cl之间的电子传递而阻止细胞ATP合成，从而抑制其线粒体呼吸而发挥抑菌作用。肟菌酯不仅杀菌谱广，而且具有优良的保护、治疗和渗透活性。耐雨水冲刷，持效期长等特点。戊唑醇，原药为无色晶体，熔点为102.4°C，蒸气压为0.013mPa(20°C )，溶解性 (200C )水3ang/L、二氯甲烷> 200g/L、甲苯50 100g/L。毒性原药急性经口 LD5tl约 4000mg/kg，急性经皮LD5tl > 5000 mg/kg。戊唑醇是一种可被植物吸收并向顶端传导的三唑类杀菌剂，如所有三唑类杀菌剂一样，戊唑醇是真菌留醇生物合成中脱甲基化的抑制剂。 是用于种子处理或叶面喷洒的高效内吸性杀菌剂。
3
由于待测成分受方法本身灵敏度的限制，绝大多数化学检测及分析方法要求事先对试样进行有效的、合理的处理，即在进行分析测定前对试样进行物理的、化学的处理，将待测成分从样品中提取出来，排除其它成分对待测成分的干扰。同时还要将待测成分浓缩或稀释或转变成分析测定所要求的状态，使待测成分的量及存在形式适应所选分析方法的要求，从而使测定顺利进行，以保证分析测定结果准确可靠。因此，是否能准确的检测出微量的残留其关键是样品的前处理方法，样品处理的好，可以减少杂质干扰，减少杂质对仪器的污染，提高分析结果的灵敏度和准确度。这就要求对样品的前处理应加以特别重视，对不同的样品及测定项目的不同，应选择适当的方法以满足测定要求。本专利所建立的样品前处理方法为我单位自行研制的方法，对肟菌酯和戊唑醇农产品残留样的处理具有很强的专属性，同时具有处理简单，节约成本等优点。
发明内容
本专利所描述的含有肟菌酯和戊唑醇残留样品测定前的处理方法可以同时检测肟菌酯及其代谢物肟菌酸和戊唑醇，既含有肟菌酯及其代谢物肟菌和戊唑醇的混合农药的水稻样品，也可以检测单独还有肟菌酯及其代谢物肟菌或者戊唑醇的水稻样品。通过查新检索，国内未见有相关方面的方法报道。为了评价肟菌酯和戊唑醇在水稻田中使用后的安全性，本发明建立了使用气相色谱法测定水稻中肟菌酯和戊唑醇残留量的方法。具体是使用有机溶剂提取水稻中肟菌酯和戊唑醇，液液分配进行净化，利用旋转蒸发将过滤后的有机溶剂完全浓缩至干并定容，最后采用气相色谱法检测。采用此方法的测定结果显示
最小检出量肟菌酯8. 5X IO-Hg ；戊唑醇:8· ox 10-ng ;肟菌酸:2.0X10-10go最低检出浓度植株、籽粒、稻壳、土壤和水样的肟菌酯、戊唑醇最低检出浓度均为0. 008mg/kg ；肟菌酸为 0. 015 mg/kg。为实现上述目的，本发明提供了专署性强的农产品残留样测定前的处理方法 一种含有肟菌酯和戊唑醇残留样品测定前的处理方法，其特征在于称样品20. 0g，加
水30-40ml，再加入50-100mL丙酮振荡提取20-30min，过滤，残渣用20mL丙酮分数次洗涤， 合并滤液转移至分液漏斗中；加入5%氯化钠溶液20-30mL，振荡，再用30_40mL石油醚萃取两次，合并上层有机相，经无水硫酸钠干燥，浓缩近干，用丙酮/正己烷体积比1 :1定容待测；最后采用外标法测定含量。本发明所述的处理方法，其中的样品为植株、籽粒、稻壳和土壤样品。本发明更加详细的测定方法如下 1、前处理分析步骤
分别称取植株、籽粒、稻壳和土壤20g，水40克。置于具塞锥形瓶中，加入50mL丙酮振荡提取30min，过滤，残渣用20mL丙酮分数次洗涤，合并滤液转移至分液漏斗中。加入5%氯化钠溶液30mL，分别用40mL石油醚萃取两次，合并上层有机相，经无水硫酸钠脱水后，浓缩近干，用体积比为1:1的丙酮/正己烷定容待测。仪器条件色谱条件Agi 1 ent6890N 气相色谱仪(NPD ) 进样口 260°C，脉冲不分流进样色谱柱(HP-5ms) :30mX0. 25mm, 0. 25 μ m
柱温:60°C (2min) 20°C /min 200°C 5°C /min 250°C 20°C /min 270V (4min)
载气=N2 (彡 99. 999%)
柱流速:1. 5mL/min
检测器(NPD) 270 °C
氢气流速3mL/min
空气流速60mL/min
补充气:15mL/min
3、试验相关数据
3. 1标准曲线
本试验采用外标法(峰面积)测定含量。在上述条件下，测定肟菌酯、戊唑醇进样量与峰面积相关性，详见表1。结果如下
月亏菌酯Y=30. 136Χ+3. 6194，r=0. 9939 戊唑醇γ=44. 722Χ+6. 346，r=0. 9903， 月亏菌酸:Y=15. 715Χ+0. 2307，r= 0. 9991。
表1后菌酯/戊唑醇标准样品进样量和峰面积相关性
进样重(ng)0.10.20,412峰面积 (μνδ)肟菌醒3,610.316.237.562.0戊唑醇 .Ο15.125.458.792.0月亏菌酸1.53.56,216』31.3
3. 2最小检出量和最低检出浓度
最小检出量肟菌酯8. 5 X KT11g ；戊唑醇:8. ox 10_ng ;肟菌酸:2.0X10-10go最低检出浓度植株、籽粒、稻壳、土壤和水样的肟菌酯、戊唑醇最低检出浓度均为0. 008mg/kg ；肟菌酸为 0. 015 mg/kg。3. 3添加回收率数据
分别在水稻植株、糙米、稻壳、土壤、稻田水中添加农药标准品，肟菌酯添加浓度为0. 008,0. 05mg/kg，戊唑醇添加浓度为0. 008,0. 05mg/kg，肟菌酸添加浓度为0.015、 0.05mg/kg。添加回收率数据详见表2。表2添加回收率表
权利要求
1.一种含有肟菌酯和戊唑醇残留样品测定前的处理方法，其特征在于称取待测样品 20. 0g，加水30-40ml，再加入50_100mL丙酮振荡提取20_30min，过滤，残渣用20mL丙酮分数次洗涤，合并滤液转移至分液漏斗中；加入5%氯化钠溶液20-30mL，振荡，再用30_40mL 石油醚萃取两次，合并上层有机相，经无水硫酸钠干燥，浓缩近干，用丙酮/正己烷体积比 1 1定容待测；最后采用外标法测定含量。
2.权利要求1所述残留样测定前的处理方法，其中的样品为植株、籽粒、稻壳和土壤样品O
全文摘要
本发明公开了一种含有肟菌酯和戊唑醇残留样品测定前的处理方法，它是称样品20.0g，加水30-40ml，加入50-100ml丙酮振荡提取20-30min，过滤，残渣用20ml丙酮分数次洗涤，合并滤液转移至分液漏斗中；加入5%氯化钠溶液20-30ml，振荡，再用30-40ml石油醚萃取两次，合并上层有机相，经无水硫酸钠干燥，浓缩近干，用丙酮/正己烷体积比1∶1定容待测；最后采用外标法峰面积测定含量。本发明公开的残留样测定前的处理方法具有测定速度快，设备简单、测定成本低，准确度、稳定性和可靠性高的特点。
文档编号G01N1/10GK102226787SQ20111008992
公开日2011年10月26日 申请日期2011年4月12日 优先权日2011年4月12日
发明者刘磊, 宋淑荣, 张玉婷, 李娜, 李辉, 邵辉, 郭永泽 申请人:天津市农业科学院中心实验室