专利名称：一种快速测定植酸酶耐温性能的方法
技术领域：
本发明涉及ー种快速测定植酸酶耐温性能的方法。
背景技术：
目前，植酸酶已经广泛应用于单胃动物的饲料生产中，其大大降低了饲料成本和排泄磷对环境造成的污染，具有非常显著的经济效益、社会效益和生态效益。然而，在中国的饲料エ业中，70%以上的饲料是颗粒饲料，而植酸酶的化学本质是蛋白质，对热非常敏感，所以在饲料制粒过程中非常容易失活。随着现代生物技术和酶工程技术的不断进步，植酸酶生产エ艺也取得了很大发展，各种耐高温植酸酶产品应运而生，但由于缺乏简便有效的耐高温性能评价方法，使用户在选择耐高温植酸酶时陷入困境。有人试图通过测定实际制粒过程中植酸酶的存留率来评价植酸酶的耐高温性能，但常因混合不匀、抽样误差以及饲料中其它成分对植酸酶检测的干扰，以及试验条件难以控制等问题，而使评价效果及可重复性都很差，因此迫切期待有更加快捷准确的评价方法产生。姆吨全价配合饲料中添加5000U/g的耐高温植酸酶150g制粒后,分别抽取五组样品，检测其植酸酶活性(U/g)，结果如表I所示表I同种饲料配方添加植酸酶制粒后酶活检测结果(U/g)
权利要求
1.ー种快速测定植酸酶耐温性能的方法，该方法包括以下步骤 1)将植酸酶产品制成具有一定含水量的植酸酶待测样品，并且将所述植酸酶待测样品按等份用袋封装成(m+1) Xn份植酸酶样品，其中，所述植酸酶待测样品的含水量为16% 18%，并且其中，m为根据实际制粒温度要求设定的加热温度点的个数且为大于或等于I的整数，以及η为每个温度点处理的植酸酶样品的个数且为大于或等于2的整数； 2)将步骤I)中的mXn份植酸酶样品以每种温度条件下η份分别放入处于75°C 95°C的m个具有不同加热温度点的水浴中加热处理3 10分钟，加热处理后立即冷却，测定植酸酶的酶活，记录结果；另取未经加热处理的步骤I)中的η份植酸酶样品同时进行酶活测定，作为初始对照，记录結果； 3)根据步骤2)中记录的结果计算酶活存留率， 酶活存留率=存留酶活/初始酶活X 100% 其中，将每个温度点处理的η份样品的測定结果取算木平均值作为该温度点存留酶活，未加热的η份样品的測定结果的算木平均值作为初始酶活；以及 4)根据计算結果，评价植酸酶产品的耐温性能。
2.根据权利要求I所述的快速测定植酸酶耐温性能的方法，其中，步骤I)中，所述的含水量为18%。
3.根据权利要求2所述的快速测定植酸酶耐温性能的方法，其中，含水量为18%的植酸酶待测样品可以通过如下方法得到取适量植酸酶产品放入塑料封ロ袋中，使用下述公式计算将含水量补充到18%时的蒸馏水用量；然后准确称量蒸馏水，加入到塑料封ロ袋中，密封袋ロ，充分混匀；最后称取适量植酸酶样品，装入铝箔袋中，用塑封机密封， 其中，补水量计算公式为 补水量(mL)=取样量X (l-a)/0. 82-取样量 a表示植酸酶产品初始水分的百分含量。
4.根据权利要求I所述的快速测定植酸酶耐温性能的方法，其中，步骤2)中所述的加热处理时间为5 10分钟。
5.根据权利要求4所述的快速测定植酸酶耐温性能的方法，其中，步骤2)中所述的加热处理时间为5分钟。
6.根据权利要求I所述的快速测定植酸酶耐温性能的方法，其中，步骤2)中所述的加热温度点选自75°C、80°C、85°C、90°C和95°C中的ー个或多个。
7.根据权利要求I所述的快速测定植酸酶耐温性能的方法，其中，将步骤2)中热处理后的样品袋立即冷却至25°C以下，測定样品酶活。
8.根据权利要求I所述的快速测定植酸酶耐温性能的方法，其中，按照GB/T18634-2009方法测定步骤2)中所述的植酸酶的酶活。
9.根据权利要求I所述的快速测定植酸酶耐温性能的方法，其中，m为2或3，且η为3。
10.根据权利要求I所述的快速测定植酸酶耐温性能的方法，其中，步骤I)中所述的样品袋为铝箔袋；和/或步骤2)中的加热方式为水浴加热。
全文摘要
本发明提供了一种快速测定植酸酶耐温性能的方法。首先，该方法直接对植酸酶产品进行耐温性能测定，一方面大大降低了由于将其添加到饲料中存在的混合不均匀现象而导致的层层抽样误差；另一方面也避免了饲料中的其它物质对植酸酶检测准确性造成的干扰。其次，模拟实际颗粒饲料生产中的制粒温度和水分，并采取水浴加热方式保证各个样品受热均匀。第三，对样品数量和操作细节进行了规定，保证测定具有良好的可重复性。
文档编号G01N21/31GK102854158SQ20111018469
公开日2013年1月2日 申请日期2011年7月1日 优先权日2011年7月1日
发明者郭宝林, 魏秀莲, 苏俊兵 申请人:北京昕大洋科技发展有限公司