一种中成药、保健食品中罗格列酮或吡格列酮的检测方法

文档序号:6141433阅读:380来源:国知局
专利名称:一种中成药、保健食品中罗格列酮或吡格列酮的检测方法
技术领域
本发明涉及定性地检测化学物质存在与否的方法,具体涉及起降糖作用的中成药、保健食品中是否掺杂噻唑烷二酮类药物,主要也就是是否掺杂罗格列酮或吡格列酮的检测方法。
背景技术
治疗糖尿病有很多药物,上世纪80年代初,常使用氯磺丙脲和甲苯磺丁脲,后来发展为很多类别。现有治疗糖尿病药物大致可以分为五大类,即磺酰脲类药物、双胍类药物、α-糖苷酶抑制剂、噻唑烷二酮类(TZD)药物和非磺酰脲类的胰岛素促进分泌剂。服用这些化学药物达到一定量后显示出来的毒副作用就非常明显,如口服降糖药罗格列酮或吡格列酮(尤其是过量)可能有升高患者心肌梗死和心源性死亡的危险;过量盐酸苯乙双胍浓度会对人体造成严重的乳酸性酸中毒;过量格列本脲可造成低血糖症以及肾上腺皮质功能减退、致畸等一系列严重不良反应。在这种情况下,市场上就出现了许多起到改善糖尿病症状和治疗糖尿病的中成药和保健食品。这些产品因为大多是天然物质制成,毒副作用小。但为了迎合糖尿病患者既想快速降糖又想副作用小的心理,一些不良厂商打着纯天然的旗号欺瞒患者,在治疗糖尿病的中成药和调节血糖的保健食品中擅自添加降糖西药,患者在不知情的情况下大量服用, 其后果极其严重。尤其是如前所述的,如果添加罗格列酮或吡格列酮等噻唑烷二酮类药物, 而患者在不知情的情况下过量服用,很容易造成患者心肌梗死和心源性死亡,危害极大。因此为保障消费者的生命安全,需要对降糖类的中成药和保健食品中是否掺杂了罗格列酮或吡格列酮等噻唑烷二酮类药物进行检测。作为沉淀剂的磷钼酸试剂(Sormenschein试剂,H3PO4 · 12Mo03)可与很多碱性物质反应,生成鲜黄色或棕黄色沉淀,这是本领域技术人员皆知的事实。但直接用来检测降糖类中成药、保健食品中是否掺杂西药降糖成分并不可行。这主要有下列原因一是掺杂的罗格列酮、吡格列酮的化学碱性很弱,如不经特殊的提取分离步骤,虽然这些降糖的化合物能与沉淀剂发生反应,但产品中共存的其它碱性成分也会反应,掩盖所要的反应现象,造成结果不明显、不清晰,难以作出准确判断。二是降糖成分添加可能是多种类型的复合添加, 如噻唑烷二酮类可能与磺酰脲类、双胍类等复合添加,或者单独添加了磺酰脲类、双胍类物质,这些物质也会干扰检测显现,会出现针对噻唑烷二酮类物质出现假阳性;也就是即使检测出阳性,也不能判断是否就是罗格列酮或吡格列酮。因此,现有技术中进行检测的方法主要是采用质液联用技术进行检测,或者如专利号为ZL200810085068. 9的中国发明专利所公开的,使用液相色谱仪,采用高效液相色谱技术进行检测。但这样的检测方法中,检测设备都很昂贵,并且操作维护复杂,检测周期长; 尤其不适合现场检测。总体来说也就是检测成本高且操作不方便。而应用化学方法,使用常用的试剂、器具进行快速检测在行政执法查处等需要现场快速检测的场合极为重要。但这却是本领域技术人员长期以来未能克服的技术难题。换句话说就是现有技术还不能利用常规的化学检测方法进行检测,具体就是不能采用磷钼酸试剂来检测降糖类中成药、保健食品中是否掺杂罗格列酮和吡格列酮。现有技术中没有任何相关的检测降糖类中成药、食品中是否添加罗格列酮或吡格列酮的方法的报道。也没有其它任何文献或信息给出利用磷钼酸试剂检测降糖中成药、保健食品中是否添加罗格列酮或吡格列酮的技术启示。当然,这也就是现有技术中如果需要进行该检测则需要采用复杂的仪器设备的原因。相近的技术领域中,例如专利申请号为200910192682. X的中国专利申请中记载了检测降压类中成药、食品中是否添加生物碱类降压药的检测方法。从原理上讲罗格列酮或吡格列酮也呈现生物碱性,或许也可以利用该专利申请的检测技术检测降糖类中成药或保健食品中是否有罗格列酮或吡格列酮添加。但是,根据该专利技术的教导,在乙醇环境中(如其权利要求1的技术方案)或者是在非酸性、非中性环境中进行检测(如其说明书第2页倒数第三段所述),结果误差也极其明显(检测结果经质液联用技术验证,正确率不到40% )。说明用于起降糖作用的中成药、保健品中是否添加噻唑烷二酮类药物不适合该专利申请中介绍的方法检测。原因可能是降糖产品的基本成分与该专利中的降压产品不同,也可能是掺杂的其他干扰物质的性质不同,或者降糖中成药、保健食品与降压中成药、保健食品的性质不同, 或者多种因素兼具。总之该专利对解决本发明的技术问题并无启示。

发明内容
本发明的目的是提供一种能准确、快速地检测中成药、保健食品中是否添加罗格列酮、吡格列酮的检测方法。本发明解决上述问题的技术方案是一种中成药、保健食品中罗格列酮或吡格列酮的检测方法,包括以下步骤(1)取待测样品,按5 10mL/g#fJra入二氯甲烷,强烈振摇至少40秒,然后过滤;(2)在滤液中加入少量的0.08 0. 12mol/L盐酸溶液,上下翻转至少8次,再静置使两相分层;(3)在上述上层液中滴入适量浓度为0. 04-0. lg/mL的磷钼酸溶液,如果出现沉淀或浑浊,则表明样品中掺杂有罗格列酮或吡格列酮。或者同时掺杂有罗格列酮和吡格列酮。采用上述的检测方法,所用器具简单,药品易得,操作也很简单,便于快速检测和现场检测,并且经标准检测手段验证具有很高的检测精准度。至于盐酸溶液、磷钼酸溶液的具体用量,则是本领域技术人员根据经验或者有限的试验即可确定的;通常盐酸溶液用量与二氯甲烷大致相当,磷钼酸溶液作为检测试剂只要数滴即可。只要掌握好了二氯甲烷的量就可以保障检测的精准度。进一步的,所述的样品加入二氯甲烷后,强烈振摇1分钟;这样既能最充分地提取待检物质又节约时间。进一步的,所述的滤液中加入2mL的0. lmol/L盐酸溶液;这样的盐酸用量节省并且又保证检测效果。进一步的,所述的滤液中加盐酸溶液后翻转10次,静置30秒分层;这样检测的效
果最好。
进一步的,所述的静置后的上层液中滴入2滴浓度为0. 05g/mL的磷钼酸溶液。这样沉淀反应效果最明显并且又节约试剂用量。本发明的另一目的在于提供应用上述检测方法进行快速检测的试剂盒。技术方案为一种应用上述检测方法进行快速检测的试剂盒,特征在于包括以下试剂试剂1: 二氯甲烷;试剂2 0. 08 0. 12mol/L 盐酸溶液;试剂3 0. 04-0. lg/mL磷钼酸溶液。这样的试剂盒便于携带和进行现场检测;当然这样的试剂盒还可以包括一些常用的试管、注射器等器具,便于检测所用器具的集中收纳和携带。至于试剂的量则根据要检测的样品的量确定,通常越多越好,便于多次取用,进行多此重复检测;也可以每个试剂盒内有多组试剂,这样使用更方便。相应地,试剂盒的进一步改进是所述的二氯甲烷的纯度为分析纯;因为二氯甲烷纯度越高肯能产生的干扰也越小,但检测实践证明只要是化学纯以上纯度的产品都能保证检测的准确性。所述的盐酸溶液浓度为0. lmol/L ;进一步的,所述的磷钼酸溶液浓度为0. 05g/mL ;最好是所述的所述的试剂盒中二氯甲烷为3mL、盐酸溶液为2mL、磷钼酸溶液装于滴液瓶中且不少于2滴。这些用量都是最常规、通用的用量,试剂盒内可以有多组这样的试剂。磷钼酸溶液装在滴液瓶中便于滴加使用,有2滴磷钼酸溶液通常足够判断检测结果。下面结合优选的试剂盒方案详细说明检测方法1、样品前处理拧开试剂瓶1的瓶盖。胶囊剂取1粒内容物,加入至试剂瓶1的瓶中;片剂取1片, 研细或压碎,加入粉末至试剂瓶1的瓶中;丸剂、颗粒剂、散剂等取每次服用量的1/4,研细、 剪碎或压碎,加入至试剂瓶1的瓶中。盖紧瓶盖,强烈晃动、也就是大力振摇使得可能存在的待检物质充分溶解到二氯甲烷中,然后静置一会。再打开试剂瓶2瓶盖;取1支注射器, 拔出活塞,接滤头,倒入试剂瓶1内的上层液体,用活塞挤压,收集滤液至试剂瓶2瓶中;这样就使盐酸溶液和含提取物的二氯甲烷相混合了。拧紧试剂瓶2瓶盖,将试剂瓶2上下翻转数次使得两种液体均勻接触,打开试剂瓶2的瓶盖,再静置使两相分层;使得溶解在二氯甲烷中的待检物自然就能溶解到盐酸溶液中。2、检测滴加几滴试剂3至试剂瓶2的上层溶液中,滴加时勿振摇试剂瓶2,观察试剂瓶2 上层溶液是否产生浑浊或沉淀物。试剂盒中试剂的量的确定无需付出创造性劳动,可以根据经验掌握,况且在某种试剂过量时,直接倒掉部分该试剂即可。本发明的检测方法操作简单,所用的都是常用试剂和器具,检测速度快,降低了检测成本,尤其适合快速检测。检测结果经标准检测方法验证无误。检测原理可能是下述的原因1、干扰因素的排除
中成药、保健食品中成分复杂,既有大量的脂溶性物质(如色素等),又有大量的水溶性物质(如苷类),它们部分能溶于有机溶剂,部分又能溶于水,如不进行适当分离,则会影响结果的判断。罗格列酮和吡格列酮都含有噻唑烷二酮的碱性基团,见如下的结构式
权利要求
1.一种中成药、保健食品中罗格列酮或吡格列酮的检测方法,包括以下步骤(1)取待测样品,按5 10mL/g#fJra入二氯甲烷,强烈振摇至少40秒,然后过滤;(2)在滤液中加入少量的0.08 0. 12mol/L盐酸溶液,上下翻转至少8次,再静置使两相分层;(3)在上述上层液中滴入适量浓度为0.04-0. lg/mL的磷钼酸溶液,如果出现沉淀或浑浊,则表明样品中掺杂有罗格列酮或吡格列酮。
2.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于所述的样品加入二氯甲烷后,强烈振摇1分钟。
3.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于所述的滤液中加入2mL的0.lmol/L 盐酸溶液。
4.根据权利要求1或3所述的检测方法,其特征在于所述的滤液中加盐酸溶液后翻转10次,静置30秒分层。
5.根据权利要求1或2或3所述的检测方法,其特征在于所述的静置后的上层液中滴入2滴浓度为0. 05g/mL的磷钼酸溶液。
6.一种应用权利要求1到5中任意一项所述的检测方法进行快速检测的试剂盒,包括以下试剂试剂1: 二氯甲烷;试剂2 0. 08 0. 12mol/L盐酸溶液;试剂3 0. 04-0. lg/mL磷钼酸溶液。
7.根据权利要求6所述的试剂盒,其特征在于所述的二氯甲烷的纯度为分析纯。
8.根据权利要求6所述的试剂盒,其特征在于所述的盐酸溶液浓度为0.lmol/L ;
9.根据权利要求6所述的试剂盒,其特征在于所述的磷钼酸溶液浓度为0.05g/mL。
10.根据权利要求6所述的试剂盒,其特征在于所述的试剂盒中二氯甲烷为3mL、盐酸溶液为2mL、磷钼酸溶液装于滴液瓶中且不少于2滴。
全文摘要
本发明涉及定性地检测起降糖作用的中成药、保健食品中是否掺杂噻唑烷二酮类药物的检测方法;步骤(1)取待测样品,按5~10mL/g样品加入二氯甲烷,强烈振摇至少40秒,然后过滤;(2)在滤液中加入少量的0.08~0.12mol/L盐酸溶液,上下翻转至少8次,再静置使两相分层;(3)在上述上层液中滴入适量浓度为0.04-0.1g/mL的磷钼酸溶液,如果出现沉淀或浑浊,则表明样品中掺杂有罗格列酮或吡格列酮;相应的试剂盒试剂1二氯甲烷;试剂20.08~0.12mol/L盐酸溶液;试剂30.04-0.1g/mL磷钼酸溶液;这样的检测方法准确可靠,试剂盒便于携带和进行现场检测。
文档编号G01N31/02GK102353747SQ201110182819
公开日2012年2月15日 申请日期2011年6月30日 优先权日2011年6月30日
发明者李杨杰, 肖树雄 申请人:广东省药品检验所
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